1.本发明涉及医疗技术领域，尤其是一种人类睾丸组织悬液冷冻保护剂及 其制备方法。
背景技术：2.现有的睾丸组织悬液冷冻保护剂在使用时往往不能够实现较长 时间的冷冻保护效果，随着冷冻保护的时间不断增长时，保护剂就会 逐渐降低其保护的效果，从而会导致睾丸组织的内部细胞出现不同程 度的冷冻坏死的情况，以至于降低了睾丸组织在冷冻时的效果，同时 在睾丸组织完成了冷冻需要复苏后，传统的保护剂进行复苏的时间较 长，这样在复苏的过程中就很容易对睾丸组织内部的细胞造成不同程 度的破坏，降低了保护时的质量，应用时存在一定的局限性。
技术实现要素：[0003][0004]
本发明针对背景技术中的不足，提供了一种人类睾丸组织悬液冷冻保护 剂及其制备方法。
[0005]
本发明为解决上述现象，采用以下技术方案，一种人类睾丸组织悬液冷 冻保护剂，包括甘油、水、丙三醇、丙二醇、葡萄糖、乙酰胺、聚乙烯吡咯 烷酮、羟乙基淀粉、蔗糖以及海藻糖，其中甘油的占比设为23份-36份，所 述水的占比设为13份-20份，所述丙二醇的占比设为8份-15份，所述丙三 醇的占比设为9份-13份，所述葡萄糖的占比设为5份-10份，所述乙酰胺的 占比设为15份-12份，所述聚乙烯吡咯烷酮的占比设为3份-8份，所述羟乙 基淀粉的占比设为4份-9份，所述蔗糖的占比设为11份-16份，所述海藻糖 占比设为6份-12份。
[0006]
作为本发明的进一步优选方式，包括甘油、水、丙三醇、丙二醇、葡萄 糖、乙酰胺、聚乙烯吡咯烷酮、羟乙基淀粉、蔗糖以及海藻糖，其中甘油的 占比设为23份，所述水的占比设为13份，所述丙二醇的占比设为8份，所 述丙三醇的占比设为9份，所述葡萄糖的占比设为5份，所述乙酰胺的占比 设为15份，所述聚乙烯吡咯烷酮的占比设为3份，所述羟乙基淀粉的占比设 为4份，所述蔗糖的占比设为11份，所述海藻糖占比设为6份。
[0007]
作为本发明的进一步优选方式，包括甘油、水、丙三醇、丙二醇、葡萄 糖、乙酰胺、聚乙烯吡咯烷酮、羟乙基淀粉、蔗糖以及海藻糖，其中甘油的 占比设为29份，所述水的占比设为16份，所述丙二醇的占比设为11份，所 述丙三醇的占比设为12份，所述葡萄糖的占比设为6.5份，所述乙酰胺的占 比设为18份，所述聚乙烯吡咯烷酮的占比设为5份，所述羟乙基淀粉的占比 设为6.5份，所述蔗糖的占比设为13.5份，所述海藻糖占比设为9份。
[0008]
作为本发明的进一步优选方式，包括甘油、水、丙三醇、丙二醇、葡萄 糖、乙酰胺、聚乙烯吡咯烷酮、羟乙基淀粉、蔗糖以及海藻糖，其中甘油的 占比设为36份，所述水的占比设为20份，所述丙二醇的占比设为15份，所 述丙三醇的占比设为13份，所述葡萄糖的占比
设为10份，所述乙酰胺的占 比设为12份，所述聚乙烯吡咯烷酮的占比设为8份，所述羟乙基淀粉的占比 设为9份，所述蔗糖的占比设为16份，所述海藻糖占比设为12份。
[0009]
制作方法包括如下：
[0010]
s1，首先需要对所有的原料进行混合，先将所有的原料取出，并将其分 别放置在密封的容器内部，然后称取好相应的原料分量后，将所有的原料倒 入在搅拌机的内部；
[0011]
s2，然后对初步混合好的原料进行加热，将混合原料放置在加热炉的内 部，并启动加热炉使其内部产生高温来对混合原料进行加热；
[0012]
s3，接着对完成了加热的原料进行过滤，需要采用金属过滤网进行过滤；
[0013]
s4，最后将经过了过滤的原料放置在阴凉的环境中，并采用自然风的方 式对其进行降温冷却。
[0014]
