一种NK细胞无血清培养基的制作方法

专利2025-12-14  4

本发明属于细胞培养,涉及一种nk细胞无血清培养基。


背景技术:

1、nk细胞作为人体免疫系统的重要细胞之一,在抗肿瘤、抗病毒等方面发挥着关键作用。正常人体内nk细胞主要存在于外周血循环中,占nk细胞总数的90%。但nk细胞在外周血中的中的比例含量少(只约占淋巴细胞的5%-7%),因此不管在实验研究还是临床治疗应用,nk细胞都必须进行体外培养和扩增,以达到理想的研究和治疗所需的状态。然而,传统的nk细胞培养方法多依赖于血清,这不仅增加了成本,还可能引入外源性病原体和不确定的生长因子,影响nk细胞的纯度和功能。

2、因此,开发一种无血清的nk细胞培养基,对于提高nk细胞的体外培养效率和安全性具有重要意义。


技术实现思路

1、鉴于现有技术中所存在的问题,本发明公开了一种nk细胞无血清培养基,采用的技术方案是,包括无血清基础培养基、脂肪酸负载白蛋白、聚肌胞、维生素、氨基酸、微量元素以及生长因子。

2、作为本发明的一种优选方案,所述无血清基础培养基选自dmem、rpmi 1640、x-vivo 15中的至少一种,用于促进nk细胞的增殖和活性。

3、作为本发明的一种优选方案,所述生长因子包括il-2、il-15和il-21中的至少一种。

4、作为本发明的一种优选方案,所述脂肪酸负载白蛋白通过将脂肪酸负载到无脂肪酸白蛋白上后,再将所获得的白蛋白溶液添加到基础培养基中制得。

5、作为本发明的一种优选方案,所述无血清培养基还包括抗氧化剂,以保护nk细胞免受氧化应激。

6、作为本发明的一种优选方案,所述抗氧化剂采用β-巯基乙醇。

7、作为本发明的一种优选方案,所述无血清培养基的培养条件为37℃,5%co2的饱和湿度环境。

8、作为本发明的一种优选方案,所述聚肌胞的含量为0.01-0.1%(w/v),用于诱导免疫细胞的分化、成熟或分泌细胞因子。

9、本发明的有益效果:可以有效降低对血清的依赖,降低生产成本,减少外源性污染,提高nk细胞的纯度和功能。



技术特征:

1.一种nk细胞无血清培养基,其特征在于:包括无血清基础培养基、脂肪酸负载白蛋白、聚肌胞、维生素、氨基酸、微量元素以及生长因子。

2.根据权利要求1所述的一种nk细胞无血清培养基,其特征在于:所述无血清基础培养基选自dmem、rpmi 1640、x-vivo 15中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的一种nk细胞无血清培养基,其特征在于:所述生长因子包括il-2、il-15和il-21中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的一种nk细胞无血清培养基,其特征在于:所述脂肪酸负载白蛋白通过将脂肪酸负载到无脂肪酸白蛋白上后,再将所获得的白蛋白溶液添加到基础培养基中制得。

5.根据权利要求1所述的一种nk细胞无血清培养基,其特征在于:所述无血清培养基还包括抗氧化剂,以保护nk细胞免受氧化应激。

6.根据权利要求5所述的一种nk细胞无血清培养基,其特征在于:所述抗氧化剂采用β-巯基乙醇。

7.根据权利要求1所述的一种nk细胞无血清培养基,其特征在于:所述无血清培养基的培养条件为37℃,5%co2的饱和湿度环境。

8.根据权利要求1所述的一种nk细胞无血清培养基,其特征在于:所述聚肌胞的含量为0.01-0.1%(w/v)。


技术总结
本发明涉及一种NK细胞无血清培养基。采用的技术方案是:包括包括无血清基础培养基、脂肪酸负载白蛋白、聚肌胞、维生素、氨基酸、微量元素、抗氧化剂以及生长因子,所述无血清基础培养基选自DMEM、RPMI 1640、X‑VIVO 15中的至少一种,用于促进NK细胞的增殖和活性,所述生长因子包括IL‑2、IL‑15和IL‑21中的至少一种,所述脂肪酸负载白蛋白通过将脂肪酸负载到无脂肪酸白蛋白上后,再将所获得的白蛋白溶液添加到基础培养基中制得,所述无血清培养基的培养条件为37℃,5%CO2的饱和湿度环境,所述聚肌胞的含量为0.01‑0.1%(w/v),用于诱导免疫细胞的分化、成熟或分泌细胞因子。本发明的有益效果:有效降低对血清的依赖,降低生产成本,提高NK细胞的纯度和功能。

技术研发人员:杨怀军,王端贺,杨程,王开聚
受保护的技术使用者:上海循源生物科技有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/11/11
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