1.本发明涉及用于对源自血液的样品中存在的白细胞进行浓缩分离的白细胞浓缩分离设备。此外，本发明涉及能够浓缩分离白细胞的血液采集容器。此外，本发明涉及使用了所述白细胞分离设备或所述血液采集容器的白细胞的分离方法。
背景技术：2.在临床检查中，从血液中浓缩分离特定的细胞，进行使用了分离得到的细胞的检查。例如，为了观察白细胞的形态、解析白细胞的表面抗原、或检查白细胞内部的染色体、基因，而从血液中除去红细胞，分离白细胞。
3.作为从血液中除去红细胞并且回收白细胞的方法，已知有溶血法、使用了聚蔗糖的离心分离法，但这些方法的操作复杂，并且根据操作者的技能，白细胞的回收率变动较大。
4.下述专利文献1、2中记载了不管操作者的技能如何，都能够简便地分离白细胞的设备。
5.下述专利文献1中记载了，容纳了具有特定的比重的凝胶状组合物的血液采集容器。通过将血液采集至该血液采集容器，进行离心分离，由于比重差，红细胞沉降至所述凝胶状组合物的下侧，白细胞浓缩分离在所述凝胶状组合物的上侧。
6.下述专利文献2中记载了，容纳了具有特定的比重的凝胶状组合物和具有比该凝胶状组合物大的比重的水溶性的密度梯度物质的血液采集容器。通过将血液采集至该血液采集容器，进行离心分离，由于比重差，红细胞沉降至所述凝胶状组合物的下侧，就白细胞而言，白细胞浓缩分离在所述凝胶状组合物与血浆层之间形成的层中。
7.现有技术文献
8.专利文献
9.专利文献1：wo2019/131613a1
10.专利文献2：日本特开昭61-084557号公报
技术实现要素：11.发明所解决的技术问题
12.专利文献1所述的方法中，离心分离后，凝胶状组合物的上部堆积的白细胞层中的红细胞的混入量可能变多。使用红细胞的混入量较多的检体进行白细胞的检查时，存在检查精度降低，不能得到正常检查结果的风险。
13.此外，专利文献2所述的方法中，能够在一定程度上减少白细胞层中的红细胞的混入量，但是难以提高白细胞的回收率。即使使用白细胞的回收量较少的检体的情况，也存在检查精度降低，不能得到正常检查结果的风险。
14.本发明的目的在于，提供能够得到白细胞的回收率较高并且红细胞的混入量较少的检体的白细胞浓缩分离设备和血液采集容器。此外，本发明的另一个目的在于，提供使用
了所述白细胞浓缩分离设备或血液采集容器的白细胞的分离方法。
15.解决问题的技术手段
16.根据本发明的广泛方案，提供一种白细胞浓缩分离设备，其为用于添加给定量的源自血液的样品，对存在于所述源自血液的样品中的白细胞进行浓缩分离的白细胞浓缩分离设备，其中，所述设备具备：容器主体、和容纳在所述容器主体内的血细胞分离材料，所述血细胞分离材料在25℃下的比重为1.075以上1.093以下，所述设备具备以下的构成a1或构成b1，
17.构成a1：具备容纳在所述容器主体内的红细胞凝聚剂。
18.构成b1：具备容纳在所述容器主体内的渗透压调节剂，当用与待添加至所述白细胞浓缩分离设备中的源自血液的样品的给定量等量的生理盐水，来溶解容纳在所述容器主体内的水溶性成分，而得到渗透压测定用溶液时，所述渗透压测定用溶液的渗透压为300mosm/l以上500mosm/l以下。
19.根据本发明的广泛方案，提供一种血液采集容器，其为采集给定量的血液的血液采集容器，其中，所述容器具备：血液采集容器主体、和容纳在所述血液采集容器主体内的血细胞分离材料，所述血细胞分离材料在25℃下的比重为1.075以上1.093以下，所述血液采集容器具备以下的构成a2或构成b2，
20.构成a2：具备容纳在所述血液采集容器主体内的红细胞凝聚剂。
21.构成b2：具备容纳在所述血液采集容器主体内的渗透压调节剂，当用与待采集至所述血液采集容器中的血液的给定量等量的生理盐水，来溶解容纳在所述血液采集容器主体内的水溶性成分，而得到渗透压测定用溶液时，所述渗透压测定用溶液的渗透压为300mosm/l以上500mosm/l以下。
22.在本发明的血液采集容器的一个特定方案中，所述血细胞分离材料为具有触变性的血细胞分离用组合物。
23.在本发明的血液采集容器的一个特定方案中，所述血液采集容器具备所述构成a2。
24.在本发明的血液采集容器的一个特定方案中，所述红细胞凝聚剂为葡聚糖、羟乙基淀粉或聚乙二醇。
25.在本发明的血液采集容器的一个特定方案中，所述葡聚糖的重均分子量为50000以上。
26.在本发明的血液采集容器的一个特定方案中，所述血液采集容器具备所述构成b2。
27.在本发明的血液采集容器的一个特定方案中，所述渗透压测定用溶液的渗透压为320mosm/l以上360mosm/l以下。
28.在本发明的血液采集容器的一个特定方案中，所述血细胞分离材料在25℃下的比重为1.082以上1.090以下，所述渗透压测定用溶液的渗透压为320mosm/l以上360mosm/l以下。
29.在本发明的血液采集容器的一个特定方案中，所述渗透压调节剂为氯化钠或葡萄糖。
30.在本发明的血液采集容器的一个特定方案中，所述血液采集容器具备所述构成a2
和所述构成b2。
31.在本发明的血液采集容器的一个特定方案中，所述血液采集容器具备：容纳在所述血液采集容器主体内的抗凝固剂。
32.在本发明的血液采集容器的一个特定方案中，所述血液采集容器具备：容纳在所述血液采集容器主体内的抗氧化剂。
33.在本发明的血液采集容器的一个特定方案中，所述抗氧化剂为抗坏血酸或抗坏血酸的无机盐。
34.根据本发明的广泛方案，提供一种白细胞的分离方法，其为使用了所述白细胞浓缩分离设备的白细胞的分离方法，其中，所述方法具备：向所述白细胞浓缩分离设备中添加源自血液的样品的工序；和对添加有所述源自血液的样品的所述白细胞浓缩分离设备进行离心分离的工序。
35.根据本发明的广泛方案，提供一种白细胞的分离方法，其为使用了所述血液采集容器的白细胞的分离方法，其中，所述方法具备：向所述血液采集容器内采集血液的工序；和对采集有所述血液的所述血液采集容器进行离心分离的工序。
36.根据本发明的广泛方案，提供一种白细胞浓缩分离系统，其为用于采集给定量的源自血液的样品，对存在于所述源自血液的样品中的白细胞进行浓缩分离的白细胞浓缩分离系统，其中，所述系统具备：25℃下的比重为1.075以上1.093以下的血细胞分离材料，所述系统具备以下的构成a3或构成b3，
37.构成a3：具备红细胞凝聚剂。
38.构成b3：具备渗透压调节剂，当用与所述源自血液的样品的给定量等量的生理盐水，来溶解待与所述源自血液的样品混合的水溶性成分，而得到渗透压测定用溶液时，所述渗透压测定用溶液的渗透压为300mosm/l以上500mosm/l以下。
39.发明的效果
40.本发明的白细胞浓缩分离设备为用于添加给定量的源自血液的样品，对存在于所述源自血液的样品中的白细胞进行浓缩分离的白细胞浓缩分离设备，其中，所述设备具备：容器主体、和容纳在所述容器主体内的血细胞分离材料，所述血细胞分离材料在25℃下的比重为1.075以上1.093以下，所述设备具备以下的构成a1或构成b1。构成a1：具备容纳在所述容器主体内的红细胞凝聚剂。构成b1：具备容纳在所述容器主体内的渗透压调节剂，当用与待添加至所述白细胞浓缩分离设备中的源自血液的样品的给定量等量的生理盐水，来溶解容纳在所述容器主体内的水溶性成分，而得到渗透压测定用溶液时，所述渗透压测定用溶液的渗透压为300mosm/l以上500mosm/l以下。本发明的白细胞浓缩分离设备中，由于具备所述构成，因此能够得到白细胞的回收率较高并且红细胞的混入量较少的检体。
