本公开涉及免疫治疗剂领域，并且尤其涉及靶向人叶酸受体α(hfrα)的抗体-药物缀合物。
背景技术：
1、叶酸受体α(frα)是由folr1编码的糖基磷脂酰肌醇(gpi)锚定的细胞表面蛋白，并且是高亲和力fr家族成员之一，该家族还包括frβ(folr2)、frg(folr3)和frd(folr4)。frα已经被鉴定为高度相关的癌症治疗靶标，因为它在多种癌症(包括卵巢癌、三阴性乳腺癌(tnbc)、子宫内膜癌、间皮瘤和肺癌)中过表达，在非恶性组织中具有极少表达。
2、目前正在进行在癌症治疗中涉及frα靶向剂的若干临床研究，这些剂包括抗frα抗体、法妥珠单抗(farletuzumab)和frα靶向抗体-药物缀合物(adc)、索米妥昔单抗(mirvetuximab soravtansine)(immunogen,inc.)、morab-202(eisai inc.)和stro-002(sutro biopharma,inc.)。
3、已开发喜树碱(camptothecin)类似物作为抗体-药物缀合物(adc)的有效载荷。两种此类adc已被批准用于治疗癌症。曲妥珠单抗-德鲁替康(trastuzumab deruxtecan)(enhertutm)，其中喜树碱类似物德鲁替康(dxd)经由可裂解的基于四肽的接头与抗her2抗体曲妥珠单抗缀合；和沙妥珠单抗格维替康(sacituzumab govitecan)(trodelvytm)，其中喜树碱类似物sn-38经由可水解的ph敏感性接头与抗trop-2抗体沙妥珠单抗缀合。
4、其他喜树碱类似物和衍生物，以及包含它们的adc已经有所描述。参见例如国际(pct)公布号wo 2019/195665、wo 2019/236954、wo 2020/200880和wo 2020/219287。
5、提供该背景信息的目的是使申请人相信的已知信息与本公开可能相关。不一定旨在承认，也不应该解释为，任何先前信息构成了针对所要求保护的发明的现有技术。
技术实现思路
1、本文描述了靶向人frα的抗体-药物缀合物(adc)和使用方法。本公开的一个方面涉及具有式(x)的抗体-药物缀合物：
2、t-[l-(d)m]n
3、(x)
4、其中：
5、m介于1与4之间；
6、n介于1与10之间；
7、t是包含抗原结合结构域的抗frα抗体构建体，所述抗原结合结构域特异性结合人叶酸受体α(hfrα)内包含seq id no:15的氨基酸残基e120、d121、r123、t124、s125和y126的表位；
8、l为接头，并且
9、d为式i的化合物：
10、
11、其中：
12、r1选自：-h、-ch3、-chf2、-cf3、-f、-br、-cl、-oh、-och3、-ocf3和-nh2，并且
13、r2选自：-h、-ch3、-cf3、-f、-br、-cl、-oh、-och3和-ocf3，
14、并且其中：
15、当r1为-nh2时，则r为r3或r4，并且当r1不是-nh2时，则r为r4；
16、r3选自：-h、-c1-c6烷基、-c3-c8环烷基、-(c1-c6烷基)-o-r5、-co2r8、-芳基、-杂芳基和–(c1-c6烷基)-芳基；
17、r4选自：
18、r5选自：-h、-c1-c6烷基、-c3-c8环烷基、-芳基、-杂芳基、-芳基和–(c1-c6烷基)-芳基；
19、r6和r7各自独立地选自：-h、-c1-c6烷基、-c3-c8环烷基、-(c1-c6烷基)-o-r5、-c3-c8杂环烷基和-c(o)r17；
20、r8选自：-h、-c1-c6烷基、-c3-c8环烷基和-c3-c8杂环烷基；
21、每个r9独立地选自：-h、-c1-c6烷基、-c3-c8环烷基、-芳基、-杂芳基和–(c1-c6烷基)-芳基；
22、每个r10独立地选自：-c1-c6烷基、-c3-c8环烷基、-nr14r14’、-芳基、-杂芳基和–(c1-c6烷基)-芳基；
23、r10’选自：-h、-c1-c6烷基、-c3-c8环烷基、-芳基、-杂芳基和–(c1-c6烷基)-芳基；
24、r11选自：-h和-c1-c6烷基；
25、r12选自：-h、-c1-c6烷基、-co2r8、-芳基、-杂芳基、–(c1-c6烷基)-芳基、-s(o)2r16和
26、r13选自：-h和-c1-c6烷基；
27、r14和r14’各自独立地选自：-h、c1-c6烷基、-c3-c8环烷基和-c3-c8杂环烷基；
28、r16选自：-c1-c6烷基、-c3-c8环烷基、-芳基、-杂芳基和–(c1-c6烷基)-芳基；
29、r17选自：-c1-c6烷基、-c3-c8环烷基、-c3-c8杂环烷基、–(c1-c6烷基)-c3-c8杂环烷基、-芳基、-杂芳基和–(c1-c6烷基)-芳基；
30、r18和r19与它们所键合的n原子一起形成具有0至3个选自下列的取代基的4元、5元、6元或7元环：卤素、-c1-c6烷基、-c3-c8环烷基和-(c1-c6烷基)-o-r5；
31、r24、r25和r26各自为-c1-c6烷基；
32、xa和xb各自独立地选自：nh、o和s，并且
33、xc选自：o、s和s(o)2，
34、条件是所述化合物不是(s)-9-氨基-11-丁基-4-乙基-4-羟基-1,12-二氢-14h-吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-3,14(4h)-二酮。
35、本公开的另一个方面涉及具有选自以下的结构的抗体-药物缀合物：
36、
37、
38、其中：
39、t是包含可操作地连接至igg fc区的两个抗原结合结构域的抗frα抗体构建体，所述抗原结合结构域中的每一个包含：
40、(a)如seq id no:39中所示的vl氨基酸序列和如seq id no:19中所示的vh氨基酸序列；或
