1.本发明涉及蒲公英提取物制备技术领域，具体为一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法与应用。
背景技术：2.蒲公英，菊科，是一种药食两用的植物，蒲公英具有解食毒，散滞气、化热毒、消恶肿、固牙齿、生肾水、壮筋骨等功效。临床上常用于治疗急性乳腺炎、淋巴腺炎、急性结膜炎、感冒发热、急性扁桃体炎、急性支气管炎、胃炎、肝炎、胆囊炎和尿路感染等疾病。
3.研究表明，总黄酮是蒲公英的主要有效成分，蒲公英总黄酮具有良好的抑菌作用，并具有重要的抗氧化作用，能清除超氧阴离子自由基。
4.现有技术中，cn102133254a一种超声提取蒲公英总黄酮的方法，本方法将蒲公英粉碎后过20目筛，加入石油醚混合均匀，充分脱色后经滤纸过滤，取滤渣挥干备用；准确称取预处理好的材料，按料液比(g/ml)1∶20-30加入30-50％的乙醇溶液，充分摇匀后浸泡1小时，在温度60-70℃下，超声频率40khz提取20-35min，得蒲公英总黄酮提取物，应用于制备抗炎药物。其制备方法较为简单，制得的成品中含杂质较多，为此，我们提出一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法与应用，提升了提取效率，提高了成品的纯度。
技术实现要素：5.本发明要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法，采用粉碎、提取、固液分离、过滤除菌、浓缩和喷雾干燥工艺制成蒲公英根提取物干粉，其可作为有消炎杀菌功效的饲料添加剂使用，可以有效解决背景技术中的问题。
6.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法，包括以下步骤：
7.1)粉碎
8.将蒲公英根清洗、表面干燥后超微粉碎，之后过100-200目筛，得到蒲公英根微粉；
9.2)ce提取
10.加入重量比27-32倍的水，采用水提法制备提取液，取上清液用于毛细管电泳分离，分离得到蒲公英总黄酮溶液；
11.3)固液分离；
12.采用离心分离法实现固液分离，得到离心渣和离心液；
13.4)过滤除菌
14.采用薄膜微孔过滤法除去离心液中的细菌等有害组分，达到消毒除菌的效果，回收滤液；
15.5)浓缩
16.采用ro膜过滤处理，滤去滤液中小分子组分，得到浓缩液，滤去水、无机盐等小分子组分，由于黄酮的分子量基本在200-400范围内，不被过滤掉，收集被滤膜截留的溶液，即
为超滤液；
17.6)喷雾干燥
18.加入麦芽糊精，均质后采用sd膜式干燥机喷雾干燥，得到蒲公英总黄酮喷干粉。
19.进一步的，1)中，将蒲公英根微粉至于-27℃环境下急冻45-60s，再自然升温至室温，温度的大幅度变化，使细胞壁破裂，细胞内的活性成分逸出，提高了提取得率。
20.进一步的，1)中，将蒲公英根微粉进行加压处理，压力0.4-0.8mpa，时间3-5min，加压后，使细胞外部的压力远大于内部压力，促使细胞壁破裂，活性成分逸出，提高了提取得率。
21.进一步的，2)中，水提时，使用超声波辅助提取，超声波频率为50-80mhz，采用超声波辅助溶剂进行提取，声波产生高速、强烈的空化效应和搅拌作用，破坏植物药材的细胞，使溶剂渗透到蒲公英细胞中，缩短提取时间，提高提取率。
22.进一步的，2)中，电泳条件为:石英毛细管柱(55μm
×
60cm)，运行缓冲液:25mmol/l的硼砂溶液，再生液:0.15mol/l氢氧化钠溶液,分离电压12-16kv，进样时间为6-8s，温度为26-30℃，时间为25-30min。
23.进一步的，分离电压14kv，进样时间为7s，温度为28℃，时间为28min。
24.进一步的，3)中，离心机转速为240-300rmp。
25.进一步的，5)中，浓缩液中总黄酮浓度为未浓缩时的6-8倍。
26.进一步的，6)中，麦芽糊精与浓缩液的重量比为1：(5-8)。
27.进一步的，6)中，对喷雾干燥后的干粉进行粉碎、过筛和混合操作，得到复合需求的蒲公英总黄酮喷干粉。
28.一种蒲公英根部提取物干粉的应用，其作为有消炎杀菌功效的饲料添加剂。
