1.本发明属于中药分析及质量鉴别、控制技术领域，具体涉及一种清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别方法。
背景技术：2.清肝止淋汤是一种主治赤带的中药方剂，具体配方为白芍(醋炒)、当归(酒洗)和黑豆各37.30g，地黄(酒炒)18.65g，阿胶(白面炒)、粉丹皮各11.19g，黄柏、牛膝各7.46g，香附(酒炒)3.73g，大枣46g。清肝止淋汤的用法为用水煎服，具有养血清肝，扶脾止淋功效。
3.地黄是玄参科、地黄属多年生草本植物，其地下块根为黄白色，一般地黄是指生地黄，酒生怀地黄是由地黄用酒炒后制得，用酒炒制得的地黄其功用发生变化，性温，在临床上是治疗人类贫血、气血亏损及肝肾不足的良药。现有技术中，酒生怀地黄的制备方法通常为：将生怀地黄片，照酒炙法炒至微焦，每100kg生怀地黄，用黄酒12kg。
4.现有技术中，中药制剂中地黄的鉴定检测方法包括薄层色谱法，但是相应的检测方法仅适用于特定的药物。如公开号为cn103381217a的中国专利文献公开了一种六味补血胶囊的质量控制方法，其中，熟地黄的鉴定方法包括如下步骤：取熟地黄对照药材2.5g，剪碎，用粉碎机将其捣碎，加入50％甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液挥干，加入甲醇2ml使其溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录vib)试验，分别吸取对照药材溶液10μl，供试品溶液10μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝16∶1∶2为展开剂，展开，取出，晾干，用0.5％的2，2-二苯基-1-苦肼基无水乙醇溶液浸渍，晾干。
5.公开号为cn113009062a的中国专利文献公开了地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法，包括如下步骤：(1)取待测样品，制备供试品溶液；(2)取水苏糖标准品制备对照品溶液，或/和，取地黄对照药材制备对照药材溶液；(3)吸取供试品溶液以及对照品溶液或/和对照药材溶液，点于薄层板，以乙酸乙酯、乙醇、水、氨水体积比为(1.5～2.5)：(4.5～5.5)：(3.5～4.5)：(0.4～0.6)的混合物为展开剂展开，干燥，喷以硫酸乙醇显色，检视。
6.公开号为cn109709240a的中国专利文献公开了一种中药组合物的检测方法，该中药组合物中，熟地黄的鉴别方法包括：(1)供试品溶液制备：称取所述中药组合物，加入纯水溶解，用正丁醇萃取，静置，弃去正丁醇液，向水层加入无水乙醇，振荡，静置，弃去乙醇液，向沉淀加入甲醇，超声处理，滤过，蒸干滤液，冷却至室温，残渣加甲醇溶液溶解；(2)对照品溶液的制备：另取水苏糖对照品适量，加有机溶剂制成对照品的溶液；(3)薄层色谱鉴别：吸取供试品溶液和对照品溶液，以乙酸乙酯-甲醇-水-冰醋酸为展开剂展开，喷以硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。
7.上述方法均只适用于特定中药制剂中地黄的鉴别，且存在杂质组分干扰或中药制剂组成不同导致的干扰严重、斑点不清晰等问题。清肝止淋汤的组成复杂，多种多样结构相似的成分分离较为困难，开发一种易于显色、准确度高、适用于清肝止淋汤中酒生怀地黄的
鉴别方法至关重要。
技术实现要素：8.清肝止淋汤组成复杂，多种多样结构相似的成分分离较为困难，本发明提供了一种清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别方法，该方法易于显色、准确度高、能降低干扰组分的影响，且显色时间较短。
9.具体采用的技术方案如下：
10.一种清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别方法，包括以下步骤：
11.(1)制备供试品溶液