作为本发明的进一步优选方式，步骤s1中，首先需要对所有的原料进行 混合，先将所有的原料取出，并将其分别放置在密封的容器内部，然后称取 好相应的原料分量后，将所有的原料倒入在搅拌机的内部，接着启动搅拌机 对原料进行混合搅拌即可，同时其转速为580r/min，且搅拌时间为8min。
[0015]
作为本发明的进一步优选方式，步骤s2中，然后对初步混合好的原料进 行加热，将混合原料放置在加热炉的内部，并启动加热炉使其内部产生高温 来对混合原料进行加热，同时加热的温度为200℃，且加热时间设为 8min-16min，使得所有的原料可以通过高温而充分的融合在一起。
[0016]
作为本发明的进一步优选方式，步骤s3中，将装有混合原料的容器倾倒 至金属过滤网上，然后在金属过滤网底部设有的储存容器就会对原料进行储 存，以此来完成过滤效果，同时金属过滤网的规格为1000目。
[0017]
作为本发明的进一步优选方式，步骤s4中，同时可以在装有原料的容器 上方设置两组风扇，如此即可结合风扇吹出的气流起到快速降温冷却的效果。
[0018]
本发明通过以甘油为主要原液，并结合葡萄糖、乙酰胺和海藻糖等成分， 可以起到对睾丸组织的复杂性保护的目的，使得在冷冻状态下可以降低细胞 膜的渗透应力，以此来极大程度上延长了对睾丸组织的有效冷冻保护时长， 从而也就较好的避免因细胞内部出现结冰而导致细胞损伤的情况，在应用时 大大提高了对睾丸组织的全方位保护效果，这样当结束了对睾丸组织的冷冻 保护工作后，可以在较短的时间内完成睾丸组织的复苏效果，且复苏的效果 较好降低了细胞坏死的情况，有着较为重要的临床应用价值，具有广泛的应 用前景。
附图说明
[0019]
图1为本发明的制备流程图。
具体实施方式
[0020]
下面将结合本发明实施例中，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、 完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全 部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造 性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0021]
本发明提供一种技术方案：一种人类睾丸组织悬液冷冻保护剂及其制备 方法，包括甘油、水、丙三醇、丙二醇、葡萄糖、乙酰胺、聚乙烯吡咯烷酮、 羟乙基淀粉、蔗糖以及海藻糖，其中甘油的占比设为23份-36份，所述水的 占比设为13份-20份，所述丙二醇的占比设为8份-15份，所述丙三醇的占 比设为9份-13份，所述葡萄糖的占比设为5份-10份，所述乙酰胺的占比设 为15份-12份，所述聚乙烯吡咯烷酮的占比设为3份-8份，所述羟乙基淀粉 的占比设为4份-9份，所述蔗糖的占比设为11份-16份，所述海藻糖占比设 为6份-12份。
[0022]
制作方法包括如下：
[0023]
s1，首先需要对所有的原料进行混合，先将所有的原料取出，并将其分 别放置在密封的容器内部，然后称取好相应的原料分量后，将所有的原料倒 入在搅拌机的内部；
[0024]
s2，然后对初步混合好的原料进行加热，将混合原料放置在加热炉的内 部，并启动加热炉使其内部产生高温来对混合原料进行加热；
[0025]
s3，接着对完成了加热的原料进行过滤，需要采用金属过滤网进行过滤；
[0026]
s4，最后将经过了过滤的原料放置在阴凉的环境中，并采用自然风的方 式对其进行降温冷却。
[0027]
步骤s1中，首先需要对所有的原料进行混合，先将所有的原料取出，并 将其分别放置在密封的容器内部，然后称取好相应的原料分量后，将所有的 原料倒入在搅拌机的内部，接着启动搅拌机对原料进行混合搅拌即可，同时 其转速为580r/min，且搅拌时间为8min。
