本发明涉及农业微生物领域，具体涉及一种促生型微生物菌剂的制备工艺。
背景技术：
1、微生物菌剂是一种由微生物制成的复合菌剂，微生物菌剂的组成包括有机质、有益微生物、矿质元素和调节因子等，这些成分相互作用，协同发挥作用，可以改善土壤环境，促进植物生长，提高农作物的产量和品质，使用微生物菌剂不仅可以减少化肥和农药的使用，还可以保护环境，提高农业的可持续发展能力。
2、微生物菌剂包括粉剂、颗粒和液体，其中液体菌剂的活菌含量最高，但单一组分的液体菌剂多为定向菌剂，只具备单一的促生功能，在短期进行种植使用时，加速土壤内肥力吸收，对土壤肥力的过度榨取会导致土壤酸碱失衡，导致后续土壤种植效果变差，另一方面，由于作物的快速生长，作物的易滋生病菌，导致作物需经常喷洒农药进行灭菌，增加了种植成本。
技术实现思路
1、(一)发明目的
2、为解决背景技术中存在的技术问题，本发明提出一种促生型微生物菌剂的制备工艺，具有促进植物生长、辅助土壤酸碱中和预防生长过程中作物沾染病害的特点。
3、(二)技术方案
4、为解决上述技术问题，本发明提供了一种促生型微生物菌剂的制备工艺，包括以下步骤：
5、步骤一、菌种培养、在无菌条件下，将哈茨木霉菌、枯草芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌在对应的培养基内培养，温度25～30℃、ph值5.0～8.0、培养时间12～18h；
6、步骤二、菌种筛选、获取活化的哈茨木霉菌群、枯草芽孢杆菌群和嗜酸乳杆菌群，筛选高抗逆性的哈茨木霉菌株、高促生的枯草芽孢杆菌株和高促生的嗜酸乳杆菌株；
7、步骤三、菌株增殖、将筛选后的高抗逆性的哈茨木霉菌株、高促生的枯草芽孢杆菌株和高促生的嗜酸乳杆菌株接种在对应的培养基内定向育种，进行各菌株的扩大培养；
8、步骤四、菌体菌液收集、高抗逆性的哈茨木霉菌株、高促生的枯草芽孢杆菌株和高促生的嗜酸乳杆菌株培养有效活菌数达到至少2.0cfu3/ml后，通过离心、过滤处理收集高抗逆性的哈茨木霉菌体、高促生的枯草芽孢杆菌体和高促生的嗜酸乳杆菌体，将各菌体与提取液混合获取哈茨木霉菌液、枯草芽孢杆菌液和嗜酸乳酸杆菌液，并通过离心、过滤和超滤，去除各菌液中的杂质和不溶物，提高菌液纯度；
9、步骤五、菌剂调配、配置载体，载体包括：淀粉2％、糖1％、助剂1.5％和蒸馏水，枯草芽孢杆菌液和嗜酸乳酸杆菌液和载体进行第一次混合培养，培养时间24-36h，获取枯草芽孢杆菌和嗜酸乳酸杆菌混合菌剂，将哈茨木霉菌液加入枯草芽孢杆菌和嗜酸乳酸杆菌混合菌剂，补充含量为淀粉1％、糖0.5％和助剂0.5％进行第二次混合培养，培养时间24-36h，获取促生型微生物菌剂，其中哈茨木霉菌液、枯草芽孢杆菌液和嗜酸乳酸杆菌液的组分比为2％∶1％∶1％；
10、步骤六、菌剂封装，对灌注设备和灌装容器进行灭菌处理后，将配置完成的促生型微生物菌剂灌装至对应的灌装容器内，进行密封和避光存储。
11、进一步的，步骤一中哈茨木霉菌的培养基组分为：蔗糖30.0g、nano33.0g、mgso4·7h2o 0.5g、kcl0.5g、feso4·4h2o 0.01g、k2hpo4 1.0g、琼脂15.0g和蒸馏水1.0l，培养温度25℃、ph值6.0～6.5、培养时间12h。
12、进一步的，步骤一中枯草芽孢杆菌的培养基组分为葡萄糖3.50g、蛋白胨0.83g、酵母膏0.50g、磷酸二氢钾0.35g、碳酸钙0.25g和蒸馏水1.0l，培养温度30℃，ph值6.5～7.5，培养时间15h。
13、进一步的，步骤一中嗜酸乳杆菌的培养基组分为蛋白胨10g、牛肉浸膏10g、酵母浸出粉5g、葡萄糖20g、乙酸钠5g、柠檬酸二铵2g、mgso47h2o 0.58g、mnso4 h2o 0.33g、琼脂15g和蒸馏水1.0l，培养温度30℃，ph值6.5-7，培养时间18h。
14、进一步的，步骤二中，筛选高抗逆性的哈茨木霉菌株的步骤包括：
15、将土壤中的病原真菌和细菌植入哈茨木霉菌群，静置培养24-36h、保留沿病原真菌和细菌外周菌丝生长、缠绕的菌株做为高抗逆性的哈茨木霉菌株，与病原真菌和细菌共生的菌株筛除。