41、(b)如seq id no:124中所示的vl氨基酸序列和如seq id no:91中所示的vh氨基酸序列；或
42、(c)如seq id no:64中所示的vl氨基酸序列和
43、(i)如seq id no:50中所示的vh氨基酸序列，或
44、(ii)如seq id no:54中所示的vh氨基酸序列，或
45、(iii)如seq id no:57中所示的vh氨基酸序列，或
46、(iv)如seq id no:61中所示的vh氨基酸序列，或
47、(v)如seq id no:76中所示的vh氨基酸序列，或
48、(vi)如seq id no:79中所示的vh氨基酸序列，或
49、(vii)如seq id no:82中所示的vh氨基酸序列，或
50、(viii)如seq id no:85中所示的vh氨基酸序列，或
51、(ix)如seq id no:88中所示的vh氨基酸序列，或
52、(x)如seq id no:106中所示的vh氨基酸序列；或
53、(d)如seq id no:130中所示的vl氨基酸序列和
54、(i)如seq id no:99中所示的vh氨基酸序列，或
55、(ii)如seq id no:106中所示的vh氨基酸序列，或
56、(iii)如seq id no:113中所示的vh氨基酸序列，或
57、(iv)如seq id no:116中所示的vh氨基酸序列，或
58、(v)如seq id no:133中所示的vh氨基酸序列，或
59、(vi)如seq id no:136中所示的vh氨基酸序列；或
60、(e)如seq id no:119中所示的vl氨基酸序列和
61、(i)如seq id no:106中所示的vh氨基酸序列，或
62、(ii)如seq id no:116中所示的vh氨基酸序列，
63、并且其中n介于4与8之间。
64、本公开的另一方面涉及药物组合物，其包含如本文所述的抗体-药物缀合物和药学上可接受的载体或稀释剂。
65、本公开的另一方面涉及抑制癌细胞增殖的方法，其包括使细胞与有效量的如本文所述的抗体-药物缀合物接触。
66、本公开的另一方面涉及杀伤癌细胞的方法，其包括使细胞与有效量的如本文所述的抗体-药物缀合物接触。
67、本公开的另一方面涉及治疗有需要的受试者的癌症的方法，其包括向受试者施用有效量的如本文所述的抗体-药物缀合物。
68、本公开的另一方面涉及用于在疗法中使用的如本文所述的抗体-药物缀合物。
69、本公开的另一方面涉及用于在癌症的治疗中使用的如本文所述的抗体-药物缀合物。
70、本公开的另一方面涉及如本文所述的抗体-药物缀合物在制造用于治疗癌症的药物中的用途。
1.一种具有式(x)的抗体-药物缀合物：
2.根据权利要求1所述的抗体-药物构建体，其中所述抗原结合结构域包含重链cdr氨基酸序列(hcdr1、hcdr2和hcdr3)和轻链cdr氨基酸序列(lcdr1、lcdr2和lcdr3)，所述重链cdr氨基酸序列包含如seq id no:3、4和5中所示的序列，所述轻链cdr氨基酸序列包含如seq id no:6、7和8中所示的序列。
3.根据权利要求1所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗原结合结构域包含具有如seqid no:19、50、54、57、61、76、79、82、85、88、91、99、106、113、116、133或136中任一个所示的序列的vh结构域的cdr序列。
4.根据权利要求1或3所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗原结合结构域包含具有如seq id no:39、64、119、124或130中任一个所示的序列的vl结构域的cdr序列。
5.根据权利要求1所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗原结合结构域包含：
6.根据权利要求1至5中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中d为式(iv)的化合物：
7.根据权利要求6所述的抗体-药物缀合物，其中r1a选自：-ch3、-cf3、-och3、-ocf3和-nh2。
8.根据权利要求6所述的抗体-药物缀合物，其中r1a选自：-ch3、-och3和nh2。
9.根据权利要求6至8中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中r2a选自：-h、-f、-br和-cl。
10.根据权利要求6至9中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中x是-o-、-s-或-nh-，并且r4a选自：
11.根据权利要求1至5中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中d为式(v)的化合物：
12.根据权利要求11所述的抗体-药物缀合物，其中r2a为f。
13.根据权利要求11或12所述的抗体-药物缀合物，其中r20a选自：-h、-c1-c6烷基、-(c1-c6烷基)-o-r5、-(c1-c6烷基)-芳基、
14.根据权利要求1至5中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中d为式(vi)的化合物：
15.根据权利要求14所述的抗体-药物缀合物，其中r2a选自：-ch3、-cf3、-f、-br、-cl、-oh、-och3和-ocf3。
16.根据权利要求14所述的抗体-药物缀合物，其中r2a为f。