29.与现有技术相比，本发明的有益效果是：本一种蒲公英根部提取物干粉的制备方法及制备方法，具有以下好处：
30.1、本发明通过粉碎、提取、固液分离、过滤除菌、浓缩和喷雾干燥工艺制成蒲公英根提取物干粉，其工艺相对简单，所得成品纯度高，有效提升了蒲公英总黄酮提取效率。
31.2、ce提取相对于其他提取分离方法，可以更准确的分离出黄酮类物质，使成品中含有的杂质更少；采用离心分离法实现滤液和滤渣分离，通过mf微滤实现精准除菌，ro浓缩可以控制浓缩比，整体工艺成熟稳定，操作简单方便，适合工厂规模化生产。
附图说明
32.图1为本发明一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法的工艺流程图。
具体实施方式
33.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
34.请参阅图1，本实施例提供一种技术方案：
35.实施例1
36.一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法，包括以下步骤：
37.1)粉碎
38.将蒲公英根清洗、表面干燥后超微粉碎，之后过150目筛，得到蒲公英根微粉；
39.2)ce提取
40.加入重量比29倍的水，采用水提法制备提取液，取上清液用于毛细管电泳分离，分离得到蒲公英总黄酮溶液，电泳条件为:石英毛细管柱(55μm
×
60cm)，运行缓冲液:25mmol/l的硼砂溶液，再生液:0.15mol/l氢氧化钠溶液,分离电压14kv，进样时间为7s，温度为28℃，时间为28min；
41.3)固液分离；
42.采用离心分离法实现固液分离，得到离心渣和离心液，离心机转速为260rmp；
43.4)过滤除菌
44.采用薄膜微孔过滤法除去离心液中的细菌等有害组分，回收滤液；
45.5)浓缩
46.采用ro膜过滤处理，滤去滤液中小分子组分，得到浓缩液，浓缩液中总黄酮浓度为未浓缩时的8倍；
47.6)喷雾干燥
48.加入麦芽糊精，麦芽糊精与浓缩液的重量比为1：6，均质后喷雾干燥，得到蒲公英总黄酮喷干粉。
49.经检测，实施例1制备的蒲公英总黄酮喷干粉中总黄酮转移率为33.18，固转率为24.84％，提取物收率28.75％。
50.实施例2
51.一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法，包括以下步骤：
52.1)粉碎
53.将蒲公英根清洗、表面干燥后超微粉碎，之后过150目筛，得到蒲公英根微粉，将蒲公英根微粉至于-27℃环境下急冻45s，再自然升温至室温，急冻使蒲公英根细胞内活性物质更容易析出；
54.2)ce提取
55.加入重量比29倍的水，采用水提法制备提取液，取上清液用于毛细管电泳分离，分离得到蒲公英总黄酮溶液，电泳条件为:石英毛细管柱(55μm
×
60cm)，运行缓冲液:25mmol/l的硼砂溶液，再生液:0.15mol/l氢氧化钠溶液,分离电压14kv，进样时间为7s，温度为28℃，时间为28min；
56.3)固液分离；
57.采用离心分离法实现固液分离，得到离心渣和离心液，离心机转速为260rmp；
58.4)过滤除菌
59.采用薄膜微孔过滤法除去离心液中的细菌等有害组分，回收滤液；
60.5)浓缩
61.采用ro膜过滤处理，滤去滤液中小分子组分，得到浓缩液，浓缩液中总黄酮浓度为未浓缩时的8倍；
62.6)喷雾干燥
63.加入麦芽糊精，麦芽糊精与浓缩液的重量比为1：6，均质后喷雾干燥，得到蒲公英总黄酮喷干粉。
64.经检测，实施例2制备的蒲公英总黄酮喷干粉中总黄酮转移率为33.35，固转率为24.76％，提取物收率28.83％。
65.实施例3
66.一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法，包括以下步骤：
67.1)粉碎
68.将蒲公英根清洗、表面干燥后超微粉碎，之后过150目筛，得到蒲公英根微粉，将蒲公英根微粉进行加压处理，压力0.6mpa，时间5min，加压使蒲公英根细胞壁破裂，其内的活性物质析出；
