辅酶q产生促进剂和辅酶q产生促进方法
技术领域
1.本发明涉及一种辅酶q产生促进剂和辅酶q产生促进方法。
背景技术：2.辅酶q是一种几乎在以人为首的所有生物体中生物合成的脂溶性的生命体内物质。在真核生物中，辅酶q在线粒体的内膜中存在最多，是电子传递系统的必需的结构成分，在该电子传递系统中辅酶q在氧化磷酸化引起的能量(atp)产生中作为电子传递的载体发挥作用。辅酶q的结构由苯醌环和类异戊二烯侧链构成，不同链长的辅酶q类型存在于自然界中。例如，人、牛等的主要辅酶q是类异戊二烯侧链为10个单位的辅酶q10，小鼠、大鼠等的主要辅酶q是辅酶q9，低等生物的主要辅酶q是辅酶q6-q9。辅酶q10以“氧化型”(泛醌)、“自由基中间型”(半醌自由基)、“还原型”(泛醇)三种状态存在，泛醌经受二电子还原变成泛醇。认为人体中60％-80％的辅酶q10以还原型存在。辅酶q10的结构如下所述。
3.[化学式1]
[0004][0005]
作为辅酶q(特别是还原型)的生理作用，已经报道了增加细胞能量产生和减少日常生活中引起的身体疲劳的功能(能量代谢改善作用)。因此，在人体中，在具有活跃的能量代谢和高能量需求的器官中发现高水平的辅酶q10。通常，心脏、大脑、肾脏、肝脏、脾脏、胰腺等包括相对高浓度的辅酶q10。
[0006]
此外，已知辅酶q除了具有上述能量代谢改善作用外还具有抗氧化作用。由于现代生活导致暴露于各种压力，因此生命体内处于容易产生活性氧的状态。辅酶q作为内源性地产生的氧化抑制剂构成了用于去除活性氧的生命体内系统之一。即，辅酶q表现出通过反复进行氧化还原反应而作为抗氧化物质发挥作用的能力，并且对被认为是衰老和各种疾病的诱因的生命体内的各种氧化应激表现出高防御作用。特别是在人体中，作为辅酶q10的还原型的泛醇表现出高抗氧化作用，并且被认为通过抑制由活性氧引起的细胞损伤对于预防与生活方式相关的疾病、增强免疫系统等是有效的。如上所述，辅酶q是与对生命活动而言重要的生理作用(即能量代谢改善作用和抗氧化作用)相关的生命体内的重要分子。
[0007]
虽然人体中所需的辅酶q10是通过体内产生、膳食等进行补充而确保的，但体内合成的辅酶q10的量从大约20岁开始随着年龄的增长而减少，这种减少与伴随衰老的各种机能障碍相关。随着年龄的增长，辅酶q10的含量在几乎每个器官中都会减少。例如，在小鼠中，辅酶q10显著地减少的器官是能量代谢活跃地发生的心脏、肾脏和脾脏。尤其，不断跳动
的心脏需要大量的能量，因此受辅酶q10减少的影响很大。
[0008]
此外，辅酶q10的减少不仅由衰老引发，还由药物摄入和疾病引发。作为一个例子，已知摄入作为高脂血症(高血脂)的治疗药物的具有降低ldl-c(ldl胆固醇)效果的他汀类药物(hmg-coa还原酶抑制剂)会降低体内辅酶q10水平。例如，已经报道了一种情况，摄入20mg/天的普伐他汀、辛伐他汀等12周，使得血液中的辅酶q10量减少约50％。
[0009]
此外，作为上述疾病的另一个例子，在由线粒体机能障碍引起的线粒体疾病中，辅酶q10的生物合成障碍等发生，从而引发各种症状。相反地，与辅酶q10生物合成相关的基因簇的突变引发致命的多器官衰竭、中枢神经系统障碍等。由线粒体机能障碍引起的辅酶q10量减少与多种疾病相关。例如，一些心脏病亚型被认为可能由心肌线粒体中辅酶q10量减少引发。实际上，据指出，心力衰竭患者的血液辅酶q10水平倾向于降低。
[0010]
