本发明涉及食品发酵，具体涉及到一种肠膜明串珠菌富集培养方法、保护剂及应用。
背景技术：
1、乳酸菌是益生菌，是一种天然的有益微生物类品，它对发酵食品、饲料品质和肠道的卫生都具有重要意义，膜明串珠菌是乳酸菌中明串珠菌属的重要菌种，因其能够产生特殊风味物质，在乳和泡菜等食品领域广泛应用。乳酸菌对培养条件要求苛刻，常规方法培养活菌数较低。富集培养在微生物学中是十分强大的技术方式，是提高微生物产量的有效途径和手段，其培育的菌悬液活菌数有很高的含量其管控主要依赖生理要素，例如温度、氮源、碳源、温度和ph等。冻干技术(freeze-drying technology)是真空冷冻干燥技术的简要称呼，也是保存微生物的一大手段，用于制备高浓度的乳酸菌菌粉。冷冻干燥发酵技术是发酵剂的主要制备手段，把高密度培育的乳酸菌在相应的条件下离心，添加合适的保护剂，之后在真空条件下冷冻干燥，制作成浓度较高的乳酸菌冻干粉，有助于乳酸菌菌剂维持生物活性以及稳定性。
2、然而目前的发酵技术，冷冻干燥后的细胞存活率较低，使得冷冻干燥发酵的发酵效果并不理想。
技术实现思路
1、针对现有技术中的上述不足，本发明提供了一种肠膜明串珠菌富集培养方法、保护剂及应用，用于解决冷冻干燥后的细胞存活率较低，发酵效果不理想等问题。
2、为实现上述目的，本发明提供一种肠膜明串珠菌富集培养方法，包括：
3、s1，菌株活化：将筛选出的保藏在-20℃的具有降解亚硝酸盐功能肠膜明串珠菌菌株，接种于mrs液体培养基中，活化3代；
4、s2，发酵培养基中增菌培养：将活化后的肠膜明串珠菌接种于umrs培养基中，在30℃培养24h，所述umrs培养基包括按百分含量计为2％～4％的碳源、5％～9％的氮源和3％～5％的生长因子；
5、s3，富集条件：在增菌后菌体液基础上，通过4000～8000r/m，3-5℃，7-9min条件下离心浓缩，得到菌泥；
6、s4，菌株冻干：在富集后的所述菌泥中加入保护剂，置于冻干机内冻干，其中保护剂中添加2％-5％的葡萄糖、3％-5％的脱脂乳粉和1％-3％的海藻糖。
7、根据本发明的一个实施例，所述s2中，所述肠膜明串珠菌的接种量为3％。
8、根据本发明的一个实施例，所述umrs培养基包括按百分含量计为2.5％的碳源、5％的氮源和5％的生长因子。
9、根据本发明的一个实施例，所述2.5％的碳源包括1.67％果糖和0.83％麦芽糖，所述5％的氮源包括2％的酵母浸粉、2％的蛋白胨和1％的牛肉膏，5％的生长因子包括3％番茄汁和2％的胡萝卜汁。
10、根据本发明的一个实施例，所述保护剂中添加2％的葡萄糖、5％的脱脂乳粉和2％的海藻糖。
11、根据本发明的一个实施例，所述umrs液体培养基包括磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，硫酸镁0.2g，柠檬酸钠5.0g，硫酸锰0.05g和吐温-80 1.0ml。
12、第二方面，本发明还提供一种冻干保护剂，应用于第一方面实施例所解释的具有降解亚硝酸盐功能的肠膜明串珠菌富集培养，包括：2％-5％的葡萄糖、3％-5％的脱脂乳粉和1％-3％的海藻糖。
13、作为第二方面的一个实施例，冻干保护剂包括：2％的葡萄糖、5％的脱脂乳粉和2％的海藻糖。
14、作为第二方面的一个实施例，在富集培养过程中，所述肠膜明串珠菌的接种量为3％。
15、第三方面，本发明还公开一种保护剂在降解发酵食品中的亚硝酸盐含量的应用。
16、综上所述，本发明具有以下有益效果：
17、根据本发明实施例的肠膜明串珠菌的培养方法，肠膜明串珠菌的od600值最高且活菌数从原来的4.9×109cfu/ml达到了1.7×1010cfu/ml。再结合复合冻干保护剂，可以使得冷冻干燥细胞存活率可达70.01％以上。
1.一种肠膜明串珠菌富集培养方法，其特征在于，包括：
2.如权利要求1所述的富集培养方法，其特征在于，所述s2中，所述肠膜明串珠菌的接种量为3％。
3.如权利要求1所述的富集培养方法，其特征在于，所述umrs培养基包括按百分含量计为2.5％的碳源、5％的氮源和5％的生长因子。
4.如权利要求1所述的富集培养方法，其特征在于，所述2.5％的碳源包括1.67％果糖和0.83％麦芽糖，所述5％的氮源包括2％的酵母浸粉、2％的蛋白胨和1％的牛肉膏，5％的生长因子包括3％番茄汁和2％的胡萝卜汁。
5.如权利要求4所述的富集培养方法，其特征在于，所述保护剂中添加2％的葡萄糖、5％的脱脂乳粉和2％的海藻糖。
6.如权利要求1-5任一项所述的富集培养方法，其特征在于，所述umrs液体培养基包括磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，硫酸镁0.2g，柠檬酸钠5.0g，硫酸锰0.05g和吐温-80 1.0ml。
7.一种冻干保护剂，应用于权利要求1-6任一项所述具有降解亚硝酸盐功能的肠膜明串珠菌富集培养，其特征在于，包括：2％-5％的葡萄糖、3％-5％的脱脂乳粉和1％-3％的海藻糖。
8.如权利要求7所述的冻干保护剂，其特征在于，包括：2％的葡萄糖、5％的脱脂乳粉和2％的海藻糖。
9.如权利要求7所述的冻干保护剂，其特征在于，在富集培养过程中，所述肠膜明串珠菌的接种量为3％。
10.一种保护剂在降解发酵食品中的亚硝酸盐含量的应用。
