本发明属于医疗药物领域，具体涉及一种薯蓣皂苷在类风湿关节炎药物中的应用及机制研究方法。
背景技术：
1、类风湿关节炎(ra)是以t细胞反应为主要的自身免疫性疾病，其特征是活化免疫细胞的浸润和炎症因子的产生，可导致软骨、骨骼损伤和残疾。且具有迁延日久、延绵难治的特点，是当今世界医学领域的难题。与正常人群相比，ra患者发生严重感染、呼吸系统疾病、骨质疏松、心血管疾病、癌症和死亡的风险更高。全球的平均患病率为0.2％-1.0％，我国的患病率为0.2％-0.4％，同时我国部分地区发病率仍然呈现上升的趋势，且我国ra治疗现状仍不容乐观。所以不断攀升的发病率和致残率给患者、医疗机构和社会带来了巨大的负担，积极改善其治疗具有重大的医学意义和社会价值。
技术实现思路
1、为了进一步改善当下类风湿关节炎的治疗现状，本发明提供了一种薯蓣皂苷在类风湿关节炎药物中的应用以及薯蓣皂苷治疗类风湿关节炎的作用机制研究方法。
2、一种薯蓣皂苷治疗类风湿关节炎的作用机制研究方法，包括以下步骤：
3、通过数据库分别预测薯蓣皂苷和ra交集靶点，构建蛋白相互作用网络图，通过cytoscape3.7.2软件进行可视化，筛选核心靶点并进行基因本体功能(go)和京都基因和基因组百科全书(kegg)通路富集分析，获得薯蓣皂苷与ra相关的信号通路。通过构建牛ⅱ型胶原诱导的dba/1小鼠关节炎(cia)模型，按照关节炎临床评分法进行评分后，随机分为cia模型组、甲氨蝶呤(mtx)阳性对照组、薯蓣皂苷低(dioscin-l)、中(dioscin-m)、高(dioscin-h)给药组，药物干预后，通过关节炎临床评分法及苏木精-伊红(h&e)染色分析关节组织的病理损伤程度来观察薯蓣皂苷抗胶原关节炎的疗效。采用酶联免疫法(elisa)分析抗胶原特异性抗体和致炎因子il-17的产生水平；利用流式细胞术检测淋巴结和脾脏淋巴细胞γδtcr及其亚型vδ4的表达水平；通过流式细胞术进行胞内染色，检测γδt细胞及其亚型vδ4分泌il-17+水平。通过对比cia模型组、甲氨蝶呤(mtx)阳性对照组、薯蓣皂苷低(dioscin-l)、中(dioscin-m)、高(dioscin-h)给药组各组的抗胶原特异性抗体和致炎因子il-17的产生水平、淋巴结和脾脏淋巴细胞γδtcr及其亚型vδ4的表达水平、γδt细胞及其亚型vδ4分泌il-17+水平得出治疗机制结论。
4、根据上述，薯蓣皂苷可应用于风湿关节炎的治疗药物中。
5、本发明的有益效果是：
6、通过采用多对照组(cia模型组、甲氨蝶呤(mtx)阳性对照组、薯蓣皂苷低(dioscin-l)、中(dioscin-m)、高(dioscin-h)给药组)的不同给药干预的方式，采集不同对照组疗效、关节组织的病理损伤程度、抗胶原特异性抗体和致炎因子il-17的产生水平、淋巴结和脾脏淋巴细胞γtcr及其亚型v4的表达水平、γδt细胞及其亚型vδ4分泌il-17+水平的数据，进行协同分析。
7、薯蓣皂苷作为穿山龙主要活性成分，现有技术中缺乏确切的作用靶点以及靶点确认方法，进而无法确定其针对类风湿关节炎的作用机制，限制了临床应用。本发明提供的方法能快速有效的筛选核心靶点并明确治疗机制，为实际临床中的药物应用提供理论基础，以提升薯蓣皂苷在类风湿关节药物应用中的质量。
1.一种薯蓣皂苷治疗类风湿关节炎的作用机制研究方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述一种薯蓣皂苷治疗类风湿关节炎的作用机制研究方法，其特征在于，步骤1中通过数据库分别预测薯蓣皂苷和ra交集靶点，构建蛋白相互作用网络图，通过cytoscape 3.7.2软件进行可视化，筛选核心靶点。
3.根据权利要求1所述一种薯蓣皂苷治疗类风湿关节炎的作用机制研究方法，其特征在于，步骤2中做通路富集分析，获取薯蓣皂苷与ra相关的信号通路。
4.根据权利要求1所述一种薯蓣皂苷治疗类风湿关节炎的作用机制研究方法，其特征在于，所述s4中采用关节炎临床评分法评价薯蓣皂苷抗胶原关节炎的疗效。
5.根据权利要求1所述一种薯蓣皂苷治疗类风湿关节炎的作用机制研究方法，其特征在于，所述s4中采用苏木精-伊红(h&e)染色和关节组织学评分评价关节组织的病理损伤程度，评价薯蓣皂苷治疗ra的疗效。
6.根据权利要求1所述一种薯蓣皂苷治疗类风湿关节炎的作用机制研究方法，其特征在于，所述s4中中采用酶联免疫法(elisa)分析抗胶原特异性抗体的浓度和致炎因子il-17的产生水平，以评价薯蓣皂苷治疗ra的疗效。
7.根据权利要求1所述一种薯蓣皂苷治疗类风湿关节炎的作用机制研究方法，其特征在于，所述s4中中利用流式细胞术检测淋巴结和脾脏淋巴细胞γδtcr及其亚型vδ4的表达水平。
8.根据权利要求1所述一种薯蓣皂苷治疗类风湿关节炎的作用机制研究方法，其特征在于，所述s4中中通过流式细胞术进行胞内染色，检测γδt细胞及其亚型vδ4分泌il-17+水平。
9.薯蓣皂苷在治疗类风湿关节炎药物中的应用。
