本发明涉及生物，更具体的涉及一种v5标签抗体及其应用。
背景技术：
1、表位标记是在克隆过程中通过基因改造使蛋白质重组的一种方法，用于检测和/或纯化表达蛋白。而表位标签能在多种细胞类型中定位基因产物，研究蛋白质及其复合物的拓扑结构，识别相关蛋白质，特别是在缺乏蛋白质特异性抗体的情况下，用于表征新鉴定的、低丰度或免疫原性差的蛋白质。通常采用表位标签与重组蛋白的c或n端结合进行表位标记。其中v5标签来源于副粘病毒猴病毒5(sv5)的p和v蛋白上的一个小表位(pk)。通常使用的v5标签包含所有14个氨基酸(gkpipnpllgldst)，但也可以使用较短的9氨基酸序列(ipnpllgld)。
2、而v5标签抗体是一种用于检测和纯化v5标签蛋白的抗体，其具有高度特异性等优点，能识别重组蛋白的c末端或n末端上的v5表位，且不受周围氨基酸序列的影响，是检测含有v5表位的重组蛋白的有效工具。常用于检测和纯化带有v5标签的靶蛋白，尤其是在没有特异性抗体或其他探针的情况下。v5标签抗体可适用于多种应用，如酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,elisa)、免疫印迹(western blotting,wb)、流式细胞术(flow cytometry)、免疫沉淀(immunoprecipitation,ip)和免疫细胞化学/免疫荧光(immunocytochemistry/immunofluorescence，icc/if)。
3、虽v5标签抗体具有高度特异性和通用性等优点，为研究人员提供了有效的工具来探索蛋白质功能及其相互作用，但目前市场上可用的v5标签单克隆抗体种类有限且价格昂贵。因此，开发新型的v5标签单克隆抗体具有巨大的应用潜力，特别是在重组蛋白的免疫吸附和纯化过程中，有望拓展其广泛的应用前景。
技术实现思路
1、针对现有技术的以上缺陷或改进需求，本发明提供了一种v5标签抗体及其应用，其目的在于以猿猴病毒5(sv5)副粘病毒p和v蛋白上的氨基酸残基gkpipnpllgldst(95-108)的合成肽与klh偶联作为抗原，免疫刺激小鼠产生抗体，获取其免疫脾细胞与sp2/0-ag14骨髓瘤融合，筛选获得一株抗体效价最高(1.96×104)的杂交瘤细胞株，以此制备v5标签单克隆抗体，通过该抗体可变区基因克隆及测序，获得该抗体重链和轻链的氨基酸序列，以此为基础可制备v5标签重组抗体，由此解决现有v5标签抗体种类较少，价格昂贵的技术问题。
2、为实现上述目的，按照本发明的一个方面，提供了一种v5标签抗体，其包括3个重链的互补决定区：重链cdr1、重链cdr2和重链cdr3，以及3个轻链的互补决定区：轻链cdr1、轻链cdr2和轻链cdr3；
3、所述重链cdr1为seq id no:1所示的氨基酸序列s-y-s-i-h；
4、所述重链cdr2为seq id no:2所示的氨基酸序列y-i-n-p-a-s-g-y-s-a-y-n-e-n-f-k-b；
5、所述重链cdr3为seq id no:3所示的氨基酸序列d-k-f-y-a-y-d-y；
6、所述轻链cdr1为seq id no:4所示的氨基酸序列r-a-s-q-s-i-v-h-k-n-g-n-t-y-l-d；
7、所述轻链cdr2为seq id no:5所示的氨基酸序列r-v-a-q-k-f-s；
8、所述轻链cdr3为seq id no:6所示的序列f-n-a-s-h-v-p-y-t。
9、优选地，所述v5标签抗体，其所述抗体，其重链可变区中fr1-4依次为以下氨基酸序列：
10、包括如seq id no:7，8，9，10所示的氨基酸序列或由其组成，
11、或者与seq id no:7，8，9，10所示的序列具有至少80％，85％，90％同一性的序列，
12、或者与seq id no:7，8，9，10所示的氨基酸序列相比具有一个或多个氨基酸突变的序列。
13、优选地，所述v5标签抗体，其所述重链可变区中fr1-4依次为以下氨基酸序列：
14、如seq id no:7，8，9，10所示的氨基酸序列，
15、或者与seq id no:7，8，9，10所示的氨基酸序列具有至少91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％或100％序列同一性的序列，
