本发明属于鱼卵保存，具体涉及一种鱼卵固定保存方法。
背景技术：
1、鱼卵的保存主要是出于科学研究、资源评估与保护以及生态监测等多方面的需求。鱼卵作为鱼类繁殖周期的起始点，其数量、种类及健康状况直接关联到鱼类种群的未来动态与生态系统的平衡。鱼卵是是渔业资源评估与预测的关键指标，通过对鱼卵数量的监测，可以预测未来成鱼资源的潜在补充量，为渔业管理提供科学依据，确保资源的可持续利用；其次，鱼卵的种类与分布反映了鱼类种群的遗传多样性和生态适应性，对于生物多样性保护和物种恢复具有重要意义；再者，鱼卵及其发育过程的研究，有助于深入理解鱼类生殖生物学、种群生态学以及生态系统功能等科学问题，推动相关学科的发展。最后，从生态系统的角度来看，鱼卵数量与分布直接影响到浮游生物群落的结构与动态，进而对整个河流/海洋生态系统的平衡与稳定产生深远影响。因此，通过保存鱼卵样本，不仅可以长期保存珍贵的生物学资料，为未来的科学研究提供丰富的素材，还能够为渔业资源管理和生态系统保护提供及时、准确的监测数据，促进人与自然的和谐共生。
2、常见的鱼卵保存方法有冷藏保存、冷冻保存、干燥保存、固定保存及活体保存；其中，固定保存是一种常用有效的保存方法，常用的固定剂，如福尔马林，具有较好的固定效果。将鱼卵浸泡在一定浓度的福尔马林溶液中进行固定，固定的时间和浓度需要根据具体鱼卵种类和实验要求进行调整；固定后的鱼卵可以长期保存，这种方式主要用于制作标本或进行形态学研究；乙醇同样可作为固定剂，其效果与福尔马林类似，但在使用时同样需要注意浓度和时间的控制。但利用福尔马林和乙醇进行鱼卵的固定，虽能减少鱼卵的变质，但也同样会造成鱼卵外观和细胞结构上的损坏，带来鱼卵的透光性及保存质量差等问题；同时福尔马林和乙醇在酸性条件下会造成dna的嘌呤与脱氧核糖之间的糖苷键不稳定，并不利于后续对于dna的提取渗出及有效检测。
技术实现思路
1、本发明要解决的问题是：提供一种鱼卵固定保存方法，以解决鱼卵保存质量差、鱼卵透光性差及保存后dna提取纯度低的问题。
2、为解决其技术问题所采取的技术方案是，提供一种鱼卵固定保存方法，包括以下步骤：
3、(1)采集鱼卵并放入储存容器中；
4、(2)向步骤(1)储存容器中加入茶树油溶液至鱼卵完全浸没，放置固定；
5、(3)去除步骤(2)储存容器中茶树油溶液，加入抗生素溶液并混匀；
6、(4)将步骤(3)储存容器中的鱼卵连同抗生素溶液转移至无菌管中密封保存。
7、本发明采用上述技术方案的有益效果为：本发明利用茶树油及抗生素溶液进行鱼卵固定保存，可提高鱼卵保存质量及保证dna的提取效果。茶树油的有效成分可抑制多种有害微生物的生长，可更有效的降低微生物对鱼卵的侵害风险，确保鱼卵在保存过程中免受感染，从而保持鱼卵的清洁和无菌状态，可避免因微生物感染导致的变质和损坏；同时，茶树油相对温和，对鱼卵的损伤较小；部分传统的化学防腐剂(福尔马林、乙醇等)会对鱼卵产生潜在的不良影响，而茶树油在发挥抗菌作用的同时，对鱼卵的正常生理结构和发育潜能影响较小；此外，茶树油在一定条件下能保持较长时间的活性，可持续为鱼卵提供抗菌保护。经过茶树油处理后的鱼卵在加入到抗生素溶液中，抗生素能够针对特定的微生物进行杀灭或抑制，与茶树油形成协同增效作用，这种协同作用使得鱼卵在保存过程中受到的微生物污染风险更低，从而保持了更高的结构完整性和透光度。
8、在鱼卵保存过程中，茶树油能有效地防止或减缓鱼卵中脂质和其他生物分子的氧化反应，这种抗氧化作用对于保持鱼卵的完整性和减少dna降解至关重要；去除茶树油溶液后，加入抗生素溶液并混匀；抗生素的主要作用是抑制或杀灭可能污染鱼卵的微生物，从而防止微生物对鱼卵的破坏和dna的降解，这一步骤进一步提高了鱼卵保存的质量。
9、优选的，步骤(1)包括以下步骤：采集鱼卵并进行处理和分类，去除杂质，然后用滴管吸入储存容器中。
10、优选的，步骤(2)中茶树油溶液的体积浓度为2～6％。
11、更优选的，步骤(2)中茶树油溶液的体积浓度为4％。
12、本发明采用优选技术方案的有益效果为：体积浓度为4％茶树油足以在鱼卵保存过程中提供有效的抗氧化保护，这有助于防止鱼卵中的脂质和其他生物分子发生氧化反应，从而减少dna的降解和损伤；同时，此体积浓度下，茶树油能够抑制或杀灭可能污染鱼卵的微生物，如细菌、真菌等，从而保持鱼卵的清洁和无菌状态。此外，此浓度下茶树油能够适当地渗透到鱼卵组织中，与内部的生物分子相互作用，提供有效的保护，该浓度也不会过高而导致鱼卵细胞过度脱水或破裂。
13、优选的，步骤(2)中放置固定的温度为室温，时间为25～35min。
14、优选的，步骤(3)中抗生素溶液的质量浓度为0.05～0.2％。
15、更优选的，步骤(3)中抗生素溶液的质量浓度为0.1％。
16、更优选的，抗生素溶液中的抗生素为氨苄西林钠、阿莫西林、苄星青霉素或羧苄青霉素。
17、优选的，步骤(4)密封保存的温度为3～5℃，时间为6～8d。
18、本发明具有以下有益效果：
19、(1)本发明的鱼卵固定保存方法操作简单，试剂易得，可实现鱼卵的快速固定保存；
20、(2)本发明的鱼卵固定保存方法中所用的茶树油及抗生素能有效减低微生物对鱼卵的侵害风险，可适用于复杂的采样环境，可确保鱼卵的外观清透、细胞结构完整度高，且能利于后续对于dna的提取渗出及有效检测，为鱼卵保存提供了一种更为有效和可靠的技术手段。
1.一种鱼卵固定保存方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的鱼卵固定保存方法，其特征在于，所述步骤(1)包括以下步骤：采集鱼卵并进行处理和分类，去除杂质，然后用滴管吸入储存容器中。
3.如权利要求1所述的鱼卵固定保存方法，其特征在于，所述步骤(2)中茶树油溶液的体积浓度为2～6％。
4.如权利要求3所述的鱼卵固定保存方法，其特征在于，所述步骤(2)中茶树油溶液的体积浓度为4％。
5.如权利要求1所述的鱼卵固定保存方法，其特征在于，所述步骤(2)中放置固定的温度为室温，时间为25～35min。
6.如权利要求1所述的鱼卵固定保存方法，其特征在于，所述步骤(3)中抗生素溶液的质量浓度为0.05～0.2％。
7.如权利要求6所述的鱼卵固定保存方法，其特征在于，所述步骤(3)中抗生素溶液的质量浓度为0.1％。
8.如权利要求1所述的鱼卵固定保存方法，其特征在于，所述步骤(4)密封保存的温度为3～5℃，时间为6～8d。
