1.本发明涉及体液收集领域，尤其涉及一种体液的有形成分的收集方法。
背景技术：2.日常医疗工作中对于胸水、腹水等体液标样的细胞学检查是非常重要的，特别是对于细胞病理工作者而言更是尤为重要的组成部分，因此，能否有效、方便的收集、分离胸水、腹水等体液标样中的有形成分是保证这一工作的重要前提；
3.现有的体液中有形成分的收集方法一般是直接对标样进行离心步骤从而完成有形成分的收集沉淀，一般需要执行4次离心以上离心步骤且该方法收集的有形成分容易附着在离心管的管壁上不易从离心管中挂出，进而导致了挂出步骤中损失了一定量的标样，因此现有的体液中有形成分的收集方法的收集效果并不足够理想。
技术实现要素：4.基于此，针对上述问题，本发明提出一种体液的有形成分的收集方法，通过固定体液中的有形成分并结合离心作业使体液中的有形成分从一种液相转移至另一液相从而提高了体液的有形成分的收集量。
5.本发明的技术方案是：
6.一种体液的有形成分的收集方法，包括以下步骤：
7.步骤一，取标样和甲醛溶液置于离心管中并让甲醛溶液与标样混合生成第一混合溶液，将该混合溶液静置并待其充分反应，其中，标样与甲醛溶液的体积比为9：0.75-2；
8.步骤二，取丙三醇溶液置于离心管中并与第一混合溶液混合生成第二混合溶液，将该混合溶液静置并待其充分反应；
9.步骤三，将离心管放置于离心机中并对第二混合溶液进行离心作业从而得到体液的有形成分的集合体；
10.进一步技术方案中，标样与甲醛溶液和甲醇溶液的体积比为9：1：1-3；
11.进一步技术方案中，离心作业设置为2500bpm/min，其作业时间设置为5分钟；
12.进一步技术方案中，还包括步骤四：
13.重复执行步骤一和步骤三直至得到体液的有形成分的集合体；
14.进一步技术方案中，丙三醇溶液的用量为1至2ml；
15.进一步技术方案中，在步骤一与步骤二之间还包括红细胞破坏步骤：
16.取甲醇溶液置于离心管中，将第一混合溶液与甲醇溶液混合并静置待其充分反应，标样、甲醛溶液和甲醇溶液的体积比为21.6:2.4:1且甲醇溶液的浓度为1mol/l。
17.本发明的有益效果是：
18.1、通过该方法实现了提高体液内有形成分的收集量的技术效果；
19.2、通过这样的比例关系从而实现了更有效的收集体液中的有形成分的技术效果；
20.3、通过这样的设置从而更进一步实现了有效的收集体液中的有形成分的技术效
果；
21.4、通过该步骤实现了对清亮或细胞较少的标样体液的有形成分的收集的技术效果；
22.5、通过设置丙三醇溶液的用量从而实现了避免体液的有形成分的集合体的体积过大而导致后续处理不方便的技术效果；
23.6、通过该步骤破坏标样中的红细胞从而实现了降低后续实验中假阳性结果的发生几率。
附图说明
24.图1是本发明实施例1所述的一种体液的有形成分的收集方法的流程示意图；
25.图2是本发明实施例1和现有方法所收集的体液的有形成分的体积的对比图。
具体实施方式
26.下面结合附图对本发明的实施例进行详细说明。
27.如图1所示，一种体液的有形成分的收集方法，包括以下步骤：
28.步骤一，取标样和甲醛溶液置于离心管中并让甲醛溶液与标样混合生成第一混合溶液，将该混合溶液静置并待其充分反应，其中，标样与甲醛溶液的体积比为9：0.75-2；
29.步骤二，取丙三醇溶液置于离心管中并与第一混合溶液混合生成第二混合溶液，将该混合溶液静置并待其充分反应；
30.步骤三，将离心管放置于离心机中并对第二混合溶液进行离心作业从而得到体液的有形成分的集合体；
31.下面通过实施例一对上述发明内容进行详细阐述。
32.实施例1：
33.以胸水标样为例，说明该收集方法的使用步骤以及作用：