16、或者与seq id no:7，8，9，10所示的氨基酸序列具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸突变的氨基酸序列；所述氨基酸突变，为保守突变，包括置换，插入或缺失。
17、优选地，所述v5标签抗体，其所述抗体，其轻链可变区中fr1-4依次为以下氨基酸序列：
18、包括如seq id no:11，12，13，14所示的氨基酸序列或由其组成，
19、或者与seq id no:11，12，13，14所示的序列具有至少80％，85％，90％同一性的序列，
20、或者与seq id no:11，12，13，14所示的氨基酸序列相比具有一个或多个氨基酸突变的序列。
21、优选地，所述v5标签抗体，其所述轻链可变区中fr1-4依次为以下氨基酸序列：
22、如seq id no:11，12，13，14所示的氨基酸序列，
23、或者与seq id no:11，12，13，14所示的氨基酸序列具有至少91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％或100％序列同一性的序列，
24、或者与seq id no:11，12，13，14所示的氨基酸序列具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸突变的氨基酸序列；所述氨基酸突变，为保守突变，包括置换，插入或缺失。
25、优选地，所述v5标签抗体，其所述抗体，其重链氨基酸序列如seq id no:15所示，轻链氨基酸序列如seq id no:16所示。
26、按照本发明的另一方面，还提供了一种含有编码如本发明所述v5标签抗体的核酸序列的生物材料，其所述生物材料，包括表达载体、表达盒、宿主细胞、工程菌或杂交瘤细胞株。
27、按照本发明的另一方面，还提供了一种如本发明所述v5标签抗体在检测、分离和纯化v5标记的靶蛋白中的应用。
28、优选地，所述应用，其应用于酶联免疫吸附试验、免疫印迹、流式细胞术、免疫沉淀、和/或免疫细胞化学/免疫荧光。
29、按照本发明的另一方面还提供了一种靶蛋白检测试剂盒，其包含如本发明所述v5标签抗体。
30、总体而言，通过本发明所构思的以上技术方案与现有技术相比，由于本发明提供的新的v5标签抗体，能够取得下列有益效果：
31、本发明以猿猴病毒5(sv5)副粘病毒p和v蛋白上的氨基酸残基gkpipnpllgldst(95-108)的合成肽与klh偶联作为抗原，免疫刺激小鼠产生抗体，获取免疫脾细胞，通过杂交瘤技术制备并筛选效价高的v5标签单克隆抗体，实验结果表明，筛选出的v5标签单克隆抗体，其效价高达2.07×106(腹水抗体)、亲和力kd为1.425e-8且活性高，能够用于检测、分离和纯化v5标签标记的靶蛋白，尤其是用于检测没有特异性抗体或其他探针的靶蛋白。
1.一种v5标签抗体，其特征在于，包括3个重链的互补决定区：重链cdr1、重链cdr2和重链cdr3，以及3个轻链的互补决定区：轻链cdr1、轻链cdr2和轻链cdr3；
2.如权利要求1所述的v5标签抗体，其特征在于，所述抗体，其重链可变区中fr1-4依次为以下氨基酸序列：
3.如权利要求2所述的v5标签抗体，其特征在于，所述重链可变区中fr1-4依次为以下氨基酸序列：
4.如权利要求1至3任意一项所述的v5标签抗体，其特征在于，所述抗体，其轻链可变区中fr1-4依次为以下氨基酸序列：
5.如权利要求4所述的v5标签抗体，其特征在于，所述轻链可变区中fr1-4依次为以下氨基酸序列：
6.如权利要求5所述的v5标签抗体，其特征在于，所述抗体，其重链氨基酸序列如seqid no:15所示，轻链氨基酸序列如seq id no:16所示。
7.一种含有编码如权利要求6所述v5标签抗体的核酸序列的生物材料，其特征在于，所述生物材料，包括表达载体、表达盒、宿主细胞、工程菌或杂交瘤细胞株。
8.一种如权利要求6所述v5标签抗体在检测、分离和纯化v5标记的靶蛋白中的应用。
9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，应用于酶联免疫吸附试验、免疫印迹、流式细胞术、免疫沉淀、和/或免疫细胞化学/免疫荧光。
10.一种靶蛋白检测试剂盒，其特征在于，包含如权利要求6所述v5标签抗体。