12.取清肝止淋汤样品，加水，超声处理，离心，取上清液；用乙酸乙酯振摇提取上清液，弃乙酸乙酯液，水液用正丁醇振摇提取后，取正丁醇液用氨水振摇提取，得到氨水液，蒸干，残渣加水溶解后过柱，最终将收集得到的洗脱液蒸干，残渣加有机溶剂溶解后得到供试品溶液；
13.(2)制备对照样品溶液
14.所述的对照样品溶液为阴性样品溶液和阳性样品溶液，阴性样品溶液为缺酒生怀地黄样品溶液，阳性样品溶液为酒生怀地黄对照药材溶液和梓醇对照品溶液；
15.(3)酒生怀地黄的鉴别
16.将供试品溶液和对照样品溶液点样于同一硅胶g薄层板，以丁二酸-异丙醇-氯仿为展开剂展开，干燥后，喷以硫酸-乙酸-乙醇溶液加热显色，检视。
17.清肝止淋汤样品组成复杂，本发明以梓醇为有效成分对其中的酒生怀地黄进行鉴别，梓醇是一种环烯醚萜葡萄糖苷类化合物，本发明首先利用水饱和正丁醇提取出其中的皂苷类物质；再利用氨水液洗去酸性物质，减少一些略显酸性的苷类物质；并进一步采用过柱步骤结合展开剂丁二酸-异丙醇-氯仿以及显色剂硫酸-乙酸-乙醇来降低薄层色谱中其他干扰组分的影响，保证色谱斑点清晰，阴性无干扰。
18.优选的，过柱步骤具体为：残渣加水溶解后通过d101型大孔吸附树脂柱，用水洗脱后弃去洗脱液，再用30％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液后蒸干；残渣加乙醇溶解，通过中性氧化铝柱，用乙醇洗脱后收集洗脱液蒸干；残渣加水溶解，通过c18固相萃取小柱，依次用水、10％甲醇溶液洗脱，收集得到洗脱液。
19.d101型大孔吸附树脂柱对于不带极性的有机化合物普遍吸附能力强，适用性较好，特别对皂甙类分离，纯化效果尤佳；中性氧化铝柱基于物理吸附发挥作用，对不同极性物质的吸附能力不同，在本发明中被用于除去高极性物质和鞣质物质；c18固相萃取小柱通过极性相互作用、疏水相互作用或离子交换等作用力选择性地保留目标物和少量与目标物性质相近的组分，再利用另一种溶剂体系选择性地把目标物洗脱下来，从而实现待测有效成分的纯化和富集。本技术结合d101型大孔吸附树脂柱-中性氧化铝柱-c18固相萃取小柱三步过柱处理，并结合适宜的样品溶剂以及洗脱溶剂，实现了目标组分梓醇的成功分离和富集，便于后续薄层色谱法的检测鉴定。
20.优选的，每1g清肝止淋汤样品对应的水的用量为12.5-25g；超声处理时间为20-40min；利用乙酸乙酯振摇提取2-3次后分别弃去乙酸乙酯液；正丁醇振摇提取2-3次后合并提取液得到正丁醇液；氨水振摇提取2-3次后合并提取液得到氨水液；所述的有机溶剂为乙
醇，每1g清肝止淋汤样品对应的有机溶剂为0.25-0.5ml。
21.具体的，供试品溶液的制备方法为：取清肝止淋汤样品2～4g，加水50ml，超声处理30min，离心5分钟，取上清液，用乙酸乙酯振摇提取两次，每次20ml，弃去乙酸乙酯液，水液用正丁醇振摇提取两次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨水振摇提取两次，每次20ml，合并氨水液，蒸干，残渣加水10ml溶解，通过d101型大孔吸附树脂柱，依次用水50ml洗脱，弃去洗脱液，再用30％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇5ml溶解，通过中性氧化铝柱，加乙醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水3ml溶解，并通过c18固相萃取小柱，依次用水、10％甲醇各5ml洗脱，收集洗脱液，合并洗脱液蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，得到供试品溶液。
22.步骤(2)中，利用缺酒生怀地黄样品制备得到缺酒生怀地黄样品溶液；利用酒生怀地黄样品制备得到酒生怀地黄对照药材溶液；梓醇对照品溶液的制备方法为：取梓醇对照品，加乙醇制成浓度为0.2～0.8mg/ml的溶液，作为梓醇对照品溶液。
23.具体的，缺酒生怀地黄样品溶液的制备方法为：取缺酒生怀地黄的阴性样品2～4g，并按照上述供试品溶液的制备方法制成缺酒生怀地黄样品溶液。