16、进一步的，步骤二中，筛选高促生的枯草芽孢杆菌株的步骤包括：
17、向培养基中添加氮磷钾，静置培养12-24h，选取菌群扩大幅度最高的做为高促生的枯草芽孢杆菌株。
18、进一步的，步骤二中，筛选高促生的嗜酸乳杆菌株的步骤包括：
19、向培养基中添加酸性物质，分别增加培养基ph值为8、10和12，静置培养12h，检测嗜酸乳杆菌群周围ph值下降比重，与初始ph值6.0对比，选取ph值下降比重最高的做为高促生的嗜酸乳杆菌株。
20、进一步的，步骤五中，
21、第一次混合培养获取的枯草芽孢杆菌和嗜酸乳酸杆菌混合菌剂，具备调理土壤ph值和加速氮磷钾的矿化与释放的功能，刺激作物生长；
22、第二次混合培养中增加了哈茨木霉菌液，哈茨木霉菌包覆土壤的病原真菌和细菌，保护作物根系，降低根部病害发生几率。
23、进一步的，步骤五中，在进行第一次混合培养和第二次混合培养时，使用的培养基通过外部的旋转装置进行混合旋转，旋转转速为200-300r/min。
24、本发明的上述技术方案具有如下有益的技术效果：采用哈茨木霉菌液、枯草芽孢杆菌液和嗜酸乳酸杆菌液搭配制成促生型微生物菌剂，在作物种植时，加大作物根系和叶片增长幅度，提高作物抗逆性，减少病虫害对叶片的影响，同时保证中值土壤保持中性，防止出现土壤碱化板结。
1.一种促生型微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种促生型微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，步骤一中哈茨木霉菌的培养基组分为：蔗糖30.0g、nano3 3.0g、mgso4·7h2o 0.5g、kcl 0.5g、feso4·4h2o 0.01g、k2hpo4 1.0g、琼脂15.0g和蒸馏水1.0l，培养温度25℃、ph值6.0～6.5、培养时间12h。
3.根据权利要求1所述的一种促生型微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，步骤一中枯草芽孢杆菌的培养基组分为葡萄糖3.50g、蛋白胨0.83g、酵母膏0.50g、磷酸二氢钾0.35g、碳酸钙0.25g和蒸馏水1.0l，培养温度30℃，ph值6.5～7.5，培养时间15h。
4.根据权利要求1所述的一种促生型微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，步骤一中嗜酸乳杆菌的培养基组分为蛋白胨10g、牛肉浸膏10g、酵母浸出粉5g、葡萄糖20g、乙酸钠5g、柠檬酸二铵2g、mgso4 7h2o 0.58g、mnso4 h2o 0.33g、琼脂15g和蒸馏水1.0l，培养温度30℃，ph值6.5-7，培养时间18h。
5.根据权利要求1所述的一种促生型微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，步骤二中，筛选高抗逆性的哈茨木霉菌株的步骤包括：
6.根据权利要求1所述的一种促生型微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，步骤二中，筛选高促生的枯草芽孢杆菌株的步骤包括：
7.根据权利要求1所述的一种促生型微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，步骤二中，筛选高促生的嗜酸乳杆菌株的步骤包括：
8.根据权利要求1所述的一种促生型微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，在步骤五中，
9.根据权利要求1所述的一种促生型微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，在步骤五中，在进行第一次混合培养和第二次混合培养时，使用的培养基通过外部的旋转装置进行混合旋转，旋转转速为200-300r/min。
