本发明涉及用于促进间充质干细胞（msc）的免疫抑制活性的新方法。
背景技术：
1、间充质干细胞是一类起源于中胚层的成体干细胞，具有自我更新及多向分化潜能，可分化为多种间质组织，如骨髓、软骨、脂肪、骨髓造血组织等。临床上，其被广泛用于治疗多类疾病包括心血管疾病、骨科疾病、神经系统疾病、皮肤科、风湿免疫病、炎症性疾病、免疫排斥性疾病、妇产科、呼吸系统疾病、眼科和口腔科等等相关的疾病。其丰富的来源包括骨髓、脐带血、脐带组织、胎盘组织和脂肪组织等，更是为其临床应用提供了便利。
2、截止目前，国外共有十余种干细胞新药上市。在我国，也累计有十余款间充质干细胞新药申请获得临床批件。干细胞药物的研制也已经成为了重点专项的目标之一。且随着细胞治疗产品研究与评价技术指导原则以及干细胞产品临床试验技术指导原则的颁布，明晰了干细胞治疗作为药品申报的标准，为药品研发注册申请人及开展药物临床试验的研究者提供了更具针对性的建议，无疑对干细胞临床转化应用的发展起到了极大的促进作用。目前我国也已有一百余个干细胞临床研究备案机构，有七十余项备案的干细胞相关研究项目，已有研究，mscs也对急性胰腺炎有干预作用，它可通过多重作用来调节重症急性胰腺炎的，包括：（1）减轻胰腺组织的炎症。mscs能下调重症胰腺炎动物的促炎标记物包括il-1β、il-6、tnf-a，同时增加抗炎细胞因子il-10等；（2）免疫调节。mscs可减少胰腺组织中cd3+t细胞的百分率，同时增加foxp+调节性t细胞的百分率；（3）血管生成。经过基质细胞衍生因子1α(sdf-1α) 预处理的mscs可以促进胰腺组织中血管标志物（cd31和vwf）表达增加，即促进胰腺组织中血管生成；（3）减少腺泡细胞的凋亡。mscs可能通过减轻氧化应激来减少腺泡细胞的损伤；（4）抗氧化。mscs增加了胰腺局部组织的抗氧化活性，如超氧化物歧化酶（sod），谷胱甘肽过氧化物（gpx）和ho-1等，同时降低了丙二醛（mda）的水平，mda是急性胰腺炎期间脂质过氧化的产物。
3、尽管mscs对急性胰腺炎的干预方面已经看到了一线曙光，也有诸多干细胞临床转化的利好，仍然没有mscs用于急性胰腺炎的临床研究报道。其原因主要是mscs对重症急性胰腺炎的干预效果还未达到临床治疗的要求，疗效还有待提高。众所周知，在不受刺激的情况下，msc 并不具有免疫调节作用。仅在炎症因子刺激条件下，msc通过炎症调节信号轴、炎症抑制分子、生长因子、外泌体、趋化因子、补体成分或者多种代谢物等机制来调节炎症。有许多研究者尝试通过调节msc 免疫调节相关分子来调节其抗炎、抗肿瘤和再生作用。常用的刺激调节方式包括：（1）缺氧诱导msc 增加生长因子和抗炎分子分泌；（2）促炎症调节诱导msc分泌抗炎分子；（3）促msc尺寸增加，以促进抗肿瘤和抗炎分子分泌。本发明旨在通过调节msc抗炎作用来促进其对重症型胰腺炎的干预作用，为重症胰腺炎的临床治疗提供新思路和新方法。
4、已有文献报道，ifn-γ预刺激的hmsc 具有更强的免疫调节作用，主要因为ifn-γ能通过干扰素信号通路上调多种免疫活性因子如ido，pd-l1，pge2，ccl8,cxcl9和cxcl10等。申请人前期工作发现，趋化因子-inos/ido轴在mscs调节急性胰腺炎中发挥重要作用，mscs通过该通路减少疾病进展阶段胰腺浸润淋巴中巨噬细胞、中性粒细胞和cd4+t细胞在病灶部位的招募。有研究者构建了偶联有ifn-γ的注射用合成水凝胶包裹 hmsc 用于治疗小鼠结肠粘膜伤口，提示具有良好的修护效果。也有报道经ifn-γ预处理的msc对结肠炎的治疗效果可进一步提升。此外，一些临床应用的药物如他莫昔芬和磷酸氯喹跟ifn-γ联用后，可通过调节经典或非经典的干扰素信号通路，进一步促进msc分泌上述免疫调节活性因子从而增强msc的免疫调节作用。鉴于部分药物对msc的增殖抑制作用，又筛选了一些中药活性单体，为msc免疫调节分子提供了多种可选方案。
