1.本发明属于医药发明技术领域,尤其涉及土槿皮乙酸在抗肿瘤药物药效学研究中的应用。
背景技术:2.土槿皮乙酸的cas号是82508-31-4,分子式是c23h28o8,分子量是 432.46。具有显著的抗肿瘤新生血管形成的作用,抗肿瘤作用,抗生育作用,抗血管生成作用,抗真菌作用,土槿皮乙酸可激活过氧化物酶增殖物激活受体。
3.目前,对土槿皮乙酸的研究主要集中在离体细胞水平的抗肿瘤作用,在动物水平验证土槿皮乙酸抗肿瘤作用的文章很少。且目前,关于土槿皮乙酸在裸鼠体内是否具有抗宫颈癌hela,人卵巢癌(ho-8910),人乳腺癌 mda-mb-468,神经胶质瘤细胞a172和神经元母细胞瘤sk-n-sh仍是未知。我们在裸鼠体内分析土槿皮乙酸抗抗宫颈癌hela,人卵巢癌(ho-8910),人乳腺癌mda-mb-468,神经胶质瘤细胞a172和神经元母细胞瘤sk-n-sh的药理作用,为开发其为抗肿瘤药物提供依据。
技术实现要素:4.本发明实施例的目的在于提供土槿皮乙酸在抗肿瘤药物药效学研究中的应用,旨在解决关于土槿皮乙酸在裸鼠体内是否具有抗宫颈癌hela,人卵巢癌(ho-8910),人乳腺癌mda-mb-468,神经胶质瘤细胞a172和神经元母细胞瘤sk-n-sh仍是未知的问题。
5.本发明实施例是这样实现的,土槿皮乙酸在抗肿瘤药物药效学研究中的应用,所述应用为土槿皮乙酸在裸鼠体内抗宫颈癌hela、人卵巢癌(ho-8910)、人乳腺癌mda-mb-468、神经胶质瘤细胞a172以及神经元母细胞瘤sk-n-sh 的研究。
6.进一步的技术方案,所述研究包括以下步骤:
7.步骤1:细胞移植:将500万个细胞悬于0.1ml的磷酸盐缓冲液中,移植于右前肢,移植8天后,肿瘤大小约为130立方毫米,将实验动物分为5 组,即阴性对照物、阳性对照组、高剂量组、中剂量组和低剂量组,每组裸鼠8只;
8.步骤2:给药:将10mg/kg紫杉醇、10mg/kg替莫唑胺、10mg/kg土槿皮乙酸、15mg/kg土槿皮乙酸和25mg/kg土槿皮乙酸的与溶剂混合并分别注射到不同组别的裸鼠体内;
9.步骤3:实验观察:肿瘤接种后每3天称量裸鼠的体重1次,每3天测量肿瘤尺寸1次,末次给药后3天取肿瘤称重,同时观察裸鼠行为的影响(包括运动,饮食,饮水,毛发脱落等);
10.步骤4:数理统计:用one-way anova进行统计分析。
11.进一步的技术方案,所述步骤2中的溶剂为12.5%乙醇+12.5%聚氧乙烯氢化蓖麻油+75%生理盐水。
12.进一步的技术方案,裸鼠的饲养条件为:恒温恒湿的无菌环境,每笼4 只裸鼠;温度:22
±
3℃,湿度:50
±
10%;笼子:聚碳酸酯的笼子,尺寸 300mm x 180mm x 150mm,每周
换两次垫料;饮食:辐射灭菌的食物,无菌水,自由取食;动物标记:耳朵标记。
13.进一步的技术方案,步骤1中的肿瘤细胞用含10%血清的dmem培养,培养条件是37℃,含5%co2,对数生长期的肿瘤细胞悬于pbs中,置于冰上用于接种。
14.本发明实施例提供的土槿皮乙酸在抗肿瘤药物药效学研究中的应用,通过设置实验,将宫颈癌细胞hela、人卵巢癌细胞ho-8910、人乳腺癌 mda-mb-468、神经胶质细胞瘤a172、神经元母细胞瘤sk-n-sh移植到6-8 周的雌性裸鼠体内,腹腔注射高(25mg/kg/d)、中(15mg/kg/d)、低(10 mg/kg/d)三个剂量的土槿皮乙酸,与阳性对照药紫杉醇和替莫唑胺比较,在裸鼠体内具有抗宫颈癌hela,人卵巢癌(ho-8910),人乳腺癌mda-mb-468,神经胶质瘤细胞a172和神经元母细胞瘤sk-n-sh的作用。
附图说明
15.图1为土槿皮乙酸对hela细胞的抑制作用图;
16.图2为土槿皮乙酸对ho-8910细胞的抑制作用图;
17.图3为土槿皮乙酸对mda-ma-468细胞的抑制作用图;
18.图4为土槿皮乙酸对a172细胞的抑制作用图;
19.图5为土槿皮乙酸对sk-n-sh细胞的抑制作用图;
具体实施方式
20.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合附图及实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
21.以下结合具体实施例对本发明的具体实现进行详细描述。
