本发明涉及饲料添加剂，尤其涉及一种预防反刍动物产气荚膜梭菌病的复合制剂。
背景技术：
1、产气荚膜梭菌（clostridium perfringens）又称魏氏梭菌，最早是由英国学者从一腐败尸体中分离得到，是一种革兰氏阳性、可以产生芽孢的厌氧致病菌。产气荚膜梭菌能够广泛存在于植物、土壤、河流等自然环境、处理不彻底的动物制品以及人类和动物胃肠道，是一种能够通过多种途径在人类、动物和自然环境间传播的人畜共患的条件性致病菌。目前已知 产气荚膜梭菌可产生20余种毒素和酶，根据对其中6种毒素的产生能力，产气荚膜梭菌被分为ａ～ｇ七个毒素型，例如其中a型、b型、c型、d型产气荚膜梭菌分别可导致羔羊醉酒症、羔羊痢疾、羊猝狙、羊肠毒血症、牛猝死症、鹿肠毒血症等疫病的发生，尽管商品化疫苗在梭菌病防空过程中发挥重要作用，但因养殖场养殖模式的差异、疫苗免疫失败等原因，导致梭菌病时有发生，给羊、牛、鹿等产业造成较大的经济损失。
技术实现思路
1、本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种预防反刍动物产气荚膜梭菌病的复合制剂。
2、本发明提出了一种预防反刍动物产气荚膜梭菌病的复合制剂。根据本发明的实施例，该复合制剂包括：乳酸菌培养物、丝兰粉和小分子糖，所述小分子糖包括葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖中的至少一种。
3、丝兰富含多种生物活性成分，如皂苷、酚类、生物碱、萜类、类固醇、单宁、糖苷和类黄酮，可增强机体免疫反应以及抗氧化能力，从而提高动物对消化道内的病原微生物感染的抵抗力。丝兰提取物还有助于调节瘤胃中氨气和甲烷气体的生成，提高瘤胃中微生物发酵，促进食物分解过程，调整肠道菌群结构，促进动物肠道健康，有利于氨基酸、维生素、矿物质等营养物质的消化吸收和利用，可以起到改善动物健康状况和生长性能的作用。乳酸菌在代谢过程中可以产生许多具有抑菌作用的物质，能抑制有害微生物的生长。小分子糖作为重要的营养性糖，在动物细胞代谢中起着重要的作用，保持稳定的血糖水平对维持动物机体正常的生命活动具有十分重要的意义。
4、发明人发现，将乳酸菌培养物、丝兰粉和小分子糖复合制备的复合制剂可以显著抑制反刍动物胃肠道内的产气荚膜梭菌生长及其毒素的产生，提高反刍动物的生存率，而且该复合制剂也可以作为一种预防制剂添加在饲料中，针对未感染荚膜梭菌的反刍动物，也起到很好的预防作用，明显降低了产气荚膜梭菌引起的反刍动物的病死率，较好解决了因养殖模式的差异、疫苗免疫失败等原因造成的梭菌病存在较高发生率的问题。另外，发明人还发现，该复合制剂对反刍动物具有良好的促进育肥作用，从而提高了养殖效益。
5、在本发明的一些实施例中，所述乳酸菌培养物与所述丝兰粉的质量比为（10~20）：（0.3~1）。例如，乳酸菌培养物与丝兰粉的质量比10：0.3，15：0.3，20：0.3，10：0.5，15：0.5，20：0.5，10：1，15：1，20：1等，或上述任意两点数值之间的范围。发明人发现，控制乳酸菌培养物与丝兰粉的质量比在上述范围内，不仅更好地抑制产气荚膜梭菌，提高反刍动物的生存率，具有更好的预防作用，而且基于经济成本出发，可以显著降低复合制剂的生产成本。
6、在本发明的一些实施例中，丝兰粉的目数为100目~130目。控制丝兰粉的目数在上述范围内，可以更好地发挥丝兰活性组分的作用，与乳酸菌培养物发挥更好的协同作用，提高复合制剂的对荚膜梭菌的抑制和预防能力。