虽然如上所述健康的人可以通过日常膳食和体内合成获得足够的辅酶q10用于预防辅酶q10缺乏，但是在由衰老、药物摄入等引起的辅酶q10产生水平降低的情况下，确保必要和足够量的辅酶q10变得困难。因此，为了补充辅酶q10的缺乏，辅酶q10作为医药品、食品或补充品进行外在地补充。
[0011]
在日本，在医药领域，辅酶q10(氧化型)以通用名称泛癸利酮(ubidecarenone)被列入日本药典。作为医药品，泛癸利酮被用作改善心肌代谢的药物，被批准每天摄入30mg，对“基础治疗进行中的轻度至中度充血性心力衰竭症状”有功效和效果。泛癸利酮被证实通过口服给药通过淋巴管被吸收，移动到细胞内线粒体，并激活细胞内电子传递系统中的atp产生。此外，在药理学上，泛癸利酮被认可可以将由异丙肾上腺素引发的心肌中的氧缺乏保持在轻微的程度。此外，泛癸利酮被认可可以改善由高血压及其它原因等引起的心力衰竭。临床上，通过双盲比较试验证实，对于伴有例如缺血性心脏病、瓣膜病和心肌病的心脏病作为基础疾病的充血性心力衰竭，通过在常规治疗药物(如洋地黄-利尿剂)基础上施用本制剂，能够改善充血性心力衰竭症状。为了这种心脏病的改善，辅酶q10的替代疗法(口服补充品和静脉注射)已在全球范围内进行，并且效果在一定程度上已被认可。
[0012]
此外，作为医药品成分使用的辅酶q10在2001年被批准作为食品成分使用，此后已经作为各种保健食品(补充品)被销售。作为保健食品，每日推荐量为60mg的产品分销最多，每日推荐量超过30mg的产品占全部产品的80％以上，同时也分销每日推荐量为300mg的产品。
[0013]
如上所述，进行了通过外在地补充外源性的辅酶q10来治疗和预防由辅酶q10缺乏引起的各种疾病的尝试。例如，专利文献1报道了一种用于降低血液ldl胆固醇浓度、用于降低血液ldl胆固醇浓度和疲劳恢复、或用于疲劳恢复的食品组合物，其包含1.8倍以上的辅酶q10标准摄入量的辅酶q10作为预防生活方式相关疾病进展的医药品的替代品。
[0014]
作为另一个例子，专利文献2报道了一种抗氧化补充品，该抗氧化补充品作为配合了在体内更有效地起作用的还原型的辅酶q10而不是以往经常使用的氧化型的辅酶q10的抗氧化补充品，并且包含维生素e、维生素c、还原型辅酶q10、α硫辛酸、花青素、β胡萝卜素、硒、s-腺苷甲硫氨酸、维生素b6、维生素b12和叶酸。
[0015]
现有技术文献
[0016]
专利文献
[0017]
专利文献1：jp-a-2018-14912
[0018]
专利文献2：jp-a-2015-218140
技术实现要素：[0019]
发明所要解决的问题
[0020]
然而，作为补充品等外在地补充外源性的辅酶q10的现有技术被认为是利用辅酶q10的抗氧化作用来提供改善效果，而不是辅酶q10被直接摄入器官并促进细胞内能量代谢而发挥功能。
[0021]
另外，由于外在地补充的辅酶q10具有相当高的亲油性，因此大部分不溶于水，并且具有较大的分子量，口服的辅酶q10的吸收效率低。因此，在外在地补充的辅酶q10中是否可以充分地预期辅酶q10的效果是值得怀疑的。
[0022]
此外，在摄入辅酶q10的情况下，由于对于每个器官来说吸收率不同，并且特别是在最需要辅酶q10的器官(例如心脏和肾脏)中辅酶q10几乎没有被吸收，因此存在的问题是，仅通过摄入外源性的辅酶q10，难以在最需要辅酶q10的高能量需求器官(例如心脏和肾脏)中补充所需量的辅酶q10。
[0023]
因此，本发明的目的是提供一种辅酶q产生促进剂，它可以提高细胞内的内源性的(生物合成来源的)辅酶q的水平。
[0024]
用于解决问题的方法
[0025]
