本发明涉及生物,特别涉及抗体及其应用。
背景技术:
1、人促甲状腺素受体(human thyroid-stimulating hormone receptor,htshr)主要存在于甲状腺滤泡上皮细胞膜上,tshr是g蛋白偶联受体家族的一种,本质为糖蛋白,由764个氨基酸组成,分子量约为85 kd,分为膜外区、跨膜区和膜内区三部分。tshr可以作为一种自身抗原,结合甲状腺刺激性抗体(thyroid stimulating antibody,tsab),产生类似tsh的刺激性反应,最终导致甲状腺自我免疫耐受丧失,产生并释放过多的甲状腺激素,临床上出现心悸、多汗、纳亢等甲状腺机能亢进的表现。
2、trab是引起graves病患者甲亢和甲亢复发的重要原因之一,由于trab为igg类抗体,可通过胎盘并可刺激胎儿甲状腺引起新生儿甲亢。监测血清trab含量对甲状腺疾病的诊断,鉴别诊断,疗效观察,预后判断有重要的临床价值。同时促甲状腺素受体抗体(trab)是毒性弥漫性甲状腺肿(graves' disease,gd)发病的一个重要因素,已成为gd重要诊断指标之一,能反映gd的活动程度,对gd的预后、复发的预计和鉴别高危人群有重要的临床意义。因此,提供能快速、灵敏地检测患者血清中trab的浓度的抗体具有重要的现实意义。
技术实现思路
1、有鉴于此,本发明提供的抗体及其应用,该重组抗体能快速、灵敏的检测患者血清中trab的浓度。
2、为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
3、本发明提供了抗体,其重链可变区具有:
4、(1)、如seq id no:1所示的核苷酸序列;或
5、(2)、如(1)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列,且功能与(1)的相同或相似;或
6、(3)、与如(1)或(2)所示的核苷酸序列至少有95%同源性的核苷酸序列;
7、其轻链可变区具有:
8、(4)、如seq id no:2所示的氨基酸序列;或
9、(5)、如(4)所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列,且功能与(4)的相同或相似;或
10、(6)、与如(4)或(5)所示的氨基酸序列至少有95%同源性的氨基酸序列;
11、所述多个为2个至10个。
12、本发明还提供了具有编码上述抗体的核苷酸序列的核酸分子。
13、在本发明的一些具体实施方案中,上述核酸分子具有:
14、(7)、如seq id no:3和/或seq id no:4所示的核苷酸序列;或
15、(8)、如(7)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列,且功能与(7)的相同或相似;或
16、(9)、与如(7)或(8)所示的核苷酸序列至少有95%同源性的核苷酸序列;
17、所述多个为2个至10个。
18、本发明还提供了表达载体,其具有:
19、(7)、如seq id no:3和/或seq id no:4所示的核苷酸序列;或
20、(8)、如(7)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列,且功能与(7)的相同或相似;或
21、(9)、与如(7)或(8)所示的核苷酸序列至少有90%同源性的核苷酸序列;
22、所述多个为2个至30个。
23、本发明还提供了细胞,其具有:
24、(i)、上述抗体;或
25、(ii)、上述核酸分子;或
26、(iii)、上述表达载体。
27、本发明还提供了如下任一项在制备检测trab的试剂或试剂盒中的应用:
28、(a)、上述抗体;
29、(b)、上述核酸分子;
30、(c)、上述表达载体;
31、(d)、上述细胞。
32、本发明还提供了如下任一项在制备检测tshr的试剂或试剂盒中的应用:
33、(a)、上述抗体;
34、(b)、上述核酸分子;
35、(c)、上述表达载体;
36、(d)、上述细胞。
37、本发明还提供了试剂,包括可接受的辅料或助剂,以及如下任意项:
38、(a)、上述抗体;
39、(b)、上述核酸分子;
40、(c)、上述表达载体;
41、(d)、上述细胞。
42、本发明还提供了试剂盒,包括可接受的辅料或助剂,以及如下任意项:
43、(a)、上述抗体;
44、(b)、上述核酸分子;
45、(c)、上述表达载体;
46、(d)、上述细胞;
47、(e)、上述试剂。
48、本发明还提供了检测trab的方法,包括:
49、(a)、基于上述抗体检测trab;或
50、(b)、表达上述核酸分子,获得抗体,基于所述抗体检测trab;或
51、(c)、表达上述表达载体,获得抗体,基于所述抗体检测trab;或
52、(d)、培养上述细胞,获得抗体,基于所述抗体检测trab;或
53、(e)、基于上述试剂检测trab;或
54、(f)、基于上述试剂盒检测trab。
55、本发明的抗体有如下效果:
56、本发明利用杂交瘤筛选技术,筛选获得了本发明所述的tshr重组鼠单克隆抗体,实验证明,该单抗特异性强,检测灵敏度高,对后期应用与临床诊断有重要作用。此外该抗体与液质结果一致性高。经鉴定,利用该单抗进行重复多次检测,稳定性良好,准确性高。
1.抗体,其特征在于,包括:
2.具有编码如权利要求1所述抗体的核苷酸序列的核酸分子。
3.如权利要求2所述的核酸分子,其特征在于,具有:
4.表达载体,其特征在于,具有:
5.细胞,其特征在于,具有:
6.如下任一项在制备检测trab的试剂或试剂盒中的应用:
7.试剂,其特征在于,包括可接受的辅料或助剂,以及如下任意项:
8.试剂盒,其特征在于,包括可接受的辅料或助剂,以及如下任意项:
9.检测trab的方法,其特征在于,包括: