本发明属于生物医药，具体涉及一种靶向实验性自身免疫性神经炎的仿生纳米脂质体及其制备方法和用途。
背景技术：
1、神经系统疾病是严重危害人类健康的疾病之一，神经损伤后的治疗、再生和功能恢复是医学领域的历史性难题。吉兰巴雷综合征(guillain-barrésyndrome,gbs)是一种感染后自身免疫介导的周围神经系统疾病，其症状通常表现为肌无力，从双下肢开始逐渐上升，最终可能涉及支持呼吸、循环和消化的肌肉。在重症情况下，可能引发颈肌和呼吸肌无力，导致呼吸困难。目前针对吉兰巴雷综合征的治疗手段主要包括静脉注射免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin，ivig)和血浆置换(plasma exchange，pe)。尽管接受了标准的免疫治疗，仍有大约5％的人死亡，高达20％的人在发病一年后无法独立行走。单纯的免疫调节虽然可以起到治疗作用，但是对于已经受损的周围神经修复作用甚微。
2、gbs确切的发病机制尚未完全明确，研究gbs的实验模型对于理解其病理机制和开发新的治疗方法至关重要。实验性自身免疫性神经炎(experimentalautoimmuneneuritis,ean)是gbs常用的动物模型，它能够模拟gbs的多种病理特征，包括周围神经的炎症和脱髓鞘，以及免疫细胞的浸润。ean模型通过注射特定的抗原，如神经节苷脂或多肽，诱导动物产生免疫反应，进而引发神经损伤。该模型有助于研究gbs的免疫病理机制，包括th1和th17细胞的作用，以及细胞因子如肿瘤坏死因子α(tnf-α)和干扰素γ(ifn-γ)的影响。虽然ean是一种实验模型，但是对于研究吉兰巴雷综合征的病理过程以及开发新的治疗方法具有重要意义。对于实验性自身免疫性神经炎(ean)有靶向治疗作用的药物对于治疗吉兰巴雷综合征有巨大的潜力。
3、壳囊孢菌素b(cytosporone b，csnb)是nr4a1的天然激动剂。现有研究(yu,h.,etal.,nr4a1 agonist cytosporone b attenuates neuroinflammation in a mouse modelof multiple sclerosis.neural regeneration research,2022.17(12):p.2765.)认为csnb可抑制th1、th17细胞的分化、增加巨噬细胞向抗炎表型极化，具有调节免疫并抑制炎症的作用。红景天苷(salidroside,sal)是红景天的主要药效成分，具有神经保护活性，研究表明(li,j.,et al.,salidroside promotes sciatic nerve regeneration followingcombined application epimysium conduit and schwann cells in rats.exp biol med(maywood),2020.245(6):p.522-531.或liu,h.,et al.,the proliferation enhancingeffects of salidroside on schwann cells in vitro.evidence-based complementaryand alternative medicine,2017.2017:p.1-10.)红景天苷可以促进体外雪旺细胞的增殖及大鼠坐骨神经的再生。但是壳囊孢菌素b和红景天苷是否可以改善实验性自身免疫性神经炎的发生发展尚未可知。同时，csnb价格昂贵，sal在体内半衰期短、生利用度低以及制药过程中容易受光线、温度等影响，因此限制了它们在疾病治疗中的应用。
4、仿生纳米脂质体是一种新型药物递送系统，它通过模拟细胞膜结构来提高药物的生物相容性、靶向性和治疗效率。这种技术利用了不同种类的细胞膜来修饰纳米载体，例如红细胞、血小板、干细胞、巨噬细胞、肿瘤细胞以及细菌等的膜，从而赋予纳米载体更好的体内循环时间和靶向性。然而如何得到一种靶向实验性自身免疫性神经炎且对自身免疫性神经炎有治疗作用的仿生纳米脂质体需要进一步研究。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一种靶向实验性自身免疫性神经炎的仿生纳米脂质体及其制备方法和用途。
2、本发明提供了一种靶向实验性自身免疫性神经炎的仿生纳米脂质体，它是在载壳囊孢菌素b和红景天苷的脂质体外层包裹仿生细胞膜，再在仿生细胞膜表面修饰磷脂化透明质酸而得。
3、进一步地，所述载壳囊孢菌素b和红景天苷的脂质体的制备方法包括如下步骤：
4、(1)将大豆卵磷脂、胆固醇、壳囊孢菌素b溶于有机溶剂中，旋转蒸发后除去有机溶剂，得到薄膜；
5、(2)在薄膜中加入含红景天苷的水合介质进行水化，即得。
6、进一步地，
7、步骤(1)中，所述大豆卵磷脂和胆固醇的质量比为(2～4):1；
8、和/或，步骤(1)中，所述大豆卵磷脂和壳囊孢菌素b的质量比为(5～20):1；
9、和/或，步骤(1)中，所述有机溶剂为氯仿或甲醇；
10、和/或，步骤(2)中，所述红景天苷和步骤(1)中的大豆卵磷脂的质量比为1:(1～4)；
11、和/或，步骤(2)中，所述含红景天苷的水合介质与大豆卵磷脂的体积质量比为(1～4)ml:2mg；
12、优选地，
13、步骤(1)中，所述大豆卵磷脂和胆固醇的质量比为2:1；
14、和/或，步骤(1)中，所述大豆卵磷脂和壳囊孢菌素b的质量比为10:1；
15、和/或，步骤(2)中，所述红景天苷和步骤(1)中的大豆卵磷脂的质量比为1:2；