为了解决上述问题而认真研究的结果是，发明人在世界上首次发现作为与辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nad)的生物合成相关的中间代谢物的烟酰胺单核苷酸能促进辅酶q的产生，并基于这一突破性的研究结果，认为烟酰胺单核苷酸可应用于例如预防或治疗由辅酶q缺乏引起的疾病。从而完成了本发明。
[0026]
本发明如下。
[0027]
[1]一种辅酶q产生促进剂，其包含烟酰胺单核苷酸作为活性成分。
[0028]
[2]根据[1]所述的辅酶q产生促进剂，其中辅酶q是辅酶q10或辅酶q9。
[0029]
[3]根据[1]或[2]所述的辅酶q产生促进剂，其中辅酶q存在于心脏、大脑、肾脏、肝脏、脾脏或胰腺中。
[0030]
[4]一种用于促进辅酶q产生的饮食品，其中该饮食品包含根据[1]所述的辅酶q产生促进剂。
[0031]
[5]一种用于治疗或预防由辅酶q缺乏引起的疾病的医药品，其中该医药品包含根据[1]所述的辅酶q产生促进剂。
[0032]
[6]一种辅酶q产生促进方法，其包括使对象摄入有效剂量的根据[1]所述的辅酶q产生促进剂。
[0033]
发明效果
[0034]
本发明可以激活器官内部线粒体中的辅酶q生物合成并提高细胞内的内源性辅酶q的水平，因此，即使是在外源性的辅酶q难以被吸收的心脏、肾脏等中也可以直接提高辅酶q水平。此外，还可以提高通过以往的外源性的辅酶q难以补充的还原型的辅酶q的水平。因此，本发明对于预防或治疗由辅酶q缺乏引起的疾病非常有效。另外，由于包含作为与生命体内nad+生物合成相关的中间代谢物的烟酰胺单核苷酸作为活性成分，因此本发明是安全的并且可以长期摄入。
附图说明
[0035]
图1a是表示实施例1的结果的图表。
[0036]
图1b是表示实施例1的结果的另一图表。
[0037]
图2是表示与烟酸(niacin)(烟酰胺和烟碱酸(nicotinic acid)的总称)相关的代谢途径的说明图。
具体实施方式
[0038]
根据本发明的辅酶q产生促进剂(以下可以被称为“本试剂”)包含烟酰胺单核苷酸作为活性成分，在线粒体中激活辅酶q生物合成，并促进辅酶q产生。虽然本试剂的作用机制尚未完全解决，但猜想烟酰胺单核苷酸增加烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nad)的量并促进乙酰化酶的催化反应，同时激活线粒体并增加atp产生以促进辅酶q产生。因此，认为本试剂通过作为活性成分的烟酰胺单核苷酸提高辅酶q的水平来提供预防或治疗由辅酶q缺乏引起的疾病的效果。
[0039]
本试剂使用作为活性成分的烟酰胺单核苷酸来激活辅酶q产生以提高内源性辅酶q10的水平，因此使比外源性的辅酶q10更高效地和有效地提供辅酶q10的生理作用成为可能。因此，通过摄入作为活性成分的烟酰胺单核苷酸而不是外源性的辅酶q10，对于由辅酶q10水平降低引发的疾病(最主要的是心脏病)，可以在短期内期待症状的改善效果，或者，通过作为补充品等预先持续摄入，可以获得疾病的预防效果。例如，通过使患有由辅酶q10水平降低引起的心脏病的对象摄入本试剂，可以期待与将辅酶q10直接补充到心脏中的线粒体的效果同等的效果。
[0040]
本试剂使用作为活性成分的烟酰胺单核苷酸来激活各种器官中的辅酶q产生，特别是心脏、大脑(特别是小脑)、肾脏、肝脏、脾脏和胰腺中，以增加内源性辅酶q10的水平。
[0041]
烟酰胺单核苷酸(化学式：c
11h15
n2o8p)是在包括人在内的许多生物体内产生的化合物，并以下面结构式[化学式2]表达。烟酰胺单核苷酸通常被称为nmn，并且已知为辅酶nad