24.具体的，酒生怀地黄对照药材溶液的制备方法为：取酒生怀地黄对照药材0.5～1.5g，加水50ml，煎煮30分钟，离心5分钟，取上清液，用乙酸乙酯振摇提取两次，每次20ml，弃去乙酸乙酯液，水液用正丁醇振摇提取两次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨水振摇提取两次，每次20ml，合并氨水液，蒸干，残渣加水10ml溶解，通过d101型大孔吸附树脂柱，依次用水50ml洗脱，弃去洗脱液，再用30％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇5ml溶解，通过中性氧化铝柱，加乙醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为酒生怀地黄对照药材溶液。由于酒生怀地黄对照药材较清肝止淋汤的原料成分更简单，无需利用c18固相萃取小柱进行进一步的纯化。
25.优选的，所述的d101型大孔吸附树脂柱的柱内径为1.5cm，柱高为10cm，应用d101型大孔吸附树脂柱洗脱时，洗脱流速为1～3ml/min。
26.优选的，所述的中性氧化铝柱的柱内径为1.5cm，2g，填料目数为100～200目；应用中性氧化铝柱洗脱时，洗脱流速为1～3ml/min。
27.优选的，c18固相萃取小柱的规格为1000mg/6ml，且需用甲醇10ml预洗，水20ml平衡；应用c18固相萃取小柱洗脱时，洗脱流速为1～2ml/min。
28.优选的，步骤(3)中，展开剂选用体积比为1：2～4：7～12的丁二酸-异丙醇-氯仿；显色剂选用体积比为8～12：2～4：84～90的硫酸-乙酸-乙醇溶液；所述的加热温度为105～110℃，时间为3～5min；检视条件为365nm紫外光灯下检视。当选用上述展开剂、显色剂时，色谱斑点清晰，无明显拖尾，阴性无干扰；且显色时间较短。
29.与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
30.(1)本发明以梓醇为有效成分对清肝止淋汤中的酒生怀地黄进行鉴别，并采用特定的提取方法以及d101型大孔吸附树脂柱-中性氧化铝柱-c18固相萃取小柱三步过柱处理，结合展开剂丁二酸-异丙醇-氯仿以及显色剂硫酸-乙酸-乙醇来降低薄层色谱中干扰组分的影响，实现清肝止淋汤中酒生怀地黄的准确鉴别。
31.(2)本发明以体积比为1：2～4：7～12的丁二酸-异丙醇-氯仿为展开剂，体积比为8～12：2～4：84～90的硫酸-乙酸-乙醇溶液为显色剂，非常适用于清肝止淋汤中酒生怀地黄
的鉴别，色谱斑点清晰，无明显拖尾，准确度高且显色时间较短。
附图说明
32.图1为实施例1的薄层色谱鉴别效果图。
33.图2为对比例1的薄层色谱鉴别效果图。
34.图3为对比例2的薄层色谱鉴别效果图。
具体实施方式
35.下面结合附图与实施例，进一步阐明本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明，而不用于限制本发明的范围。
36.本发明实施例中，清肝止淋汤样品来源于海南葫芦娃药业集团股份有限公司。
37.实施例1
38.(1)供试品溶液：取清肝止淋汤样品3g，加水50ml，超声处理30分钟，离心5分钟，取上清液，用乙酸乙酯振摇提取两次，每次20ml，弃去乙酸乙酯液，水液用正丁醇振摇提取两次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨水振摇提取两次，每次20ml，合并氨水液，蒸干，残渣加水10ml溶解，通过d101型大孔吸附树脂柱(柱内径为1.5cm，柱高为10cm，洗脱流速为2ml/min)，依次用水50ml洗脱，弃去洗脱液，再用30％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇5ml溶解，通过中性氧化铝柱(内径1.5cm，2g，100～200目，洗脱流速为2ml/min)，加乙醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水3ml溶解，并通过c18固相萃取小柱(1000mg/6ml，用甲醇10ml预洗，水20ml平衡，洗脱流速为1ml/min)，依次用水、10％甲醇各5ml洗脱，收集洗脱液，合并洗脱液蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液；
