本发明涉及蓝莓育种，特别涉及一种蓝莓多倍体诱导方法。
背景技术：
1、蓝莓是杜鹃花科越橘属的多年生落叶或常绿灌木型果树，是一种食用价值和营养价值较高的新兴浆果，具有广阔的经济发展前景。国内蓝莓研究起步晚，自主研发品种缺乏，现有栽培品种主要来自于国外，亟需培育具有我国自主知识产权的特色优质蓝莓新品种。
2、植物组织培养技术广泛应用于无病毒苗木繁育和新品种培育，早熟、大果和抗性强是蓝莓的主要育种目标；多倍体植物具有较强的遗传可塑性及生理适应性，通常具有器官巨大化、抗性强等特征，因此多倍体育种是种质创新的重要方向；利用组织培养技术与多倍体诱导相结合培育大果和抗性强蓝莓新品种，既缩短育种周期，且不受季节变化影响。
3、因此基于建立的叶片再生体系，开发蓝莓多倍体诱导方法处理蓝莓叶片，诱导多倍体，创制多倍体育种材料，为选育果大、抗性强、优质的蓝莓新品种奠定种植基础。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一种蓝莓多倍体诱导方法，创制蓝莓多倍体材料，为选育优质新品种提供材料基础。
2、本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：包括以下步骤，
3、(1)在超净工作台上配制秋水仙素溶液，并进行过滤灭菌，然后选取组培苗生长均一的幼嫩叶片并将其横切成两半，浸泡在所述秋水仙素溶液中，置于摇床上振荡处理；
4、(2)用无菌滤纸将步骤(1)中处理得到的叶片表面的水分吸干，接种到生芽培养基中，置于培养室培养，培养温度(25±1)℃，黑暗培养10天，之后转移到光照条件下，培养20天陆续生芽；
5、(3)取步骤(2)中得到的不定芽的叶片利用流式细胞仪进行倍数鉴定。
6、本发明的进一步设置为：在步骤(2)中，所述生芽培养基为wpm+2.0mg/l zt+0.05mg/l iba+30g/l蔗糖+7g/l琼脂粉，ph为5.2-5.4。
7、本发明的进一步设置为：在步骤(1)中，所述秋水仙素溶液的质量分数为0.0375％。
8、本发明的进一步设置为：在步骤(1)中，所述振荡处理条件为120r/min，24h。
9、本发明的进一步设置为：在步骤(1)中，所述蓝莓的品种为莱格西。
10、本发明的进一步设置为：在步骤(2)中，所述光照条件为光照强度12000lx，光照时间16h/d。
11、本发明的有益效果是：
12、1、本发明利用秋水仙素浸渍法处理蓝莓品种莱格西组培苗叶片，通过染色体压片和流式细胞术鉴定再生不定芽叶片的倍性，获得莱格西纯合八倍体，为蓝莓大果、优质新品种选育奠定了材料基础。
13、2、本发明的蓝莓品种为莱格西，在0.0375％秋水仙素处理叶片24h条件下，愈伤诱导率100％，生芽率39.12％。
14、3、本发明获得莱格西纯合八倍体，加倍植株在形态上与正常植株明显不同，具体表现为茎增粗、叶片面积增大及厚度增加等。
1.一种蓝莓多倍体诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.据权利要求1所述的一种蓝莓多倍体诱导方法，其特征在于：在步骤(2)中，所述生芽培养基为wpm+2.0mg/l zt+0.05mg/l iba+30g/l蔗糖+7g/l琼脂粉，ph为5.2-5.4。
3.根据权利要求1所述的一种蓝莓多倍体诱导方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述秋水仙素溶液的质量分数为0.0375％。
4.根据权利要求1所述的一种蓝莓多倍体诱导方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述振荡处理条件为120r/min，24h。
5.根据权利要求1所述的一种蓝莓多倍体诱导方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述蓝莓的品种为莱格西。
6.根据权利要求1所述的一种蓝莓多倍体诱导方法，其特征在于：在步骤(2)中，所述光照条件为光照强度12000lx，光照时间16h/d。