+
的生物合成中涉及的中间代谢物。
[0042]
[化学式2]
[0043][0044]
烟酰胺单核苷酸在生命体内，由肝组织在nad代谢途径中产生，即，通过犬尿氨酸途径从喹啉酸合成烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nad)中涉及的途径。参照图2对此进行具体描述。图2是表示被称为维生素b3的烟酸(烟酰胺和烟碱酸的总称)中涉及的代谢途径的说明图。通过膳食摄入的烟碱酸被肝脏吸收转化为烟酰胺，烟酰胺经由血液流动供给全身。细胞分别从血液中吸收烟酰胺，并将其转化为nad和nadp以使用它们。烟酰胺也可由色氨酸生物合成。
[0045]
如图2所示，在生命体内，当色氨酸为起始原料时，通过作为色氨酸代谢途径的犬
尿氨酸途径将色氨酸转化为喹啉酸(qa)，进而将其转化为烟碱酸单核苷酸(namn)。同时，当烟碱酸(na)为起始原料时，将烟碱酸直接转化为namn。之后，通过烟碱酸腺嘌呤二核苷酸(naad)在nad循环中将namn相互转化为nad、烟酰胺(nam)和烟酰胺单核苷酸。通过烟酰胺磷酸核糖基转移酶(nampt)将烟酰胺(nam)转化为烟酰胺单核苷酸，随后，通过烟酰胺单核苷酸腺苷酸转移酶(nmnat)转化烟酰胺单核苷酸以产生nad。另外，烟酰胺单核苷酸也由作为nad中间代谢物的烟酰胺核苷(nr)产生。
[0046]
烟酰胺单核苷酸包括α型和β型两种类型的光学异构体，β型用于本发明。例如通过由烟酰胺和核糖合成烟酰胺核苷(参见bioorg.med.chem.lett.,12,1135-1137(2002))，随后使核糖部分的5-羟基磷酸化(参见chem.comm.,1999,729-730)来获得烟酰胺单核苷酸。具体地，例如，首先，将烟酰胺和l核糖四乙酸酯溶解在无水乙腈中、在氮气流下过量添加三甲基硅烷基三氟磺酸并在室温下搅拌、添加甲醇以停止反应来制备反应液。将上述反应液倒入填充有活性炭的柱中，用蒸馏水清洗，然后用甲醇洗脱并收集其产物。接着，为了使该产物的l-核糖部分的5-羟基进行磷酸化反应，通过将上述产物溶解在三甲氧基磷酸中、在冰点以下滴加三氯氧磷并在氮气流下搅拌、加入氢氧化钠水溶液中和从而停止反应来制备反应液。将冷的乙腈-乙醚溶液添加到上述反应液中。然后将下层(水相)通过阴离子交换树脂收集反应物，再用阳离子交换树脂对反应物进行纯化，从而可以收集到高纯度的烟酰胺单核苷酸。烟酰胺单核苷酸可从东方酵母工业株式会社和邦泰生物工程(深圳)有限公司购得，可以购买这些商业产品以使用。
[0047]
烟酰胺单核苷酸是包含很少杂质的纯化物，特别是优选地其纯度为90％或以上，进一步优选地其纯度为95％或以上。当纯度低于90％时，难闻的气味可能会产生，或者烟酰胺单核苷酸的作用可能会降低，从而无法充分提供本发明的效果。
[0048]
通过单独使用烟酰胺单核苷酸或通过在其他成分中混合可以容易地制造本试剂。只要本试剂提供本发明的效果，则不具体地限制其他成分。
[0049]
如上所述，其他成分的例子包括作为去除活性氧的食品成分而已知的、类胡萝卜素(例如番茄红素、叶黄素和维生素a)、虾青素、多酚(例如类黄酮、儿茶素、异黄酮、芝麻素和姜黄素)、维生素e和维生素c；作为增强免疫力的食品成分而已知的、维生素a、维生素e、维生素c和锌；以及作为抑制衰老的食品成分而已知的、二十二碳六烯酸(dha)、二十碳五烯酸(epa)、卵磷脂、色氨酸；等等。另外，例如，可以包括在食品领域中常见的补充成分的各种维生素、微量元素、柠檬酸、苹果酸、调味剂、无机盐等作为其他成分。
