1.本发明涉及人血红蛋白的制备方法领域,具体为一种人血红蛋白质控品的制备方法。
背景技术:2.胶体金法粪便隐血大便隐血(fob)检测试剂在进行灵敏度检测时需要用到人血红蛋白(hb)企业参考品,hb的临界值浓度一般为0.05-0.1μg/ml, 企业内部一般会配制到几十μg/ml的母液进行稀释,母液配制完成后放到
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20℃环境下冷冻保存。但低浓度的人血红蛋白不稳定,不易保存,用常规pbs 稀释液配制的人血红蛋白(hb)企业参考品保存有效期仅1个月左右。
技术实现要素:3.基于此,本发明的目的是提供一种人血红蛋白质控品的制备方法,以解决上述背景技术中提到的技术问题。
4.为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种人血红蛋白质控品的制备方法,包括如下步骤:
5.s1:在1x pbs溶液中加入蔗糖,搅拌直至溶解;
6.s2:加入辣根过氧化物酶,搅拌至溶解;
7.s3:加入1g/l bsa,搅拌至溶解;
8.s4:再加10%(v/v)甘油,搅拌,配制完成后装至瓶中2-8℃保存;
9.s5:用上述稀释液稀释人血红蛋白配制企业参考品,-20℃冷冻保存。
10.通过采用上述技术方案,使用新的稀释液配方保存人血红蛋白,可保护血红蛋白在低温下的稳定性,延长参考品的有效期,使其低温冷冻保存的有效期延长至12个月及以上,企业现有人血红蛋白参考品配制的稀释液直接使用1x pbs,未加保护物质,血红蛋白在低温下易降解,导致浓度偏低,有效期很短,增加企业的配制工作。
11.本发明进一步设置为,步骤s1中,采用的搅拌方式为磁力。
12.通过采用上述技术方案,磁力的搅拌方式能够减少振动,从而使得搅拌的效果更好,提高搅拌的效率。
13.本发明进一步设置为,步骤s4中采用的搅拌方式为磁力搅拌,且转速为 500r/min以上。
14.通过采用上述技术方案,磁力搅拌的方式能够减少在搅拌时产生的振动,从而进行保护。
15.本发明进一步设置为,步骤s4中混匀时间至少为20分钟。
16.通过采用上述技术方案,混合的时间较长,使得能够更充分的混合,发生反应。
17.综上所述,本发明主要具有以下有益效果:
18.本发明通过使用新的稀释液配方保存人血红蛋白,可保护血红蛋白在低温下的稳
定性,延长参考品的有效期,使其低温冷冻保存的有效期延长至12 个月及以上,企业现有人血红蛋白参考品配制的稀释液直接使用1x pbs,未加保护物质,血红蛋白在低温下易降解,导致浓度偏低,有效期很短,增加企业的配制工作。
附图说明
19.图1为本发明的流程图。
具体实施方式
20.下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的,仅用于解释本发明,而不能理解为对本发明的限制。
21.下面根据本发明的整体结构,对其实施例进行说明。
22.实施例一
23.一种人血红蛋白质控品的制备方法,如图1所示,包括如下步骤:
24.s1:在1x pbs溶液中加入100g/l蔗糖,搅拌直至溶解;
25.s2:加入100mg/l辣根过氧化物酶,搅拌至溶解;
26.s3:加入1g/l bsa,搅拌至溶解;
27.s4:再加10%(v/v)甘油,搅拌,步骤s4中混匀时间至少为20分钟,配制完成后装至瓶中2-8℃保存;
28.s5:用上述稀释液稀释人血红蛋白配制企业参考品,-20℃冷冻保存。
29.步骤s1中,采用的搅拌方式为磁力,磁力的搅拌方式能够减少振动,从而使得搅拌的效果更好,提高搅拌的效率。
30.步骤s4中采用的搅拌方式为磁力搅拌,且转速为500r/min以上,磁力搅拌的方式能够减少在搅拌时产生的振动,从而进行保护。
31.本发明是一种人血红蛋白参考品稀释液的配制方法,通过添加合适浓度的蔗糖、辣根过氧化物酶、bsa和甘油等物质,保护低浓度的人血红蛋白不被降解,保持稳定的浓度,从而延长参考品的有效期。
32.本企业配制的人血红蛋白参考品采用氰化高铁血红蛋白法在不同时间点进行浓度测定,测定结果如下:
[0033][0034]
现有参考品冷冻保存1个月,浓度降低约25%;而新配方稀释液配制的参考品冷冻保存12个月,浓度降低仅约1.6%,符合企业浓度降低范围10%以内的标准。
[0035]
实施例二
[0036]
一种人血红蛋白质控品的制备方法,包括如下步骤:
[0037]
s1:在1x pbs溶液中加入90g/l蔗糖,搅拌直至溶解;
[0038]
s2:加入90mg/l辣根过氧化物酶,搅拌至溶解;
[0039]