[0028]
步骤s2中，然后对初步混合好的原料进行加热，将混合原料放置在加热 炉的内部，并启动加热炉使其内部产生高温来对混合原料进行加热，同时加 热的温度为200℃，且加热时间设为8min-16min，使得所有的原料可以通过 高温而充分的融合在一起。
[0029]
步骤s3中，将装有混合原料的容器倾倒至金属过滤网上，然后在金属过 滤网底部设有的储存容器就会对原料进行储存，以此来完成过滤效果，同时 金属过滤网的规格为1000目。
[0030]
步骤s4中，同时可以在装有原料的容器上方设置两组风扇，如此即可结 合风扇吹出的气流起到快速降温冷却的效果。
[0031]
实例一
[0032]
本发明提供一种技术方案：一种人类睾丸组织悬液冷冻保护剂及其制备 方法，包括甘油、水、丙三醇、丙二醇、葡萄糖、乙酰胺、聚乙烯吡咯烷酮、 羟乙基淀粉、蔗糖以及海藻糖，其中甘油的占比设为23份，所述水的占比设 为13份，所述丙二醇的占比设为8份，所述丙三醇的占比设为9份，所述葡 萄糖的占比设为5份，所述乙酰胺的占比设为15份，所述聚乙烯吡咯烷酮的 占比设为3份，所述羟乙基淀粉的占比设为4份，所述蔗糖的占比设为11份， 所述海藻糖占比设为6份。
[0033]
制作方法包括如下：
[0034]
s1，首先需要对所有的原料进行混合，先将所有的原料取出，并将其分 别放置在密封的容器内部，然后称取好相应的原料分量后，将所有的原料倒 入在搅拌机的内部；
[0035]
s2，然后对初步混合好的原料进行加热，将混合原料放置在加热炉的内 部，并启动加热炉使其内部产生高温来对混合原料进行加热；
[0036]
s3，接着对完成了加热的原料进行过滤，需要采用金属过滤网进行过滤；
[0037]
s4，最后将经过了过滤的原料放置在阴凉的环境中，并采用自然风的方 式对其进行降温冷却。
[0038]
步骤s1中，首先需要对所有的原料进行混合，先将所有的原料取出，并 将其分别放置在密封的容器内部，然后称取好相应的原料分量后，将所有的 原料倒入在搅拌机的内部，接着启动搅拌机对原料进行混合搅拌即可，同时 其转速为580r/min，且搅拌时间为8min。
[0039]
步骤s2中，然后对初步混合好的原料进行加热，将混合原料放置在加热 炉的内部，并启动加热炉使其内部产生高温来对混合原料进行加热，同时加 热的温度为200℃，且加热时间设为8min-16min，使得所有的原料可以通过 高温而充分的融合在一起。
[0040]
步骤s3中，将装有混合原料的容器倾倒至金属过滤网上，然后在金属过 滤网底部设有的储存容器就会对原料进行储存，以此来完成过滤效果，同时 金属过滤网的规格为1000目。
[0041]
步骤s4中，同时可以在装有原料的容器上方设置两组风扇，如此即可结 合风扇吹出的气流起到快速降温冷却的效果。
[0042]
由于采用的乙酰胺、聚乙烯吡咯烷酮结合羟乙基淀粉，较好的延长了对 睾丸组织的有效冷冻保护时长，从而也就较好的避免因细胞内部出现结冰而 导致细胞损伤的情况，满足了对睾丸组织保护的效果。
[0043]
实例二
[0044]
本发明提供一种技术方案：一种人类睾丸组织悬液冷冻保护剂及其制备 方法，包括甘油、水、丙三醇、丙二醇、葡萄糖、乙酰胺、聚乙烯吡咯烷酮、 羟乙基淀粉、蔗糖以及海藻糖，其中甘油的占比设为29份，所述水的占比设 为16份，所述丙二醇的占比设为11份，所述丙三醇的占比设为12份，所述 葡萄糖的占比设为6.5份，所述乙酰胺的占比设为18份，所述聚乙烯吡咯烷 酮的占比设为5份，所述羟乙基淀粉的占比设为6.5份，所述蔗糖的占比设 为13.5份，所述海藻糖占比设为9份。
[0045]
制作方法包括如下：