[0050]
为了提供本发明的效果，本试剂旨在使作为活性成分的烟酰胺单核苷酸的量为足以活化线粒体并促进辅酶q产生的量。具体量根据摄入本试剂的对象的年龄、性别、体重、期待效果、症状等而不同，但烟酰胺单核苷酸的每个成年人的每日摄入量通常为1mg-500mg，优选为5mg-350mg，更优选为50mg-300mg，进一步优选为150mg-300mg。小于1mg可能无法提供本发明的效果，而大于500mg仅提供几乎相似的效果，但导致经济上的劣势。
[0051]
本试剂可用于促进辅酶q产生和治疗或预防由辅酶q缺乏引起的疾病的目的。由辅酶q缺乏引起的疾病包括由辅酶q缺乏引起的、线粒体疾病(如线粒体脑肌病)、生活方式相关疾病、心血管疾病(如充血性心力衰竭、心肌梗塞、心绞痛、血管内皮机能障碍)、糖尿病和神经退行性疾病(如帕金森病、亨廷顿病和弗里德赖希共济失调)。另外，在本发明中，“治疗由辅酶q缺乏引起的疾病”是指治愈某种疾病或减轻症状。这包括，例如，阻止疾病的进展、
降期和抑制疾病的转移。此外，“预防由辅酶q缺乏引起的疾病”不仅是指预防某种疾病的发作，还广义地包括预防疾病治愈或缓解后的复发/重现和恶化。
[0052]
不具体地限制本试剂的制造方法，可以根据其形式适当地选择应用于制造本试剂的通用制造方法。例如，在形式为粉末的情况下，可以通过将烟酰胺单核苷酸和根据需要添加的其他成分均匀地混合来制造本试剂。另外，作为活性成分的烟酰胺单核苷酸在市场上分销并且可购得。特别是近年来，已经建立了烟酰胺单核苷酸的质量管理系统和量产系统。
[0053]
本试剂可以用作饮食品、医药品等。在用作饮食产品的情况下，可以将本试剂作为食品领域中用于促进辅酶q产生的饮食品来提供。通过每天摄入食品形式的本试剂，可以重复地提供本发明的效果，因此对于更好地享受该效果特别有效。不具体地限定作为本发明的对象的食品的种类，除一般食品外，对象还包括功能性食品、特定保健用途食品、膳食补充品、食品添加剂、饲料、护理食品、饮食治疗食品、治疗性饮食、减肥食品等。具体地，例如，可以举以下例子：甜食(口香糖、糖果、曲奇、橡皮糖、饼干、蛋糕、巧克力、日式甜食、果冻等)、面包、面条、米/谷物加工食品(谷类食品等)、肉类加工食品、鱼贝类加工食品、蔬菜加工食品、即食食品、发酵食品、调味料(酱料、调味品、番茄酱等)、香料、乳制品(酸奶、奶酪、牛奶等)、冰淇淋、冷冻食品、蒸煮袋食品、饮料(碳酸饮料、软饮料、乳基饮料、酒精饮料、运动饮料、果味饮料、茶、营养饮料、浓缩饮料等)、粉末状饮料(果汁粉、汤粉等)。不限制食品的形态，特别是在功能性食品、特定保健用途食品等的情况下，可以将食品加工成例如散剂、片剂、丸剂、颗粒剂、硬胶囊制剂、软胶囊制剂、果冻剂、液剂、糊剂。
[0054]
食品的摄入量根据食品的类型、摄入食品的对象的年龄、性别、体重、期待的效果和症状而不同。但是，食品中包含的烟酰胺单核苷酸的每个成年人的每日摄入量通常为1mg-500mg，优选为5mg-350mg，更优选为50mg-300mg，进一步优选为150mg-300mg。小于1mg可能无法提供本发明的效果，而大于500mg仅提供几乎相似的效果，但导致经济上的劣势。可以相对于食品总重量在100％以下的范围内适当地设定食品中烟酰胺单核苷酸的配比。
[0055]
该食品是安全的，并且没有特别认可的副作用。因此，可以长期摄入该食品。该食品不仅适用于老年人，也适用于年轻人。
[0056]