17.根据权利要求14至16中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中x为-o-、-s-或-nh-，并且r25选自：-c1-c6烷基、-(c1-c6烷基)-o-r5a、–(c1-c6烷基)-芳基、或x为o，并且r25-x-选自：
18.根据权利要求14至16中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中x是-o-、-s-或-nh-，并且r25选自：-c1-c6烷基、-(c1-c6烷基)-o-r5a、-(c1-c6烷基)-芳基、
19.根据权利要求1至18中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中每个烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选地被一个或多个选自下列的取代基取代：卤素、酰基、酰氧基、烷氧基、羧基、羟基、氨基、酰氨基、硝基、氰基、叠氮基、烷硫基、硫基、磺酰基、磺酰氨基、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基。
20.根据权利要求1至18中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中每个烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选地被一个或多个选自下列的取代基取代：卤素、酰基、酰氧基、烷氧基、羧基、羟基、氨基、酰氨基、硝基、氰基、叠氮基、烷硫基、硫基、磺酰基和磺酰氨基。
21.根据权利要求1至5中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中d具有如表6或表7中所示化合物中的任一种的结构。
22.根据权利要求1至5中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中d为化合物139或化合物141。
23.根据权利要求1至22中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中l是可裂解的接头。
24.根据权利要求23所述的抗体-药物缀合物，其中l是蛋白酶可裂解的接头。
25.根据权利要求23或24所述的抗体-药物缀合物，其中l包括二肽、三肽或四肽。
26.根据权利要求23至25中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中l具有：
27.根据权利要求1至5中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中式(x)中的l-(d)具有如表8-10中所示药物-接头(dl)中的任一种的结构。
28.根据权利要求1至5中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中式(x)中的l-(d)具有如表8或表9中所示药物-接头(dl)中的任一种的结构。
29.根据权利要求1至5中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中式(x)中的l-(d)为：
30.根据权利要求1至29中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中m介于1与2之间。
31.根据权利要求1至29中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中m为1。
32.根据权利要求1至31中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中n介于2与8之间。
33.根据权利要求1至31中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中n介于4与8之间。
34.根据权利要求1至33中任一项所述的抗体-药物缀合物，其中所述抗frα抗体构建体还包含支架，并且其中所述抗原结合结构域可操作地连接至所述支架。
35.根据权利要求34所述的抗体-药物缀合物，其中所述支架包含igg fc区。
36.一种抗体-药物缀合物，其具有选自以下的结构：
37.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至36中任一项所述的抗体-药物缀合物和药学上可接受的载体或稀释剂。
38.一种抑制癌细胞增殖的方法，其包括使所述细胞与有效量的根据权利要求1至36中任一项所述的抗体-药物缀合物接触。
39.一种杀伤癌细胞的方法，其包括使所述细胞与有效量的根据权利要求1至36中任一项所述的抗体-药物缀合物接触。
40.一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，其包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1至36中任一项所述的抗体-药物缀合物。
41.根据权利要求40所述的方法，其中所述癌症是乳腺癌、卵巢癌、结肠直肠癌、非小细胞肺癌(nsclc)、胰腺癌或子宫内膜癌。
42.根据权利要求1至36中任一项所述的抗体-药物缀合物，其用于疗法。
43.根据权利要求1至36中任一项所述的抗体-药物缀合物，其用于癌症的治疗。
44.根据权利要求43使用的抗体-药物缀合物，其中所述癌症是乳腺癌、卵巢癌、结肠直肠癌、非小细胞肺癌(nsclc)、胰腺癌或子宫内膜癌。
45.根据权利要求1至36中任一项所述的抗体-药物缀合物在制造用于治疗癌症的药物中的用途。
46.根据权利要求45所述的用途，其中所述癌症是乳腺癌、卵巢癌、结肠直肠癌、非小细胞肺癌(nsclc)、胰腺癌或子宫内膜癌。
