本发明涉及医药生物，具体而言，涉及globoh六糖、linker化合物、蛋白偶联物及免疫原性组合物在治疗或抑制上皮性肿瘤中的应用。
背景技术：
1、肿瘤糖基化异常是癌症生物学中的一个重要标志，肿瘤相关糖抗原（tumor-associated carbohydrate antigens, tacas）在肿瘤细胞表面的过度表达与在正常细胞中的无/低表达形成显著对比，相关糖抗原研究也是目前肿瘤治疗性抗体和治疗疫苗焦点。taca球状丝氨酸聚糖（globo h）是一种结构复杂的六糖化合物，globo h抗原在各种上皮细胞肿瘤（如乳腺、卵巢、结肠、胃、胰腺和肺癌）上过表达，正常细胞极低表达。其主要通过肿瘤免疫抑制、微血管生成及肿瘤蛋白激酶几方面实现促癌作用。这些发现使得globo h，一种六糖抗原表位，成为引人注目的肿瘤标记物以及癌症疫苗研发的可行标靶。
2、开发针对globo h的治疗疫苗或药物通过激活人体免疫系统，尤其是激活针对globo h的特异性抗体和细胞免疫反应，有望阻断这些促癌机制。由于肿瘤相关糖抗原分子量较小，缺乏尺寸效应和簇效应，具备强免疫原性，只能刺激b细胞产生低亲和的igm抗体，没有免疫记忆，因此需要与载体蛋白偶联形成糖缀合物，以诱导机体产生持久且可增强的igg抗体。
3、而糖-蛋白偶联策略对于最终的治疗疫苗效果极为关键，现有globo h采用下述的糖-蛋白偶联策略：1）还原胺化方法：反应条件苛刻，改变了抗原基础结构，伴随过度还原及其他副反应[1]；2）硫加成方法：含硫键在体内环境不稳定，易被还原或氧化，影响偶联产品的长期稳定性[2]；3）二硫键方法：二硫键强还原性，在体内有断裂的风险[3]；4）环加成方法：环状linker单元可能存在免疫原性问题[4]。现有技术存在糖-蛋白结合效率低，容易产生其他副反应或者免疫副作用，限制了现有globoh疫苗的免疫效果。
4、鉴于此，特提出本发明。
5、参考文献：
6、[1] gildersleeve, j., oyelaran, o., simpson, j.,&allred, b. e.(2008). improved procedure for direct coupling of carbohydrates to proteinsvia reductive amination. bioconjugate chemistry, 19(7), 1485-1490.
7、[2] smith, a. m.,&brown, s. p. (2015). thiol-mediated conjugation ofsugars to proteins. bioconjugate chemistry, 26(3), 531-540.
8、[3] sadowsky, j., pillow, t. h., chen, j., fan, f., he, c., wang, y.,...&wai, j. (2017). development of efficient chemistry to generate site-specific disulfide-linked protein- and peptide-payload conjugates:application to thiomab antibody-drug conjugates. bioconjugate chemistry, 28(8), 2086-2098.
9、[4] bruins, j. j., blanco-ania, d., van der doef, v., van delft, f.v.,&albada, b. (2018). orthogonal, dual protein labelling by tandemcycloaddition of strained alkenes and alkynes to ortho-quinones and azides.chemical communications, 54(53), 7338-7341.
