本发明整体涉及免疫调节和与pd-1特异性结合的抗体及其使用方法。
背景技术：
1、程序性细胞死亡受体蛋白(pd-1)/程序性细胞死亡受体蛋白配体1(pd-l1)途径作为癌症免疫疗法靶点已显示出有希望的临床成功。目前靶向pd-1或pd-l1的抗体可阻断这种相互作用并增强针对癌细胞的免疫应答。pd-1单克隆抗体和其他免疫检查点抑制剂的成功临床试验为癌症免疫学开辟了新途径。然而，大部分癌症患者对新的免疫疗法没有反应导致对联合疗法和预测性生物标志物的研究日趋深入(iwai,y.等人，journal ofbiomedical science，第24卷，第26页(2017))。
2、因此，本发明的目的是提供用于调节pd-1信号传导的组合物和方法。
3、本发明的另一个目的是提供与pd-1特异性结合并调节pd-1信号传导的抗体及其抗原结合片段。
4、本发明的另一个目的是提供用于治疗癌症的组合物和方法。
5、本发明的另一个目的是提供用于治疗感染的组合物和方法。
技术实现思路
1、提供了与pd-1、优选人或小鼠pd-1免疫特异性结合并诱导或促进激活免疫细胞增殖或活性的免疫应答的抗体及其抗原结合片段。在一个实施方案中，所公开的抗体及其抗原结合片段与免疫细胞上表达的pd-1特异性结合。所公开的抗体及其抗原结合片段与免疫细胞上的pd-1的结合导致激活信号(例如增强或促进细胞因子产生和/或免疫细胞增殖激活的信号)被传递到免疫细胞中。表达pd-1的免疫细胞包括但不限于b细胞和t细胞以及髓源性细胞(riley,j.，immunol rev.，第229卷第1期，第114–125页(2009))。在一个实施方案中，免疫细胞是t细胞，优选cd8+t细胞。
2、另一个实施方案提供了在有此需要的受试者中刺激、促进或增强适应性免疫应答的方法，该方法通过向该受试者施用有效量的所公开的抗pd-1抗体或其抗原结合片段以在受试者中诱导、增强或促进适应性免疫应答。
3、一个实施方案提供了具有重链互补决定区(cdr)和轻链cdr的抗体或其抗原结合片段，该重链cdr具有根据seq id no:6、7和8的氨基酸序列，该轻链cdr具有根据seq idno:12、13和14的氨基酸序列，其中该抗体或其抗原结合片段免疫特异性结合pd-1。
4、一个实施方案提供了具有重链的抗体或其抗原结合片段，该重链与seq id no:4或5具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
5、一个实施方案提供了具有轻链的抗体或其抗原结合片段，该轻链与seq id no:10或11具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
6、一个实施方案提供了具有重链和轻链的抗体或其任何抗原结合片段，该重链与seq id no:4或5具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性，该轻链与seq id no:10或11具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
7、一个实施方案提供了经工程改造以表达所公开的抗体或其抗原结合片段中的任一种的转基因动物。在一个实施方案中，该动物是小鼠。
8、一个实施方案提供了编码重链的核酸，该重链与seq id no:4或5具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
9、一个实施方案提供了编码轻链的核酸，该轻链与seq id no:10或11具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
10、一个实施方案提供了具有重链cdr和轻链cdr的抗体或其抗原结合片段，该重链cdr具有根据seq id no:18、19和20的氨基酸序列，该轻链cdr具有根据seq id no:24、13和25的氨基酸序列。
11、一个实施方案提供了具有重链的抗体或其抗原结合片段，该重链与seq id no:16或17具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
12、一个实施方案提供了具有轻链的抗体或其抗原结合片段，该轻链与seq id no:22或23具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
13、一个实施方案提供了具有重链和轻链的抗体或其抗原结合片段，该重链具有与seq id no:16或17具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性，该轻链与seq id no:22或23具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
14、一个实施方案提供了编码重链的核酸，该重链与seq id no:16或17具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
15、一个实施方案提供了编码轻链的核酸，该轻链与seq id no:22或23具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
16、一个实施方案提供了具有重链cdr和轻链cdr的抗体或其抗原结合片段，该重链cdr具有根据seq id no:29、30和31的氨基酸序列，该轻链cdr具有根据seq id no:35、36和37的氨基酸序列。
17、一个实施方案提供了具有重链的抗体或其抗原结合片段，该重链与seq id no:27或28具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