41.本发明的血液采集容器为采集给定量的血液的血液采集容器，其中，所述容器具备：血液采集容器主体、和容纳在所述血液采集容器主体内的血细胞分离材料，所述血细胞分离材料在25℃下的比重为1.075以上1.093以下，所述血液采集容器具备以下的构成a2或构成b2。构成a2：具备容纳在所述血液采集容器主体内的红细胞凝聚剂。构成b2：具备容纳在所述血液采集容器主体内的渗透压调节剂，当用与待采集至所述血液采集容器中的血液的给定量等量的生理盐水，来溶解容纳在所述血液采集容器主体内的水溶性成分，而得到渗透压测定用溶液时，所述渗透压测定用溶液的渗透压为300mosm/l以上500mosm/l以下。
本发明的血液采集容器中，由于具备所述构成，因此能够得到白细胞的回收率较高并且红细胞的混入量较少的检体。
附图说明
42.[图1]图1是本发明的第1实施方式的血液采集容器的正视截面图。
[0043]
[图2]图2是本发明的第2实施方式的血液采集容器的正视截面图。
具体实施方式
[0044]
以下，对本发明详细地进行说明。
[0045]
本发明的白细胞浓缩分离设备为用于添加给定量的源自血液的样品，对存在于所述源自血液的样品中的白细胞进行浓缩分离的白细胞浓缩分离设备，其中，所述设备具备：容器主体、和容纳在所述容器主体内的血细胞分离材料，所述血细胞分离材料在25℃下的比重为1.075以上1.093以下，所述设备具备以下的构成a1或构成b1。
[0046]
构成a1：具备容纳在所述容器主体内的红细胞凝聚剂。
[0047]
构成b1：具备容纳在所述容器主体内的渗透压调节剂，当用与待添加至所述白细胞浓缩分离设备中的源自血液的样品的给定量等量的生理盐水，来溶解容纳在所述容器主体内的水溶性成分，而得到渗透压测定用溶液时，所述渗透压测定用溶液的渗透压为300mosm/l以上500mosm/l以下。
[0048]
本发明的血液采集容器为采集给定量的血液的血液采集容器，其中，所述容器具备：血液采集容器主体、和容纳在所述血液采集容器主体内的血细胞分离材料，所述血细胞分离材料在25℃下的比重为1.075以上1.093以下，所述血液采集容器具备以下的构成a2或构成b2。
[0049]
构成a2：具备容纳在所述血液采集容器主体内的红细胞凝聚剂。
[0050]
构成b2：具备容纳在所述血液采集容器主体内的渗透压调节剂，当用与待采集至所述血液采集容器中的血液的给定量等量的生理盐水，来溶解容纳在所述血液采集容器主体内的水溶性成分，而得到渗透压测定用溶液时，所述渗透压测定用溶液的渗透压为300mosm/l以上500mosm/l以下。
[0051]
本发明的白细胞浓缩分离设备和血液采集容器中，由于具备所述构成，因此能够得到白细胞的回收率较高并且红细胞的混入量较少的检体。本发明的白细胞浓缩分离设备和血液采集容器中，由于具备所述构成，因此能够得到白细胞的含量较多并且红细胞的含量较少的检体。
[0052]
本发明的白细胞浓缩分离设备可以具备所述构成a1，可以具备所述构成b1，也可以具备所述构成a1和所述构成b1。从进一步有效地发挥本发明的效果的观点出发，本发明的白细胞浓缩分离设备优选具备所述构成a1和所述构成b1。
[0053]
本发明的血液采集容器可以具备所述构成a2，可以具备所述构成b2，也可以具备所述构成a2和所述构成b2。从进一步有效地发挥本发明的效果的观点出发，本发明的血液采集容器优选具备所述构成a2和所述构成b2。
[0054]
在本发明的血液采集容器具备所述构成a2的情况下，将血液采集至血液采集容器时，红细胞因红细胞凝聚剂的作用而凝聚。通过对血液采集容器进行离心分离，凝聚了的红
细胞良好地移动至具有特定的比重的血细胞分离材料的下方。此外，白细胞良好地移动至具有特定的比重的血细胞分离材料的上方。其结果，能够得到白细胞的回收率较高并且红细胞的混入量较少的检体。
[0055]
在本发明的血液采集容器具备所述构成b2的情况下，将血液采集至血液采集容器时，血液的渗透压增大。因此，白细胞内的水分和红细胞内的水分向血细胞外移动，白细胞和红细胞的比重变大，其结果，能够增大白细胞的比重与红细胞的比重的差。通过对血液采集容器进行离心分离，比重变大了的红细胞良好地移动至具有特定的比重的血细胞分离材料的下方。此外，白细胞良好地移动至具有特定的比重的血细胞分离材料的上方。其结果，能够得到白细胞的回收率较高并且红细胞的混入量较少的检体。
[0056]
在本发明的白细胞浓缩分离设备中，也能够通过与上述同样的机制，得到白细胞的回收率较高并且红细胞的混入量较少的检体。
[0057]
在本发明的白细胞浓缩分离设备具备所述构成a1和所述构成b1这两者的构成的情况下和在本发明的血液采集容器具备所述构成a2和所述构成b2这两者的情况下，可同时发挥基于所述红细胞凝聚的效果和基于所述比重的效果，进一步有效地发挥本发明的效果。
[0058]
在具备所述构成b1的白细胞浓缩分离设备中，当用与待添加至所述白细胞浓缩分离设备中的源自血液的样品的给定量等量的生理盐水，来溶解容纳在所述容器主体内的水溶性成分，而得到渗透压测定用溶液时，得到的渗透压测定用溶液的渗透压为300mosm/l以上500mosm/l以下。
[0059]
在具备所述构成b2的血液采集容器中，当用与待采集至所述血液采集容器中的血液的给定量等量的生理盐水，来溶解容纳在所述血液采集容器主体内的水溶性成分，而得到渗透压测定用溶液时，得到的渗透压测定用溶液的渗透压为300mosm/l以上500mosm/l以下。
[0060]
具体而言，所述渗透压测定用溶液以下述方式制备。
[0061]
将与待添加至白细胞浓缩分离设备中的源自血液的样品的给定量或待采集至血液采集容器中的血液的给定量等量的生理盐水添加至白细胞浓缩分离设备或血液采集容器。例如，在待采集5ml的血液的血液采集容器中，将5ml的生理盐水添加至该血液采集容器。添加后，进行转倒混合，用生理盐水溶解水溶性成分，能够得到渗透压测定用溶液。所述水溶性成分例如为渗透压调节剂、红细胞凝聚剂和包含这些的液体等。
[0062]
所述渗透压测定用溶液的渗透压使用渗透压计(例如，arkray公司制“o m-6060”)，通过冰点下降法进行测定。
[0063]
所述渗透压测定用溶液的渗透压优选为300mosm/l以上，更优选为310mosm/l以上，进一步优选为320mosm/l以上，优选为500mosm/l以下，更优选为400mosm/l以下，进一步优选为360mosm/l以下。所述渗透压为所述下限以上时，能够进一步有效地抑制红细胞向检体中的混入。所述血细胞分离材料在25℃下的比重为1.082以上1.090以下，所述渗透压测定用溶液的渗透压为320mosm/l以上360mosm/l以下的情况下，进一步有效地发挥本发明的效果。
[0064]
(血细胞分离材料)
[0065]
所述白细胞浓缩分离设备具备容纳在所述容器主体内的血细胞分离材料。所述血
液采集容器具备容纳在所述血液采集容器主体内的血细胞分离材料。所述血细胞分离材料在25℃下的比重为1.075以上1.093以下。作为所述血细胞分离材料，可举出血细胞分离用组合物和血细胞分离用夹具等。从易于制备血细胞分离材料出发，所述血细胞分离材料优选为所述血细胞分离用组合物。
[0066]
所述血细胞分离材料的容纳位置只要是所述容器主体内或所述血液采集容器主体内就没有特别限定。所述白细胞浓缩分离设备中，所述血细胞分离材料可以配置在所述容器主体内的底部，也可以配置在内壁面上。所述血液采集容器中，所述血细胞分离材料可以配置在所述血液采集容器主体的底部，也可以配置在内壁面上。