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供globoh六糖、linker化合物、蛋白偶联物及免疫原性组合物在治疗或抑制上皮性肿瘤中的应用以解决上述技术问题。
2、第一方面，本发明提供了一种式i所示的化合物或其立体异构体、溶剂化物、水合物、前药、稳定的同位素衍生物及药学上可接受的盐在制备用于治疗或抑制上皮性肿瘤生长的药物或疫苗中的应用，
3、。
4、第二方面，本发明提供了一种linker化合物在制备用于治疗或抑制上皮性肿瘤生长的药物或疫苗中的应用，linker化合物包括双活化酯linker和式i所示的化合物或其立体异构体、溶剂化物、水合物、前药、稳定的同位素衍生物及药学上可接受的盐，双活化酯linker与式i所示的化合物的氨基酰胺缩合；
5、。
6、第三方面，本发明提供了一种蛋白偶联物在制备用于治疗或抑制上皮性肿瘤生长的药物或疫苗中的应用，蛋白偶联物，其包括载体蛋白和上述的linker化合物，载体蛋白与linker化合物通过酰胺缩合。
7、第四方面，本发明提供了一种免疫原性组合物，其包括上述的蛋白偶联物和佐剂。
8、第五方面，本发明提供了上述的免疫原性组合物在制备用于治疗或抑制上皮性肿瘤生长的药物中的应用。
9、本发明具有以下有益效果：
10、本发明基于酰胺缩合的方式进行的糖-蛋白偶联，具备副反应小、生物兼容性强、不产生额外免疫原性的技术优势。globoh六糖可以通过连接子（linker）而与载体蛋白复合，用于制备治疗癌症或抑制上皮性肿瘤生长的药物或疫苗。通过与佐剂搭配，制备相应的免疫原性组合物，通过免疫检测，受试者体内能产生较高的体液免疫和细胞免疫效果，能在受试者体内诱导产生较高的igg、igm、igg抗体亚型的抗体滴度。本发明提供的免疫原性组合物免疫受试者后，产生的抗体对肿瘤细胞具有特异性结合效果，特异性抗体引发的cdc反应对肿瘤细胞具有强杀伤效果。因此，本发明提供的globoh六糖、linker化合物、蛋白偶联物在制备抑制上皮性肿瘤的药物或疫苗中具有良好的应用前景。蛋白偶联物与佐剂配合后的免疫原性组合物在制备抑制上皮性肿瘤的疫苗中也具有良好的应用前景。
1.一种式i所示的化合物或其立体异构体、溶剂化物、水合物、前药、稳定的同位素衍生物及药学上可接受的盐在制备用于治疗或抑制上皮性肿瘤生长的药物或疫苗中的应用，其特征在于，
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述上皮性肿瘤选自乳头状瘤、胃肠癌、子宫癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌、腺癌、乳腺癌、腺瘤和鳞癌中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物或疫苗用于诱导如下至少一种抗体的产生：
4.一种linker化合物在制备用于治疗或抑制上皮性肿瘤生长的药物或疫苗中的应用，其特征在于，所述linker化合物包括双活化酯linker和式i所示的化合物或其立体异构体、溶剂化物、水合物、前药、稳定的同位素衍生物及药学上可接受的盐，所述双活化酯linker与式i所示的化合物的氨基酰胺缩合；
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述双活化酯linker选自下述结构式所示化合物：
6.一种蛋白偶联物在制备用于治疗或抑制上皮性肿瘤生长的药物或疫苗中的应用，其特征在于，
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述载体蛋白是白喉毒素交叉反应性材料197、白喉类毒素、破伤风类毒素或牛血清白蛋白。
8.一种免疫原性组合物，其特征在于，其包括权利要求6-7任一项中所述的蛋白偶联物和佐剂。
9.根据权利要求8所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述佐剂选自toll样受体激动剂、rig-i样受体激动剂、nod样受体激动剂、c-型凝集素受体、sting激动剂、细菌毒素及其衍生物、皂苷类、细胞因子和其他佐剂中的至少一种；所述其他佐剂选自热激蛋白、a151、gtp-gdp、氟化钠、烷基聚丙烯酯多聚体、二甲基双十八烷基季胺溴化物、脂质体、铝佐剂、mf59、as03、α-galcer、脂多糖和rc-529佐剂的至少一种。
10.如权利要求8-9任一项所述的免疫原性组合物在制备用于治疗或抑制上皮性肿瘤生长的药物中的应用。
