一株杂交瘤细胞株、单克隆抗体和应用

专利2025-07-30  14


本发明属于食品安全免疫检测,尤其涉及一株杂交瘤细胞株、单克隆抗体和应用。


背景技术:

1、氯氟吡氧乙酸和氯氟吡氧乙酸异辛酯是吡啶氧乙酸类除草剂,具有内吸传导性作用,有典型的激素类除草剂反应,二者生产量大,应用广泛。其中,氯氟吡氧乙酸异辛酯在施用后,能够在植株体内快速水解为母体物质氯氟吡氧乙酸。

2、目前关于氯氟吡氧乙酸和氯氟吡氧乙酸异辛酯残留检测的方法主要集中在仪器检测方面,如高效液相色谱法(lc)、高效液相色谱-串联质谱法(uplc-ms/ms)、气相色谱法(gc)、气相色谱-串联质谱法(gc-ms/ms)等,但是上述这些方法需要专业的操作人、大型的仪器设备、复杂的样品预处理和耗时的分析过程,检测成本高,不利于氯氟吡氧乙酸和氯氟吡氧乙酸异辛酯现在检测。免疫分析方法由于其对抗原和抗体的特异性识别作用,具有快速、简便、实时、易于进行现场检测、样品前处理简单、灵敏度高、选择性强、适合于高通量分析等优点,而且能大幅度降低检测成本。但是,目前缺少能同时特异性识别氯氟吡氧乙酸和氯氟吡氧乙酸异辛酯广谱的单克隆抗体。


技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一株杂交瘤细胞株、单克隆抗体和应用,本发明的单克隆抗体能够同时特异性识别氯氟吡氧乙酸和氯氟吡氧乙酸异辛酯广谱。

2、本发明提供了一株杂交瘤细胞株,所述杂交瘤细胞株命名为11d8,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:cgmcc no.45937。

3、本发明还提供了上述方案所述的杂交瘤细胞株在制备同时特异性识别氯氟吡氧乙酸和氯氟吡氧乙酸异辛酯的单克隆抗体中的应用。

4、本发明还提供了一种单克隆抗体,所述单克隆抗体由上述方案所述杂交瘤细胞株或其传代细胞株分泌产生。

5、本发明还提供了一种单克隆抗体,所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列包括:如seq id no.1所示的重链可变区cdr1,如seq id no.2所示的重链可变区cdr2和如seqid no.3所示的重链可变区cdr3;所述单克隆抗体的轻链可变区的氨基酸序列包括:如seqid no.4所示的轻链可变区cdr1,如seq id no.5所示的轻链可变区cdr2和如seq id no.6所示的轻链可变区cdr3。

6、优选的,所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列如seq id no.7所示;所述单克隆抗体的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.8所示。

7、本发明还提供了上述方案所述单克隆抗体的编码基因,所述单克隆抗体的编码基因的重链可变区的核苷酸序列包括:如seq id no.9所示的重链可变区cdr1,如seq idno.10所示的重链可变区cdr2和如seq id no.11所示的重链可变区cdr3;所述单克隆抗体的编码基因的轻链可变区的核苷酸序列包括:如seq id no.12所示的轻链可变区cdr1,如seq id no.13所示的轻链可变区cdr2和如seq id no.14所示的轻链可变区cdr3。

8、优选的,所述单克隆抗体的编码基因的重链可变区的基因序列如seq id no.15所示;所述单克隆抗体的编码基因的轻链可变区的基因序列如seq id no.16所示。

9、本发明还提供了一种试剂盒或试纸条,包括上述方案所述的单克隆抗体。

10、本发明还提供了上述方案所述的杂交瘤细胞株、所述的单克隆抗体、所述的编码基因或者所述的试剂盒或试纸条在检测氯氟吡氧乙酸和/或氯氟吡氧乙酸异辛酯中的应用。

11、本发明还提供了一种间接竞争elisa检测氯氟吡氧乙酸和/或氯氟吡氧乙酸异辛酯的方法,包括以下步骤:

