本发明属于生物医药，涉及parp1抑制剂在制备smad4突变的胰腺癌放疗增敏剂中的应用。
背景技术：
1、胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma，pdac)发现晚、放化疗耐药，五年生存率低于10％。pdac中的主要突变基因包括kras、cdkn2a、tp53和smad4。smad4突变率约为55％，是tgf-β信号通路中的一个重要转录因子。当tgf-β信号通路被激活时，smad2和smad3首先被磷酸化，然后它们与smad4结合形成异源二聚体复合物，转运至细胞核，激活或抑制靶基因。smad4缺失与放疗耐药性增加和胰腺导管腺癌预后较差有关。我们之前的研究表明，smad4缺失会通过增强活性氧的产生和辐射诱导的自噬而加剧放疗耐药性。有针对性地应用特定抑制剂可能会解决携带这些突变的患者的肿瘤进展问题。例如，临床前研究表明，cdk4/6抑制剂可抑制kras突变胰腺导管腺癌模型中的肿瘤生长。然而，仍未有提高smad4缺失胰腺癌患者放疗敏感性的有效方法。因此，迫切需要开发更多新型的靶向疗法。
2、放疗通过诱导dna损伤来杀伤肿瘤细胞，肿瘤细胞通过dna损伤修复对抗这种损伤。parp1是parp家族的一个重要组成部分，在dna损伤修复中发挥着关键作用。dna损伤后，parp1会迅速定位到损伤部位，并开始形成par链，招募其他dna损伤修复蛋白。虽然parp抑制剂通过合成致死效应已被批准用于治疗brca基因突变的癌症，但只有5-10％的胰腺癌患者具有brca1或brca2突变，大部分胰腺癌患者对此并无响应，这限制了parp抑制剂在胰腺癌治疗中的适用性。因此，迫切需要扩大parp抑制剂的应用范围。
技术实现思路
1、本发明针对上述问题进行，目的在于提供parp1抑制剂的新用途，即parp1抑制剂在制备smad4突变的胰腺癌放疗增敏剂中的用途。
2、发明人经过广泛而深入的研究，首次发现，smad4抑制parp1招募到dna损伤位点，从而降低dna修复效率。据此，parp抑制剂奥拉帕利与放疗联合使用可显著缓解smad4缺失胰腺导管腺癌的放疗耐药，为使用parp抑制剂提高这类患者的放疗疗效提供了理论依据。
3、此外，本发明结合大量临床信息，确定smad4在胰腺导管腺癌的放疗抵抗中起重要作用，smad4的表达情况能够作为胰腺导管腺癌患者预后的指标。基于此，smad4对于胰腺导管腺癌患者病情判断和治疗方式的选择具有重要的指导意义。
4、基于上述研究，本发明的具体技术方案如下：
5、本发明的第一方面，提供了parp1抑制剂在制备smad4突变的胰腺癌放疗增敏剂中的应用。
6、其中，parp1抑制剂为宽泛概念，选自如下情形的任意一种或多种：抑制parp1蛋白表达或活性功能的化合物，靶向parp1编码序列的干扰rna、反义寡核苷酸或短发夹rna。上述物质可单独靶向parp1，也可以重组载体、脂质体或者纳米颗粒包裹的形式靶向parp1的化合物。
7、其中，抑制parp1蛋白表达或活性功能的化合物选自如下化合物：奥拉帕利。
8、本发明具体实施方式中，通过动物模型实验对比smad4野生型胰腺癌小鼠和smad4突变型胰腺癌小鼠对于parp1抑制剂和放疗组合的敏感度，结果显示smad4突变型胰腺癌小鼠对于parp1抑制剂和放疗组合的敏感度更高，肿瘤体积明显小于仅进行放射治疗的小鼠；但smad4野生型胰腺癌小鼠则对此几乎不敏感，肿瘤体积甚至略大于放射治疗的小鼠。
9、本发明的第二方面，提供了一种smad4突变的胰腺癌放疗增敏剂，包括活性组分以及药学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。其中，所述活性组分为上所述的parp1抑制剂或靶向parp1的重组载体。
10、本发明中的组合物在对包括人在内的动物给药时，给药剂量因病人的年龄和体重、疾病特性和严重性、以及给药途径而异，可以参考动物实验的结果和种种情况，总给药量不能超过一定范围。
11、进一步，本发明的药物组合物和放疗联用。
12、本发明第三方面，提供了检测smad4表达量的试剂在制备胰腺导管腺癌患者放疗预后评估试剂盒中的用途。
13、本发明第四方面，提供了检测smad4表达量的试剂在制备胰腺导管腺癌患者放疗敏感性评估试剂盒中的用途。
14、其中，所述的预后评估试剂盒，包含了检测生物样品中smad4表达量的试剂。
15、优选的，所述的检测生物样品中smad4表达量的试剂，选自：对smad4具有检测特异性的pcr引物，引物序列基于序列设计得到。
16、优选的，所述的生物样品获自对象的外周血或者胰腺肿瘤组织。
17、本发明的第四方面，提供了一种胰腺导管腺癌患者放疗预后评估试剂盒，该试剂盒包含了检测生物样品中smad4表达量的试剂。
18、本发明所述的预后评估试剂盒由逆转录系统、引物系统和扩增系统组成。
19、本发明的有益保障及效果：
20、本发明首次将parp1抑制剂与放疗联合在smad4缺失的胰腺导管腺癌患者中使用，将parp1抑制剂在胰腺导管腺癌患者中的使用范围扩大，为原先放疗抵抗的smad4缺失胰腺导管腺癌患者提供新的治疗方法，为使用parp抑制剂提高这类患者的放疗疗效提供了理论依据。
1.parp1抑制剂在制备smad4突变的胰腺癌放疗增敏剂中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：
4.一种靶向parp1的重组载体，其特征在于，包括表达载体以及插入设置在该表达载体上的靶向parp1编码序列的干扰rna、短发夹rna或反义寡核苷酸。
5.根据权利要求4所述的parp1重组载体，其特征在于：
6.权利要求5所述的靶向parp1的重组载体在制备smad4突变的胰腺癌放疗增敏剂的用途。
7.一种smad4突变的胰腺癌放疗增敏剂，其特征在于，该药物组合物包括活性组分以及药学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂，
8.检测smad4表达量的试剂在制备胰腺导管腺癌患者放疗预后评估或放疗敏感性试剂盒中的用途。
9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，所述试剂盒包含了检测生物样品中smad4表达量的试剂，所述的检测生物样品中smad4表达量的试剂选自：对smad4具有检测特异性的pcr引物。
10.一种胰腺导管腺癌患者放疗预后评估试剂盒，其特征在于，该试剂盒由逆转录系统、引物系统和扩增系统组成。