34.步骤一：体液的有形成分固定步骤，取胸水标样，观察体液情况，记录其性质、色泽等情况，将胸水标来回颠倒数次备用，取21.6ml胸水标样置于50ml离心管中，取2.4ml甲醛溶液置于50ml离心管中并封闭离心管，将封闭的离心管来回颠倒三至五次后放置约15秒钟，待其充分反应；
35.本实施例1中的甲醛溶液在加入等比例的胸水或腹水样本后，稀释后浓度在10％左右，如果加入等比例的水则为福尔马林固定液，福尔马林固定液为病理科常规固定剂，也可以是病理科的其他常规固定剂，通过加入福尔马林固定液，该固定液能够使胸水标样中含有的蛋白质、细胞等有形成分固定从而保持其形态不会改变。
36.步骤二：有形成分的容纳液相的添加步骤，取1-2ml丙三醇置于离心管中并封闭离心管，将封闭的离心管静置1分钟待其充分反应；
37.标样为本发明中的输出体液中有形成分的液相，丙三醇为本发明中，收集体液中有形成分的液相的液相。
38.步骤三：体液中有形成分的离心步骤，将该离心管放置于离心机中并进行离心作业，离心机设置为2500bpm/min，离心作业的时间设置为5分钟；
39.通过离心作用使甲醛溶液中的被固定后的蛋白质、细胞等有形成分由液相中直接
分离并进入丙三醇中从而得到体液的有形成分的集合体；
40.由于不同有形成分如细胞、蛋白质等的分子量大小不一，因此，在离心时，不同有形成分在丙三醇中的运动速度不同从而分离出的有形成分是不均匀的分部于丙三醇内，且由于不同的有形成分已经由甲醛溶液固定，所以不同的有形成分之间会产生网状结构进而将不同的有形成分集合于丙三醇内，故而该胶状物质即为收集后的体液的有形成分的集合体。
41.如图2所示，图中为现有方法和本实施例1在标样体积相同的情况下收集到的体液的有形成分的集合体并制成石蜡包后切片，最后在常规he染色后得到的体液中的有形成分的体积，图中上部分为现有方法收集到的体液的有形成分的体积，该图下部分为本实施体1收集到的体液的有形成分的体积，由此可知，通过本实施1和现有方法所收集的体液的有形成分的体积的对比图，本实施1的收集方法相比于现有的收集方法而言，收集到的体液的有形成分量有明显提高，且由于固定了体液中的有形成分从而不会因为离心作业导致体液中的有形成分附着于离心管的管壁上，在方便了从离心管中取出体液的有形成分的集合体的同时也一定程度上提高了体液中的有形成分的收集量；
42.而且通过该方法得到的体液的有形成分的集合体制作成石蜡包埋块，相比于现有的收集方法得到的体液的有形成分的集合体而言，该石蜡包埋块对于后续的如特殊染色、免疫组化、dna提取等实验均无任何影响。
43.值得说明的是，对于清亮或细胞较少的标样而言，由于清亮或细胞较少的标样中的有形成分含量过低往往无法在一次离心后就得到体液的有形成分的集合体，因此，为了实现对该清亮或细胞较少的标样的收集需要在离心机完成离心步骤后，若未收集到体液的有形成分的集合体，则在离心管中保留约1ml的甲醛和丙三醇的混合液并再次加入该清亮或细胞较少的标样后，再次经离心机进行离心步骤，若仍未收集到体液的有形成分的集合体，则重复上述步骤，直至收集到体液的有形成分的集合体，最后可以在补充一定量的丙三醇从而更好的将体液的有形成分的集合体收集到丙三醇中；
44.通过多次加入清亮或细胞较少的标样从而增加了该标样的有形成分的含量，并通过多次离心步骤进而收集清亮或细胞较少的标样的集合体的目的。
45.优选的，步骤一完成后步骤二执行以前，可以增加一个步骤，取1.0ml甲醇溶液置于离心管中并封闭离心管，将封闭的离心管来回颠倒三至五次后静置，静置时间约为10分钟；
