本发明属于环二肽的应用，具体涉及具有改善屏障保湿修护作用的环二肽，其结构为环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽和/或环(d-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽，具有促进flg、aqp3、lor、ivl等皮肤屏障保湿因子表达的作用，可作为改善屏障保湿修护的成分应用于化妆品、食品或药品。
背景技术：
1、皮肤是人体内最大的器官，总重量大约占个体体重的16％，也是抵御外界不良因素侵扰的第一道防线，起到保护内部组织和器官的作用。皮肤对外部环境的刺激具有防护作用，例如对紫外线、有害物的物理阻隔。皮肤防止过多水分的流失，保持角质层的含水量，调节肌肤的水分含量等。正常的皮肤含水量为20％～35％，当皮肤含水量降低至10％以下时，皮肤的屏障功能即受损。当皮肤屏障受损的时候可能会产生皮肤干燥、皮肤粗糙、色素沉着、皱纹和老化。因此保护皮肤，维持皮肤的屏障功能、改善皮肤保湿效果，对护肤品来说具有重要意义。
2、皮肤屏障的结构基础是最表面角质形成细胞形成的角质层、角质细胞间的脂类、天然保护因子，即所谓的“砖墙学说”，角质层及其角质包膜(砖泥)〉和细胞间的脂质双分子层(灰泥)。角质层的形成有多种重要的蛋白参与，其中包括丝聚合蛋白(filaggrin，flg)、内披蛋白(involucrin，ivl)、兜甲蛋白(loricrin，lor)、角质形成细胞转谷氨酰胺酶、角蛋白1(keratin 1，k1)和角蛋白10(keratin 10，k10)等。
3、丝聚合蛋白flg又称为微丝凝聚蛋白，主要存在于表皮颗粒层和透明层，由表皮颗粒层的透明角质颗粒中无活性的pflg经一些特异性磷酸酶和蛋白酶催化转化而来。它可以和角蛋白中间丝蛋白互相作用，聚集成角蛋白纤维束，从而形成最外层角质形成细胞的扁平支架结构。有研究表明，在特应性皮炎患者中，flg表达下降，皮肤屏障功能弱化或存在障碍。兜甲蛋白lor主要表达于颗粒层与角质层，是最终分化的ce的主要构成成分。角质包膜的形成标志着角质形成细胞分化的终末产物——角质形成细胞的产生，是表皮作为一种防御屏障的基础。内披蛋白ivl主要表达于棘细胞层上部与颗粒层，是角质形成细胞分化的标志性蛋白，位于角化包膜的外层，与含有-oh的神经酰胺共价结合，由此将脂质基质和角化细胞连接起来而发挥作用。
4、在皮肤结构中，虽然角质层被认为是最重要的生理屏障，但表皮基底层对于屏障功能同样重要。表皮基底层的角质形成细胞表达得到水通道蛋白(aquaporin 3，aqp3)，它是一个完整的跨膜蛋白通道。体内循环中的水分和甘油可以通过aqp3到达表皮，促进角质层的水合作用，与皮肤保湿屏障功能密切相关。
5、环肽在自然界中广泛存在，具有较强的生物活性，多数可作为药物或者药物前体，在生物体的生命活动中扮演着极其重要的角色。而环二肽是环肽成员中最小的一类化合物，在自然界中普遍存在。环二肽具有二酮哌嗪结构，因此具有较高的稳定性。环二肽特殊的空间构象使其具有明显的生理活性，在化学、药物化学、生物化学、生命科学等领域具有很多潜在的应用价值，因此受到国内外许多化学家、生物学家和药学家的关注。
6、申请人特别关注环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽和环二肽(d-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽。
7、环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽是一种微生物代谢产物，在很多细菌、真菌及放线菌能代谢产生该物质。漆淑华等从海洋细菌pseudomonas sp，的代谢产物中分离出环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)化合物(漆淑华，钱培元，张偲，海洋细菌pseudomonas sp.抗菌代谢产物的研究[j]，天然产物研究与开发，2009，21(3):420-423)；吴秀丽等从火木层孔菌的液体培养物中分离到该物质(吴秀丽，林生，朱承根等，火木层孔菌液体培养物的化学成分研究[j]，中国中药杂志，2011，36(7):874-880)；李海峰等在枯草芽孢杆菌7ze3中也分离到该化合物(李海峰，叶永浩，郭坚华，枯草芽孢杆菌7ze3环二肽的分离与鉴定[j]，江苏农业科学，2010(2):107-109)；王静等报道，从侧柏内生真菌中分离出了环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽(王静，魏艳，易晓华等，侧柏内生真菌j46除草选择性探究及活性物质分离[c]，第十三届全国农药学教学科研研讨会论文集，2013:260-266)。朱建生等从海洋细菌中分离出了环(d-亮氨酸-l-脯氨酸)化合物(朱建生，海洋细菌pseudomonas putida中环二肽及其生物活性研究[d]，江苏:扬州大学，2013)。
