本发明属于生物医药，尤其涉及一种基于核酸的多通道ca2+纳米调制器及其制备方法、应用。
背景技术：
1、有效治疗癌症是一项亟待解决的挑战，它可以挽救数百万人的生命。近年来，研究人员开发了许多治疗癌症的方法，如光热疗法、光动力疗法、免疫疗法等。虽然取得了一定的成果，但仍存在一些制约其应用的难题，如氧气浓度有限、近红外穿透力不足、细胞多药耐药性等。线粒体作为细胞的“能量工厂”，为细胞的正常生命活动提供能量。线粒体还参与细胞凋亡、分化和细胞信息传递等过程，并具有调节细胞生长和细胞周期的能力。研究表明，线粒体代谢和线粒体功能异常与肿瘤细胞的增殖和转移有关。以破坏线粒体功能为目标的疗法正在成为一种有吸引力的抗癌策略。
2、ca2+作为最重要的第二信使，参与调节各种生理过程，与生物信号传导密切相关。然而，当细胞内ca2+平衡被破坏时，异常的ca2+超载将引发一系列线粒体紊乱，包括线粒体膜电位(mmp)降低、三磷酸腺苷(atp)水平下降以及线粒体介导的细胞凋亡途径被激活。最近，基于ca2+超载的抗癌疗法越来越受到关注。但细胞内ca2+的一定浓度限制了ca2+超载的治疗效果。因此，有效提高细胞内ca2+浓度成为增强ca2+超载的关键因素。目前，提高细胞内ca2+浓度主要有两种方法：第一种是向细胞内输送外源性ca2+，第二种是阻断细胞内ca2+的外排。然而，单一调控对改善ca2+超载的作用有限，而同时实现两种调控的结合则能显著改善ca2+超载。
3、基于ca2+的生物矿化被认为是一种生物安全性极高的癌症治疗策略。这种策略通常利用螯合剂收集游离ca2+，通过矿化作用进一步在肿瘤细胞表面或细胞器内形成钙化层，阻断其正常功能，从而抑制细胞生长和增殖。有报道称，核酸是优良的ca2+螯合剂，核酸中的磷酸基团可为ca2+矿化提供有效而充分的反应位点，然而，其在活细胞中的应用尚未见报道。
技术实现思路
1、本发明提供了一种基于核酸的多通道ca2+纳米调制器的制备方法，所述多通道ca2+纳米调制器是通过acp@c负载核苷酸序列如seq id no.1所示的cy5.5-dna制得的。
2、优选地，所述多通道ca2+纳米调制器的制备方法如下：
3、将45-55μg acp@c粉末溶于0.5-1.5ml 8-12mm hepes缓冲液中，然后加入1-3μl90-110μm dna，室温孵育0.8-1.2h，离心收集沉淀acp@c-d，所述acp@c-d即为基于核酸的多通道ca2+纳米调制器。
4、更优选地，所述acp@c粉末的使用量为50μg。
5、更优选地，所述hepes缓冲液的使用量为1ml，浓度为10mm。
6、更优选地，所述dna的使用量为2μl，浓度为100μm。
7、更优选地，所述室温孵育时间为1h。
8、更优选地，所述acp@c的制备方法如下：将0.8-1.2ml浓度为4-6mg/ml的cur加入到27-31ml 0.8-1.2mm ca(no3)2·4h2o溶液中，室温下搅拌0.5-1.5h，然后缓慢加入27-31ml0.5-0.7mm(nh4)2hpo4溶液到上述溶液中。
9、更优选地，所述cur的浓度为5mg/ml，体积为1ml，ca(no3)2·4h2o溶液的浓度为1mm，体积为29ml，(nh4)2hpo4溶液的浓度为0.67mm，体积为29ml。
10、本发明还提供了一种由上述制备方法制得的基于核酸的多通道ca2+纳米调制器。
11、本发明还提供了上述基于核酸的多通道ca2+纳米调制器在制备抗肿瘤药物中的应用。
12、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
13、本发明构建了一种基于核酸的ca2+纳米调节剂(acp@c-d)，以多种方式破坏线粒体功能，用于癌症治疗。如图1所示，通过共沉淀法将钙离子外流抑制剂姜黄素(cur)载入无定形磷酸钙(acp)，然后在其表面吸附cy5.5标记的dna适体，由此产生的acp@c-d可用于促进线粒体功能障碍介导的癌症治疗的双重途径，并已证明具有以下优点：(1)acp@c-d易于合成，可有效装载药物。(2)acp@c-d可在tme处崩解并释放cur和ca2+，从而提高治疗的准确性。(3)ca2+的迸发性增加可有效增强ca2+超载。(4)释放的cur不仅能阻止ca2+的外流，还能促进ca2+从内质网流向线粒体，从而进一步放大ca2+超载。(5)cy5.5的线粒体靶向性使线粒体中的dna合体富集，并为ca2+提供足够且高效的螯合位点，实现线粒体生物矿化。(6)所构建的纳米调制器的所有成分都是可生物降解和生物吸收的材料，具有良好的生物安全性。总之，该纳米调节剂是一种前景广阔的纳米药物，可为基于线粒体的肿瘤治疗提供有价值的参考。
1.一种基于核酸的多通道ca2+纳米调制器的制备方法，其特征在于，所述多通道ca2+纳米调制器是通过acp@c负载核苷酸序列如seq id no.1所示的cy5.5-dna制得的。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述多通道ca2+纳米调制器的制备方法如下：
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述acp@c粉末的使用量为50μg。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述hepes缓冲液的使用量为1ml，浓度为10mm。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述dna的使用量为2μl，浓度为100μm。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述室温孵育时间为1h。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述acp@c的制备方法如下：将0.8-1.2ml浓度为4-6mg/ml的cur加入到27-31ml 0.8-1.2mm ca(no3)2·4h2o溶液中，室温下搅拌0.5-1.5h，然后缓慢加入27-31ml 0.5-0.7mm(nh4)2hpo4溶液到上述溶液中。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述cur的浓度为5mg/ml，体积为1ml，ca(no3)2·4h2o溶液的浓度为1mm，体积为29ml，(nh4)2hpo4溶液的浓度为0.67mm，体积为29ml。
9.一种由权利要求1-6或8任一项所述的制备方法制得的基于核酸的多通道ca2+纳米调制器。
10.权利要求9所述的基于核酸的多通道ca2+纳米调制器在制备抗肿瘤药物中的应用。
