本发明属于植物提取方法，具体涉及丹参提取物及其制备方法和应用。
背景技术：
1、丹参为唇形科植物丹参的干燥根和根茎，主产于山东、陕西、山西、河北、安徽、四川、江苏等地，味苦，微寒，归心、肝经，具有活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈等功效。临床用于治疗胸痹心痛、脘腹胁痛、瘕积聚、热痹疼痛、疮疡肿痛等，是最常用的活血化瘀中药之一。
2、丹参中的化学成分主要分为脂溶性成分、水溶性成分和其它类成分，其中脂溶性成分包括丹参酮类、挥发油类等，水溶性成分主要为酚酸类，其它类成分主要有黄酮类、多糖类、无机盐类等。
3、近年来研究认为，丹参水溶性有效成分是活化化瘀的有效成分。例如，丹酚酸a对缺血再灌注引起的心肌细胞损伤有明显的保护作用，总丹酚酸表现较强的抗缺血再灌注心律失常作用；丹酚酸a、丹酚酸b以及总丹酚酸对小鼠脑缺血再灌注引起的脑损伤有保护作用，可以减少脑组织中mda含量；丹酚酸抗血栓作用：丹酚酸对肝肾的保护作用；丹酚酸具有很强的抗氧化作用，可以清除超氧阴离子和释基自由基，抑制脂质过氧化反应，等等。
4、研究显示，丹参酚酸b易受热分解，且不耐热，在提取过程中有较多杂质析出。因此，在工业生产中对于丹参酚酸b的精制有一定难度。近年来，有关丹参酚酸b的提取工艺研究有较多报道，包括醇沉工艺、水煎煮、大孔树脂纯化等。中国专利cn112439004a公开了一种丹参提取物及其制备方法和应用，所述的丹参提取物是将丹参用亲水性溶剂与水的混合溶剂提取得到的粗提物浸膏混悬于水中后，先用石油醚萃取再用乙酸乙酯萃取，所得乙酸乙酯萃取部位即为所述丹参提取物，并且，所述丹参提取物中不含有丹参酮ⅱa和隐丹参酮。研究结果显示：该发明提供的丹参提取物在不抑制金黄色葡萄球菌生长的情况下，不仅能够抑制金黄色葡萄球菌的毒力，可降低其致病力，而且不易产生耐药，对金黄色葡萄球菌感染有显著治疗效果，可望作为活性组分用于制备抗金黄色葡萄球菌毒力的药物，为新型抗菌药物的研发奠定基础。中国专利cn109568217a公开了一种丹参提取物的制备方法及其在祛痘中的应用。该方法包括如下步骤：(1)将丹参粉碎，得到丹参粉末；(2)将重量百分比为50％～80％的乙醇溶液的ph值调节至碱性，得到碱性乙醇溶液；(3)将步骤(2)中得到的碱性乙醇溶液加入到步骤(1)中得到的丹参粉末中进行提取，得到初提液；然后将初提液的ph值调节至酸性，静置、离心，得到离心液；再将离心液用超滤膜进行超滤，得到丹参提取物。该发明的方法简单易行，条件易控制，原料利用率高，通过本发明的方法提取得到的丹参提取物中能够同时含有丹参酚酸、丹参多糖和丹参酮，能够有效控制由于皮脂分泌旺盛导致的痤疮，因此，可将其应用于祛痘类化妆品中。但上述专利均并未给出其提取方法对丹参有效成分的提取率有何提高，且对于丹参提取物中丹参酚酸b的活性是否有影响也无法知晓，其提取率还有待提高。
5、因此，本领域亟急一种可提高丹参提取物中有效成分提取率且对丹参酚酸b的活性影响较小的制备方法。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种丹参提取物及其制备方法和应用，该丹参提取物的制备方法提取率高，操作方便，获得的丹参提取物中有效成分含量高，具有极大的应用前景。
2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
3、一种丹参提取物的制备方法，包括以下步骤：
4、s1、丹参粉末的制备：将丹参药材进行低温粉碎，过筛，得到丹参粉末；
5、s2、提取助剂的制备：将羟丙基-β-环糊精加入去离子水中，接着加入含虎杖苷、虾青素的混合溶液，混合均匀后进行超声处理，处理完成后加入单甘油脂肪酸酯，在恒定的转速下搅拌均匀，再进行高速均质，均质完成后减压浓缩，得到提取助剂；
6、s3、丹参水提液的制备：将步骤s1中的丹参粉末加入去离子水，接着加入提取助剂，进行水提，水提完成后过滤，得到丹参水提液和滤渣，备用；
7、s4、滤渣提取液的制备：将步骤s3中的滤渣加入酸性乙醇溶液中，接着加入复合酶，搅拌均匀后加入提取助剂，随后进行超声处理，处理完成后灭酶、过滤，得到滤渣提取液；
8、s5、丹参提取物的制备：将步骤s3中的丹参水提液、步骤s4中的滤渣提取液混合均匀，减压浓缩，喷雾干燥，即得所述丹参提取物。
