本发明涉及生物化学与分子生物学,具体涉及一种五达颗粒含药血清对术后肠麻痹(postoperative ileus,poi)症状的研究方法。
背景技术:
1、术后肠麻痹的概念,泛指为手术后暂时性的胃肠运动功能障碍。术后肠麻痹是腹部手术后常见的并发症之一。其病理生理学机制是多因素的,包括手术创伤、炎症、水肿、神经损伤等多方面,而其中一个重要的机制是手术操作引起的组织创伤可导致大量细胞因子和炎症介质的释放。
2、术后患者常出现胃肠功能障碍等并发症,针对这些并发症,目前普遍存在缺乏有效的主动干预措施,临床疗效不明显,甚至出现不良反应等情况,需要从理论方法上找到解决这些临床难题的思路及路径。
3、中医学将术后胃肠功能障碍的症状归属于“肠痹”、“肠结”等范畴,肠道失运则胀痛拒按,大便不通或脾胃运化失职,水谷相杂而下。气机升降失调为主要病机,调升降、疏理气机以畅通三焦为其主要治法。中医药治疗术后并发症有不良反应少,效果明显的优势。
4、例如,专利cn1628815a公开了大黄煎液与大承气汤联合用于治疗术后炎性肠梗阻的药物中的应用,具有通里攻下、活血化瘀、清热解毒、抗菌和促使肠蠕动的大黄煎液胃管注入联合复方大承气汤加减保留灌肠通过促使患者的肠管活动以加速炎症吸收和协助梗阻缓解,来促进肠梗阻患者的炎症粘连吸收以达到治疗目的。cn106668389a公开一种促进术后胃肠功能恢复及防治术后肠麻痹的中药组合物及其制备方法,中药口服制剂采用传统煎煮方法结合现代制剂技术提取、浓缩、制剂而成;能有效的促进患者术后胃肠功能恢复及防治术后肠麻痹,减少其经济负担。
5、目前暂无五达颗粒含药血清对术后胃肠功能障碍的相关研究,因此,探索五达颗粒含药血清中的化学成分和作用机制对于术后胃肠功能障碍药物的筛选、研发具有深刻意义。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种五达颗粒含药血清对术后肠麻痹(poi)症状的研究方法。本发明通过明确五达颗粒含药血清中药物组分对术后肠麻痹(poi)症状的药用价值,为突破治疗术后肠麻痹(poi)症状奠定基础,尤其是细胞中12个差异表达基因的表达水平情况,为下一步探究五达颗粒含药血清的作用机制提供数据支持。
2、一方面,本发明提供一种五达颗粒含药血清对术后肠麻痹(poi)症状的研究方法,包括以下步骤:
3、步骤s1、将五达颗粒水溶液灌胃健康动物后,取含五达颗粒血浆制备五达颗粒含药血清;
4、步骤s2、对含药血清中药物组分进行检测;
5、步骤s3、原代培养的smc细胞系加入步骤s2所得五达颗粒含药血清培养,并完成rna-seq实验。
6、优选地,所述含药血清中含有去甲异波尔定、槟榔碱。
7、优选地,所述含药血清中含有人参皂苷rc、人参皂苷rd、槲皮苷、异槲皮苷、去甲异波尔定、槟榔碱和苦杏仁苷。
8、优选地,步骤s2,检测通过高效液相法鉴定五达颗粒中的化学成分。
9、优选地,所述步骤s3中,所述rna-seq实验鉴定出12个差异表达基因,其中4个上调,8个下调。
10、优选地,所述上调的4个基因依次是zc3h11a、stx16-npepl1、ptges3l-aarsd1、disp1。
11、上调的基因zc3h11a在生物体内非常重要,具有多种功能,特别是在发育、免疫反应和病毒复制等方面。stx16-npepl1基因异常与胃肠道疾病关系密切,上调为保护胃肠道。ptges3l-aarsd1基因在免疫细胞中表达,可能参与免疫反应和t细胞受体信号传导。disp1基因对生物组织结构、功能稳态具有重要作用。下调的基因多与肿瘤、代谢疾病发生、细胞内代谢、凋亡密切相关。
12、优选地,所述下调的8个基因分别是zbed6、best1、tcaf2、ac005324.3、palm2-akap2、al136295.4、stbd1、al355312.5。
13、另一方面,本发明提供一种前述五达颗粒含药血清在制备术后肠麻痹的药物组合物中的应用,所述药物组合物含有药理学上可接受的药用辅料。
14、优选地,所述药物组合物的剂型包括胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、片剂、注射剂、冻干粉剂。
15、优选地,所述药物组合物以任意比例/单药/联合在制备治疗术后肠麻痹(poi)制剂中的应用。
16、本发明具备的有益效果:本发明对五达颗粒含药血清运用高效液相法鉴定五达颗粒含药血清中的化学成分、含药血清处理smc细胞,使得smc细胞生理功能趋于正常,说明五达颗粒含药血清能用于术后肠麻痹症状的治疗。
17、一直以来,由于技术限制、中药成分复杂等原因,中药药理学的研究进展缓慢,本发明通过研究五达颗粒水溶液的组分,并对其有效药用组分进行分析及可能的作用机制,为之后术后肠麻痹(poi)药物的开发奠定基础,为后续术后肠麻痹(poi)发现、治疗药物、治疗预后评估的研究提供新工具。
1.一种五达颗粒含药血清对术后肠麻痹症状的研究方法,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述研究方法,其特征在于,所述含药血清中含有去甲异波尔定和槟榔碱。
3.根据权利要求2所述研究方法,其特征在于,所述含药血清中含有人参皂苷rc、人参皂苷rd、槲皮苷、异槲皮苷、去甲异波尔定、槟榔碱和苦杏仁苷。
4.根据权利要求1所述研究方法,其特征在于,步骤s2,检测通过高效液相法鉴定五达颗粒中的化学成分。
5.根据权利要求1所述研究方法,其特征在于,所述步骤s3中,所述rna-seq实验鉴定出12个差异表达基因,其中4个上调,8个下调。
6.根据权利要求5所述研究方法,其特征在于,所述上调的4个基因依次是zc3h11a、stx16-npepl1、ptges3l-aarsd1、disp1;所述下调的8个基因分别是zbed6、best1、tcaf2、ac005324.3、palm2-akap2、al136295.4、stbd1、al355312.5。
7.一种权利要求1中所述五达颗粒含药血清在制备术后肠麻痹的药物组合物中的应用,所述药物组合物含有药理学上可接受的药用辅料。
8.根据权利要求7所述应用,其特征在于,所述药物组合物的剂型包括胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、片剂、注射剂、冻干粉剂。
9.根据权利要求7所述应用,其特征在于,所述药物组合物以任意比例/单药/联合在制备治疗术后肠麻痹制剂中的应用。