[0046]
s1，首先需要对所有的原料进行混合，先将所有的原料取出，并将其分 别放置在密封的容器内部，然后称取好相应的原料分量后，将所有的原料倒 入在搅拌机的内部；
[0047]
s2，然后对初步混合好的原料进行加热，将混合原料放置在加热炉的内 部，并启动加热炉使其内部产生高温来对混合原料进行加热；
[0048]
s3，接着对完成了加热的原料进行过滤，需要采用金属过滤网进行过滤；
[0049]
s4，最后将经过了过滤的原料放置在阴凉的环境中，并采用自然风的方 式对其进行降温冷却。
[0050]
步骤s1中，首先需要对所有的原料进行混合，先将所有的原料取出，并 将其分别放置在密封的容器内部，然后称取好相应的原料分量后，将所有的 原料倒入在搅拌机的内部，接着启动搅拌机对原料进行混合搅拌即可，同时 其转速为580r/min，且搅拌时间为8min。
[0051]
步骤s2中，然后对初步混合好的原料进行加热，将混合原料放置在加热 炉的内部，并启动加热炉使其内部产生高温来对混合原料进行加热，同时加 热的温度为200℃，且加热时间设为8min-16min，使得所有的原料可以通过 高温而充分的融合在一起。
[0052]
步骤s3中，将装有混合原料的容器倾倒至金属过滤网上，然后在金属过 滤网底部设有的储存容器就会对原料进行储存，以此来完成过滤效果，同时 金属过滤网的规格为1000目。
[0053]
步骤s4中，同时可以在装有原料的容器上方设置两组风扇，如此即可结 合风扇吹出的气流起到快速降温冷却的效果。
[0054]
通过提高了蔗糖和海藻糖的含量，这样在对睾丸组织冷冻保护的过程中就 可以起到提高包裹性的效果，使得冷冻保护剂可以充分的包裹住所有的组织， 提高了冷冻时的保护效果。
[0055]
实例三
[0056]
本发明提供一种技术方案：一种人类睾丸组织悬液冷冻保护剂及其制备 方法，包括甘油、水、丙三醇、丙二醇、葡萄糖、乙酰胺、聚乙烯吡咯烷酮、 羟乙基淀粉、蔗糖以及海藻糖，其中甘油的占比设为36份，所述水的占比设 为20份，所述丙二醇的占比设为15份，所述丙三醇的占比设为13份，所述 葡萄糖的占比设为10份，所述乙酰胺的占比设为12份，所述聚乙烯吡咯烷 酮的占比设为8份，所述羟乙基淀粉的占比设为9份，所述蔗糖的占比设为16 份，所述海藻糖占比设为12份。
[0057]
制作方法包括如下：
[0058]
s1，首先需要对所有的原料进行混合，先将所有的原料取出，并将其分 别放置在密封的容器内部，然后称取好相应的原料分量后，将所有的原料倒 入在搅拌机的内部；
[0059]
s2，然后对初步混合好的原料进行加热，将混合原料放置在加热炉的内 部，并启动加热炉使其内部产生高温来对混合原料进行加热；
[0060]
s3，接着对完成了加热的原料进行过滤，需要采用金属过滤网进行过滤；
[0061]
s4，最后将经过了过滤的原料放置在阴凉的环境中，并采用自然风的方 式对其进行降温冷却。
[0062]
步骤s1中，首先需要对所有的原料进行混合，先将所有的原料取出，并 将其分别放置在密封的容器内部，然后称取好相应的原料分量后，将所有的 原料倒入在搅拌机的内部，接着启动搅拌机对原料进行混合搅拌即可，同时 其转速为580r/min，且搅拌时间为8min。
[0063]
步骤s2中，然后对初步混合好的原料进行加热，将混合原料放置在加热 炉的内部，并启动加热炉使其内部产生高温来对混合原料进行加热，同时加 热的温度为200℃，且加热时间设为8min-16min，使得所有的原料可以通过 高温而充分的融合在一起。
[0064]
步骤s3中，将装有混合原料的容器倾倒至金属过滤网上，然后在金属过 滤网底部设有的储存容器就会对原料进行储存，以此来完成过滤效果，同时 金属过滤网的规格为1000目。