9、优选的，步骤s1中所述低温粉碎的温度为-80～-60℃，所述过筛的目数为200-400目。
10、在本发明中，粉碎可使丹参粉粒径大小均匀，比表面积增大，有利于提高提取率，但粉碎过细会使得丹参粉末之间易团聚，溶剂难于穿透，不利于提取，因此粉碎的目数在控制在200-400目之间。
11、更优选的，步骤s1中所述低温粉碎的温度为-80～-70℃，所述过筛的目数为200-300目。
12、在本发明中，通过低温下粉碎，使丹参内部的细胞液处理冷冻状态，可以减少丹参破碎时由于细胞液流出从而导致有效成分的损失，提高提取物中有效成分的含量。
13、优选的，步骤s2中所述混合溶液的制备方法如下：将5-10g虎杖苷、5-10g虾青素加入100g无水乙醇中，搅拌均匀即得；所述羟丙基-β-环糊精、去离子水、混合溶液、单甘油脂肪酸酯的质量比为20-30:200-300:50-60:5-8。
14、更优选的，骤s2中所述混合溶液的制备方法如下：将7-10g虎杖苷、5-8g虾青素加入100g无水乙醇中，搅拌均匀即得；所述羟丙基-β-环糊精、去离子水、混合溶液、单甘油脂肪酸酯的质量比为25-30:250-300:50-65:7-8。
15、优选的，步骤s2中所述超声处理的功率为200-300w，温度为40-50℃，时间为30-40min；所述搅拌的速度为200-300r/min，时间为20-30min；所述高速均质的转速为2000-3000r/min，时间为5-8min；所述减压浓缩的压力为30-40kpa，浓缩至原体积的1/2。
16、更优选的，步骤s2中所述超声处理的功率为250-300w，温度为45-50℃，时间为30-35min；所述搅拌的速度为250-300r/min，时间为25-30min；所述高速均质的转速为2500-3000r/min，时间为5-7min；所述减压浓缩的压力为30-35kpa，浓缩至原体积的1/2。
17、在本发明中，制备的提取助剂以羟丙基-β-环糊精为原料，通过加入虎杖苷、虾青素，使三者形复合物，最后加入表面活性剂单甘油脂肪酸酯，使提取助剂能有效的在提取过程中起到增溶作用，提高丹参的提取率。
18、优选的，步骤s3中所述丹参粉末与去离子水的质量比为1:15-25；所述提取助剂的用量为去离子水的10-20％，所述水提的温度为70-80℃，时间为2-3h。
19、更优选的，步骤s3中所述丹参粉末与去离子水的质量比为1:20-25；所述提取助剂的用量为去离子水的15-20％，所述水提的温度为70-75℃，时间为2.5-3h。
20、在本发明中，通过对丹参粉末进行水提，使丹参中大部分水溶性有效成分提取出来，如丹参素、丹酚酸a、丹酚酸b等。
21、优选的，步骤s4中所述酸性乙醇溶液的制备方法如下：将4-7g柠檬酸加入100g无水乙醇中，搅拌均匀后于80℃加热1-2h即得；所述复合酶由质量比为3:1-3的纤维素酶和β-葡萄糖苷酶混合而成。
22、更优选的，步骤s4中所述酸性乙醇溶液的制备方法如下：将柠檬酸加入无水乙醇中，搅拌均匀后于80℃加热1.5-2h即得；所述复合酶由质量比为3:2-3的纤维素酶和β-葡萄糖苷酶混合而成。
23、优选的，步骤s4中所述滤渣与酸性乙醇溶液的质量比为1:15-20，所述复合酶用量为滤渣质量的4-8％，所述提取助剂的用量为酸性乙醇溶液质量的10-20％，所述超声处理的功率为300-400w，温度为40-50℃，时间为20-30min。
24、更优选的，步骤s4中所述滤渣与酸性乙醇溶液的质量比为1:15-18，所述复合酶用量为滤渣质量的6-8％，所述提取助剂的用量为酸性乙醇溶液质量为15-20％，所述超声处理的功率为350-400w，温度为45-50℃，时间为20-25min。
25、在本发明中，将滤渣在酸性乙醇溶液中通过复合酶与超声波联用的方法，进一步提取滤渣中的有效成分，纤维素酶和β-葡萄糖苷酶可降解丹参的细胞壁，使细胞壁内的有效成分释放，同时超声处理可提高酸性乙醇溶液对基体的穿透，从而提高丹参中脂溶性有效成分的提取率，如丹参酮ⅱa、丹参酮ⅱb和隐丹参酮等。
26、优选的，步骤s5中所述减压浓缩的压力的30-40kpa，浓缩至原体积的1/3。
27、更优选的，步骤s5中所述减压浓缩的压力的30-35kpa，浓缩至原体积的1/3。