12、以待检样品为包被抗原,以上述方案所述的单克隆抗体为一抗,进行间接竞争elisa检测。

13、本发明提供了一株杂交瘤细胞株,所述杂交瘤细胞株命名为11d8,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:cgmcc no.45937。本发明的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体能够同时特异性识别氯氟吡氧乙酸和氯氟吡氧乙酸异辛酯,对氯氯氟吡氧乙酸和氯氟吡氧乙酸异辛酯有较好的检测灵敏度;可实现对食品中氯氟吡氧乙酸和氯氟吡氧乙酸异辛酯残留量的检测,为建立快速、简便、价廉、灵敏、特异的氯氟吡氧乙酸和氯氟吡氧乙酸异辛酯检测方法提供了新手段。

14、生物保藏说明

15、小鼠杂交瘤细胞株11d8,保藏单位为:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏编号为:cgmcc no.45937,保藏日期为:2024年06月04日。



技术特征:

1.一株杂交瘤细胞株,其特征在于,所述杂交瘤细胞株命名为11d8,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:cgmcc no.45937。

2.权利要求1所述的杂交瘤细胞株在制备同时特异性识别氯氟吡氧乙酸和氯氟吡氧乙酸异辛酯的单克隆抗体中的应用。

3.一种单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体由权利要求1所述杂交瘤细胞株或其传代细胞株分泌产生。

4.一种单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列包括:如seq id no.1所示的重链可变区cdr1,如seq id no.2所示的重链可变区cdr2和如seq idno.3所示的重链可变区cdr3;所述单克隆抗体的轻链可变区的氨基酸序列包括:如seq idno.4所示的轻链可变区cdr1,如seq id no.5所示的轻链可变区cdr2和如seq id no.6所示的轻链可变区cdr3。

5.根据权利要求4所述的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列如seq id no.7所示;所述单克隆抗体的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.8所示。

6.权利要求4或5所述单克隆抗体的编码基因,其特征在于,所述单克隆抗体的编码基因的重链可变区的核苷酸序列包括:如seq id no.9所示的重链可变区cdr1,如seq idno.10所示的重链可变区cdr2和如seq id no.11所示的重链可变区cdr3;所述单克隆抗体的编码基因的轻链可变区的核苷酸序列包括:如seq id no.12所示的轻链可变区cdr1,如seq id no.13所示的轻链可变区cdr2和如seq id no.14所示的轻链可变区cdr3。

7.根据权利要求6所述的单克隆抗体的编码基因,其特征在于,所述单克隆抗体的编码基因的重链可变区的基因序列如seq id no.15所示;所述单克隆抗体的编码基因的轻链可变区的基因序列如seq id no.16所示。

8.一种试剂盒或试纸条,其特征在于,包括权利要求3~5任意一项所述的单克隆抗体。

9.权利要求1所述的杂交瘤细胞株、权利要求3~5任意一项所述的单克隆抗体、权利要求6或7所述的编码基因或者权利要求8所述的试剂盒或试纸条在检测氯氟吡氧乙酸和/或氯氟吡氧乙酸异辛酯中的应用。

10.一种间接竞争elisa检测氯氟吡氧乙酸和/或氯氟吡氧乙酸异辛酯的方法,其特征在于,包括以下步骤:


技术总结
本发明提供了一株杂交瘤细胞株、单克隆抗体和应用,属于食品安全免疫检测技术领域。本发明的杂交瘤细胞株命名为11D8,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCC No.45937。本发明的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体能够同时特异性识别氯氟吡氧乙酸和氯氟吡氧乙酸异辛酯,对氯氯氟吡氧乙酸和氯氟吡氧乙酸异辛酯有较好的检测灵敏度;可实现对食品中氯氟吡氧乙酸和氯氟吡氧乙酸异辛酯残留量的检测,为建立快速、简便、价廉、灵敏、特异的氯氟吡氧乙酸和氯氟吡氧乙酸异辛酯检测方法提供了新手段。

技术研发人员:曹振,赵云,金茂俊,王静,罗婷,许灵媛
受保护的技术使用者:中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
技术研发日:
技术公布日:2024/11/11
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