39.(2)缺酒生怀地黄样品溶液：取缺酒生怀地黄阴性样品3g，并按照供试品溶液的制备方法制成缺酒生怀地黄样品溶液；区别仅在于将清肝止淋汤样品换为缺酒生怀地黄阴性样品；
40.(3)酒生怀地黄对照药材溶液：取酒生怀地黄对照药材1g，加水50ml，煎煮30分钟，离心5分钟，取上清液，用乙酸乙酯振摇提取两次，每次20ml，弃去乙酸乙酯液，水液用正丁醇振摇提取两次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨水振摇提取两次，每次20ml，合并氨水液，蒸干，残渣加水10ml溶解，通过d101型大孔吸附树脂柱(柱内径为1.5cm，柱高为10cm，洗脱流速为2ml/min)，依次用水50ml洗脱，弃去洗脱液，再用30％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇5ml溶解，通过中性氧化铝柱(内径1.5cm，2g，100～200目，洗脱流速为2ml/min)，加乙醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为酒生怀地黄对照药材溶液；
41.(4)梓醇对照品溶液的制备方法为：取梓醇对照品，加乙醇制成浓度为0.5mg/ml的溶液，作为梓醇对照品溶液；
42.(5)分别取2μl上述步骤制得的梓醇对照品溶液、酒生怀地黄对照药材溶液、供试品溶液和缺酒生怀地黄样品溶液，分别点样于同一硅胶g薄层板上，以体积比为1：2：12的丁二酸-异丙醇-氯仿为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积比为8：2：90的硫酸-乙酸-乙醇溶液，105℃加热3分钟，立即置紫外光灯(365nm)下检视。
43.薄层色谱检测结果如图1所示，图1中的色谱条带从左至右分别为梓醇对照品溶
液、酒生怀地黄对照药材溶液、供试品溶液(分别重复测试三次)和缺酒生怀地黄样品溶液，由图中结果可知，本发明方法荧光点清晰度高、无明显拖尾，阴性无干扰(缺酒生怀地黄样品在相同位置没有出现斑点)，能够实现清肝止淋汤中酒生怀地黄的准确鉴别。
44.实施例2
45.本实施例与实施例1中梓醇对照品溶液、酒生怀地黄对照药材溶液、供试品溶液和缺酒生怀地黄样品溶液的配制方法相似，区别仅在于，取清肝止淋汤样品2g制备供试品溶液，取缺酒生怀地黄阴性样品2g制备缺酒生怀地黄样品溶液，取酒生怀地黄对照药材0.5g制备酒生怀地黄对照药材溶液，梓醇对照品溶液的浓度为0.2mg/ml；制备酒生怀地黄对照药材溶液、供试品溶液和缺酒生怀地黄样品溶液时，通过d101型大孔吸附树脂柱的流速为1ml/min；通过中性氧化铝柱的流速为3ml/min；制备供试品溶液和缺酒生怀地黄样品溶液时，通过c18固相萃取小柱的流速为2ml/min。
46.分别取4μl上述步骤制得的梓醇对照品溶液、酒生怀地黄对照药材溶液、供试品溶液和缺酒生怀地黄样品溶液，分别点样于同一硅胶g薄层板上，以体积比为1：4：10的丁二酸-异丙醇-氯仿为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积比为12：4：84的硫酸-乙酸-乙醇溶液，110℃加热3分钟，立即置紫外光灯(365nm)下检视。
47.实施例3
48.本实施例与实施例1中梓醇对照品溶液、酒生怀地黄对照药材溶液、供试品溶液和缺酒生怀地黄样品溶液的配制方法相似，区别仅在于，取清肝止淋汤样品4g制备供试品溶液，取缺酒生怀地黄阴性样品4g制备缺酒生怀地黄样品溶液，取酒生怀地黄对照药材1.5g制备酒生怀地黄对照药材溶液，梓醇对照品溶液的浓度为0.8mg/ml；制备酒生怀地黄对照药材溶液、供试品溶液和缺酒生怀地黄样品溶液时，通过d101型大孔吸附树脂柱的流速为3ml/min；通过中性氧化铝柱的流速为1ml/min；制备供试品溶液和缺酒生怀地黄样品溶液时，通过c18固相萃取小柱的流速为2ml/min。