[0067]
《血细胞分离用组合物》
[0068]
所述血细胞分离用组合物是离心分离时移动至白细胞和红细胞之间而形成分隔壁的组合物。此外，所述血细胞分离用组合物用于防止离心分离后红细胞混入白细胞层。所述血细胞分离用组合物优选具有触变性，更优选为具有触变性的凝胶状组合物。所述白细胞浓缩分离设备中，所述血细胞分离用组合物可以容纳在所述容器主体的底部，也可以配置在内壁面上。从进一步有效地发挥本发明的效果的观点出发，所述血细胞分离用组合物优选容纳在所述容器主体的底部。所述血液采集容器中，所述血细胞分离用组合物可以容纳在所述血液采集容器主体的底部，也可以配置在内壁面上。从进一步有效地发挥本发明的效果的观点出发，所述血细胞分离用组合物优选容纳在所述血液采集容器主体的底部。
[0069]
所述血细胞分离用组合物优选包含无机微粉和在25℃下具有流动性的有机成分。所述在25℃下具有流动性的有机成分和所述无机微粉分别可以仅使用一种，也可以组合使用两种以上。
[0070]
在25℃下具有流动性的有机成分：
[0071]
所述“在25℃下具有流动性”是指在25℃下的粘度为500pa
·
s以下。
[0072]
所述有机成分在25℃下的粘度优选为30pa
·
s以上，更优选为50pa
·
s以上，优选为200pa
·
s以下，更优选为100pa
·
s以下。所述粘度为所述下限以上和所述上限以下时，血细胞分离用组合物的流动性提高，能够提高分隔壁的强度。
[0073]
所述有机成分在25℃下的粘度使用e型粘度计(例如，东机产业公司制“t ve-35”)，在25℃和剪切速率1.0秒-1
的条件下进行测定。
[0074]
作为所述有机成分，可举出：树脂、和树脂与增塑剂等有机化合物的混合物等。就所述有机成分而言，在所述树脂与所述有机化合物的混合物的情况下，只要作为该混合物(所述有机成分)具有流动性即可，该树脂或该有机化合物可以不具有流动性。就所述有机成分而言，在所述树脂与所述有机化合物的混合物的情况下，该树脂例如可以是在25℃下为固体的树脂。所述树脂和所述有机化合物分别可以仅使用一种，也可以组合使用两种以上。
[0075]
作为所述树脂，可举出：石油树脂、环戊二烯类树脂、聚酯树脂、聚氨酯树脂、(甲基)丙烯酸类树脂、聚硅氧烷树脂、α-烯烃-富马酸酯共聚物、癸二酸与2,2-二甲基-1,3-丙二醇与1,2-丙二醇的共聚物、聚醚聚氨酯类树脂和聚醚聚酯类树脂等。所述树脂可以仅使用一种，也可以组合使用两种以上。
[0076]
作为所述石油树脂的市售品，可举出eastman chemical公司制“r egalite s5090”等。
[0077]
作为所述环戊二烯类树脂，可举出：环戊二烯类单体的聚合物、环戊二烯类单体与芳香族类单体的共聚物和双环戊二烯树脂等。所述环戊二烯类树脂可以进行了氢化。所述环戊二烯类单体的聚合物和所述环戊二烯类单体与芳香族类单体的共聚物可以是低聚物。
[0078]
作为所述环戊二烯类单体，可举出：环戊二烯、双环戊二烯和环戊二烯的烷基取代衍生物等。
[0079]
作为所述芳香族类单体，可举出：苯乙烯、甲基苯乙烯、茚和甲基茚等。
[0080]
作为所述双环戊二烯树脂的市售品，可举出colon公司制“sukorettsu(
スコレッツ
)su500”和“sukorettsu su90”等。
[0081]
作为所述聚酯树脂，可举出聚对苯二甲酸亚烷基酯树脂和聚萘二甲酸亚烷基酯树脂等。作为所述聚对苯二甲酸亚烷基酯树脂，可举出：聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚对苯二甲酸丁二醇酯和聚-1,4-环己烷二亚甲基对苯二甲酸酯等。
[0082]
作为所述聚氨酯树脂，可举出多元醇化合物和异氰酸酯化合物的反应物等。
[0083]
作为所述(甲基)丙烯酸类树脂，可举出通过将至少1种(甲基)丙烯酸酯单体聚合而得到的树脂和通过将至少1种(甲基)丙烯酸酯单体和至少1种该(甲基)丙烯酸酯单体以外的单体聚合而得到的树脂。
[0084]
作为所述(甲基)丙烯酸酯单体，例如可举出：具有碳原子数为1以上20以下烷基的(甲基)丙烯酸烷基酯、(甲基)丙烯酸聚亚烷基二醇酯、(甲基)丙烯酸烷氧基烷基酯、(甲基)丙烯酸羟基烷基酯、(甲基)丙烯酸缩水甘油酯、(甲基)丙烯酸二烷基氨基烷基酯、(甲基)丙烯酸苄酯、(甲基)丙烯酸苯氧基烷基酯、(甲基)丙烯酸环己酯、(甲基)丙烯酸异冰片酯和(甲基)丙烯酸烷氧基甲硅烷基烷基酯等。所述(甲基)丙烯酸酯单体可以仅使用一种，也可以组合使用两种以上。
[0085]
作为所述有机化合物，可举出苯多羧酸烷基酯衍生物等。所述有机化合物优选为苯多羧酸烷基酯衍生物。因此，所述有机成分优选为所述树脂与所述苯多羧酸烷基酯衍生物的混合物。
[0086]
作为所述苯多羧酸烷基酯衍生物，可举出：邻苯二甲酸酯、偏苯三酸酯和均苯四酸酯等。所述苯多羧酸烷基酯衍生物可以仅使用一种，也可以组合使用两种以上。
[0087]
作为所述偏苯三酸酯，可举出：偏苯三酸三正辛酯、偏苯三酸三异辛酯和偏苯三酸三异癸酯等。
[0088]
作为所述均苯四酸酯，可举出均苯四酸四异辛酯。
[0089]
作为所述偏苯三酸酯的市售品，可举出：dic公司制“monosizer w700”和“monosizer w-750”、新日本理化公司制“sanso cizer totm”和“sanso cizer titm”等。
[0090]
作为所述均苯四酸酯的市售品，可举出dic公司制“monosizer w-7010”等。
[0091]
所述苯多羧酸烷基酯衍生物优选为邻苯二甲酸酯、偏苯三酸酯或均苯四酸酯，更优选为偏苯三酸酯。
[0092]
在血细胞分离用组合物100重量％中，所述有机成分的含量优选为80重量％以上，更优选为85重量％以上，进一步优选为90重量％以上，优选为95重量％以下。
[0093]
无机微粉：
[0094]
作为所述无机微粉，可举出：二氧化硅微粉、氧化钛粉末、氧化锌粉末、碳酸钙粉末、氧化铝粉末、玻璃微粉、滑石粉粉末、高岭土粉末、膨润土粉末、二氧化钛粉末和锆粉末
等。
[0095]
所述无机微粉更优选包含二氧化硅微粉、与二氧化硅微粉不同的无机微粉。所述与二氧化硅微粉不同的无机微粉优选为比重比二氧化硅微粉大的无机微粉，更优选为氧化锌粉末、氧化钛粉末、氧化铝粉末等比重为3以上无机微粉。
[0096]
从进一步有效地发挥本发明的效果的观点出发，所述无机微粉优选包含二氧化硅微粉。
[0097]
作为所述二氧化硅微粉，可举出天然二氧化硅和合成二氧化硅。作为合成二氧化硅，可举出亲水性二氧化硅和疏水性二氧化硅。亲水性二氧化硅通过粒子表面的羟基彼此氢键合，而在赋予血细胞分离用组合物触变性的同时，具有调节比重的作用。另一方面，疏水性二氧化硅与亲水性二氧化硅相比，触变性的赋予效果较小。
[0098]
从同时将血细胞分离用组合物的比重和触变性这两者保持在适宜的范围的观点出发，所述二氧化硅微粉优选包含亲水性二氧化硅，更优选包含亲水性二氧化硅和疏水性二氧化硅。所述二氧化硅微粉优选至少包含亲水性二氧化硅。
[0099]
血细胞分离用组合物100重量％中，亲水性二氧化硅的含量优选为0.01重量％以上，更优选为0.1重量％以上，进一步优选为0.3重量％以上，优选为2.50重量％以下，更优选为2.00重量％以下。所述亲水性二氧化硅的含量为所述下限以上和所述上限以下时，能够将血细胞分离用组合物的比重和触变性这两者保持在更适宜的范围。
