本发明属于药物制剂，涉及一种纳米药物，具体涉及一种纳米形态的高载药量的人参皂苷rh2组合物及其制备方法和应用。
背景技术：
1、人参为多年生草本植物，味甘、微苦，性温、平。具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神等功效。在人参所包括的多种化学成分，例如：皂苷类、氨基酸和多肽、挥发油类、糖类、微量元素及其他成分中，人参皂苷是最重要的活性成分之一。
2、其中，人参皂苷rh2(g-rh2)因其突出的抗肿瘤活性而得到广泛研究。(20s)g-rh2相比(20r)g-rh2而言，具有更出色的抗肿瘤作用，可直接杀伤肿瘤细胞，抑制肿瘤细胞的增殖、诱导肿瘤细胞凋亡以及对肿瘤细胞的转移、侵袭等都有明显作用。研究报道，g-rh2是通过多种途径诱导多类癌细胞凋亡以实现对癌细胞的抑制作用；chen等通过微阵列结果分析得到人参皂苷rh2通过调节incrnas(长非编码rna)和mrnas的差异表达来抑制肝癌。除此之外，人参皂苷rh2对心肌受损有保护作用，可以增强机体的免疫功能，还有抗过敏、抗哮喘等药理作用。其结构如下:
3、
4、人参皂苷rh2属于人参次级苷元，含量极低，现多利用含量较高的人参皂苷经降解、转化等方法获得。人参皂苷rh2主要是通过提高免疫功能、抑制肿瘤的发生发展和转移、诱发肿瘤细胞凋亡以及癌细胞的分化、改变肿瘤细胞对抗癌药物的耐药性并增强抗癌药的药效以充分发挥其抗肿瘤作用，还可以预防或减轻癌症常用的治疗方法中化疗所致一定的毒副作用等。
5、大量基础和临床研究表明含人参皂苷rh2在肿瘤治疗方面有广阔的应用前景，但传统制剂目前仍存在不少问题，如颗粒偏大、不溶于水，生物利用度较低等，限制了其临床应用。如果能通过改进传统制剂工艺、采用现代技术制备新型含人参皂苷中药，从而提高其生物利用度、减少药物用量、降低毒副作用并提高疗效，将具有重要的临床意义。
技术实现思路
1、有鉴于此，本发明的目的是提供一种人参皂苷rh2组合物，其是一种能提高人参皂苷rh2口服生物利用度的组合物。
2、需要说明的是，人参皂苷rh2是一种难溶性成分，而且是备受关注的活性成分，但与常规难溶性药物不同，人参皂苷纳米粒的制备极其困难。迄今为止，关于人参皂苷rh2的纳米给药系统的研究极其有限，只有亚微乳、自微乳、脂质纳米粒(epc、plga、dspe-peg为辅料，载药量7.2％)、以壳聚糖和三聚磷酸钠为辅料制备的纳米粒载药量7.89％；plga-peg为辅料的rh2胶束，在最优化的条件下载药量<4％。
3、对人参皂苷rh2脂质体的研究相对多一些，截止目前为止，载药量最高的为脂质体，其极限载药量也只有23％。脂质体的制备需要使用较大量的磷脂，而磷脂的成本较高；同时磷脂的化学稳定性差，运输和储存过程中易于氧化，给产品的稳定性也带来不利的影响，为避免或延缓磷脂氧化而采取的一系列措施会进一步推高产品的成本。因此，为真正实现在临床上的应用，需要用更稳定的辅料制备出载药量更高的rh2纳米药物。
4、在所有的纳米给药系统中，以纳米混悬剂和纳米晶的载药量最高，制备rh2的纳米晶或纳米混悬剂似乎是顺理成章的选择。然而，人参皂苷rh2比较特殊，本发明尝试了各种辅料作为稳定剂以最经济的研磨法(top-down法)制备rh2的纳米混悬剂，并将药载比设定在1:2起，但无一例外以失败告终，不是粒径特别大，就是稳定性差(放置出现不可逆的沉淀聚集)；后尝试用反溶剂沉淀法，筛选能在1:2的药载比下制备出rh2纳米粒且稳定性良好的纳米混悬剂，结果也均未获得成功。显示以常规方法和常规辅料无法成功制备出rh2的纳米混悬剂，需要另辟蹊径才能获得具有高载药量的rh2的纳米组合物。
5、本发明在前期探索过程中，意外发现，在rh2的乙醇溶液中混入油酸后，用tpgs为稳定剂，可以成功制备得到人参皂苷rh2的类似纳米混悬剂的纳米粒，放置稳定、在人工胃肠液中稳定，且载药量高达40％。将油酸换成亚油酸，以及油酸-亚油酸不同比例的混合物，仍然具有优异的稳定性和高载药量，但将油酸换成大豆油、玉米油、橄榄油之后，无法成功制备得到稳定的rh2纳米粒，提示油酸/亚油酸可能与rh2之间存某种特定的相互作用，能帮助rh2在tpgs的稳定作用下完成组装，形成类似纳米混悬剂的高载药纳米粒；且将tpgs换成其他两亲性辅料，发现基本都可以制备得到rh2纳米粒。
6、为了实现本发明的目的，本发明在大量研究基础上，采用了如下技术方案：
7、本发明的第一个技术目的在于提供一种人参皂苷rh2组合物，所述组合物包括人参皂苷rh2、油酸/亚油酸、两亲性辅料；其中，
8、所述人参皂苷rh2、油酸/亚油酸与两亲性辅料的重量比为4:2-8:1-8。
9、可选地，所述组合物包括药学上可接受的辅料，所述辅料包括调节渗透压和ph的辅料，具体包括葡萄糖、氯化钠、磷酸缓冲液、甘油。