16、和/或，步骤(2)中，所述含红景天苷的水合介质与大豆卵磷脂的体积质量比为1ml:2mg。
17、进一步地，
18、步骤(2)中，所述水合介质为ph为7.4的磷酸盐缓冲液；
19、和/或，步骤(2)中，水合后过粒径为0.22μm的微孔滤膜。
20、进一步地，所述仿生细胞膜为巨噬细胞膜。
21、进一步地，所述磷脂化透明质酸的制备方法包括如下步骤：
22、将透明质酸、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺、n-羟基琥珀酰亚胺和dspe-peg2000-nh2溶解在pbs缓冲液中并进行搅拌反应，透析后冷冻干燥，即得；
23、优选地，
24、所述透明质酸、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺、n-羟基琥珀酰亚胺和dspe-peg2000-nh2的质量比为1:(1～5):(1～10):5；
25、和/或，所述反应的温度为25～40℃。
26、本发明还提供了一种制备前述的仿生纳米脂质体的方法，它包括如下步骤：
27、1)将载壳囊孢菌素b和红景天苷的脂质体与仿生细胞膜的pbs缓冲液混合后搅拌，得到外层包裹仿生细胞膜的脂质体；
28、2)将外层包裹仿生细胞膜的脂质体与磷脂化透明质酸的pbs缓冲液混合后搅拌，即得。
29、进一步地，
30、步骤1)中，所述脂质体中大豆卵磷脂与仿生细胞膜的质量比为(10～20):1；
31、和/或，步骤1)中，所述搅拌的温度为25～37℃，转速为800～1000rpm，时间为1～4小时；
32、和/或，步骤2)中，所述脂质体中大豆卵磷脂与磷脂化透明质酸的质量比为(20～60):1；
33、和/或，步骤2)中，所述搅拌的温度为25～37℃，转速为800～1000rpm，时间为0.5～2小时；
34、优选地，
35、步骤1)中，所述脂质体中大豆卵磷脂与仿生细胞膜的质量比为10:1；
36、和/或，步骤2)中，所述脂质体中大豆卵磷脂与磷脂化透明质酸的质量比为20:1。
37、本发明还提供了前述的仿生纳米脂质体在制备预防和/或治疗自身免疫性神经炎的药物中的用途；
38、优选地，所述自身免疫性神经炎为实验性自身免疫性神经炎。
39、进一步地，所述药物为预防和/或治疗吉兰巴雷综合征的药物。
40、与现有技术相比，本发明的有益效果为：
41、(1)本发明制备的仿生纳米脂质体结构与细胞膜结构类似，都是由磷脂和胆固醇组成，安全性较高，其作为药物载体不会对机体产生毒/副作用；
42、(2)本发明制备的仿生纳米脂质体中负载了壳囊孢菌素b(csnb)和红景天苷(sal)，利用csnb的免疫调节作用和sal的促神经增殖作用可以达到免疫平衡和神经修复的目的，进而缓解实验性自身免疫性神经炎的进展；
43、(3)本发明将巨噬细胞的细胞膜修饰于脂质体表面，达到躲避网状内皮吞噬系统监视，增加脂质体在血液中的稳定性，延长药物循环半衰期的目的。同时，本发明脂质体通过修饰磷脂化透明质酸提高靶向性，实现实验性自身免疫性神经炎防治效果的最大化；
44、(4)本发明解决了csnb和sal在体内生物利用度低和药物毒副作用的问题，为开发新型防治实验性自身免疫性神经炎的药剂及相关临床预防和治疗提供新理论支持，具有原始创新性、良好的社会经济效益和广阔的应用前景，可为今后临床转化提供理论基础。
45、综上，本发明提供了一种靶向实验性自身免疫性神经炎的仿生纳米脂质体，该仿生纳米脂质体同时包载壳囊孢菌素b(csnb)和红景天苷(sal)，在具有仿生膜免疫逃逸效果的同时，可将csnb和sal靶向递送至炎性神经部位，在调节免疫平衡的同时促进已受损的周围神经恢复，缓解实验性自身免疫性神经炎的发生发展，从而对实验性自身免疫性神经炎的损伤部位进行针对性治疗。本发明仿生纳米脂质体还能延长药物半衰期，提高药物生物利用度，减少药物对机体的毒副作用，使用时安全性更好。因此，本发明仿生纳米脂质体有望用于对自身免疫性神经炎疾病(如吉兰巴雷综合征)的防治，具有良好的临床应用前景。
46、显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
47、以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
1.一种靶向实验性自身免疫性神经炎的仿生纳米脂质体，其特征在于：它是在载壳囊孢菌素b和红景天苷的脂质体外层包裹仿生细胞膜，再在仿生细胞膜表面修饰磷脂化透明质酸而得。
2.根据权利要求1所述的仿生纳米脂质体，其特征在于：所述载壳囊孢菌素b和红景天苷的脂质体的制备方法包括如下步骤：
3.根据权利要求2所述的仿生纳米脂质体，其特征在于：
4.根据权利要求3所述的仿生纳米脂质体，其特征在于：
5.根据权利要求1所述的仿生纳米脂质体，其特征在于：所述仿生细胞膜为巨噬细胞膜。
6.根据权利要求1所述的仿生纳米脂质体，其特征在于：所述磷脂化透明质酸的制备方法包括如下步骤：
7.一种制备权利要求1～6任一项所述的仿生纳米脂质体的方法，其特征在于：它包括如下步骤：
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：
9.权利要求1～6任一项所述的仿生纳米脂质体在制备预防和/或治疗自身免疫性神经炎的药物中的用途；
10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于：所述药物为预防和/或治疗吉兰巴雷综合征的药物。