[0100]
血细胞分离用组合物100重量％中，二氧化硅微粉的含量优选为0.1重量％以上，更优选为1重量％以上，进一步优选为3重量％以上，优选为10重量％以下，更优选为5重量％以下。所述二氧化硅微粉的含量为所述下限以上和所述上限以下时，能够将血细胞分离用组合物的比重和触变性这两者保持在更适宜的范围。
[0101]
所述二氧化硅微粉和所述与二氧化硅微粉不同的无机微粉的平均粒径没有特别限定。所述二氧化硅微粉的平均粒径可以为1nm以上，可以为10nm以上，可以为500nm以下，可以为100nm以下。所述与二氧化硅微粉不同的无机微粉的平均粒径没有特别限定。所述无机微粉的平均粒径可以为10nm以上，可以为100nm以上，可以为10μm以下，可以为1μm以下。
[0102]
所述二氧化硅微粉和所述与二氧化硅微粉不同的无机微粉的平均粒径为以体积基准测定的平均粒径，是成为50％的中值粒径(d50)的值。所述体积平均粒径(d50)可通过激光衍射
·
散射法、图像解析法、coulter法和离心沉降法等测定。所述体积平均粒径(d50)优选通过基于激光衍射
·
散射法或图像解析法的测定求出。
[0103]
血细胞分离用组合物100重量％中，所述无机微粉的含量优选为0.1重量％以上，更优选为1重量％以上，进一步优选为3重量％以上，优选为10重量％以下，更优选为5重量％以下。所述无机微粉的含量为所述下限以上和所述上限以下时，能够将血细胞分离用组合物的比重和触变性这两者保持在更适宜的范围。
[0104]
其他成分：
[0105]
在不损害本发明的效果的范围内，所述血细胞分离用组合物可以包含所述成分以外的其他成分。就所述血细胞分离用组合物而言，例如，作为所述其他成分，可以包含有机凝胶剂、热塑性弹性体、聚亚烷基二醇、硅油、辅助溶剂、抗氧化剂、着色剂和水等。所述其他成分分别可以仅使用一种，也可以组合使用两种以上。
[0106]
其他详细内容：
[0107]
所述血细胞分离用组合物在25℃下的比重为1.075以上1.093以下。所述血细胞分离用组合物在25℃下的比重优选为1.077以上，更优选为1.082以上，优选为1.090以下，更优选为1.088以下。所述比重为所述下限以上和所述上限以下时，能够良好地得到白细胞的回收率更高、红细胞的混入量更少的检体。
[0108]
所述血细胞分离用组合物在25℃下的比重通过以下方法测定：将1滴血细胞分离用组合物依次滴加至比重以0.002的间隔进行了阶段性的调节的25℃的食盐水中，通过在食盐水中的浮沉进行测定。
[0109]
所述血细胞分离用组合物在25℃下的粘度优选为100pa
·
s以上，更优选为150pa
·
s以上，优选为500pa
·
s以下，更优选为400pa
·
s以下。所述粘度为所述下限以上和所述上限以下时，能够进一步有效地发挥本发明的效果。
[0110]
所述血细胞分离用组合物在25℃下的粘度使用e型粘度计(例如，东机产业公司制“tve-35”)，在25℃和剪切速率1.0秒-1
的条件下进行测定。
[0111]
《血细胞分离用夹具》
[0112]
所述血细胞分离用夹具是离心分离时移动至白细胞和红细胞之间而形成分隔壁的夹具。此外，所述血细胞分离用夹具用于防止离心分离后红细胞混入白细胞层。
[0113]
作为所述血细胞分离用夹具，例如可使用作为血清或血浆分离用夹具已知的夹具。作为所述血细胞分离用夹具，例如可举出wo2010/132783a1等所述的机械性隔膜(血细胞分离用夹具)等。
[0114]
作为所述血细胞分离用夹具的材料，例如可举出弹性体等。
[0115]
(红细胞凝聚剂)
[0116]
具备所述构成a1的白细胞浓缩分离设备具备容纳在所述容器主体内的红细胞凝聚剂。具备所述构成a2的血液采集容器具备容纳在所述血液采集容器主体内的红细胞凝聚剂。作为所述红细胞凝聚剂，可使用以往公知的红细胞凝聚剂。所述红细胞凝聚剂可以仅使用一种，也可以组合使用两种以上。
[0117]
作为所述红细胞凝聚剂，可举出：葡聚糖、羟乙基淀粉、甲基纤维素和聚蔗糖等多糖类；聚氨基酸、聚胺砜、聚凝胺、聚环氧烷烃、聚亚烷基亚胺、聚丙烯酰胺和阳离子改性聚乙烯醇等阳离子类聚合物；聚乙二醇(peg)；万古霉素和卡那霉素等低分子化合物；植物凝集素等细胞结合性糖蛋白等。
[0118]
所述红细胞凝聚剂优选为多糖类或聚乙二醇，更优选为多糖类。所述红细胞凝聚剂优选为葡聚糖、羟乙基淀粉或聚乙二醇，更优选为葡聚糖。在这些情况下，进一步有效地发挥本发明的效果。此外，血细胞分离用组合物与容器主体或血液采集容器主体的密合性提高，能够有效地抑制离心分离后血细胞分离用组合物与容器主体或血液采集容器主体之间的间隙残存红细胞。
[0119]
所述葡聚糖的重均分子量优选为50000以上，更优选为70000以上，进一步优选为100000以上，优选为1000000以下，更优选为600000以下，进一步优选为300000以下。所述重均分子量为所述下限以上和所述上限以下时，本发明的效果更有效地发挥。此外，血细胞分离用组合物与容器主体或血液采集容器主体的密合性进一步提高，能够进一步有效地抑制离心分离后血细胞分离用组合物与容器主体或血液采集容器主体之间的间隙中的红细胞的残存。
[0120]
所述羟乙基淀粉的重均分子量优选为70000以上，更优选为100000以上，进一步优选为200000以上，优选为1000000以下，更优选为700000以下，进一步优选为500000以下。所述重均分子量为所述下限以上和所述上限以下时，本发明的效果更有效地发挥。此外，血细胞分离用组合物与容器主体或血液采集容器主体的密合性进一步提高，能够进一步有效地抑制离心分离后血细胞分离用组合物与容器主体或血液采集容器主体之间的间隙中的红细胞的残存。
[0121]
所述聚乙二醇的重均分子量优选为1000以上，更优选为3000以上，进一步优选为5000以上，优选为100000以下，更优选为50000以下，进一步优选为30000以下。所述重均分子量为所述下限以上和所述上限以下时，本发明的效果更有效地发挥。此外，血细胞分离用组合物与容器主体或血液采集容器主体的密合性进一步提高，能够进一步有效地抑制离心分离后血细胞分离用组合物与容器主体或血液采集容器主体之间的间隙中的红细胞的残存。
[0122]
所述重均分子量表示通过凝胶渗透色谱(gpc)测定得到的以普鲁兰多糖(pullulan)计的重均分子量。
[0123]
所述白细胞浓缩分离设备中，所述红细胞凝聚剂可以以粉末的状态容纳在所述容器主体内，也可以以溶解在液体中的状态容纳在所述容器主体内。所述红细胞凝聚剂以溶解在液体中的状态容纳在所述容器主体内的情况下，为了防止血液流入时的溶血，优选将液体的渗透压调节为与血液等渗。需要说明的是，所述红细胞凝聚剂也可以以粉末状态和溶解在液体中的状态这两种状态存在于所述容器主体内。
[0124]
所述血液采集容器中，所述红细胞凝聚剂可以以粉末的状态容纳在所述血液采集容器主体内，也可以以溶解在液体中的状态容纳在所述血液采集容器主体内。所述红细胞凝聚剂以溶解在液体中的状态容纳在所述血液采集容器主体内的情况下，为了防止血液流入时的溶血，优选将液体的渗透压调节为与血液等渗。需要说明的是，所述红细胞凝聚剂也可以以粉末状态和溶解在液体中的状态这两种状态存在于所述血液采集容器主体内。