[0065]
步骤s4中，同时可以在装有原料的容器上方设置两组风扇，如此即可结 合风扇吹出的气流起到快速降温冷却的效果。
[0066]
本发明睾丸组织悬液冷冻保护剂参数表格如下表:
[0067][0068]
综上所述，本发明通过以甘油为主要原液，并结合葡萄糖、乙酰胺和海 藻糖等成分，可以起到对睾丸组织的复杂性保护的目的，使得在冷冻状态下 可以降低细胞膜的渗透应力，以此来极大程度上延长了对睾丸组织的有效冷 冻保护时长，从而也就较好的避免因细胞内部出现结冰而导致细胞损伤的情 况，在应用时大大提高了对睾丸组织的全方位保护效果，这样当结束了对睾 丸组织的冷冻保护工作后，可以在较短的时间内完成睾丸组织的复苏效果， 且复苏的效果较好降低了细胞坏死的情况，有着较为重要的临床应用价值， 具有广泛的应用前景。
[0069]
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点,对于 本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在 不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发 明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限 制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落 在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将 权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。
[0070]
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实 施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起 见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也 可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
技术特征：1.一种人类睾丸组织悬液冷冻保护剂，其特征在于，包括甘油、水、丙三醇、丙二醇、葡萄糖、乙酰胺、聚乙烯吡咯烷酮、羟乙基淀粉、蔗糖以及海藻糖，其中甘油的占比设为23份-36份，所述水的占比设为13份-20份，所述丙二醇的占比设为8份-15份，所述丙三醇的占比设为9份-13份，所述葡萄糖的占比设为5份-10份，所述乙酰胺的占比设为15份-12份，所述聚乙烯吡咯烷酮的占比设为3份-8份，所述羟乙基淀粉的占比设为4份-9份，所述蔗糖的占比设为11份-16份，所述海藻糖占比设为6份-12份。2.根据权利要求1所述的一种人类睾丸组织悬液冷冻保护剂，其特征在于，包括甘油、水、丙三醇、丙二醇、葡萄糖、乙酰胺、聚乙烯吡咯烷酮、羟乙基淀粉、蔗糖以及海藻糖，其中甘油的占比设为23份，所述水的占比设为13份，所述丙二醇的占比设为8份，所述丙三醇的占比设为9份，所述葡萄糖的占比设为5份，所述乙酰胺的占比设为15份，所述聚乙烯吡咯烷酮的占比设为3份，所述羟乙基淀粉的占比设为4份，所述蔗糖的占比设为11份，所述海藻糖占比设为6份。3.