s3:加入0.95g/l bsa,搅拌至溶解;
[0040]
s4:再加9%(v/v)甘油,搅拌,步骤s4中混匀时间至少为20分钟,配制完成后装至瓶中5℃保存,加入瓶中温度只有5℃保存时,能保存5天;
[0041]
s5:用上述稀释液稀释人血红蛋白配制企业参考品,-20℃冷冻保存。
[0042]
本发明是一种人血红蛋白参考品稀释液的配制方法,通过添加合适浓度的蔗糖、辣根过氧化物酶、bsa和甘油等物质,保护低浓度的人血红蛋白不被降解,保持稳定的浓度,从而延长参考品的有效期。
[0043]
本企业配制的人血红蛋白参考品采用氰化高铁血红蛋白法在不同时间点进行浓度测定,测定结果如下:
[0044]
[0045]
实施例三
[0046]
一种人血红蛋白质控品的制备方法,包括如下步骤:
[0047]
s1:在1x pbs溶液中加入100g/l蔗糖,搅拌直至溶解;
[0048]
s2:加入110mg/l辣根过氧化物酶,搅拌至溶解;
[0049]
s3:加入1.1g/l bsa,搅拌至溶解;
[0050]
s4:再加11%(v/v)甘油,搅拌,步骤s4中混匀时间至少为20分钟,配制完成后装至瓶中8℃保存,加入瓶中温度只有8℃保存时,能保存7天;
[0051]
s5:用上述稀释液稀释人血红蛋白配制企业参考品,-20℃冷冻保存。
[0052]
本发明是一种人血红蛋白参考品稀释液的配制方法,通过添加合适浓度的蔗糖、辣根过氧化物酶、bsa和甘油等物质,保护低浓度的人血红蛋白不被降解,保持稳定的浓度,从而延长参考品的有效期。
[0053]
本企业配制的人血红蛋白参考品采用氰化高铁血红蛋白法在不同时间点进行浓度测定,测定结果如下:
[0054][0055]
一种人血红蛋白参考品稀释液的配制方法,通过添加合适浓度的蔗糖、辣根过氧化物酶、bsa和甘油等物质,保护低浓度的人血红蛋白不被降解,保持稳定的浓度,从而延长参考品的有效期。
[0056]
本企业配制的人血红蛋白参考品采用氰化高铁血红蛋白法在保存温度不同的情况下,保存时间的测定,测定结果如下
[0057][0058]
尽管已经示出和描述了本发明的实施例,但本具体实施例仅仅是对本发明的解释,其并不是对发明的限制,描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合,本领域技术人员在阅读完本说明书后可在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下,可以根据需要对实施例做出没有创造性贡献的修改、替换和变型等,但只要在本发明的权利要求范围内都受到专利法的保护。
技术特征:1.一种人血红蛋白质控品的制备方法,包括如下步骤:s1:在1x pbs溶液中加入蔗糖,搅拌直至溶解;s2:加入辣根过氧化物酶,搅拌至溶解;s3:加入bsa,搅拌至溶解;s4:再加甘油,搅拌,配制完成后装至瓶中2-8℃保存;s5:用上述稀释液稀释人血红蛋白配制企业参考品,-20℃冷冻保存。2.根据权利要求1所述的一种人血红蛋白质控品的制备方法,其特征在于:步骤s1中,采用的搅拌方式为磁力搅拌。3.根据权利要求1所述的一种人血红蛋白质控品的制备方法,其特征在于:步骤s4中采用的搅拌方式为磁力搅拌,且转速为500r/min以上。4.根据权利要求1所述的一种人血红蛋白质控品的制备方法,其特征在于:步骤s4中混匀时间至少为20分钟,且加入甘油的量为10%(v/v)甘油。5.根据权利要求1所述的一种人血红蛋白质控品的制备方法,其特征在于:步骤s1中加入蔗糖的量为100g/l。6.根据权利要求1所述的一种人血红蛋白质控品的制备方法,其特征在于:步骤s2中加入辣根过氧化物酶的量为100mg/l。
技术总结本发明公开了一种人血红蛋白质控品的制备方法,涉及人血红蛋的制备方法领域,包括如下步骤:在1X PBS溶液中加入蔗糖,搅拌直至溶解;加入辣根过氧化物酶,搅拌至溶解;加入1g/L BSA,搅拌至溶解;再加10%甘油,搅拌,配制完成后装至瓶中2-8℃保存;用上述稀释液稀释人血红蛋白配制企业参考品,-20℃冷冻保存。本发明通过使用新的稀释液配方保存人血红蛋白,可保护血红蛋白在低温下的稳定性,延长参考品的有效期,使其低温冷冻保存的有效期延长至12个月及以上,企业现有人血红蛋白参考品配制的稀释液直接使用1X PBS,未加保护物质,血红蛋白在低温下易降解,导致浓度偏低,有效期很短,增加企业的配制工作。企业的配制工作。企业的配制工作。
技术研发人员:潘洁 李因来
受保护的技术使用者:杭州艾策医疗技术有限公司
技术研发日:2022.07.01
技术公布日:2022/11/1