[0125]
作为所述液体，可举出水和醇等。
[0126]
所述红细胞凝聚剂优选配置在所述血液采集容器主体的内壁面上或配置在所述血细胞分离材料的表面上。需要说明的是，所述红细胞凝聚剂可以配置在所述血液采集容器主体的内壁面上，可以配置在所述血细胞分离材料的表面上，也可以配置在所述血液采集容器主体的内壁面上和所述血细胞分离材料的表面上这两者上。所述白细胞浓缩分离设备的情况也同样，所述红细胞凝聚剂优选配置在所述容器主体的内壁面上或配置在所述血细胞分离材料的表面上。
[0127]
所述红细胞凝聚剂以粉末状态进行了容纳的情况下，粉末状的红细胞凝聚剂优选附着在所述血液采集容器主体的内壁面上或配置在所述血细胞分离材料的表面上。所述白细胞浓缩分离设备的情况也同样，粉末状的红细胞凝聚剂优选附着在所述容器主体的内壁面上或配置在所述血细胞分离材料的表面上。
[0128]
所述白细胞浓缩分离设备中，就所述红细胞凝聚剂的含量而言，每1ml待添加的源自血液的样品优选为5mg以上，更优选为10mg以上，优选为50mg以下，更优选为30mg以下。所述血液采集容器中，就所述红细胞凝聚剂的含量而言，每1ml待采集的血液优选为5mg以上，更优选为10mg以上，优选为50mg以下，更优选为30mg以下。所述红细胞凝聚剂的含量为所述
下限以上和所述上限以下时，本发明的效果更有效地发挥。此外，血细胞分离用组合物与血液采集容器主体的密合性进一步提高，能够进一步有效地抑制离心分离后血细胞分离用组合物与血液采集容器主体之间的间隙中的红细胞的残存。
[0129]
(渗透压调节剂)
[0130]
具备所述构成b1的白细胞浓缩分离设备具备容纳在所述容器主体内的渗透压调节剂。具备所述构成b2的血液采集容器具备容纳在所述血液采集容器主体内的渗透压调节剂。作为所述渗透压调节剂，可使用以往公知的渗透压调节剂。所述渗透压调节剂可以仅使用一种，也可以组合使用两种以上。
[0131]
作为所述渗透压调节剂，可举出：氯化钠、氯化钾、葡萄糖、二羟基丙酮、以及d-甘露醇和d-山梨糖醇等糖醇等。
[0132]
从进一步有效地发挥本发明的效果的观点出发，所述渗透压调节剂优选为氯化钠或葡萄糖。
[0133]
所述白细胞浓缩分离设备中，所述渗透压调节剂可以以粉末的状态容纳在所述容器主体内，也可以以溶解在液体中的状态容纳在所述容器主体内。需要说明的是，所述渗透压调节剂也可以以粉末状态和溶解在液体中的状态这两种状态存在于所述容器主体内。
[0134]
所述血液采集容器中，所述渗透压调节剂可以以粉末的状态容纳在所述血液采集容器主体内，也可以以溶解在液体中的状态容纳在所述血液采集容器主体内。需要说明的是，所述渗透压调节剂也可以以粉末状态和溶解在液体中的状态这两种状态存在于所述血液采集容器主体内。
[0135]
作为所述液体，可举出水和醇等。
[0136]
所述渗透压调节剂优选配置在所述血液采集容器主体的内壁面上或配置在所述血细胞分离材料的表面上。需要说明的是，所述渗透压调节剂可以配置在所述血液采集容器主体的内壁面上，可以配置在所述血细胞分离材料的表面上，也可以配置在所述血液采集容器主体的内壁面上和所述血细胞分离材料的表面上这两者上。所述白细胞浓缩分离设备的情况也同样，所述渗透压调节剂优选配置在所述容器主体的内壁面上或配置在所述血细胞分离材料的表面上。
[0137]
所述渗透压调节剂以粉末的状态进行了容纳的情况下，粉末状的渗透压调节剂优选附着在所述血液采集容器主体的内壁面上或配置在所述血细胞分离材料的表面上。所述白细胞浓缩分离设备的情况也同样，粉末状的渗透压调节剂优选附着在所述容器主体的内壁面上或配置在所述血细胞分离材料的表面上。
[0138]
就所述容器主体内或所述血液采集容器主体内容纳的所述渗透压调节剂的量而言，只要所述渗透压测定用溶液的渗透压满足所述范围就没有特别限定。
[0139]
(抗凝固剂)
[0140]
所述白细胞浓缩分离设备优选具备：容纳在所述容器主体内的抗凝固剂。所述血液采集容器优选具备：容纳在所述血液采集容器主体内的抗凝固剂。作为所述抗凝固剂，可使用以往公知的抗凝固剂。所述抗凝固剂可以仅使用一种，也可以组合使用两种以上。
[0141]
作为所述抗凝固剂，可举出：肝素、乙二胺四乙酸(edta)和柠檬酸等。
[0142]
所述白细胞浓缩分离设备中，所述抗凝固剂可以以粉末的状态容纳在所述容器主体内，也可以以溶解在液体中的状态容纳在所述容器主体内。所述抗凝固剂以溶解在液体
中的状态容纳在所述容器主体内的情况下，为了防止血液流入时的溶血，优选将液体的渗透压调节为与血液等渗。需要说明的是，所述抗凝固剂也可以以粉末状态和溶解在液体中的状态这两种状态存在于所述容器主体内。
[0143]
所述血液采集容器中，所述抗凝固剂可以以粉末的状态容纳在所述血液采集容器主体内，也可以以溶解在液体中的状态容纳在所述血液采集容器主体内。所述抗凝固剂以溶解在液体中的状态容纳在所述血液采集容器主体内的情况下，为了防止血液流入时的溶血，优选将液体的渗透压调节为与血液等渗。需要说明的是，所述抗凝固剂也可以以粉末状态和溶解在液体中的状态这两种状态存在于所述血液采集容器主体内。
[0144]
作为所述液体，可举出水和醇等。
[0145]
所述抗凝固剂优选配置在所述血液采集容器主体的内壁面上或配置在所述血细胞分离材料的表面上。需要说明的是，所述抗凝固剂可以配置在所述血液采集容器主体的内壁面上，可以配置在所述血细胞分离材料的表面上，也可以配置在所述血液采集容器主体的内壁面上和所述血细胞分离材料的表面上这两者上。所述白细胞浓缩分离设备的情况也同样，所述抗凝固剂优选配置在所述容器主体的内壁面上或配置在所述血细胞分离材料的表面上。
[0146]
所述抗凝固剂以粉末的状态进行了容纳的情况下，粉末状的抗凝固剂优选附着在所述血液采集容器主体的内壁面上或配置在所述血细胞分离材料的表面上。所述白细胞浓缩分离设备的情况也同样，粉末状的抗凝固剂优选附着在所述容器主体的内壁面上或配置在所述血细胞分离材料的表面上。
[0147]
就所述容器主体内或所述血液采集容器主体内容纳的所述抗凝固剂的量而言，只要不阻碍本发明的效果就没有特别限定。
[0148]
(抗氧化剂)
[0149]
所述白细胞浓缩分离设备优选具备：容纳在所述容器主体内的抗氧化剂。所述血液采集容器优选具备：容纳在所述血液采集容器主体内的抗氧化剂。通过具备所述抗氧化剂，能够有效地抑制对所述白细胞浓缩分离设备和所述血液采集容器进行放射线灭菌时的改性。作为所述抗氧化剂，可使用以往公知的抗氧化剂。所述抗氧化剂可以仅使用一种，也可以组合使用两种以上。
[0150]
作为所述抗氧化剂，可举出抗坏血酸、抗坏血酸的无机盐等。
[0151]
所述白细胞浓缩分离设备中，所述抗氧化剂可以以粉末的状态容纳在所述容器主体内，也可以以溶解在液体中的状态容纳在所述容器主体内。所述抗氧化剂以溶解在液体中的状态容纳在所述容器主体内的情况下，为了防止血液流入时的溶血，优选将液体的渗透压调节为与血液等渗。需要说明的是，所述抗氧化剂也可以以粉末状态和溶解在液体中的状态这两种状态存在于所述容器主体内。
[0152]
所述血液采集容器中，所述抗氧化剂可以以粉末的状态容纳在所述血液采集容器主体内，也可以以溶解在液体中的状态容纳在所述血液采集容器主体内。所述抗氧化剂以溶解在液体中的状态容纳在所述血液采集容器主体内的情况下，为了防止血液流入时的溶血，优选将液体的渗透压调节为与血液等渗。需要说明的是，所述抗氧化剂也可以以粉末状态和溶解在液体中的状态这两种状态存在于所述血液采集容器主体内。