28、在本发明，将丹参水提液与滤渣提取液进行混合，不仅提取高丹参的利用率，使丹参提取物中同时具有水溶性有效成分和脂溶性有效成分，具有更好的抗自由基氧化性能。
29、本发明还保护一种如上所述方法制备得到的丹参提取物。
30、本发明还保护一种如上所述丹参提取物在制备护肤品、化妆品、药品或保健品中的应用。
31、优选的，所述护肤品或化妆品为具有氧化、美白或防晒功效的化妆品或护肤品；所述药品或保健品为具有抗皮肤老化功效的药品或保健口。
32、与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：
33、(1)本发明提供的丹参提取物的制备方法，首先通过低温粉碎，将丹参粉碎成粉末，有利于提高丹参提取物的提取率，随后将羟丙基-β-环糊精、虎杖苷、虾青素、单甘油脂肪酸酯在特定的方法下制备提取助剂，通过在制备丹参水提液和滤渣提取液时加入提取助剂，羟丙基-β-环糊精在提取过程中可起到良好的增溶作用，提高丹参中有效成分的提取率，虎杖苷、虾青素具有良好的抗氧化性，与羟丙基-β-环糊精可形成包合物，可减少丹参提取过程中丹参酚酸b的热分解，提高丹参提物中丹参酚酸b的活性，单甘油脂肪酸酯作为表面活性剂，使丹参粉末分散更均匀，同时有助于提取溶剂(如去离子水、酸性乙醇溶液)与丹参粉末之间的接触，促进丹参中有效物质的释放和溶解，从而提高提取效率和产率；接着在滤渣提取液制备时将复合酶与超声提取联用，从而将丹参中脂溶性有效成分的最大程度的提取出来，提高的丹参的生物利用率，最后再将丹参水提液与滤渣提取液进行混合，使制备得到的丹参提取物具有更好的抗氧化性能。
34、(2)本发明提供的丹参提取物的制备方法，通过将多种方法进行联合提取及加入特定的提取助剂，加强了丹参细胞内物质的释放、扩散和溶解，从而显著提高提取效率，同时加入提取助剂也减少了提取过程中丹参提取物中有效成分的稳定性，保证了丹参提取物的质量。
1.一种丹参提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s1中所述低温粉碎的温度为-80～-60℃。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s2中所述混合溶液的制备方法如下：将5-10g虎杖苷、5-10g虾青素加入100g无水乙醇中，搅拌均匀即得；所述羟丙基-β-环糊精、去离子水、混合溶液、单甘油脂肪酸酯的质量比为20-30:200-300:50-60:5-8。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s2中所述超声处理的功率为200-300w，温度为40-50℃，时间为30-40min；所述搅拌的速度为200-300r/min，时间为20-30min；所述高速均质的转速为2000-3000r/min，时间为5-8min；所述减压浓缩的压力为30-40kpa，浓缩至原体积的1/2。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s3中所述丹参粉末与去离子水的质量比为1:15-25；所述提取助剂的用量为去离子水的10-20％，所述水提的温度为70-80℃，时间为2-3h。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s4中所述酸性乙醇溶液的制备方法如下：将柠檬酸加入无水乙醇中，搅拌均匀后于80℃加热1-2h即得；所述复合酶由质量比为3:1-3的纤维素酶和β-葡萄糖苷酶混合而成。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s4中所述滤渣与酸性乙醇溶液的质量比为1:15-20，所述复合酶用量为滤渣质量的4-8％，所述提取助剂的用量为酸性乙醇溶液质量的10-20％，所述超声处理的功率为300-400w，温度为40-50℃，时间为20-30min。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s5中所述减压浓缩的压力的30-40kpa，浓缩至原体积的1/3。
9.一种如权利要求1-8任一项所述方法制备得到的丹参提取物。
10.一种如权利要求9所述丹参提取物在制备护肤品、化妆品、药品或保健品中的应用。
