本发明属于植物生物,具体涉及黄瓜csmyb82基因及其应用,用于调控黄瓜木质素的生物合成以及对白粉病菌的抗性。
背景技术:
1、黄瓜(cucumis sativus l.)是世界上栽培最广泛的经济作物之一。高效稳定的黄瓜生产对保障全球蔬菜安全至关重要。由活体营养型真菌病原体podosphaera xanthii引起的白粉病,是黄瓜种植过程中最具破坏性的疾病之一,造成黄瓜产量和质量的重大损失。尽管可以对白粉病进行化学防治,但由于长期使用化学杀菌剂,会使病原菌日益产生耐药性,同时也会对环境造成污染。相比而言,抗性黄瓜品种的遗传选育被认为是防治白粉病更经济、更环保和更有效的策略,而黄瓜抗病关键基因的功能解析是构建抗性遗传网络以及开展分子设计育种的基础。因此,挖掘在黄瓜–白粉病互作过程中发挥重要作用的基因,并揭示其潜在的分子机制是当务之急。
2、目前,为了应对病原菌的攻击,植物已经进化出了各种复杂的防御机制。作为植物细胞壁的重要组分之一,木质素为植物阻碍病原菌的传播提供了重要的物理和化学屏障。当植物遭受病原菌侵染时,细胞壁会积累大量的木质素。木质素的积累能够有效地阻碍病原菌的传播,限制真菌酶和毒素进入植物细胞壁。此外,木质素相关化合物可使病原菌失去侵染寄主的活性,进而阻止病原菌增殖和侵入。鉴于木质素在植物抗病中的关键作用,其生物合成机制成为一直以来广泛研究的焦点。木质素的生物合成受到一个十分复杂的调控网络的调控,目前普遍认为是基于nac-myb的基因调控网络模型。在该模型中,nac转录因子是第一层调控因子,作为木质部细胞分化的分子开关,既可以通过调控第二层调控因子,也可以跳过第二层调控因子,直接调控第三层基因来参与木质素的生物合成。第二层调控因子是包括atmyb46和atmyb83在内的myb转录因子,它们是第一层调控因子的直接靶点,同时也直接参与木质素生物合成途径关键酶基因及其他木质素生物合成相关myb转录因子基因(如atmyb58、atmyb63、myb103等)的转录调控。除了nac和myb转录因子外,其他转录因子如bhlh、wrky等也被报道参与调控木质素的生物合成。总之,木质素的生物合成机制极其复杂。
3、尽管在解析木质素在植物免疫中的作用以及木质素的生物合成机制方面取得了大量的进展,但是,目前关于木质素生物合成调控网络中的各个层次的关键因子之间如何通过调控木质素的生物合成介导植物对病原菌的防御反应仍缺乏系统地研究。
技术实现思路
1、为了解决上述技术问题,本发明提供一种黄瓜csmyb82基因及其应用,用于调控黄瓜木质素的生物合成以及对白粉病菌的抗性。
2、本发明是这样实现的,提供一种黄瓜csmyb82基因,其核苷酸序列如seq id no.1所示。
3、提供一种黄瓜csmyb82基因编码的蛋白质,其氨基酸序列如seq id no.2所示。
4、提供一种黄瓜csmyb82基因的重组表达载体。
5、提供一种黄瓜csmyb82基因的重组菌。
6、提供一种黄瓜csmyb82基因的应用,用于调控cscse1基因的表达。
7、优选的,上述应用中,所述黄瓜csmyb82基因或其特异性序列与cscse1启动子中的myb元件“caacca”特异性结合,抑制cscse1基因的表达。
8、提供一种黄瓜csmyb82基因的应用,用于调控黄瓜对白粉病菌的抗性。
9、优选的,上述应用中,所述白粉病菌为活体营养型真菌病原体,拉丁名为podosphaera xanthii。
10、提供一种黄瓜csmyb82基因的应用,用于调控黄瓜木质素的生物合成。
11、提供一种调控黄瓜木质素的生物合成和对白粉病菌抗性的方法,将所述的黄瓜csmyb82基因或其特异性序列导入黄瓜中,所述csmyb82基因的特异性序列如seq id no.3所示。
12、与现有技术相比,本发明的优点在于:
13、本发明提供的csmyb82基因是通过酵母单杂交筛选到能与cscse1启动子结合的myb转录因子。进一步通过emsa和烟草瞬时表达分析证明csmyb82基因直接特异性结合cscse1启动子中的“caacca”序列,并抑制cscse1基因的表达。csmyb82基因能被白粉病菌诱导表达,并在感染白粉病菌的b21-a-2-1-2和b21-a-2-2-2黄瓜中存在差异表达。利用农杆菌介导的黄瓜子叶瞬时转化系统发现csmyb82基因负调控木质素的生物合成和黄瓜对白粉病菌的抗性。本发明为黄瓜抗病品种的培育提供了新的参考基因资源,也为通过木质素途径介导植物免疫的分子机制研究提供了新的思路。
1.黄瓜csmyb82基因,其特征在于,其核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.权利要求1所述的黄瓜csmyb82基因编码的蛋白质,其特征在于,其氨基酸序列如seqid no.2所示。
3.权利要求1所述的黄瓜csmyb82基因的重组表达载体。
4.权利要求1所述的黄瓜csmyb82基因的重组菌。
5.权利要求1所述的黄瓜csmyb82基因的应用,其特征在于,用于调控cscse1基因的表达。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述黄瓜csmyb82基因或其特异性序列与cscse1启动子中的myb元件“caacca”特异性结合,抑制cscse1基因的表达。
7.权利要求1所述的黄瓜csmyb82基因的应用,其特征在于,用于调控黄瓜对白粉病菌的抗性。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述白粉病菌为活体营养型真菌病原体,拉丁名为podosphaera xanthii。
9.权利要求1所述的黄瓜csmyb82基因的应用,其特征在于,用于调控黄瓜木质素的生物合成。
10.调控黄瓜木质素的生物合成和对白粉病菌抗性的方法,其特征在于,将权利要求1所述的黄瓜csmyb82基因或其特异性序列导入黄瓜中,所述csmyb82基因的特异性序列如seq id no.3所示。