本发明属于泌体喷雾液，特别是一种治疗口腔溃疡的高活性干细胞外泌体喷雾液及其制备工艺。
背景技术：
1、口腔溃疡，俗称“口疮”，是一种发生在口腔黏膜上的溃疡性损伤病症。它的大小可以从米粒至黄豆大小不等，形状通常为圆形或椭圆形，表面覆盖着灰白或黄色的假膜，中央凹陷，边界清楚，周围黏膜红而微肿。患者在进食、说话或受到其他刺激时,往往会感到明显的疼痛感。
2、口腔溃疡的成因多种多样，包括遗传、免疫、精神压力、营养不良以及物理性创伤等多种因素。例如，长期的精神紧张和压力过大可能导致免疫系统失衡，从而引发口腔溃疡；而缺乏某些维生素(如b族维生素)和矿物质也可能导致口腔黏膜受损，进而形成溃疡。
3、此外，经常食用过于辛辣、刺激性的食物或硬物划伤等物理性因素也是口腔溃疡的常见诱因。
4、由于口腔溃疡会造成患者日常极大的不便，因此，需要对其进行及时的治疗，缩短愈合时间，降低痛苦时间是关键。
5、基于此，提供一种治疗口腔溃疡的高活性干细胞外泌体喷雾液及其制备工艺，来解决现有的技术问题。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一种治疗口腔溃疡的高活性干细胞外泌体喷雾液及其制备工艺，以解决现有技术中的不足。
2、本发明采用的技术方案如下：
3、一种治疗口腔溃疡的高活性干细胞外泌体喷雾液，按重量份计包括以下成分制成：唾液乳杆菌0.03-0.06份、薄荷脑1-2份、刺梨提取物2-3份、黄岑提取物2-3份、丙二醇3-5份、山梨醇0.2-0.8份、蛋氨酸2-5份、多糖0.5-0.9份、水85-90份；
4、所述喷雾液中还含有高活性干细胞外泌体；
5、所述高活性干细胞外泌体浓度为2.5×1011-4×1011颗粒/ml；
6、其中，刺梨提取物、黄岑提取物混合重量份比为1:1；
7、所述多糖为海藻糖。
8、作为进一步的技术方案：所述高活性干细胞外泌体由动物乳汁外泌体与脂肪干细胞外泌体混合而成；
9、所述动物乳汁外泌体与脂肪干细胞外泌体浓度比为1:5。
10、作为进一步的技术方案：所述脂肪干细胞外泌体的制备方法包括以下步骤；
11、s1：取脂肪组织，然后切碎，将切碎后的脂肪组织置于无血清干细胞培养基中培养，在温度为37℃，5％二氧化碳浓度下，进行培养15-18小时；
12、s2：采用pbs将s1培养后的培养基进行稀释至5倍体积，然后，经350×g、15min；2500×g、15min和11000×g、30min进行差速离心后；再次100000×g离心80min，得沉淀用pbs重悬，以得到外泌体粗品；
13、s3：将所得到的外泌体粗品进行纯化，得到所需脂肪干细胞外泌体；纯化为经过阴离子交换柱层析纯化；
14、用于阴离子交换柱层析的阴离子交换体采用：captommc；
15、阴离子交换柱层析在0.75m的nacl的存在下进行，阴离子交换柱层析的柱条件选择柱洗脱液的ph为7时洗脱。
16、作为进一步的技术方案：所述脂肪组织从臂部、腰部、腿部、腹部任一处的脂肪内采集而得到。
17、作为进一步的技术方案：所述羊乳外泌体制备方法为：
18、取新鲜的羊乳；
19、对羊乳以6500r/min转速离心处理1min，然后再进行均质化处理10min，再以8500r/min转速离心处理35min，取上清液；
20、将所得到的上清液添加到超纯水中，混合均匀，然后再以盐酸调节等电位点至4.1，再按4:1体积比添加edta，搅拌10min，然后再以13000r/min转速离心40min，取上清液；
21、其中edta浓度为0.125mol/l；
22、将上清液经过0.22μm的滤膜进行过滤，得到过滤液；
23、对过滤液以35000r/min转速离心30min，取沉淀，将所的沉淀以pbs重悬，得到羊乳外泌体。
24、作为进一步的技术方案：所述盐酸浓度为1.5mol/l。
25、作为进一步的技术方案：所述刺梨提取物制备方法为：
26、将刺梨去皮去核，得到刺梨果肉；
27、将刺梨果肉按1:1质量比与水进行混合，然后经过打浆10min，得到刺梨浆液；
28、向刺梨浆液中添加其质量5倍的乙醇溶液，经过搅拌4小时，然后再以5000r/min转速离心处理30min，过滤，去除滤渣，得到滤液；