另一方面，在医药领域，可以使本试剂作为以治疗或预防由辅酶q缺乏引起的疾病为目的的医药品(包括准药品)口服给药或非口服给药。不具体限制该医药品的剂型，但剂型可以包括例如散剂、片剂、持久性片剂、可咀嚼片剂、泡腾片剂、锭剂、口腔片剂、舌下片剂、胶囊制剂、细颗粒剂、颗粒剂、丸剂、干糖浆剂、液剂、悬浮剂、糖浆剂、诸如酏剂等的口服制剂、滴眼剂、洗眼剂、眼膏剂、注射剂、输液剂和外用剂。在这些剂型中，考虑到服用的容易性、活性成分的稳定性等，优选诸如散剂、片剂、胶囊制剂等口服给药制剂。已经在本试剂的描述中提及由辅酶q缺乏引起的疾病。
[0057]
考虑到物理化学性质、生物学性质等，该医药品可以适当地包含已知的制剂用添加剂，该添加剂在剂型上是合适的并且在药理学上是被允许的。这样的制剂用添加剂，例如可以列举为：赋形剂(乳糖、淀粉、结晶纤维素、磷酸钠等)、溶剂(水、大豆油、盐水溶液、注射用非水溶剂等)、粘合剂(淀粉、明胶、阿拉伯树胶、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等)、崩解剂(淀粉、羧甲基纤维素钠等)、润滑剂(滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙、聚乙二醇、蔗糖脂肪酸酯等)、包衣剂(白糖、hpc、紫胶、明胶、甘油、羟丙基甲基纤维素、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、邻苯二甲酸
醋酸纤维素等)、稳定剂(亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、依地酸钠、柠檬酸钠、抗坏血酸、二丁基羟基甲苯等)、防腐剂(对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲醇、苯酚、氯丁醇、苯扎氯铵、苄索氯铵、脱氢乙酸钠、硫柳汞等)、粘性剂(甲基纤维素、羧甲纤维素钠、硫酸软骨素、海藻酸钠等)、悬浮剂(各种非离子表面活性剂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠等)、乳化剂(阿拉伯树胶、胆固醇、脱水山梨醇倍半油酸酯、聚山梨醇酯80、十二烷基硫酸钠等)、缓冲剂(柠檬酸、乙酸、磷酸钠和硼酸)、表面活性剂(氢化蓖麻油、聚山梨醇酯80等)、着色剂(水溶性食用色素、色淀色素等)、矫味剂(乳糖、白糖、葡萄糖、甘露醇等)、香味剂(芳香精油)、增塑剂(邻苯二甲酸酯、植物油、聚乙二醇等)。
[0058]
不能等量地确定医药品的剂量，因为其根据例如给药对象的年龄、体重、症状、给药次数等是不同的。但是，作为医药品的剂量，烟酰胺单核苷酸的每个成人的每日剂量通常为1mg-500mg，优选为5mg-350mg，更优选为50mg-300mg，进一步优选为150mg至300mg。小于1mg可能无法提供本发明的效果，而大于500mg仅提供几乎相似的效果，但导致经济上的劣势。可以根据医药品的剂型、剂量等适当设定医药品中烟酰胺单核苷酸的配比。
[0059]
可以根据给药对象的年龄、体重、症状、医药品的每次的剂量等适当地设定医药品的给药次数。每天该医药品给药的次数可以列举为1-3次。
[0060]
如上所述，通过给药足以促进辅酶q产生的量的烟酰胺单核苷酸，可以提供治疗或预防由辅酶q缺乏引起的疾病的效果。因此，本发明还提供了一种方法，该方法包括使需要本试剂的对象摄入本试剂的有效量(即，上述量)的本试剂，并通过激活线粒体和促进辅酶q的产生来治疗或预防由辅酶q缺乏引起的疾病。摄入的对象，优选人、小鼠、大鼠、兔、狗、猫、牛、马、猪、猴等哺乳动物，特别地优选人。在该方法中，烟酰胺单核苷酸的摄入量、每天摄入的次数等如针对本试剂所述。在任何情况下都可以随时摄入本试剂，并且对象可以长期摄入本试剂。