[0153]
作为所述液体，可举出水和醇等。
[0154]
所述抗氧化剂优选配置在所述血液采集容器主体的内壁面上或配置在所述血细胞分离材料的表面上。需要说明的是，所述抗氧化剂可以配置在所述血液采集容器主体的内壁面上，可以配置在所述血细胞分离材料的表面上，也可以配置在所述血液采集容器主体的内壁面上和所述血细胞分离材料的表面上这两者上。所述白细胞浓缩分离设备的情况也同样，所述抗氧化剂优选配置在所述容器主体的内壁面上或配置在所述血细胞分离材料的表面上。
[0155]
所述抗氧化剂以粉末的状态进行了容纳的情况下，粉末状的抗氧化剂优选附着在所述血液采集容器主体的内壁面上或配置在所述血细胞分离材料的表面上。所述白细胞浓缩分离设备的情况也同样，粉末状的抗氧化剂优选附着在所述容器主体的内壁面上或配置在所述血细胞分离材料的表面上。
[0156]
就所述容器主体内或所述血液采集容器主体内容纳的所述抗氧化剂的量而言，只要不阻碍本发明的效果就没有特别限定。
[0157]
(容器主体和血液采集容器主体)
[0158]
作为所述容器主体和所述血液采集容器主体的形状，没有特别限定，优选为有底的管状容器。
[0159]
所述容器主体和所述血液采集容器主体的原材料没有特别限定。作为所述容器主体和所述血液采集容器主体的原材料，可举出：聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚丙烯腈等热塑性树脂；不饱和聚酯树脂、环氧树脂、环氧-丙烯酸酯树脂等热固化性树脂；乙酸纤维素、丙酸纤维素、乙基纤维素、乙基几丁质等改性天然树脂；钠钙玻璃、磷硅酸盐玻璃、硼硅酸盐玻璃等硅酸盐玻璃、石英玻璃等玻璃。所述容器主体和所述血液采集容器主体的原材料可以仅使用一种，也可以组合使用两种以上。
[0160]
(栓体)
[0161]
所述白细胞浓缩分离设备和所述血液采集容器优选具备栓体。作为所述栓体，可使用以往公知的栓体。所述栓体优选为由能够气密性并且液密性地安装在容器主体的开口或血液采集容器主体的开口的原材料、形状构成的栓体。所述栓体优选以采血针能够刺穿的方式构成。
[0162]
作为所述栓体，可举出：具有与容器主体的开口或血液采集容器主体的开口嵌合的形状的栓体、片状的密封栓体等。
[0163]
此外，所述栓体可以是具备橡胶栓等栓主体和由塑料等构成的帽部件的栓体。在这种情况下，能够抑制在血液采集后，从血液采集容器主体的开口拔出栓体时，血液与人体接触的风险。
[0164]
作为所述栓体(或所述栓主体)的材料，例如可举出：合成树脂、弹性体、橡胶、金属箔等。作为所述橡胶，可举出丁基橡胶和卤化丁基橡胶等。作为所述金属箔，可举出铝箔等。从提高密封性的观点出发，所述栓体的材料优选为丁基橡胶。所述栓体优选为丁基橡胶栓。
[0165]
(血液采集容器的其他详细内容)
[0166]
所述血液采集容器优选为采血管。所述血液采集容器主体优选为采血管主体。
[0167]
所述红细胞凝聚剂和所述渗透压调节剂以溶解在液体中的状态进行了容纳的所述血液采集容器(具备构成a2和构成b2的血液采集容器)例如可以下述方式进行制造。
[0168]
将所述红细胞凝聚剂、所述渗透压调节剂、根据需要使用的其他成分溶解在水等
溶剂中，得到混合液。向血液采集容器主体内添加得到的混合液。此外，在添加混合液之前或添加后，将血细胞分离用组合物容纳在血液采集容器主体内。
[0169]
需要说明的是，通过使所述混合液中的溶剂挥发等或将所述红细胞凝聚剂和所述渗透压调节剂等以粉末状态添加在血细胞分离用组合物的表面上，能够得到所述红细胞凝聚剂和所述渗透压调节剂以粉末状态配置在所述血细胞分离用组合物的表面上的所述血液采集容器。
[0170]
所述红细胞凝聚剂和所述渗透压调节剂以粉末状态配置在所述血液采集容器主体的内壁面上的所述血液采集容器(具备构成a2和构成b2的血液采集容器)例如可以下述方式进行制造。
[0171]
将所述红细胞凝聚剂、所述渗透压调节剂、根据需要使用的其他成分溶解在水等溶剂中，得到混合液。将所述混合液涂布至血液采集容器主体的内壁面，使其干燥。此外，在涂布混合液之前或涂布后，将血细胞分离用组合物容纳在血液采集容器主体内。
[0172]
所述血液采集容器中，可以所述红细胞凝聚剂以溶解在液体中的状态进行了容纳并且所述渗透压调节剂以粉末状态进行了容纳。所述血液采集容器中，例如，可以所述红细胞凝聚剂以粉末状态进行了容纳并且所述渗透压调节剂以溶解在液体中的状态进行了容纳。
[0173]
此外，通过使用或不使用所述红细胞凝聚剂和所述渗透压调节剂，可制造具备构成a2的血液采集容器和具备构成b2的血液采集容器。
[0174]
图1是本发明的第1实施方式的血液采集容器的正视截面图。
[0175]
图1表示的血液采集容器1具备：血液采集容器主体2、血细胞分离用组合物3、包含红细胞凝聚剂、渗透压调节剂和水的混合液4、以及栓体5。血液采集容器主体2在一端具有开口，在另一端具有封闭的底部。血细胞分离用组合物3容纳在血液采集容器主体2的底部。栓体5插入血液采集容器主体2的开口。
[0176]
混合液4配置在血细胞分离用组合物3的表面上，更具体而言，配置在血细胞分离用组合物3的上表面(一端侧的表面)。当血液采集容器为正立状态时，混合液4配置在血细胞分离用组合物3的表面上。所述红细胞凝聚剂和所述渗透压调节剂以溶解在液体中的状态容纳在血液采集容器主体2内。
[0177]
图2是本发明的第2实施方式的血液采集容器的正视截面图。
[0178]
图2表示的血液采集容器1a具备：血液采集容器主体2、血细胞分离用组合物3、红细胞凝聚剂和渗透压调节剂的混合粉末4a、以及栓体5。血液采集容器主体2在一端具有开口，在另一端具有封闭的底部。血细胞分离用组合物3容纳在血液采集容器主体2的底部。栓体5插入血液采集容器主体2的开口。
[0179]
混合粉末4a配置在血液采集容器主体的内壁面2a上。混合粉末4a附着在血液采集容器主体的内壁面2a上。即，所述红细胞凝聚剂和所述渗透压调节剂附着在血液采集容器主体的内壁面2a上。所述红细胞凝聚剂和所述渗透压调节剂以粉末状态容纳在血液采集容器主体2内。混合粉末4a比血细胞分离用组合物3更靠近一端侧。
[0180]
本发明的血液采集容器中，可以所述血细胞分离用组合物配置在所述血液采集容器主体的内壁面上，并且当血液采集容器为正立状态时，所述混合液配置在血液采集容器主体的底部。此外，本发明的血液采集容器中，可以所述血细胞分离用组合物配置在所述血
液采集容器主体的内壁面上，并且所述混合粉末配置在所述血液采集容器主体的内壁面上或所述血细胞分离用组合物的表面上。本发明的血液采集容器中，也可以所述血细胞分离用组合物配置在所述血液采集容器主体的内壁面上，并且所述混合粉末配置在所述血液采集容器主体的底部。此外，可以使用所述血细胞分离用夹具代替所述血细胞分离用组合物。
[0181]
所述白细胞浓缩分离设备和所述血液采集容器的内压没有特别限定。所述血液采集容器还可以用作在内部进行了排气后由所述密封部件进行了密封的真空采血管。在真空采血管的情况下，无论采血者的技术差异如何，都能够简便地进行一定量的血液采集。
[0182]
从防止细菌感染的观点出发，所述白细胞浓缩分离设备和所述血液采集容器的内部优选根据iso和jis的基准进行了灭菌。
[0183]
(白细胞的分离方法)
[0184]
