本发明属于微生物遗传工程领域,尤其涉及一种小蛋白sorf14905及其功能与应用。
背景技术:
1、木质纤维素生物炼制技术推动农业废弃物再利用产业化的发展,促进环境友好型替代资源的研究。目前,用于商业化生产纤维素酶和木聚糖酶的优良菌种为丝状真菌。科学研究主要集中在调控植物多糖降解酶基因表达的转录因子的挖掘及其分子调控机理等方面。然而,基于以上知识,通过分子育种获得的工程菌株的纤维素酶和木聚糖酶产量与工业化生物炼制的需求相差较大。因此,急需更加全面系统地阐明真菌的植物多糖降解酶生物合成的调控机理,寻找新的调控元件。小蛋白被称为基因组中“暗物质”,分子量小,易操作,是合成生物学技术的良好靶标。微生物尤其丝状真菌小蛋白的研究相对有限,尤其对植物多糖降解酶生物合成的作用机制的研究尚属空白。
2、草酸青霉(penicillium oxalicum)能够分泌完整的纤维素酶系和木聚糖酶系,尤其高产β-葡萄糖苷酶,是国外工业产酶菌株里氏木霉的潜在替代菌株。通过分子遗传学和生物化学等技术,鉴定和阐明关键调控草酸青霉纤维素酶和木聚糖酶基因表达的小蛋白生物学功能,对认识真菌的基因表达和蛋白合成的调控机理及调控网络具有重要的科学意义;为微生物优异种质创新提供新的分子靶标,开发更精准有效的改造菌株策略,对通过理性设计、分子育种改造其它真菌菌株包括工业生产菌株具有潜在的应用价值。
技术实现思路
1、本发明要解决的技术问题是提供一种小蛋白sorf14905及其功能与应用,该小蛋白在提高纤维素酶、木聚糖酶产量中具有应用潜力。
2、为解决上述技术问题,本发明采用以下技术方案:
3、小蛋白sorf14905,具有seq.id.no.1的氨基酸序列。
4、上述小蛋白sorf14905,来源于草酸青霉。
5、上述小蛋白sorf14905的编码基因,具有seq.id.no.2的碱基序列。
6、上述小蛋白sorf14905或编码基因在调控微生物纤维素酶、木聚糖酶的合成过程的应用。
7、调控是正调控微生物在avicel液体培养基中的纤维素酶(如滤纸酶、羧甲基纤维素酶)、木聚糖酶的产量。
8、调控是通过调控有关基因表达实现;有关基因包括:纤维素酶基因cbh1、cbh2、eg1、eg2、bgl1、pox_e06915或pox_f07846;内切β-1,4-葡聚糖酶基因eg1、eg2或pox_f07846;β-葡萄糖苷酶基因bgl1或pox_e06915;木聚糖酶基因xyn1或pox_c04470。
9、微生物为草酸青霉。
10、重组微生物,将抑制sorf14905基因表达的生物元件导入微生物制备而得。
11、抑制sorf14905基因表达的生物元件为sorf14905基因敲除盒,它具有seq.id.no.3的碱基序列。
12、上述重组微生物,是以草酸青霉δpoxku70为出发菌株,敲除其sorf14905基因得到的重组菌株。
13、针对目前植物多糖降解酶产量低、成本高的问题,发明人在研究草酸青霉时发现了一种小蛋白sorf14905,具有seq.id.no.1的氨基酸序列。研究表明,该小蛋白sorf14905及其编码基因在调控微生物纤维素酶、木聚糖酶的合成过程发挥重要作用,在avicel液体培养条件下,sorf14905蛋白可以提高纤维素酶、木聚糖酶产量。本发明为深入研究草酸青霉小蛋白调控纤维素酶和木聚糖酶生物合成的机理提供了初步依据,在工业化、规模化木质纤维素生物炼制方面具有应用潜力。
1.一种小蛋白sorf14905,其特征在于具有seq.id.no.1的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的小蛋白sorf14905,其特征在于来源于草酸青霉。
3.权利要求1所述小蛋白sorf14905的编码基因,其特征在于具有seq.id.no.2的碱基序列。
4.权利要求1所述小蛋白sorf14905或权利要求3所述编码基因在调控微生物纤维素酶、木聚糖酶的合成过程的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:所述调控是正调控微生物在avicel液体培养基中的纤维素酶、木聚糖酶的产量。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于:所述调控是通过调控有关基因表达实现;所述有关基因包括:纤维素酶基因cbh1、cbh2、eg1、eg2、bgl1、pox_e06915或pox_f07846;内切β-1,4-葡聚糖酶基因eg1、eg2或pox_f07846;β-葡萄糖苷酶基因bgl1或pox_e06915;木聚糖酶基因xyn1或pox_c04470。
7.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:所述所述微生物为草酸青霉。
8.一种重组微生物,其特征在于将抑制sorf14905基因表达的生物元件导入微生物制备而得。
9.根据权利要求7所述的重组微生物,其特征在于:所述抑制sorf14905基因表达的生物元件为sorf14905基因敲除盒,它具有seq.id.no.3的碱基序列。
10.根据权利要求7所述的重组微生物,其特征在于是以草酸青霉δpoxku70为出发菌株,敲除其sorf14905基因得到的重组菌株。
