TRAb制备及其应用的制作方法

专利2025-07-29  31


本发明涉及生物,特别涉及抗体及其应用。


背景技术:

1、人促甲状腺素受体(human thyroid-stimulating hormone receptor,htshr)主要存在于甲状腺滤泡上皮细胞膜上,tshr是g蛋白偶联受体家族的一种,本质为糖蛋白,由764个氨基酸组成,分子量约为85 kd,分为膜外区、跨膜区和膜内区三部分。tshr可以作为一种自身抗原,结合甲状腺刺激性抗体(thyroid stimulating antibody,tsab),产生类似tsh的刺激性反应,最终导致甲状腺自我免疫耐受丧失,产生并释放过多的甲状腺激素,临床上出现心悸、多汗、纳亢等甲状腺机能亢进的表现。

2、trab是引起graves病患者甲亢和甲亢复发的重要原因之一,由于trab为igg类抗体,可通过胎盘并可刺激胎儿甲状腺引起新生儿甲亢。监测血清trab含量对甲状腺疾病的诊断,鉴别诊断,疗效观察,预后判断有重要的临床价值。同时促甲状腺素受体抗体(trab)是毒性弥漫性甲状腺肿(graves' disease,gd)发病的一个重要因素,已成为gd重要诊断指标之一,能反映gd的活动程度,对gd的预后、复发的预计和鉴别高危人群有重要的临床意义。因此,提供能快速、灵敏地检测患者血清中trab的浓度的抗体具有重要的现实意义。


技术实现思路

1、有鉴于此,本发明提供的抗体及其应用,该重组抗体能快速、灵敏的检测患者血清中trab的浓度。

2、为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:

3、本发明提供了抗体,其重链可变区具有:

4、(1)、如seq id no:1所示的核苷酸序列;或

5、(2)、如(1)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列,且功能与(1)的相同或相似;或

6、(3)、与如(1)或(2)所示的核苷酸序列至少有95%同源性的核苷酸序列;

7、其轻链可变区具有:

8、(4)、如seq id no:2所示的氨基酸序列;或

9、(5)、如(4)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列,且功能与(4)的相同或相似;或

10、(6)、与如(4)或(5)所示的氨基酸序列至少有95%同源性的氨基酸序列;

11、所述多个为2个至10个。

12、本发明还提供了具有编码上述抗体的核苷酸序列的核酸分子。

13、在本发明的一些具体实施方案中,上述核酸分子具有:

14、(7)、如seq id no:3和/或seq id no:4所示的核苷酸序列;或

15、(8)、如(7)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列,且功能与(7)的相同或相似;或

16、(9)、与如(7)或(8)所示的核苷酸序列至少有95%同源性的核苷酸序列;

17、所述多个为2个至10个。

18、本发明还提供了表达载体,其具有:

19、(7)、如seq id no:3和/或seq id no:4所示的核苷酸序列;或

20、(8)、如(7)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列,且功能与(7)的相同或相似;或

21、(9)、与如(7)或(8)所示的核苷酸序列至少有90%同源性的核苷酸序列;

22、所述多个为2个至30个。

23、本发明还提供了细胞,其具有:

24、(i)、上述抗体;或

25、(ii)、上述核酸分子;或

26、(iii)、上述表达载体。

27、本发明还提供了如下任一项在制备检测trab的试剂或试剂盒中的应用:

28、(a)、上述抗体;

29、(b)、上述核酸分子;

30、(c)、上述表达载体;

31、(d)、上述细胞。

32、本发明还提供了如下任一项在制备检测tshr的试剂或试剂盒中的应用:

33、(a)、上述抗体;

34、(b)、上述核酸分子;

35、(c)、上述表达载体;

36、(d)、上述细胞。

37、本发明还提供了试剂,包括可接受的辅料或助剂,以及如下任意项:

38、(a)、上述抗体;

39、(b)、上述核酸分子;

40、(c)、上述表达载体;

41、(d)、上述细胞。

42、本发明还提供了试剂盒,包括可接受的辅料或助剂,以及如下任意项:

43、(a)、上述抗体;

44、(b)、上述核酸分子;

45、(c)、上述表达载体;

46、(d)、上述细胞;

47、(e)、上述试剂。

48、本发明还提供了检测trab的方法,包括:

49、(a)、基于上述抗体检测trab;或

50、(b)、表达上述核酸分子,获得抗体,基于所述抗体检测trab;或

51、(c)、表达上述表达载体,获得抗体,基于所述抗体检测trab;或

52、(d)、培养上述细胞,获得抗体,基于所述抗体检测trab;或

53、(e)、基于上述试剂检测trab;或

54、(f)、基于上述试剂盒检测trab。

55、本发明的抗体有如下效果:

56、本发明利用杂交瘤筛选技术,筛选获得了本发明所述的tshr重组鼠单克隆抗体,实验证明,该单抗特异性强,检测灵敏度高,对后期应用与临床诊断有重要作用。此外该抗体与液质结果一致性高。经鉴定,利用该单抗进行重复多次检测,稳定性良好,准确性高。



技术特征:

1.抗体,其特征在于,包括:

2.具有编码如权利要求1所述抗体的核苷酸序列的核酸分子。

3.如权利要求2所述的核酸分子,其特征在于,具有:

4.表达载体,其特征在于,具有:

5.细胞,其特征在于,具有:

6.如下任一项在制备检测trab的试剂或试剂盒中的应用:

7.试剂,其特征在于,包括可接受的辅料或助剂,以及如下任意项:

8.试剂盒,其特征在于,包括可接受的辅料或助剂,以及如下任意项:

9.检测trab的方法,其特征在于,包括:


技术总结
本发明涉及生物技术领域,特别涉及TRAb制备及其应用。本发明提供了抗体、其在制备TRAb检测试剂盒中的应用、试剂、试剂盒。利用杂交瘤筛选技术,本申请筛选获得了TSHR重组鼠单克隆抗体,实验证明,该单克隆抗体特异性强,检测灵敏度高,对后期应用与临床诊断有重要作用。此外该抗体与液质结果一致性高。经鉴定,利用该单克隆抗体进行重复多次检测,稳定性良好,准确性高。

技术研发人员:李桂林,李松瑞,韩阳瑞,张伟涛,李笑颜,李玲玲,田晓平,徐延伟,赵巧辉,付光宇,杨增利,吴学炜
受保护的技术使用者:郑州伊美诺生物技术有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/11/11
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