本发明涉及生物，尤其是涉及一种细胞分选稀释试剂、试剂盒及其应用、细胞分选方法。
背景技术：
1、如下陈述仅提供与本发明有关的背景信息，而不必然地构成现有技术。
2、cd34是目前公认的人造血干/祖细胞的表面标志物，脐带血中含有约1％的cd34阳性细胞(以下简称cd34+细胞)，且脐带血具有来源广泛、低免疫原性和易于储存等特点在临床应用方面更加方便，因此从脐带血中分离获得cd34+细胞是造血干/祖细胞研究和应用中非常关键的一步。
3、冻存脐带血是储存脐带血造血干细胞的主要方法，目前上市的脐带血造血干细胞产品均为冻存脐带血，首款获批的扩增脐带血造血干细胞产品(omisirge,gamida cell)亦来源于冻存脐带血。免疫磁珠分选是目前从脐带血中分离cd34+细胞进行后续应用的主要方法，包括从脐带血中进行直接免疫磁珠分选和经密度梯度离心获得单个核细胞后再进行免疫磁珠分选。
4、冻存脐带血复苏处理方式自1995年起，已有经典复苏方案，多数以冻存脐带血为材料的研究和产品均沿用该方案(rubinstein et al.)进行脐带血复苏。冻存脐带血的分选过程中，由于冻存复苏对细胞造成的不可避免的伤害，在分选过程中，极易出现细胞凝集、形成细胞团块。主要原因之一是粒细胞的破裂，释放出细胞内部粘性的遗传物质导致细胞结团；再者，是血小板凝聚导致的细胞结团。二者是导致细胞分选回收率低、纯度差、以及细胞活率低的主要原因。
5、目前基于冻存脐带血分选的预处理环节，均通过稀释离心去除冻存液中dmso成分后，再通过商品分选稀释液进行细胞重悬及分选流程。目前常规方式，是以pbs或dpbs为溶剂，添加bsa起到保护细胞的作用，添加抗凝剂(edta或枸橼酸钠)，与钙离子形成螯合物，阻止血液凝固，同时起到抗血小板聚集的作用，并通过dnase i消除白细胞(主要是粒细胞)破裂释放的内容物如dna，减少细胞粘连。常用分选稀释液如德国美天旎的分选稀释液。
6、然而，常规的商品稀释液多为牛血清白蛋白(bovine serum albumin,bsa)，对产品应用造成潜在安全风险，是生物疗法产品中需避免含有的成分之一，相应的，bsa的存在使产品的动物蛋白残留检测成本更高。同时，抗凝剂通过络合钙离子，减缓血小板聚集，但抗凝剂同样能够络合镁离子，这可能会削弱或使全能核酸酶失效，甚至导致二者一定程度上加剧细胞团块的形成，导致分选效果不稳定。
7、脐带血经冻存后与新鲜脐带血的活性存在较大差异，在分离cd34+细胞过程中多个关键工艺环节均会影响分离所得细胞的数量、活力和功能，因此探索出一种高效的从冻存脐带血中分离cd34+细胞的方法，对提高冻存脐带血应用价值以及其后续研究和应用效果至关重要。
8、有鉴于此，特提出本发明。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种细胞分选稀释试剂，及利用该细胞分选稀释试剂的细胞分选方法，以缓解现有技术中细胞分选试剂和方法的缺陷。
2、为解决上述技术问题，本发明特采用如下技术方案：
3、第一方面，提供了一种细胞分选稀释试剂，该细胞分选稀释试剂含有血清白蛋白和抗氧化剂，所述抗氧化剂包括乙酰半胱氨酸和/或烟酰胺。
4、第二方面，还提供了一种细胞分选试剂盒，该细胞分选试剂盒包含第一方面的细胞分选稀释试剂。
5、第三方面，还提供了第一方面的细胞分选稀释试剂，或第二方面的细胞分选试剂盒在细胞分选中的应用。
6、第四方面，还提供了一种细胞分选方法，该细胞分选方法包括从分散在稀释液的细胞中分选目的细胞，所述稀释液含有第一方面的细胞分选稀释试剂。
7、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
8、本发明提供的细胞分选稀释试剂，包括血清白蛋白和抗氧化剂，其中抗氧化剂包括乙酰半胱氨酸和/或烟酰胺。本发明选用的抗氧化剂具有cde备案，在临床中有广泛应用经验，副作用极低，具有安全、易获取、价格经济等优势。本发明提供的细胞分选稀释试剂通过添加抗氧化剂替代抗凝剂，能够更好保护细胞状态，实现减少细胞聚集的同时增加对细胞的保护作用，提高分离效率和细胞分选效果。该细胞分选稀释试剂用于从冻存的脐带血中分选cd34+细胞，可以稳定、高效地获取cd34+细胞和cd34-细胞，实现高效利用脐带血资源。
1.一种细胞分选稀释试剂，其特征在于，含有血清白蛋白和抗氧化剂，所述抗氧化剂包括乙酰半胱氨酸和/或烟酰胺。
2.根据权利要求1所述的细胞分选稀释试剂，其特征在于，所述乙酰半胱氨酸的工作浓度为0.1～2mm，优选为1mm；
3.根据权利要求1所述的细胞分选稀释试剂，其特征在于，所述血清白蛋白的工作浓度为0.5～5％w/v；
4.根据权利要求1～3任一项所述的细胞分选稀释试剂，其特征在于，所述细胞分选稀释试剂含有人血清白蛋白、抗氧化剂、右旋糖苷40和生理盐水；
5.细胞分选试剂盒，其特征在于，包含权利要求1～4任一项所述的细胞分选稀释试剂。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，还包括复苏稀释试剂，所述复苏稀释试剂包括血清白蛋白和右旋糖苷40；
7.权利要求1～4任一项所述的细胞分选稀释试剂，或权利要求5或6所述的细胞分选试剂盒在细胞分选中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述应用包括在血液样本中分离目的细胞；
9.细胞分选方法，其特征在于，包括从分散在稀释液的细胞中分选目的细胞，所述稀释液含有权利要求1～4任一项所述的细胞分选稀释试剂。
10.根据权利要求9所述的细胞分选方法，其特征在于，所述分选目的细胞包括使用连接有抗体的固相载体分离所述目的细胞，所述抗体特异性结合所述目的细胞；