8、但是，这些文献均未研究或提到环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽和/或环(d-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽美容护肤方面的活性研究。
9、本发明意外地发现，环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽和/或环(d-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽具有促进flg、aqp3、lor、ivl等皮肤屏障保湿因子表达的作用，可作为改善屏障和保湿的成分应用于化妆品、食品或药品。
技术实现思路
1、一方面，本发明涉及环二肽改善屏障保湿修护的应用，所述环二肽选自：环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽、环(d-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽或它们的组合。
2、在优选的实施方式中，所述改善屏障保湿修护通过促进肌肤屏障相关因子flg、aqp3、lor和/或ivl的表达实现。
3、在优选的实施方式中，环二肽的使用浓度为2.5ppm-40ppm。在优选的实施方式中，环二肽的使用浓度为10ppm-40ppm，2.5ppm-20ppm，或4ppm。
4、另一方面，本发明涉及环二肽在制备具有改善屏障保湿修护功效的皮肤外用剂中的应用，所述环二肽选自：环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽、环(d-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽或它们的组合。
5、在优选的实施方式中，所述皮肤外用剂选自以下形式：面霜、乳液、啫喱、化妆水、精华液、面膜、眼霜、气雾清洁泡、喷雾、沐浴露、或洗面奶。
6、发明详述
7、除非另有定义，本文所用的所有技术和科学术语具有本发明所属领域普通技术人员共同理解的相同含义。虽然与本文所述相似或等同的任何方法和材料可用于实施或测试本发明，但本文描述的是优选的方法和材料。对于本发明的目的，下面定义了以下术语。
8、本文所用术语“约”指与参比品的数量、水平、数值、维度、大小或用量相比，差异可高达30％、20％或10％的数量、水平、数值、维度、大小或用量。本文所使用的百分含量，除非另有说明，均以重量计。
9、在全篇说明书和权利要求书中，除非另有要求，以下词语“包含”和其变体“含有”和“包括”应理解为意指包括所述的整体或步骤，或一组整体或步骤，但不排除任何其它整体或步骤，或其它一组整体或步骤。
10、本发明是基于以下意外发现：环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽和/或环(d-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽具有促进flg、aqp3、lor、ivl等皮肤屏障保湿因子表达的作用，可作为改善屏障和保湿的成分应用于化妆品、食品或药品。
11、环二肽
12、本发明提供一种环二肽成分，其结构为：环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽和/或环(d-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽。
13、表1显示了环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽和环(d-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽的结构信息。
14、表1
15、
16、
17、在具体的实施方式中，本发明的组合物采用由东华大学提供的环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽和环(d-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽。
18、皮肤外用剂
19、本发明还提供了一种皮肤外用剂，所述皮肤外用剂包含环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽和/或环(d-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽。
20、所述皮肤外用剂是通常用于皮肤外部的所有成分的统称概念，例如可以是化妆品组合物或药学组合物。所述化妆品组合物中可以是基础化妆品、面部妆容化妆品、身体用化妆品、头发护理用化妆品等，对其剂型无特殊限制，根据不同目的可合理选择。