18、一个实施方案提供了具有轻链的抗体或其抗原结合片段，该轻链与seq id no:33或34具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
19、一个实施方案提供了具有重链和轻链的抗体或其抗原结合片段，该重链具有与seq id no:27或28具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性，该轻链与seq id no:33或34具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
20、一个实施方案提供了编码重链的核酸，该重链与seq id no:27或28具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
21、一个实施方案提供了编码轻链的核酸，该轻链与seq id no:33或34具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
22、一个实施方案提供了包含三个轻链cdr的抗体或其抗原结合片段，该三个轻链cdr具有选自由下列组成的组：seq id no:12、13、14、24、25、35、36或37的氨基酸序列。
23、另一个实施方案提供了包含三个重链cdr的抗体或其抗原结合片段，该三个重链cdr具有选自由下列组成的组：seq id no:6、7、8、18、19、20、29、30或31的氨基酸序列。
24、另一个实施方案提供了包含三个轻链cdr和三个重链cdr的抗体或其抗原结合片段，该三个轻链cdr具有选自由下列组成的组：seq id no:12、13、14、24、25、35、36或37的氨基酸序列，该三个重链cdr具有选自由下列组成的组：seq id no:6、7、8、18、19、20、29、30或31的氨基酸序列。
25、一个实施方案提供了免疫特异性结合seq id no:38的抗体或其表位结合片段或融合蛋白。在一个实施方案中，该抗体与pd-1上的seq id no:38结合。在一个实施方案中，该抗体与免疫细胞表面上表达的pd-1结合，并通过pd-1诱导或促进激活或刺激免疫细胞的信号。在一个实施方案中，被激活或刺激的免疫细胞是t细胞，例如cd8+t细胞。
26、在一些实施方案中，该抗体或其抗原结合片段是人、小鼠、嵌合、人源化、单克隆、双特异性、三特异性或多特异性的。
27、一个实施方案提供了包括所公开的抗体或其抗原结合片段中的一种或多种的药物组合物。在一些实施方案中，该药物组合物包括第二治疗剂和/或药学上可接受的赋形剂。示例性第二治疗剂包括环磷酰胺。
28、一个实施方案提供了在有此需要的受试者中诱导、促进或增强免疫应答的方法，该方法通过向受试者施用有效量的所公开的抗体或其抗原结合片段中的一种或多种以在受试者中诱导、促进或增强免疫应答。
29、一个实施方案提供了用于治疗有此需要的受试者的癌症的方法，该方法通过向受试者施用有效量的所公开的抗体或其抗原结合片段中的一种或多种来治疗受试者的癌症。
30、一个实施方案提供了用于减轻有此需要的受试者的肿瘤负担的方法，该方法通过向受试者施用有效量的所公开的抗体或其抗原结合片段中的一种或多种来减少受试者的肿瘤负担。
31、一个实施方案提供了用于治疗有此需要的受试者的感染的方法，该方法通过向受试者施用有效量的所公开的抗体或其抗原结合片段中的一种或多种来治疗受试者的感染。
1.一种包含重链互补决定区(cdr)和轻链cdr的抗体或其抗原结合片段，所述重链cdr具有根据seq id no:6、7和8的氨基酸序列，且所述轻链cdr具有根据seq id no:12、13和14的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含与seq id no:4或5具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％序列同一性的重链。
3.根据权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含与seq id no:10或11具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％序列同一性的轻链。
4.一种包含重链和轻链的抗体或其任何抗原结合片段，所述重链与seq id no:4或5具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性，所述轻链与seq id no:10或11具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
5.一种经工程改造以表达根据权利要求1至4中任一项所述的抗体或其抗原结合片段的转基因动物。
6.根据权利要求5所述的转基因动物，其中所述动物是啮齿动物。
7.根据权利要求6所述的转基因动物，其中所述啮齿动物是小鼠。
8.一种编码与seq id no:4或5具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％序列同一性的重链的核酸。
9.一种编码与seq id no:10或11具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、99％或100％序列同一性的轻链的核酸。
10.一种包含重链cdr和轻链cdr的抗体或其抗原结合片段，所述重链cdr具有根据seqid no:18、19和20的氨基酸序列，且所述轻链cdr具有根据seq id no:24、13和25的氨基酸序列。