10、进一步地，所述油酸/亚油酸为油酸和亚油酸以任意比例的混合液，所述两亲性辅料包括tpgs、pla-peg、plga-peg、pcl-peg、dspe-peg、磷脂、油酸钠中一种或多种组合。
11、需要说明的是，所述的人参皂苷rh2组合物的平均粒径为50-1000nm。其中油酸/亚油酸的存在对人参皂苷rh2纳米组合物的形成必不可少。所述的人参皂苷rh2组合物可有效解决人参皂苷rh2难溶难给药问题，口服可显著提高人参皂苷rh2的生物利用度，组合物中掺入冰片可进一步提高口服生物利用度。
12、且，所述的人参皂苷rh2组合物在胃肠液中能基本保持原来的粒径(粒径变化<100nm)，能以纳米粒的形态口服给药；在生理盐水、pbs、5％葡萄糖中粒径基本保持稳定(粒径变化<100nm)，能以纳米粒的形态静脉注射给药。
13、本发明的第二个技术目的在于提供一种如上所述人参皂苷rh2组合物的制备方法，所述方法包括以下步骤：
14、将人参皂苷rh2、两亲性辅料、油酸/亚油酸溶于有机溶剂中得到混合溶液；于搅拌或超声下，将所述混合溶液加入水中，减压蒸发除去有机溶剂，最终得到所述的人参皂苷rh2组合物。
15、或，所述人参皂苷rh2组合物的制备方法，所述方法包括以下步骤：
16、将人参皂苷rh2、油酸/亚油酸、两亲性辅料溶于有机溶剂中得到混合溶液；于搅拌或超声下，将所述混合溶液加入含油酸钠的水溶液中，减压蒸发除去有机溶剂，最终得到所述的人参皂苷rh2组合物。
17、可选地，所述有机溶剂包括乙醇、甲醇、丙酮中的一种或多种组合，水的体积为有机溶剂体积的3-50倍，搅拌转速为300-2000rpm，水浴超声功率为100-500w。
18、可选地，由所述方法制备的水分散体系，待向其中加入1％甘露醇混匀后，冷冻干燥，便得所述人参皂苷rh2组合物的固体粉末，便于长时间保存。
19、在该水性纳米分散体系中加入甘露醇后冷冻干燥，进一步得到组合物固体粉末，既可以装胶囊口服给药，也可以作为冲剂装袋，临用前加水搅拌均匀后服用。
20、本发明的第三个技术目的是提供一种如上所述的人参皂苷rh2组合物在药物制剂中的应用。
21、本发明公开的人参皂苷rh2组合物可作为活性成分与药学上可接受的赋型剂一起用于制备药物组合物，该药物组合物可以采用制剂领域的常规方法制备成各种剂型，如片剂、粉剂、粒剂、丸剂、胶囊、酊剂、口服液、膏剂、霜剂、乳剂或敷贴剂等。根据剂型的不同，该药物组合物使用的赋型剂也不同，常用赋型剂包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、乳化剂、渗透压调节剂。
22、且，本发明公开的人参皂苷rh2纳米组合物用于肿瘤的治疗及预防。
23、与现有技术相比，本发明的有益效果是：
24、本发明通过将人参皂苷rh2、油酸/亚油酸、两亲性辅料共同溶于适量乙醇等能与水混溶的有机溶剂，搅拌或超声作用下加入到水相，然后减压蒸发除去有机溶剂即得平均粒径50-1000nm的纳米组合物，载药量轻松达到30％，优化处方载药量39.6％，可以直接口服给药或静脉注射。该组合物制备工艺简便，相对于rh2物理混悬液，大鼠口服生物利用度提高>2.5倍。处方中加入少量冰片后，生物利用度提高到5.1倍。
1.一种人参皂苷rh2组合物，其特征在于，所述组合物包括人参皂苷rh2、油酸/亚油酸、两亲性辅料；其中，
2.根据权利要求1所述的人参皂苷rh2组合物，其特征在于，所述组合物包括药学上可接受的辅料，所述辅料包括调节渗透压和ph的辅料，具体包括葡萄糖、氯化钠、磷酸缓冲液、甘油、甘露醇。
3.根据权利要求1或2所述的人参皂苷rh2组合物，其特征在于，所述油酸/亚油酸为油酸和亚油酸以任意比例的混合液，所述两亲性辅料包括tpgs、pla-peg、plga-peg、pcl-peg、dspe-peg、磷脂、油酸钠中一种或多种组合。
4.一种如权利要求1所述的人参皂苷rh2组合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
5.一种如权利要求1所述的人参皂苷rh2组合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
6.根据权利要求4或5所述的人参皂苷rh2组合物的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂包括乙醇、甲醇、丙酮中的一种或多种组合，水的体积为有机溶剂体积的3-50倍，搅拌转速为300-2000rpm，水浴超声功率为100-500w。
7.根据权利要求4或5所述的人参皂苷rh2组合物的制备方法，其特征在于，由所述方法制备的水分散体系，待向其中加入1％甘露醇混匀后，冷冻干燥，便得所述人参皂苷rh2组合物的固体粉末。
8.一种如权利要求1所述的人参皂苷rh2组合物或如权利要求4或5所述方法制备的人参皂苷rh2组合物在药物制剂中的应用。