69.2)ce提取
70.加入重量比29倍的水，采用水提法制备提取液，取上清液用于毛细管电泳分离，分离得到蒲公英总黄酮溶液，电泳条件为:石英毛细管柱(55μm
×
60cm)，运行缓冲液:25mmol/l的硼砂溶液，再生液:0.15mol/l氢氧化钠溶液,分离电压14kv，进样时间为7s，温度为28℃，时间为28min；
71.3)固液分离；
72.采用离心分离法实现固液分离，得到离心渣和离心液，离心机转速为260rmp；
73.4)过滤除菌
74.采用薄膜微孔过滤法除去离心液中的细菌等有害组分，回收滤液；
75.5)浓缩
76.采用ro膜过滤处理，滤去滤液中小分子组分，得到浓缩液，浓缩液中总黄酮浓度为未浓缩时的8倍；
77.6)喷雾干燥
78.加入麦芽糊精，麦芽糊精与浓缩液的重量比为1：7，均质后喷雾干燥，得到蒲公英总黄酮喷干粉。
79.经检测，实施例3制备的蒲公英总黄酮喷干粉中总黄酮转移率为33.67，固转率为24.92％，提取物收率28.87％。
80.实施例4
81.一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法，包括以下步骤：
82.1)粉碎
83.将蒲公英根清洗、表面干燥后超微粉碎，之后过150目筛，得到蒲公英根微粉，将蒲公英根微粉进行加压处理，压力0.8mpa，时间5min，加压使蒲公英根细胞壁破裂，其内的活性物质析出；
84.2)ce提取
85.加入重量比29倍的水，采用水提法制备提取液，水提时，使用超声波辅助提取，超声波频率为60mhz，取上清液用于毛细管电泳分离，分离得到蒲公英总黄酮溶液，电泳条件为:石英毛细管柱(55μm
×
60cm)，运行缓冲液:25mmol/l的硼砂溶液，再生液:0.15mol/l氢氧化钠溶液,分离电压14kv，进样时间为7s，温度为28℃，时间为28min；
86.3)固液分离；
87.采用离心分离法实现固液分离，得到离心渣和离心液，离心机转速为260rmp；
88.4)过滤除菌
89.采用薄膜微孔过滤法除去离心液中的细菌等有害组分，回收滤液；
90.5)浓缩
91.采用ro膜过滤处理，滤去滤液中小分子组分，得到浓缩液，浓缩液中总黄酮浓度为未浓缩时的8倍；
92.6)喷雾干燥
93.加入麦芽糊精，麦芽糊精与浓缩液的重量比为1：6，均质后喷雾干燥，得到蒲公英总黄酮喷干粉。
94.经检测，实施例4制备的蒲公英总黄酮喷干粉中总黄酮转移率为33.94，固转率为24.63％，提取物收率29.01％。
95.实验例一
96.分别采用实施例1-4的方法小试，小试原材料为同一批次，总黄酮为15.34mg/g，将得到的蒲公英总黄酮喷干粉送检，检测项目以水分含量、总黄酮含量、菌类总数、大肠菌群和霉菌为代表，总黄酮含量采用紫外分光光度计检测，菌群总数检测依据国家强制性标准gb7101-2003《固体饮料卫生标准》规定，检测结果如表1所示。
[0097][0098]
表1
[0099]
由以上数据说明，制得的蒲公英总黄酮含量远大于5％的标准值，而且菌类总数、大肠菌群和霉菌等含量符合标准，可以进行中试。
[0100]
实验例二
[0101]
采用实施例1的制备方法进行中试，中试原材料中总黄酮为6.54mg/g，中试后进行检测，实施例1制备的蒲公英总黄酮喷干粉中总黄酮转移率为41.09％，固转率为23.05％，提取物收率35.55％，结果表面，工艺非常稳定，并不因原材料中总黄酮含量低影响总黄酮
转移率、固转率和提取物收率。
[0102]
将得到的蒲公英总黄酮喷干粉送检，检测项目以水分含量、总黄酮含量、菌类总数、大肠菌群、霉菌和酵母菌为代表，总黄酮含量采用紫外分光光度计检测，菌群总数检测依据国家强制性标准gb7101-2003《固体饮料卫生标准》规定，检测结果如表2所示。
[0103][0104]
表2
[0105]
由以上数据说明，制得的蒲公英总黄酮含量远大于5％的标准值，而且菌类总数、大肠菌群和霉菌等含量符合标准，可以用以企业规模化生产。
[0106]
