本发明涉及植物组织培养，尤其涉及一种西印度醋栗的组织培养繁殖方法。
背景技术：
1、西印度醋栗(phyllanthus acidus(l.)skeels)原产自马达加斯加岛，是一种大戟科(euphorbiaceae)叶下珠属(phyllanthus)的热带植物。西印度醋栗的各个部位都具有药用价值，在热带、亚热带地区有广泛的应用。在印度传统医药中，其叶可以用来治疗发烧、痔疮、天花、瘙痒和牙龈感染；在泰国传统药物中，西印度醋栗的根可用于退热和治疗皮肤炎。此外，西印度醋栗的茎皮还可以缓解女性月经期间的发热，果实含有多种营养成分和微量元素，具有抗炎和抗氧化作用。西印度醋栗由于具有丰富的化学成分和良好的药理活性，人们对其开展了一系列的深入研究。目前，从西印度醋栗中已成功分离出大量化合物，其中萜类化合物是其主要化学成分，部分化合物具有显著的抗肿瘤、抗乙肝、抗氧化、保肝、抑菌等多方面生物活性。
2、由于种子萌发率低以及种苗繁育速度慢等问题，西印度醋栗在食品和医药方面的开发与利用受到了严重的制约。迄今为止，国内外已有关于叶下珠属的多种植物组织培养的研究报道，但是对于西印度醋栗组织培养和快速繁殖的研究报道还相对鲜见。
技术实现思路
1、本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，基于已有的同属植物组培繁殖方式，提供一种培养过程简单、高效的西印度醋栗组织培养快速繁殖方法，实现西印度醋栗在食品和药用上的进一步开发与利用。
2、为实现上述目的，本发明提供以下的技术方案：
3、一种西印度醋栗的组织培养繁殖方法，包括以下步骤：
4、(1)外植体的制备与消毒：采长度为2～3cm的带一对腋芽的幼嫩茎尖为外植体；在保留一部分叶柄的前提下剪除外植体上的叶片，将剪除叶片后的茎尖用洗涤剂水浸泡30～60秒，流水冲洗1～2小时，再用乙醇和升汞溶液消毒，最后用无菌水清洗4～5次；
5、(2)初代培养：取消毒好的茎尖用无菌纸擦干水分后切去两端0.5cm，将茎尖的芽朝上插入初代培养基中进行不定芽诱导培养，培养温度为25±1℃，光照强度为1000～1500lx,光周期为12小时光照/12小时黑暗；培养25天，待诱导出不定芽长成有2～3片叶片的初代苗；
6、(3)继代增殖培养：从所述初代苗上切离不定芽，将不定芽切成带一对腋芽的2cm小段；将腋芽插入继代增殖培养基中，培养温度为25±1℃，光照强度为1000～1500lx,光周期为12小时光照/12小时黑暗；培养25天，待腋芽长至3～4cm高且诱导出新的不定芽小苗，即得到西印度醋栗组培苗；
7、(4)生根培养：从西印度醋栗组培苗上切离小苗，并将切离的小苗接种到生根培养基上，培养温度为25±1℃，光照强度为1000～1500lx,光周期为12小时光照/12小时黑暗；培养30天，待切离的小苗长出4～6根、长2～3cm的粗壮根系，即得到西印度醋栗生根苗；
8、(5)炼苗移栽：待西印度醋栗生根苗生长至根长3cm,高3～5cm的时，将其移到温室大棚中开瓶炼苗7天，将其从培养瓶中取出,洗净其底部培养基,后移栽至混合基质上培养长成完整的植株。
9、进一步地，如上所述的西印度醋栗的组织培养繁殖方法，在步骤(1)中，消毒方案如下：75％乙醇溶液消毒30秒，0.1％升汞溶液消毒15分钟。
10、进一步地，如上所述的西印度醋栗的组织培养繁殖方法，在步骤(2)中，所述初代培养基为：ms+2.0mg·l-16-ba+0.2mg·l-1naa，ph为5.8～6.0。
11、进一步地，如上所述的西印度醋栗的组织培养繁殖方法，在步骤(3)中，继代增殖培养基为：ms+0.1mg·l-16-ba+0.2mg·l-1iba；ph为5.8～6.0。
12、进一步地，如上所述的西印度醋栗的组织培养繁殖方法，在步骤(4)中，生根培养基为：ms+1.5mg·l-1iba；ph为5.8～6.0。
13、进一步地，如上所述的西印度醋栗的组织培养繁殖方法，在步骤(5)中，移栽前需将西印度醋栗生根苗置于多菌灵溶液中浸泡5～7分钟，移栽的基质为消过毒的混合基质；所述混合基质包括：珍珠岩、泥炭土、腐殖质，三者的体积比为1:1:1。
14、本发明一种西印度醋栗的组织培养快速繁殖方法的技术效果和优点：
15、本发明提供了一种简单、高效的西印度醋栗组织培养快速繁殖方法，解决了现有技术中存在的问题。通过本发明的不定芽诱导配方、继代增殖配方及生根培养配方，使西印度醋栗实现了快速大量繁殖。本发明方法简单、高效，可广泛应用于西印度种质资源保存、优良株系培育等领域。
1.一种西印度醋栗的组织培养繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的西印度醋栗的组织培养繁殖方法，其特征在于：在步骤(1)中，消毒方案如下：75％乙醇溶液消毒30秒，0.1％升汞溶液消毒15分钟。
3.根据权利要求1所述的西印度醋栗的组织培养繁殖方法，其特征在于：在步骤(2)中，所述初代培养基为：ms+2.0mg·l-16-ba+0.2mg·l-1naa，ph为5.8～6.0。
4.根据权利要求1所述的西印度醋栗的组织培养繁殖方法，其特征在于：在步骤(3)中，继代增殖培养基为：ms+0.1mg·l-16-ba+0.2mg·l-1iba；ph为5.8～6.0。
5.根据权利要求1所述的西印度醋栗的组织培养繁殖方法，其特征在于：在步骤(4)中，生根培养基为：ms+1.5mg·l-1iba；ph为5.8～6.0。
6.根据权利要求1所述的西印度醋栗的组织培养繁殖方法，其特征在于：在步骤(5)中，移栽前需将西印度醋栗生根苗置于多菌灵溶液中浸泡5～7分钟，移栽的基质为消过毒的混合基质；所述混合基质包括：珍珠岩、泥炭土、腐殖质，三者的体积比为1:1:1。