7、在本发明的一些实施例中，基于所述预防反刍动物产气荚膜梭菌病的复合制剂的总质量，所述小分子糖的质量占比为5%~10%。通过控制小分子糖的质量占比在上述范围内，可以延缓产气荚膜梭菌毒素产生的时间和产生的量，减少因毒素过量的产生而对动物组织器官造成的损伤，为有效控制产气荚膜梭菌病赢得时间。
8、在本发明的一些实施例中，所述反刍动物包括但不限于羊、牛、鹿，优选羊。
9、在本发明的一些实施例中，所述乳酸菌培养物的制备方法包括：
10、（1）将乳酸菌在mrs液体培养基中培养，得乳酸菌液体培养物；
11、（2）将小麦麸、豆粕粉、乳清粉、碳酸钙混合得到的固体物料与所述乳酸菌液体培养物混合后密封发酵，得乳酸菌发酵固体料；
12、（3）将所述乳酸菌发酵固体料烘干、粉碎，得乳酸菌培养物。
13、首先将乳酸菌在mrs液体培养基中培养，使乳酸菌能快速繁殖，有利于后续发酵的进行。然后将小麦麸、豆粕粉、乳清粉、碳酸钙混合得到的固体物料与乳酸菌液体培养物混合后密封发酵，固体物料为乳酸菌提供发酵所需的营养成分，乳酸菌在一定的发酵条件下，得到多种活性组分的发酵产物，这些产物是复合制剂抑制、预防产气荚膜梭菌的必要成分之一。最后将乳酸菌发酵固体料烘干、粉碎，得乳酸菌培养物。
14、需要说明的是，在经过乳酸菌在mrs液体培养基中培养需要对保藏的乳酸菌进行活化，具体地，可将乳酸菌经过mrs固体培养基划线培养。
15、在本发明的一些实施例中，步骤（1）中，所述乳酸菌包括嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、德氏乳杆菌乳酸亚种、乳肠球菌中的至少一种。发明人发现，采用上述乳酸菌制备乳酸菌培养物，得到的复合制剂可以有效的抑制、预防产气荚膜梭菌，提高反刍动物生存率。
16、在本发明的一些实施例中，步骤（1）中，所述乳酸菌液体培养物中的乳酸菌活菌总数≥80亿cfu/ml。
17、需要说明的是，乳酸菌在mrs液体培养基中培养的目的是使乳酸菌得到大量繁殖，对于具体的培养条件，本领域技术人员可根据实际确定，例如，培养的温度为25℃~30℃。
18、在本发明的一些实施例中，步骤（1）中，向所述mrs液体培养基中加入丝兰粉、番茄汁和豆芽汁。具体地，所述丝兰粉的加入量为0.2g/l~1.5g/l，所述番茄汁的加入量为10g/l~20g/l，所述豆芽汁的加入量为30g/l~50g/l。发明人发现，向mrs液体培养基中加入丝兰粉、番茄汁和豆芽汁，更有利于乳酸菌的快速繁殖，同时可产生一定的活性成分。
19、在本发明的一些实施例中，步骤（2）中，所述固体物料接种所述乳酸菌液体培养物的接种量为1wt%~20wt%，且所述固体物料与所述乳酸菌液体培养物混合后的混合物的水分控制在55wt%~60wt%。通过控制接种量和水分在上述范围内，更有利于乳酸菌的发酵，得到更多活性成分的产物，提高复合制剂对荚膜梭菌的抑制、预防能力。
20、在本发明的一些实施例中，步骤（2）中，所述密封发酵的温度为25℃~30℃，时间为70h～74h。发明人发现，控制密封发酵的温度和时间在上述范围内，可以促进乳酸菌的发酵进行，得到需要的发酵活性成分，有利于提高复合制剂对荚膜梭菌的抑制、预防能力。