以上仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其它相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
技术特征：1.一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1)粉碎将蒲公英根清洗、表面干燥后超微粉碎，之后过100-200目筛，得到蒲公英根微粉；2)ce提取加入重量比27-32倍的水，采用水提法制备提取液，取上清液用于毛细管电泳分离，分离得到蒲公英总黄酮溶液；3)固液分离；采用离心分离法实现固液分离，得到离心渣和离心液，转速；4)过滤除菌采用薄膜微孔过滤法除去离心液中细菌等有害物质，回收滤液；5)浓缩采用ro膜过滤处理，滤去滤液中小分子组分，得到浓缩液；6)喷雾干燥加入麦芽糊精，均质后喷雾干燥，得到蒲公英总黄酮喷干粉。2.根据权利要求1所述的一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法，其特征在于：1)中，将蒲公英根微粉至于-27℃环境下急冻45-60s，再自然升温至室温。3.根据权利要求1所述的一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法，其特征在于：1)中，将蒲公英根微粉进行加压处理，压力0.4-0.8mpa，时间3-5min。4.根据权利要求1所述的一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法，其特征在于：2)中，水提时，使用超声波辅助提取，超声波频率为50-80mhz。5.根据权利要求1所述的一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法，其特征在于：2)中，电泳条件为:石英毛细管柱(55μm
×
60cm)，运行缓冲液:25mmol/l的硼砂溶液，再生液:0.15mol/l氢氧化钠溶液,分离电压12-16kv，进样时间为6-8s，温度为26-30℃，时间为25-30min。6.根据权利要求5所述的一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法，其特征在于：分离电压14kv，进样时间为7s，温度为28℃，时间为28min。7.根据权利要求1所述的一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法，其特征在于：3)中，离心机转速为240-300rmp。8.根据权利要求1所述的一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法，其特征在于：5)中，浓缩液中总黄酮浓度为未浓缩时的6-8倍。9.根据权利要求1所述的一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法，其特征在于：6)中，麦芽糊精与浓缩液的重量比为1：(5-8)。10.一种根据权利要求1-9任一所述一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法制备的蒲公英根部提取物干粉的应用，其特征在于：作为有消炎杀菌功效的饲料添加剂。
技术总结本发明公开了一种蒲公英总黄酮喷干粉的制备方法，包括以下步骤：粉碎、CE提取、离心分离、MF过滤、RO浓缩、喷雾干燥，得到蒲公英总黄酮喷干粉。本发明通过粉碎、提取、固液分离、过滤除菌、浓缩和喷雾干燥工艺制成蒲公英根提取物干粉，所得成品纯度高，有效提升了蒲公英总黄酮提取效率，CE提取相对于其他提取分离方法，可以更准确的分离出黄酮类物质，使成品中含有的杂质更少；采用离心分离法实现滤液和滤渣分离，通过MF微滤实现精准除菌，RO浓缩可以控制浓缩比，整体工艺成熟稳定，操作简单方便，适合工厂规模化生产。适合工厂规模化生产。适合工厂规模化生产。
技术研发人员：杨志凌 张中华 杨富岭 冯国琼 杨志云 李瑞 崔志英 王彦 肖明虎
受保护的技术使用者：沃曼（广东）生物科技有限公司
技术研发日：2022.07.06
技术公布日：2022/11/1
