本发明涉及一种乳腺癌的复发预测标志物和检查试剂盒。特别是涉及一种预测er阳性乳腺癌的晩期复发的标志物。另外，涉及一种以该标志物为指标的治疗药物的筛选方法。
背景技术：
1、不论在日本还是海外，乳腺病例数均呈上升趋势。在日本，乳腺癌占女性患癌病例数的首位，约94,000人(2018年统计)患病，约15,000人(2019年统计)死亡。在世界范围内来看，乳腺癌的患者数量也很多，2020年患者数量超过220万人。
2、与其他癌症一样，乳腺癌的治疗包括外科手术、放射治疗、药物治疗，通过手术切除癌症是基本操作。对于乳腺癌，除分期之外，还根据作为激素受体的雌激素受体(er)和黄体酮受体(pgr)以及表皮生长因子受体2型(her2)的表达这样的癌细胞的特征进行亚型分类，进而确立治疗方针。这是因为如果激素受体为阳性，则内分泌治疗多会起到效果。
3、乳腺癌的约70％是表达er的er阳性型，抑制雌激素作用的内分泌治疗是有效的。但是，长期治疗后，会显示治疗抗性，而导致高复发率。已知er阴性亚型3年以内复发的情况较多，而er阳性亚型中，复发风险持续5年以上、最长20年(非专利文献1)。术后5年以后仍复发的晩期复发病例很多，这给患者带来了精神负担。
4、一直以来，为了评价乳腺癌复发的风险，使用了oncotype dx(exact sciences)，其中使用手术样本调查21种基因。通过oncotype dx进行的风险判定对于判断术后的抗癌药治疗效果等确立治疗方针非常有效。但是，oncotype dx是用于预测10年以内的复发概率的，不适用于晩期复发病例。尽管er阳性型晩期复发病例很多，但尚不存在预测术后5年的复发乳腺癌的诊断标志物。如果能够预测晩期复发风险，则有助于复发的早期发现和早期治疗。为了实现乳腺癌的最佳医疗，希望能够进行确立适当的诊断、预后预测和治疗。
5、现有技术文献
6、非专利文献
7、非专利文献1：pan h.,et al.n.,engl.j.med.2017,vol.377,pp.1836-46.
8、非专利文献2：tomita s.,et al.,nat.commun.2015；6:6966.
9、非专利文献3：yamamoto t.,et al.,sci rep2018；8:15202.
10、非专利文献4：abdalla m.o.a.et al.,nat.commun.2019；10:3778.
11、非专利文献5：goss p.e.,&chambers a.f.,nat.rev.cancer 2010,vol.10,pp.871-877.
技术实现思路
1、发明所要解决的技术问题
2、本发明的课题在于，通过提供判定晩期复发风险的检查试剂盒和检查方法来提供术后治疗的选择方法。另外，其课题还在于，通过发现与晩期复发相关的标志物来提供一种以其为标靶的治疗药物的筛选方法。
3、用于解决技术问题的技术方案
4、本发明涉及以下的检查方法、检查试剂盒和治疗药物的筛选方法。
5、(1)一种乳腺癌晩期复发的检查辅助方法，其检测原发灶的eleanor表达，在eleanor表达高的情况下，判定晩期复发的风险高。
6、本发明的发明人发现eleanor表达是乳腺癌患者的独立的复发风险因子。在eleanor表达为阳性的情况下，术后5年以后的复发风险高。
7、(2)根据(1)所述的检查辅助方法，其特征在于，检测雌激素受体(er)表达。
8、对于复发风险高的er阳性患者，推荐将术后内分泌治疗从术后5年延长至10年。但是，内分泌治疗存在更年期症状、关节疼痛、血栓形成等副作用，长期内服治疗也会导致患者的压力。因此，eleanor阴性可以作为不需要延长内分泌治疗的判断标准。本方法可以作为用于分别判断需要延长的患者和不需要延长的患者的标准。
9、(3)根据(2)所述的检查辅助方法，其特征在于，检测黄体酮受体(pgr)和表皮生长因子受体2型(her2)、ki67表达。
10、特别是，在luminal b亚型中，晩期复发风险高，因此，通过对eleanor表达和分析这些luminal亚型的因子进行考察，能够更准确地判断是否延长内分泌治疗。
11、(4)一种乳腺癌晩期复发风险的检查试剂盒，其特征在于，包含用于检测eleanor表达的试剂。
12、(5)根据(4)所述的检查试剂盒，其特征在于，上述试剂为fish探针和/或pcr引物。
13、如上所述，由于eleanor是乳腺癌的晩期复发风险因子，所以如果能够通过fish探针或pcr引物对其进行检查，则能检测乳腺癌的晩期复发风险。
14、(6)一种筛选乳腺癌治疗药物的方法，其中，将表达eleanor的细胞与候选化合物一同培养，将eleanor表达、er和/或cd44表达的变化作为指标来筛选药物。
15、(7)根据(6)所述的筛选方法，其特征在于，上述表达eleanor的细胞为lted细胞。
16、本发明的发明人发现，eleanor表达与乳腺癌的晩期复发风险相关，并且与er表达或cd44表达也相关。因此，如果能将这些分子的表达作为指标筛选化合物，则可能获得作为晩期复发乳腺癌的治疗药物的化合物。并且，由于eleanor表达也与作为乳腺癌干细胞标志物的cd44表达相关，因此，获得以乳腺癌干细胞为标靶的治疗药物的可能性大。
17、(8)一种医药组合物，其为乳腺癌的治疗药物，该医药组合物的特征在于，上述医药组合物以抑制eleanor表达的化合物为有效成分。
18、(9)根据(8)所述的医药组合物，其特征在于，上述化合物为核酸药物。
19、如下所示，通过sirna、lna等核酸，能够抑制eleanor表达。因此，这些核酸能够作为乳腺癌的晩期复发的治疗药物。
20、(10)一种乳腺癌的晩期复发治疗方法，其用于治疗乳腺癌的晩期复发，该方法的特征在于，使用(1)～(3)中任一项所述的检查辅助方法或者(4)或(5)的检查试剂盒，检测对象原发灶的eleanor表达，在判断为晩期复发风险高的情况下，利用(8)或(9)所述的医药组合物进行治疗。
1.一种乳腺癌晩期复发的检查辅助方法，其特征在于，
2.根据权利要求1所述的检查辅助方法，其特征在于，
3.根据权利要求2所述的检查辅助方法，其特征在于，
4.一种乳腺癌晩期复发风险的检查试剂盒，其特征在于，
5.根据权利要求4所述的检查试剂盒，其特征在于，
6.一种筛选乳腺癌治疗药物的方法，其特征在于，
7.根据权利要求6所述的筛选方法，其特征在于，
8.一种医药组合物，其为乳腺癌的治疗药物，所述医药组合物的特征在于，
9.根据权利要求8所述的医药组合物，其特征在于，