21、环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽和/或环(d-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽可以作为化妆品添加剂添加到精华液、膏霜、乳液、眼霜、精华油、按摩油等化妆品中。
22、所述化妆品组合物中根据剂型和目的的不同还含有不同的化妆品学层面允许的介质或基质赋形剂。
23、可以用于本发明皮肤外用剂组合物的化妆品、皮肤病学或药学上可接受的赋形剂为水相、油相、凝胶、水包蜡型乳液、水包油型乳液或油包水型乳液的形式。水相为一种或多种水溶性或分散性组分的混合物，其在室温(25℃)下可以为液体、半固体或固体。赋形剂包括或可以为在水或水-醇赋形剂中的混悬液、分散液或溶液的形式，其可以含有增稠剂或凝胶剂。本领域技术人员可以基于本领域技术人员掌握的知识选择合适的产品形式，其中包含的组分。
24、所述的组合物可以包括水相，该水相可以含有水或水与至少一种亲水性有机溶剂的混合物，所述的亲水性有机溶剂诸如醇，尤其是含有2-5个碳原子的直链或支链低级一元醇，如乙醇或丙醇；多元醇，如丙二醇、山梨醇、甘油、泛醇或聚乙二醇及其混合物。
25、当发明的组合物为乳液形式时，该组合物还可以任选包含表面活性剂。
26、所述的组合物还可以包含成膜聚合物，如聚氨基甲酸酯、聚丙烯酸均聚物或共聚物、聚酯、基于烃的树脂和/或硅氧烷树脂。可以将聚合物溶于或分散于化妆品可接受的赋形剂中并且任选与增塑剂合并。
27、本发明的组合物可以进一步包含常用于化妆品领域中的任何组分。这些组分包括防腐剂、水相增稠剂(提取物生物聚合物、合成聚合物)和脂肪相增稠剂、芳香剂、亲水性和亲脂性活性剂及其混合物。
28、本发明的组合物还可以包含另外的颗粒相，所述的颗粒相可以为化妆品组合物中使用的颜料和/或珠光剂和/或填充剂。
29、颜料可以存在于组合物中，合适的无机颜料包括氧化钛、氧化锆和氧化铈以及氧化锌、氧化铁和铁蓝；合适的有机颜料包括钡、锶、钙和铝色淀和碳黑。
30、珠光剂可以存在于组合物中，合适的珠光剂包括涂覆了氧化钛、氧化铁或天然颜料的云母。
31、填充剂可以存在于组合物中，合适的填充剂包括滑石粉、二氧化硅、硬脂酸锌、云母、高岭土、尼龙粉末、聚乙烯粉末、特氟龙、淀粉、一氮化硼、共聚物微球，例如硅氧烷树脂微珠。
32、可以将本发明的组合物配制成任何合适的产品形式。这类产品形式包括，但不限于气溶胶型喷雾剂、霜剂、乳液、固体、液体、分散体、泡沫、凝胶、化妆水、摩丝、软膏、粉剂、贴剂、润发油、溶液、手按泵型喷雾剂、棒状物、面膜和湿纸巾。可以将本发明的组合物通过本领域众所周知的各种方法便利地用于制备或作为化妆品、皮肤病学或药物局部施用产品。
33、本发明的皮肤外用剂组合物可以包括一种或多种下列成分：抗过敏剂、抗炎剂、保湿剂、抗微生物剂、抗氧化剂、螯合剂、着色剂去色素剂、润肤剂、乳化剂、表皮脱落剂、成膜剂、香料、昆虫驱避剂、润滑剂、药物活性剂、增湿剂、耐光剂、防腐剂、护肤剂、皮肤渗透增强剂、防晒剂、稳定剂、表面活性剂、增稠剂、粘度调节剂、维生素或其任意组合。
1.环二肽改善屏障保湿修护的应用，所述环二肽选自：环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽、环(d-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽或它们的组合。
2.如权利要求1所述的应用，其中，所述改善屏障保湿修护通过促进肌肤屏障相关因子flg、aqp3、lor和/或ivl的表达实现。
3.如权利要求1所述的应用，其中，所述环二肽是环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽。
4.如权利要求1所述的应用，其中，所述环二肽是环(d-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽。
5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述环二肽的使用浓度为2.5ppm-40ppm。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述环二肽的使用浓度为10ppm-40ppm。
7.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述环二肽的使用浓度为2.5ppm-20ppm。
8.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述环二肽的使用浓度为4ppm。
9.环二肽在制备具有改善屏障保湿修护功效的皮肤外用剂中的应用，所述环二肽选自：环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽、环(d-亮氨酸-l-脯氨酸)二肽或它们的组合。
10.如权利要求7所述的皮肤外用剂，所述皮肤外用剂选自以下形式：面霜、乳液、啫喱、化妆水、精华液、面膜、眼霜、气雾清洁泡、喷雾、沐浴露、或洗面奶。