21、在本发明的一些实施例中，所述小麦麸、所述豆粕粉、所述乳清粉、所述碳酸钙的质量比为（5~8）：（1~2）：（1~2）：（0.5~1）。通过控制小麦麸、豆粕粉、乳清粉、碳酸钙的质量比在上述范围内，可以促进乳酸菌的发酵，得到需要的活性组分，提高复合制剂对荚膜梭菌的抑制、预防能力。
22、在本发明的一些实施例中，步骤（3）中，所述乳酸菌培养物的乳酸含量≥90 mg/g，乳酸菌素含量≥40 mg/g。本技术制备的乳酸菌培养物含有大量的乳酸和乳酸菌素，从而更好的发挥复合制剂对产气荚膜梭菌的抑制、预防能力。
23、在本发明的一些实施例中，步骤（3）中，所述乳酸菌培养物的含水量不大于10wt%。通过控制乳酸菌培养物的含水量不大于10wt%，一方面有利于运输，延长保质期，另一方面，便于后续粉碎操作，得到一定目数的粉末。
24、在本发明的一些实施例中，所述乳酸菌培养物的目数为50目~80目。
25、在本发明的一些实施例中，将乳酸菌发酵固体料烘干的烘干温度为70℃~80℃。
26、本发明具有至少如下技术效果：
27、（1）将乳酸菌培养物、丝兰粉和小分子糖复合制备的复合制剂可以显著抑制反刍动物胃肠道内的产气荚膜梭菌生长及其毒素的产生，提高反刍动物的生存率，而且该复合制剂也可以作为一种预防制剂添加在饲料中，针对未感染荚膜梭菌的反刍动物，也起到很好的预防作用，明显降低了产气荚膜梭菌引起的反刍动物的病死率，较好解决了因养殖模式的差异、疫苗免疫失败等原因造成的梭菌病存在较高发生率的问题，特别是，该复合制剂降低了羊群因感染产气荚膜梭菌而发生羔羊痢疾、羊肠毒血症、羊猝狙、羔羊醉酒症等疫病的风险。
28、（2）该复合制剂对反刍动物具有良好的促进育肥作用，从而提高了养殖效益。
29、（3）该复合制剂作为饲料添加剂，还具有改善饲料风味，促进饲料消化吸收，改善养殖环境等作用。
1.一种预防反刍动物产气荚膜梭菌病的复合制剂，其特征在于，包括：乳酸菌培养物、丝兰粉和小分子糖，所述小分子糖包括葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖中的至少一种。
2.根据权利要求1所述复合制剂，其特征在于，所述乳酸菌培养物与所述丝兰粉的质量比为（10~20）：（0.3~1）。
3.根据权利要求1或2所述复合制剂，其特征在于，所述丝兰粉的目数为100目~130目。
4.根据权利要求1或2所述复合制剂，其特征在于，基于所述预防反刍动物产气荚膜梭菌病的复合制剂的总质量，所述小分子糖的质量占比为5%~10%。
5.根据权利要求1或2所述复合制剂，其特征在于，所述反刍动物包括羊、牛、鹿中的至少一种。
6.根据权利要求1或2所述复合制剂，其特征在于，所述乳酸菌培养物的制备方法包括：
7.根据权利要求6所述复合制剂，其特征在于，步骤（1）中，所述乳酸菌包括嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、德氏乳杆菌乳酸亚种、乳肠球菌中的至少一种；
8.根据权利要求6所述复合制剂，其特征在于，步骤（1）中，向所述mrs液体培养基中加入丝兰粉、番茄汁和豆芽汁；
9.根据权利要求6所述复合制剂，其特征在于，步骤（2）中，所述固体物料接种所述乳酸菌液体培养物的接种量为1wt%~20wt%，且所述固体物料与所述乳酸菌液体培养物混合后的混合物的水分控制在55wt%~60wt%；
10.根据权利要求6所述复合制剂，其特征在于，步骤（3）中，所述乳酸菌培养物的含水量不大于10wt%；