本发明的白细胞的分离方法是使用了所述血液采集容器的白细胞的分离方法，所述方法具备：向所述血液采集容器内采集血液的工序；和对采集有所述血液的所述血液采集容器进行离心分离的工序。所述白细胞的分离方法是从血液中分离白细胞的方法。所述白细胞的分离方法是从血液中浓缩分离白细胞的方法。
[0185]
此外，同样地，可使用所述白细胞浓缩分离设备分离白细胞。所述白细胞的分离方法具备：向所述白细胞浓缩分离设备中添加源自血液的样品的工序；和对添加有所述源自血液的样品的所述白细胞浓缩分离设备进行离心分离的工序。
[0186]
在所述离心分离的工序中，可在白细胞与红细胞之间形成基于血细胞分离材料的分隔壁。离心分离后，可使白细胞浓缩分离在由血细胞分离材料形成得到的分隔壁上。离心分离后，白细胞优选堆积在所述分隔壁上。可回收所述分隔壁上浓缩分离的白细胞，作为检体。
[0187]
就所述离心分离的工序中的离心分离条件而言，只要能够由所述血细胞分离材料形成分隔壁，使白细胞和红细胞分离，就没有特别限定。作为所述离心分离条件，例如可举出：以400g以上4000g以下进行10分钟以上120分钟以下的离心分离的条件等。
[0188]
(白细胞分离系统)
[0189]
本发明的白细胞浓缩分离系统为用于采集给定量的源自血液的样品，对存在于所述源自血液的样品中的白细胞进行浓缩分离的白细胞浓缩分离系统，其中，所述系统具备：25℃下的比重为1.075以上1.093以下的血细胞分离材料，所述系统具备以下的构成a3或构成b3。
[0190]
构成a3：具备红细胞凝聚剂。
[0191]
构成b3：具备渗透压调节剂，当用与所述源自血液的样品的给定量等量的生理盐水，来溶解待与所述源自血液的样品混合的水溶性成分，而得到渗透压测定用溶液时，所述渗透压测定用溶液的渗透压为300mosm/l以上500mosm/l以下。
[0192]
本发明的白细胞分离系统中，由于具备所述构成，因此能够得到白细胞的回收率较高并且红细胞的混入量较少的检体。
[0193]
本发明的白细胞浓缩分离系统可以具备所述构成a3，可以具备所述构成b3，也可以具备所述构成a3和所述构成b3。从进一步有效地发挥本发明的效果的观点出发，本发明的白细胞浓缩分离系统优选具备所述构成a3和所述构成b3。
[0194]
所述构成b3中的待与所述源自血液的样品混合的水溶性成分例如是渗透压调节
剂、红细胞凝聚剂和包含这些的液体等。
[0195]
所述白细胞浓缩分离系统中，所述红细胞凝聚剂、所述渗透压调节剂和所述渗透压测定用溶液的优选构成等与上述构成同样。
[0196]
所述白细胞浓缩分离系统优选具备容纳源自血液的样品的容纳部。所述血细胞分离材料、所述红细胞凝聚剂和所述渗透压调节剂优选设置在所述容纳部，但不限于此。
[0197]
以下，将举出实施例对本发明进行更详细的说明。本发明不限于以下的实施例。
[0198]
作为血细胞分离用组合物的材料，准备以下材料。
[0199]
(在25℃下具有流动性的有机成分的材料)
[0200]
(甲基)丙烯酸类树脂：
[0201]
在偶氮类聚合引发剂的存在下通过溶液聚合法使丙烯酸-2-乙基己酯和丙烯酸丁酯进行自由基聚合，得到在25℃下具有流动性的(甲基)丙烯酸酯类树脂。
[0202]
其它的树脂：
[0203]
石油树脂(eastman chemical公司制“regalite s5090”)
[0204]
双环戊二烯树脂1(colon公司制“sukorettsu su500”)
[0205]
双环戊二烯树脂2(colon公司制“sukorettsu su90”)
[0206]
有机化合物：
[0207]
偏苯三酸酯(苯多羧酸烷基酯衍生物，dic公司制“monosizer w700”)
[0208]
(无机微粉)
[0209]
亲水性二氧化硅(二氧化硅微粉，日本aerosil公司制“200cf”)
[0210]
疏水性二氧化硅(二氧化硅微粉，日本aerosil公司制“r974”)
[0211]
氧化钛粉末(石原产业公司制“a-100”)
[0212]
(其它的成分)
[0213]
硅油(toray dow corning公司制“sf8410”)
[0214]
有机凝胶剂(新日本理化公司制“gelol d”)
[0215]
1-甲基-2-吡咯烷酮(辅助溶剂)
[0216]
血细胞分离用组合物a～h的制备：
[0217]
以表1、2所述的配合比例，将在25℃下具有流动性的有机成分、无机微粉、其它的成分混合，制备具有触变性的血细胞分离用组合物a～h。
[0218]
[0219][0220]
(红细胞凝聚剂)
[0221]
葡聚糖(重均分子量200000)
[0222]
羟乙基淀粉含有液(nipro公司制“hes40”，以6w/v％的浓度含有重均分子量约40万的羟乙基淀粉的水溶液)
[0223]
聚乙二醇(peg 6k，富士胶片和光纯药公司制)
[0224]
(渗透压调节剂)
[0225]
氯化钠
[0226]
葡萄糖
[0227]
(抗凝固剂)
[0228]
乙二胺四乙酸二钾盐二水合物(edta2k
·
2h2o)
[0229]
(抗氧化剂)
[0230]
抗坏血酸钠
[0231]
(实施例1)
[0232]
将红细胞凝聚剂、渗透压调节剂和抗凝固剂溶解在水中，得到混合液。将得到的混合液的配合成分的种类和配合量示于表3。需要说明的是，得到的混合液的渗透压被调节为与血液等渗。
[0233]
准备长度100mm，开口部的内径14mm的聚对苯二甲酸乙二醇酯有底管(pet有底管，血液采集容器主体)。将2.0g的血细胞分离用组合物b容纳在所述血液采集容器主体的底部。此外，将得到的混合液1.0ml添加至血细胞分离用组合物b的表面上。对血液采集容器内部进行减压，通过丁基橡胶栓密封。由此制备血液采集容器。在得到的血液采集容器中，所述红细胞凝聚剂、所述渗透压调节剂和所述抗凝固剂以溶解在液体中的状态配置在所述血细胞分离用组合物的表面上。此外，得到的血液采集容器是用于采集4ml的血液的容器。
[0234]
(实施例2～16和比较例3,5)
[0235]
除了将血细胞分离用组合物的种类、以及红细胞凝聚剂、抗凝固剂、抗氧化剂和渗透压调节剂的配合量如表3～7所示的进行变更之外，以与实施例1同样的方式，制备血液采集容器。需要说明的是，表中，羟乙基淀粉含有液的配合量不是羟乙基淀粉的含量，而是以羟乙基淀粉含有液(市售品)的配合量表示。此外，得到的混合液的渗透压被调节为与血液等渗或者高渗。
[0236]
(比较例1)
[0237]
将抗凝固剂溶解在水中，得到混合液。
[0238]
准备长度100mm，开口部的内径14mm的pet有底管(血液采集容器主体)。将2.0g的血细胞分离用组合物d容纳在所述血液采集容器主体的底部。此外，将得到的混合液30mg涂布至血液采集容器主体的内壁面，使其干燥。对血液采集容器内部进行减压，通过丁基橡胶栓密封。由此制备血液采集容器。此外，得到的血液采集容器是用于采集4ml的血液的容器。
[0239]
(比较例2、4)
[0240]
除了将血细胞分离用组合物的种类如表7所示的进行变更之外，以与比较例1同样的方式，制备血液采集容器。
[0241]
(评价)
[0242]
(1)血细胞分离用组合物在25℃下的比重
[0243]
将1滴得到的血细胞分离用组合物依次滴加至以比重为0.002的间隔阶段性地进行了调节的25℃的食盐水中，通过食盐水中的浮沉对比重进行测定。
[0244]
(2)渗透压测定用溶液的渗透压