49.分别取6μl上述步骤制得的梓醇对照品溶液、酒生怀地黄对照药材溶液、供试品溶液和缺酒生怀地黄样品溶液，分别点样于同一硅胶g薄层板上，以体积比为1：4：7的丁二酸-异丙醇-氯仿为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积比为8：2：86的硫酸-乙酸-乙醇溶液，105℃加热5分钟，立即置紫外光灯(365nm)下检视。
50.对比例1
51.对比例1的检测方法与实施例1相同，区别仅在于供试品溶液和缺酒生怀地黄样品溶液制备时，不进行c18固相萃取小柱过柱操作，直接将中性氧化铝柱的洗脱液蒸干后的残渣加乙醇1ml溶解作为供试品溶液和缺酒生怀地黄样品溶液；其他步骤与实施例1相同。
52.本对比例的薄层色谱检测结果如图2所示，图2中的色谱条带从左至右分别为梓醇对照品溶液、酒生怀地黄对照药材溶液、供试品溶液(分别重复测试两次)和缺酒生怀地黄样品溶液，由图中结果可知，不进行c18固相萃取小柱过柱操作时，虽然梓醇对照品溶液、酒生怀地黄对照药材溶液、供试品溶液均在相应位置上有相同颜色斑点，但供试品溶液及缺酒生怀地黄样品溶液的底色较重，说明c18固相萃取小柱能够实现目标成分的进一步分离纯化，从而使斑点清晰。
53.对比例2
54.对比例2的检测方法与实施例1相同，区别仅为未制备缺酒生怀地黄样品溶液及采
用体积比为5：1：2：1的乙酸乙酯-甲醇-水-冰醋酸为展开剂，硫酸乙醇溶液为显色剂。
55.薄层色谱检测结果如图3所示，图3中的色谱条带从左至右分别为梓醇对照品溶液、酒生怀地黄对照药材溶液和供试品溶液(分别重复测试两次)，由图中结果可知，由于本技术中清肝止淋汤组分复杂，供试品溶液的色谱条带上，在与酒生怀地黄对照药材及梓醇对照品色谱相应位置上无明显斑点，且底色较重，相应的展开剂以及显色剂不适于本技术中清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别。
56.样品分析
57.实施例1-3及对比例1-2的检视结果如表1所示：
58.表1实施例1-3及对比例1-2的检视结果
[0059][0060]
从表1数据可知，实施例中的供试品溶液、阳性样品溶液(梓醇对照品溶液或酒生怀地黄对照药材溶液)在相应位置上，均显示清晰的斑点，阴性样品溶液不显示斑点，且无明显拖尾；对比例1中虽然在相应的位置处出现相同颜色斑点及阴性无干扰，但供试品溶液及阴性样品溶液底色较重，杂质组分存在干扰；而对比例2中无明显斑点，不能用来鉴别清肝止淋汤中酒生怀地黄。
[0061]
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述的仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。
技术特征：1.一种清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备供试品溶液取清肝止淋汤样品，加水，超声处理，离心，取上清液；用乙酸乙酯振摇提取上清液，弃乙酸乙酯液，水液用正丁醇振摇提取后，取正丁醇液用氨水振摇提取，得到氨水液，蒸干，残渣加水溶解后过柱，最终将收集得到的洗脱液蒸干，残渣加有机溶剂溶解后得到供试品溶液；(2)制备对照样品溶液所述的对照样品溶液为阴性样品溶液和阳性样品溶液，阴性样品溶液为缺酒生怀地黄样品溶液，阳性样品溶液为酒生怀地黄对照药材溶液和梓醇对照品溶液；(3)酒生怀地黄的鉴别将供试品溶液和对照样品溶液点样于同一硅胶g薄层板，以丁二酸-异丙醇-氯仿为展开剂展开，干燥后，喷以硫酸-乙酸-乙醇溶液加热显色，检视。2.