29、对滤液进行喷雾干燥，得到刺梨提取物。
30、作为进一步的技术方案：所述黄岑提取物制备方法为：
31、将黄岑与水按1:10质量比例混合后，常温浸泡2小时，然后再加热至80℃，水浴保温4小时，然后进行过滤，得到过滤液；
32、对过滤液进行旋蒸干燥，得到黄岑提取物。
33、一种治疗口腔溃疡的高活性干细胞外泌体喷雾液的制备方法，包括以下步骤：
34、(1)按各重量份称取：唾液乳杆菌、薄荷脑、刺梨提取物、黄岑提取物、丙二醇、山梨醇、蛋氨酸、多糖、水；
35、(2)将唾液乳杆菌、薄荷脑、刺梨提取物、黄岑提取物、丙二醇、山梨醇、蛋氨酸、多糖，依次添加到水，经过搅拌混合均匀，得到第一混合液；
36、(3)向第一混合液中添加相应量的高活性外泌体，经过搅拌10-15min，得到所述喷雾液。
37、作为进一步的技术方案：所述搅拌搅拌为500r/min。
38、外泌体(exosomes)是指包含了复杂rna和蛋白质的小膜泡，一般指直径在40～100nm的盘状囊泡。
39、有益效果：
40、本发明制备的喷雾液主要用于治疗口腔溃疡，对于口腔溃疡具有显著的疗效，能够极大的缩短口腔溃疡愈合时间。
41、本发明通过引入多种成分的配合作用，能够起到促进口腔溃疡修复的效果，通过刺梨提取物、黄岑提取物配合作用，能够起到消炎的作用，由于口腔溃疡往往伴随着炎症反应，导致局部红肿、疼痛等症状，通过消炎，能够极大的缓解口腔溃疡的症状，减缓对患者的痛苦作用。
42、通过引入高活性外泌体，能够起到促进口腔溃疡创面修复的作用，主要是通过分泌的生长因子、细胞因子等生物活性因子，能够刺激受损的口腔黏膜细胞增殖与分化作用，细胞分裂加速，口腔黏膜的愈合过程得到明显的加快，同时，对于血管新生也具有明显的促进作用，而新生的血管又能够进一步的为受损的口腔黏膜细胞提供更多的营养支持，加速了增殖作用。
43、通过唾液乳杆菌的引入，其具有抗菌作用，能够减少有害菌对溃疡面的侵袭，降低感染风险，同时，唾液乳杆菌能刺激口腔黏膜细胞的生长和再生，加速溃疡面的愈合过程，此外，唾液乳杆菌还能够调节口腔内的酸碱平衡，维持一个适宜的环境，有利于口腔黏膜的恢复和健康。
44、通过多成分共同作用，能够抑制炎症因子的释放、降低炎症反应程度，能够有效的缓解口腔溃疡引起的疼痛和肿胀。
45、通过以动物乳汁外泌体与脂肪干细胞外泌体的配合作用，不仅能够加速口腔溃疡的愈合效率，同时，可以激活机体的免疫反应，提高机体对病原体的抵抗力，从而预防口腔溃疡的复发。
1.一种治疗口腔溃疡的高活性干细胞外泌体喷雾液，其特征在于，按重量份计包括以下成分制成：唾液乳杆菌0.03-0.06份、薄荷脑1-2份、刺梨提取物2-3份、黄岑提取物2-3份、丙二醇3-5份、山梨醇0.2-0.8份、蛋氨酸2-5份、多糖0.5-0.9份、水85-90份；
2.根据权利要求1所述的一种治疗口腔溃疡的高活性干细胞外泌体喷雾液，其特征在于：所述高活性干细胞外泌体由动物乳汁外泌体与脂肪干细胞外泌体混合而成；
3.根据权利要求2所述的一种治疗口腔溃疡的高活性干细胞外泌体喷雾液，其特征在于：所述脂肪干细胞外泌体的制备方法包括以下步骤；
4.根据权利要求3所述的一种治疗口腔溃疡的高活性干细胞外泌体喷雾液，其特征在于：所述脂肪组织从臂部、腰部、腿部、腹部任一处的脂肪内采集而得到。
5.根据权利要求4所述的一种治疗口腔溃疡的高活性干细胞外泌体喷雾液，其特征在于：所述羊乳外泌体制备方法为：
6.根据权利要求1所述的一种治疗口腔溃疡的高活性干细胞外泌体喷雾液，其特征在于：所述盐酸浓度为1.5mol/l。
7.根据权利要求1所述的一种治疗口腔溃疡的高活性干细胞外泌体喷雾液，其特征在于：所述刺梨提取物制备方法为：
8.根据权利要求1所述的一种治疗口腔溃疡的高活性干细胞外泌体喷雾液，其特征在于：所述黄岑提取物制备方法为：
9.根据权利要求8所述的一种治疗口腔溃疡的高活性干细胞外泌体喷雾液的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
10.根据权利要求9所述的一种治疗口腔溃疡的高活性干细胞外泌体喷雾液的制备方法，其特征在于：所述搅拌搅拌为500r/min。