[0245]
向得到的血液采集容器中添加生理盐水4ml。添加后，进行转倒混合，用生理盐水
溶解水溶性成分，得到渗透压测定用溶液。使用渗透压计(arkr ay公司制“om-6060”)，通过冰点下降法对得到的渗透压测定用溶液的渗透压进行测定。
[0246]
(3)红细胞的混入率和白细胞的回收率
[0247]
准备3人的血液，依次进行以下的工序。
[0248]
血液采集工序：
[0249]
将血液4ml采集至得到的血液采集容器的所述血液采集容器主体内。
[0250]
离心分离工序：
[0251]
以1500g对血液采集容器进行15分钟离心分离。
[0252]
离心分离后，血浆位于由血细胞分离用组合物形成得到的分隔壁的上方。通过移液管对血浆进行搅拌，使由血细胞分离用组合物形成得到的分隔壁上堆积的血细胞悬浮，然后回收，作为检体。
[0253]
使用多项目自动血细胞分析装置(sysmex公司制“xe5000”)，对回收得到的检体进行分析，从而测定检体中的白细胞数和红细胞数。此外，对于准备的血液(全血样品)，同样地测定全血样品中的白细胞数和红细胞数。需要说明的是，所述白细胞数和所述红细胞数是用准备的3人的血液进行评价而得到的结果的平均值。
[0254]
通过下述式计算红细胞的混入率和白细胞的回收率。
[0255]
红细胞的混入率(％)＝(回收得到的检体中包含的红细胞的数(cells))/(全血样品中包含的红细胞的数(cells))
×
100
[0256]
白细胞的回收率(％)＝(回收得到的检体中包含的白细胞的数(cells))/(全血样品中包含的白细胞的数(cells))
×
100
[0257]
[红细胞的混入率的判定基准]
[0258]
○
：红细胞的混入率为2％以下
[0259]
×
：红细胞的混入率超过2％
[0260]
[白细胞的回收率的判定基准]
[0261]
○
：白细胞的回收率为40％以上
[0262]
×
：白细胞的回收率低于40％
[0263]
将组成和结果示于下述表3～7。
[0264]
[0265]
[0266]
[0267]
[0268][0269]
符号的说明
[0270]
1、1a
…
血液采集容器
[0271]2…
血液采集容器主体
[0272]
2a
…
内壁面
[0273]3…
血细胞分离用组合物
[0274]4…
混合液
[0275]
4a
…
混合粉末
[0276]5…
栓体。
技术特征：1.一种白细胞浓缩分离设备，其为用于添加给定量的源自血液的样品，对存在于所述源自血液的样品中的白细胞进行浓缩分离的白细胞浓缩分离设备，其中，所述设备具备：容器主体、和容纳在所述容器主体内的血细胞分离材料，所述血细胞分离材料在25℃下的比重为1.075以上1.093以下，所述设备具备以下的构成a1或构成b1：构成a1：具备容纳在所述容器主体内的红细胞凝聚剂；构成b1：具备容纳在所述容器主体内的渗透压调节剂，当用与待添加至所述白细胞浓缩分离设备中的源自血液的样品的给定量等量的生理盐水，来溶解容纳在所述容器主体内的水溶性成分，而得到渗透压测定用溶液时，所述渗透压测定用溶液的渗透压为300mosm/l以上500mosm/l以下。2.一种血液采集容器，其为采集给定量的血液的血液采集容器，其中，所述容器具备：血液采集容器主体、和容纳在所述血液采集容器主体内的血细胞分离材料，所述血细胞分离材料在25℃下的比重为1.075以上1.093以下，所述血液采集容器具备以下的构成a2或构成b2，构成a2：具备容纳在所述血液采集容器主体内的红细胞凝聚剂；构成b2：具备容纳在所述血液采集容器主体内的渗透压调节剂，当用与待采集至所述血液采集容器中的血液的给定量等量的生理盐水，来溶解容纳在所述血液采集容器主体内的水溶性成分，而得到渗透压测定用溶液时，所述渗透压测定用溶液的渗透压为300mosm/l以上500mosm/l以下。3.根据权利要求2所述的血液采集容器，其中，所述血细胞分离材料为具有触变性的血细胞分离用组合物。4.根据权利要求2或3所述的血液采集容器，其具备：所述构成a2。5.根据权利要求4所述的血液采集容器，其中，所述红细胞凝聚剂为葡聚糖、羟乙基淀粉或聚乙二醇。6.根据权利要求5所述的血液采集容器，其中，所述葡聚糖的重均分子量为50000以上。7.根据权利要求2或3所述的血液采集容器，其具备：所述构成b2。8.根据权利要求7所述的血液采集容器，其中，所述渗透压测定用溶液的渗透压为320mosm/l以上360mosm/l以下。9.根据权利要求7或8所述的血液采集容器，其中，所述血细胞分离材料在25℃下的比重为1.082以上1.090以下，所述渗透压测定用溶液的渗透压为320mosm/l以上360mosm/l以下。10.根据权利要求7～9中任一项所述的血液采集容器，其中，
所述渗透压调节剂为氯化钠或葡萄糖。11.根据权利要求2～10中任一项所述的血液采集容器，其具备：所述构成a2和所述构成b2。12.根据权利要求2～11中任一项所述的血液采集容器，其具备：容纳在所述血液采集容器主体内的抗凝固剂。13.根据权利要求2～12中任一项所述的血液采集容器，其具备：容纳在所述血液采集容器主体内的抗氧化剂。14.根据权利要求13所述的血液采集容器，其中，所述抗氧化剂为抗坏血酸或抗坏血酸的无机盐。15.一种白细胞的分离方法，其为使用了权利要求1所述的白细胞浓缩分离设备的白细胞的分离方法，其中，所述方法具备：向所述白细胞浓缩分离设备中添加源自血液的样品的工序；和对添加有所述源自血液的样品的所述白细胞浓缩分离设备进行离心分离的工序。16.一种白细胞的分离方法，其为使用了权利要求2～14中任一项所述的血液采集容器的白细胞的分离方法，其中，所述方法具备：向所述血液采集容器内采集血液的工序；和对采集有所述血液的所述血液采集容器进行离心分离的工序。17.一种白细胞浓缩分离系统，其为用于采集给定量的源自血液的样品，对存在于所述源自血液的样品中的白细胞进行浓缩分离的白细胞浓缩分离系统，其中，所述系统具备：25℃下的比重为1.075以上1.093以下的血细胞分离材料，所述系统具备以下的构成a3或构成b3，构成a3：具备红细胞凝聚剂；构成b3：具备渗透压调节剂，当用与所述源自血液的样品的给定量等量的生理盐水，来溶解待与所述源自血液的样品混合的水溶性成分，而得到渗透压测定用溶液时，所述渗透压测定用溶液的渗透压为300mosm/l以上500mosm/l以下。
技术总结提供能够得到白细胞的回收率较高并且红细胞的混入量较少的检体的血液采集容器。本发明的血液采集容器为采集给定量的血液的血液采集容器，其中，所述容器具备：血液采集容器主体、和容纳在所述血液采集容器主体内的血细胞分离材料，所述血细胞分离材料在25℃下的比重为1.075以上1.093以下，所述容器具备以下构成A2或构成B2，构成A2：具备容纳在所述血液采集容器主体内的红细胞凝聚剂；构成B2：具备容纳在所述血液采集容器主体内的渗透压调节剂，当用与待采集至所述血液采集容器中的血液的给定量等量的生理盐水，来溶解容纳在所述血液采集容器主体内的水溶性成分，而得到渗透压测定用溶液时，所述渗透压测定用溶液的渗透压为300mOsm/L以上500mOsm/L以下。300mOsm/L以上500mOsm/L以下。300mOsm/L以上500mOsm/L以下。
技术研发人员：驹井邦哉 五十川浩信
受保护的技术使用者：德山积水工业株式会社
技术研发日：2021.03.11
技术公布日：2022/11/1