5、虽然异基因人脐带间充质干细胞是干细胞治疗的方便细胞来源，然而，免疫排斥反应是同种异体干细胞临床应用的主要障碍。对于没有经过预处理的间充质干细胞人类白细胞抗原i类分子（hla-i）是排斥反应的主要分子。而经过ifn-γ预处理的msc则主要是因为hla-ii类分子造成的排斥。已有较多研究者通过基因编辑技术如crispr/cas9等干扰hla的轻链蛋白（β2-微球蛋白）从而避免免疫排斥，提高了干细胞的移植存活率。提示msc的基因编辑技术在改善其作用方面具有作用。
6、纳米粒或脂质体这类药物载体具有加快药物细胞内吞速度，增加药物内吞量，以及延长药物胞内滞留时间和降低药物毒性等综合作用。纳米粒在体外应用能充分发挥上述作用，且能避免体内应用时容易被内皮网状系统清除，血浆半衰期短，靶部位浓度低等缺陷。
7、根据上述的研究结果，申请人提出了一种载干扰素通路调节药物纳米粒/脂质体体外预处理msc并用于重症急性胰腺干预治疗的新方法。利用药物或化合物对干扰素信号的调节作用增强msc免疫调节作用。通过载药纳米粒或脂质体的制备进一步促进药物或化合物对msc的调节作用，并降低副作用，且最大限度地规避了纳米载体的体内应用风险。为临床多种炎症性疾病的治疗提供了新思路和新方法。
技术实现思路
1、本发明描述了用于调节msc或基因修饰的msc免疫抑制作用的新方法。
2、在实施过程中，通过施用有效量的含有分离的msc的组合物来增强（与没有接受这种治疗的）实验对象中的免疫抑制，所述msc已经使用ifnγ以及中药活性单体进行处理过。
3、下文以实施例的形式描述优选的方法和材料，所述实施例拟用于展示而非限制本发明。本领域技术人员将认识与此描述的那些方法和材料类似或者等效并且能够用于实践或者检测本发明的方法和材料。根据所详细描述的说明书以及权利要求书将明了本发明的其他特征和优点。
1.一种治疗组合物，所述的组合物特征在于：为分离的间充质干细胞，如人脐带间充质干细胞；使用干扰素联合至少一种中药来源的活性单体如大黄素（浓度范围5-100μm）、芦荟大黄素（浓度范围5-200μm）等来对上述间充质干细胞进行预处理；这些化合物主要通过经典或非经典干扰素信号通路包括jak-stat、ulk、mtor、mapk或slfn蛋白等来调控间充质干细胞的免疫调节作用的。
2.根据权利要求1所述，其中，所述分离的间充质干细胞也包含经培养的间充质干细胞。
3.根据权利要求1所述，其中，所述分离的间充质干细胞也包含通过基因修饰的间充质干细胞，比如通过基因编辑/沉默技术干扰了其抗原提呈相关分子的间充质干细胞，以抵消因激活干扰素途径导致的其免疫原性的增强。
4.根据权利要求1所述，其中，所述组合物也可以通过调节间充质干细胞的旁分泌途径来促进其免疫调节作用，如通过促进携带有pd-l1的细胞外囊泡分泌发挥作用。
5.根据权利要求1所述的组合物，所述组合物进一步包含药学可接受的载体：所述与ifnγ联合的药物或分子可以是游离药物，也可以是包载于纳米粒或脂质体中的，制备纳米粒的材料可能是聚丙交酯-乙交酯（plga）、聚乳酸（pla）、聚赖氨酸（pll）和白蛋白等；脂质体的材料可能是磷脂和胆固醇，磷脂可能是卵磷脂、大豆磷脂、脑磷脂、鞘磷脂等，也可能是人工合成的磷脂如亲脂链长为十八碳的氢化卵磷脂（hspc）、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺（dspe）、二硬脂酰磷脂酰胆碱（dspc），和其他一些亲脂链长为十六碳或十四碳的磷脂。
6.根据权利要求1所述，其中，所述组合物抑制免疫t细胞群。
7.根据权利要求1所述，其中，所述组合物诱导免疫抑制。