根据权利要求1所述的一种人类睾丸组织悬液冷冻保护剂，其特征在于，包括甘油、水、丙三醇、丙二醇、葡萄糖、乙酰胺、聚乙烯吡咯烷酮、羟乙基淀粉、蔗糖以及海藻糖，其中甘油的占比设为29份，所述水的占比设为16份，所述丙二醇的占比设为11份，所述丙三醇的占比设为12份，所述葡萄糖的占比设为6.5份，所述乙酰胺的占比设为18份，所述聚乙烯吡咯烷酮的占比设为5份，所述羟乙基淀粉的占比设为6.5份，所述蔗糖的占比设为13.5份，所述海藻糖占比设为9份。4.根据权利要求1所述的一种人类睾丸组织悬液冷冻保护剂，其特征在于，包括甘油、水、丙三醇、丙二醇、葡萄糖、乙酰胺、聚乙烯吡咯烷酮、羟乙基淀粉、蔗糖以及海藻糖，其中甘油的占比设为36份，所述水的占比设为20份，所述丙二醇的占比设为15份，所述丙三醇的占比设为13份，所述葡萄糖的占比设为10份，所述乙酰胺的占比设为12份，所述聚乙烯吡咯烷酮的占比设为8份，所述羟乙基淀粉的占比设为9份，所述蔗糖的占比设为16份，所述海藻糖占比设为12份。5.根据权利要求1-4任一所述的一种人类睾丸组织悬液冷冻保护剂的制备方法，其特征在于，制作步骤包括如下：s1，混料：首先需要对所有的原料进行混合，先将所有的原料取出，并将其分别放置在密封的容器内部，然后称取好相应的原料分量后，将所有的原料倒入在搅拌机的内部；s2，加热：然后对初步混合好的原料进行加热，将混合原料放置在加热炉的内部，并启动加热炉使其内部产生高温来对混合原料进行加热；s3，过滤：接着对完成了加热的原料进行过滤，需要采用金属过滤网进行过滤；s4，冷却：最后将经过了过滤的原料放置在阴凉的环境中，并采用自然风的方式对其进行降温冷却。6.根据权利要求5所述的一种人类睾丸组织悬液冷冻保护剂的制备方法，其特征在于，步骤s1中，首先需要对所有的原料进行混合，先将所有的原料取出，并将其分别放置在密封的容器内部，然后称取好相应的原料分量后，将所有的原料倒入在搅拌机的内部，接着启动搅拌机对原料进行混合搅拌即可，同时其转速为580r/min，且搅拌时间为8min。7.根据权利要求5所述的一种人类睾丸组织悬液冷冻保护剂的制备方法，其特征在于，步骤s2中，然后对初步混合好的原料进行加热，将混合原料放置在加热炉的内部，并启动加
热炉使其内部产生高温来对混合原料进行加热，同时加热的温度为200℃，且加热时间设为8min-16min，使得所有的原料可以通过高温而充分的融合在一起。8.根据权利要求5所述的一种人类睾丸组织悬液冷冻保护剂的制备方法，其特征在于，步骤s3中，将装有混合原料的容器倾倒至金属过滤网上，然后在金属过滤网底部设有的储存容器就会对原料进行储存，以此来完成过滤效果，同时金属过滤网的规格为1000目。9.根据权利要求5所述的一种人类睾丸组织悬液冷冻保护剂的制备方法，其特征在于，步骤s4中，同时可以在装有原料的容器上方设置两组风扇，如此即可结合风扇吹出的气流起到快速降温冷却的效果。
技术总结本发明公开了一种人类睾丸组织悬液冷冻保护剂及其制备方法，包括甘油、水、丙三醇、丙二醇、葡萄糖、乙酰胺、聚乙烯吡咯烷酮、羟乙基淀粉、蔗糖以及海藻糖，其中甘油的占比设为23份-36份，所述水的占比设为13份-20份，所述丙二醇的占比设为8份-15份，所述丙三醇的占比设为9份-13份。本发明通过以甘油为主要原液，并结合葡萄糖、乙酰胺和海藻糖等成分，可以起到对睾丸组织的复杂性保护的目的，使得在冷冻状态下可以降低细胞膜的渗透应力，以此来极大程度上延长了对睾丸组织的有效冷冻保护时长，从而也就较好的避免因细胞内部出现结冰而导致细胞损伤的情况，在应用时大大提高了对睾丸组织的全方位保护效果，具有广泛的应用前景。具有广泛的应用前景。具有广泛的应用前景。
技术研发人员：冯文娟 武斌 张迎春 王红霞
受保护的技术使用者：济南市中心医院
技术研发日：2022.05.06
技术公布日：2022/11/1