46.通过加入甲醇溶液，使该离心管中的甲醇浓度达到1mol/l从而破坏胸水标样中的红细胞，进而减少红细胞在免疫组化中的非特异着色，降低了因红细胞而导致的假阳性结果的发生几率，值得说明的是，本步骤的重点在于使离心管中的甲醇浓度达到1mol/l，但由于甲醇溶液在室温20℃时密度在0.791～0.793之间而室温高于20℃时密度减小，因此根据实际情况的不同，加入的甲醇溶液的液量也会有所改变。
47.优选的，标样、甲醛溶液、丙三醇的体积比为21.6:2.4:1，这样的比例，能更有效的收集到体液的有形成分的集合体。
48.优选的，丙三醇用量为1-2ml，这样的比例，能避免收集到的体液的有形成分的集合体的体积过大而无法放置于标准包埋盒内导致工作效率降低。
49.综上所述，本发明提出的所述的一种体液的有形成分的收集方法，利用甲醛溶液
固定体液中的有形成分，并以丙三醇作为容纳体液中有形成分的液相从而在离心作业下能收集到更多的体液中的有形成分且不会附着于离心管的管壁也进一步增加了体液中的有形成分的收集量，由此可知，相比于现有方法而言，本发明实现了显著提高收集体液中有形成分的技术效果。
50.以上所述实施例仅表达了本发明的具体实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。
技术特征：1.一种体液的有形成分的收集方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，取标样和甲醛溶液置于离心管中并让所述甲醛溶液与所述标样混合生成第一混合溶液，将该混合溶液静置并待其充分反应，其中，所述标样与甲醛溶液的体积比为9：0.75-2；步骤二，取丙三醇溶液置于离心管中并与所述第一混合溶液混合生成第二混合溶液，将该混合溶液静置并待其充分反应；步骤三，将所述离心管放置于离心机中并对所述第二混合溶液进行离心作业从而得到体液的有形成分的集合体。2.根据权利要求1所述的一种体液的有形成分的收集方法，其特征在于，所述标样与甲醛溶液和甲醇溶液的体积比为9：1：1-3。3.根据权利要求2所述的一种体液的有形成分的收集方法，其特征在于，所述离心作业设置为2500bpm/min，其作业时间设置为5分钟。4.根据权利要求3所述的一种体液的有形成分的收集方法，其特征在于，还包括步骤四：重复执行所述步骤一和步骤三直至得到所述体液的有形成分的集合体。5.根据权利要求4所述的一种体液的有形成分的收集方法，其特征在于，所述丙三醇溶液的用量为1至2ml。6.根据权利要求1至5任意一项所述的一种体液的有形成分的收集方法，其特征在于，在步骤一与步骤二之间还包括红细胞破坏步骤：取甲醇溶液置于离心管中，将所述第一混合溶液与甲醇溶液混合并静置待其充分反应，所述标样、甲醛溶液和甲醇溶液的体积比为21.6:2.4:1且所述甲醇溶液的浓度为1mol/l。
技术总结本发明公开了一种体液的有形成分的收集方法，包括以下步骤：步骤一，取标样和甲醛溶液置于离心管中并让甲醛溶液与标样混合生成第一混合溶液，将该混合溶液静置并待其充分反应，其中，标样与甲醛溶液的体积比为9：0.75-2，步骤二，取丙三醇溶液置于离心管中并与第一混合溶液混合生成第二混合溶液，将该混合溶液静置并待其充分反应，步骤三，将离心管放置于离心机中并对第二混合溶液进行离心作业从而得到体液的有形成分的集合体，通过固定体液中的有形成分并结合离心作业使体液中的有形成分从一种液相转移至另一液相从而提高了体液的有形成分的收集量。有形成分的收集量。有形成分的收集量。
技术研发人员：云海龙 许雷 罗艳 陈易华
受保护的技术使用者：中国人民解放军西部战区总医院
技术研发日：2022.07.19
技术公布日：2022/11/1