22.实施例1,为本发明一个实施例提供的土槿皮乙酸在抗肿瘤药物药效学研究中的应用,所述应用为土槿皮乙酸在裸鼠体内抗宫颈癌hela、人卵巢癌 (ho-8910)、人乳腺癌mda-mb-468、神经胶质瘤细胞a172以及神经元母细胞瘤sk-n-sh的研究。
23.所述研究包括以下步骤:
24.步骤1:细胞移植:将500万个细胞悬于0.1ml的磷酸盐缓冲液中,移植于右前肢,移植8天后,肿瘤大小约130立方毫米,将实验动物分为5组,即阴性对照物、阳性对照组、高剂量组、中剂量组和低剂量组,每组裸鼠8 只;
25.步骤2:给药:将10mg/kg紫杉醇、10mg/kg替莫唑胺、10mg/kg土槿皮乙酸、15mg/kg土槿皮乙酸和25mg/kg土槿皮乙酸的与溶剂混合并分别注射到不同组别的裸鼠体内;
26.步骤3:实验观察:肿瘤接种后每3天称量裸鼠的体重1次,每3天测量肿瘤尺寸1次,末次给药后3天取肿瘤称重,同时观察裸鼠行为的影响(包括运动,饮食,饮水,毛发脱落等);
27.步骤4:数理统计:用one-way anova进行统计分析。实验结果如图1-5 所示。
28.在本发明实施例中,溶剂为12.5%乙醇+12.5%聚氧乙烯氢化蓖麻油+75%生理盐水。
29.饲养条件为:恒温恒湿的无菌环境,每笼4只裸鼠;温度:22
±
3℃,湿度:50
±
10%;笼子:聚碳酸酯的笼子,尺寸300mm x 180mm x 150mm,每周换两次垫料;饮食:辐射灭菌的
食物,无菌水,自由取食;动物标记:耳朵标记。
30.肿瘤细胞用含10%血清的dmem培养,培养条件是37℃,含5%co2。对数生长期的肿瘤细胞悬于pbs中,置于冰上用于接种。
31.以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
技术特征:1.土槿皮乙酸在抗肿瘤药物药效学研究中的应用,其特征在于,所述应用为土槿皮乙酸在裸鼠体内抗宫颈癌hela、人卵巢癌ho-8910、人乳腺癌mda-mb-468、神经胶质瘤细胞a172以及神经元母细胞瘤sk-n-sh的研究。2.根据权利要求1所述的土槿皮乙酸在抗肿瘤药物药效学研究中的应用,其特征在于,所述研究包括以下步骤:步骤1:细胞移植:将500万个细胞悬于0.1ml的磷酸盐缓冲液中,移植于右前肢,移植8天后,待肿瘤体积为130立方毫米,将实验动物分为5组,即阴性对照物、阳性对照组、高剂量组、中剂量组和低剂量组,每组裸鼠8只;步骤2:给药:将10mg/kg紫杉醇、10mg/kg替莫唑胺、10mg/kg土槿皮乙酸、15mg/kg土槿皮乙酸和25mg/kg土槿皮乙酸的与溶剂混合并分别注射到不同组别的裸鼠体内;步骤3:实验观察:肿瘤接种后每3天称量裸鼠的体重1次,每3天测量肿瘤尺寸1次,末次给药后3天取肿瘤称重,同时观察裸鼠行为的影响;步骤4:数理统计:用one-way anova进行统计分析。3.根据权利要求2所述的土槿皮乙酸在抗肿瘤药物药效学研究中的应用,其特征在于,所述步骤1中的肿瘤细胞用含10%血清的dmem培养,培养条件是37℃,含5%co2,对数生长期的肿瘤细胞悬于pbs中,置于冰上用于接种。4.根据权利要求2所述的土槿皮乙酸在抗肿瘤药物药效学研究中的应用,其特征在于,所述步骤2中的溶剂为12.5%乙醇+12.5%聚氧乙烯氢化蓖麻油+75%生理盐水。5.根据权利要求2所述的土槿皮乙酸在抗肿瘤药物药效学研究中的应用,其特征在于,所述裸鼠的饲养条件为:恒温恒湿的无菌环境,每笼4只裸鼠;温度:22
±
3℃,湿度:50
±
10%;饮食:辐射灭菌的食物,无菌水,自由取食;动物标记:耳朵标记。6.根据权利要求5所述的土槿皮乙酸在抗肿瘤药物药效学研究中的应用,其特征在于,培养所用的笼子为聚碳酸酯的笼子,尺寸300mm x 180mm x 150mm,每周换两次垫料。
技术总结本发明适用于医药发明技术领域,提供了土槿皮乙酸在抗肿瘤药物药效学研究中的应用,所述应用为土槿皮乙酸在裸鼠体内抗宫颈癌HeLa、人卵巢癌HO-8910、人乳腺癌MDA-MB-468、神经胶质瘤细胞A172以及神经元母细胞瘤SK-N-SH的研究。研究发现土槿皮乙酸在裸鼠体内具有抗宫颈癌HeLa,人卵巢癌(HO-8910),人乳腺癌MDA-MB-468,神经胶质瘤细胞A172和神经元母细胞瘤SK-N-SH的作用。SH的作用。SH的作用。
技术研发人员:于静华
受保护的技术使用者:吉林大学
技术研发日:2022.05.17
技术公布日:2022/11/1