[0061]
[实施例]
[0062]
以下基于实施例详细描述本发明，但本发明不受这些实施例的限制。
[0063]
(实施例1)
[0064]
为了调查由烟酰胺单核苷酸引起的辅酶q10的产生促进效果，将hek293细胞(人胚肾细胞)在包含预定浓度的β烟酰胺单核苷酸(每日添加0mm(对照)、1mm和2.5mm)的dmem培养基中培养3天(37℃，5％二氧化碳)。在培养第一天之后3天，从hek293细胞中分离线粒体，通过lc-ms法分别定量线粒体中辅酶q10的还原型(泛醇)和氧化型(泛醌)的含量(lc柱：kinetex c18柱(phenomenex)，ms：shimadzu lcms-8060(岛津公司)，洗脱液：10mm甲酸铵的甲醇溶液，流速：0.5ml/min，检测：通过多反应监测(mrm)方法进行的ms/ms分析)；q10h2 883.6-》197.15m/z，q10 881.4-》197.15m/z，q9h2 815.6-》197.15m/z，q9 813.6-》197.15m/z，q8h2 747.6-》197.15m/z，q8 745.6-》197.15m/z)(柱：ods，柱温：40℃，洗脱液：70％乙腈/甲醇(1:1)和30％0.05m甲酸铵(用10％氨水制备为ph7.2)，流速：1.0ml/min，检测：uv276nm)(柱：ods，柱温：40℃，洗脱液：70％乙腈/甲醇(1:1)和30％0.05m甲酸铵(用10％氨水制备为ph7.2)，流速：1.0ml/min，检测：uv276nm)。结果示于图1a和图1b中。图1a示出了q10h2和q10的含量各自的变化，图1b示出了q10h2和q10的总量的变化。另外，在图1a和图1b中，q10h2表示辅酶q10的还原型(泛醇)，q10表示辅酶q10的氧化型形式(泛醌)。此外，“*”表示学生的双侧t试验中的p值小于0.05。
[0065]
结果发现，在包含烟酰胺单核苷酸的培养基中，辅酶q10的还原型和氧化型的含量分别增加约1.5倍至两倍。此外，还发现辅酶q10的还原型和氧化型的总量也大约加倍。结果证实，在提供了烟酰胺单核苷酸的细胞中，线粒体中的辅酶q10(还原型和氧化型)的产生被激活，并且实现了辅酶q10的显著增加。
技术特征：1.一种辅酶q产生促进剂，其中，所述辅酶q产生促进剂包含烟酰胺单核苷酸作为活性成分。2.根据权利要求1所述的辅酶q产生促进剂，其中，辅酶q是辅酶q10或辅酶q9。3.根据权利要求1或2所述的辅酶q产生促进剂，其中，辅酶q存在于心脏、大脑、肾脏、肝脏、脾脏或胰腺中。4.一种用于促进辅酶q产生的饮食品，其中，所述饮食品包含根据权利要求1所述的辅酶q产生促进剂。5.一种用于治疗或预防由辅酶q缺乏引起的疾病的医药品，其中，所述医药品包含根据权利要求1所述的辅酶q产生促进剂。6.一种辅酶q产生促进方法，其中，所述辅酶q产生促进方法包括使对象摄入有效剂量的根据权利要求1所述的辅酶q产生促进剂。
技术总结[问题]提供能够提高细胞内辅酶Q水平的辅酶Q产生促进剂。[解决方案]本发明是一种包含烟酰胺单核苷酸作为活性成分的辅酶Q产生促进剂。剂。剂。
技术研发人员：田中惠 田中经丸 濑户山大树 康东天
受保护的技术使用者：田中经丸
技术研发日：2021.03.15
技术公布日：2022/11/1