根据权利要求1所述的清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别方法，其特征在于，每1g清肝止淋汤样品对应的水的用量为12.5-25g；超声处理时间为20-40min；利用乙酸乙酯振摇提取2-3次后分别弃去乙酸乙酯液；正丁醇振摇提取2-3次后合并提取液得到正丁醇液；氨水振摇提取2-3次后合并提取液得到氨水液；所述的有机溶剂为乙醇，每1g清肝止淋汤样品对应的有机溶剂为0.25-0.5ml。3.根据权利要求1所述的清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别方法，其特征在于，步骤(1)中，过柱步骤具体为：残渣加水溶解后通过d101型大孔吸附树脂柱，用水洗脱后弃去洗脱液，再用30％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液后蒸干；残渣加乙醇溶解，通过中性氧化铝柱，用乙醇洗脱后收集洗脱液蒸干；残渣加水溶解，通过c18固相萃取小柱，依次用水、10％甲醇溶液洗脱，收集得到洗脱液。4.根据权利要求1所述的清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别方法，其特征在于，步骤(2)中，利用缺酒生怀地黄样品制备得到缺酒生怀地黄样品溶液；利用酒生怀地黄样品制备得到酒生怀地黄对照药材溶液；梓醇对照品溶液的制备方法为：取梓醇对照品，加乙醇制成浓度为0.2～0.8mg/ml的溶液，作为梓醇对照品溶液。5.根据权利要求3所述的清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别方法，其特征在于，应用d101型大孔吸附树脂柱洗脱时，洗脱流速为1～3ml/min。6.根据权利要求3所述的清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别方法，其特征在于，中性氧化铝柱中填料目数为100～200目，应用中性氧化铝柱洗脱时，洗脱流速为1～3ml/min。7.根据权利要求3所述的清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别方法，其特征在于，c18固相萃取小柱应用前，需要用甲醇预洗，水平衡；应用c18固相萃取小柱洗脱时，洗脱流速为1～2ml/min。8.根据权利要求1所述的清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别方法，其特征在于，展开剂选用体积比为1：2～4：7～12的丁二酸-异丙醇-氯仿。9.根据权利要求1所述的清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别方法，其特征在于，显色剂选用体积比为8～12：2～4：84～90的硫酸-乙酸-乙醇溶液。10.根据权利要求1所述的清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别方法，其特征在于，所述的加热温度为105～110℃，时间为3～5min。
技术总结本发明公开了一种清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别方法，包括以下步骤：利用清肝止淋汤样品制备供试品溶液，利用缺酒生怀地黄样品制备得到缺酒生怀地黄样品溶液，利用酒生怀地黄样品制备得到酒生怀地黄对照药材溶液，同时制备梓醇对照品溶液；缺酒生怀地黄样品溶液、酒生怀地黄对照药材溶液和梓醇对照品溶液均为对照样品溶液，将供试品溶液和对照样品溶液点样于同一硅胶G薄层板，以丁二酸-异丙醇-氯仿为展开剂展开，干燥后，喷以硫酸-乙酸-乙醇溶液加热显色，检视。本发明方法非常适用于清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别，色谱斑点清晰，且无明显拖尾，准确度高，且显色时间较短。且显色时间较短。且显色时间较短。
技术研发人员：刘景萍 刘全国 符丹玉 陈克领
受保护的技术使用者：海南葫芦娃药业集团股份有限公司
技术研发日：2022.07.20
技术公布日：2022/11/1
