本发明属于生物医药，具体是一种谷精草多糖的制备方法及其抗肿瘤的新用途。
背景技术：
1、肺癌是我国致死率最高的恶性肿瘤。临床上，肺癌一般可分为非小细胞肺癌(nsclc)和小细胞肺癌(sclc)，其中nsclc占比高达80-85％。肺癌的发生通常与吸烟，环境污染等因素有关。导致肺癌死亡率高的主要原因是肺癌被发现时通常处于转移期，而转移是肺癌晚期的主要特征。研究表明，肺癌主要通过淋巴管和血管转移，通过淋巴途径转移通常需要更长的时间才能形成远处转移灶，而通过血管扩散则会在远处转移灶早期形成转移灶。肺癌有一些优先转移的部位，如脑、骨和肾上腺，其他器官通常在疾病的晚期被累及。在不同类型的肺癌中，也有一个优先的转移部位，如sclc的肝转移和腺癌的脑转移。
2、谷精草在我国因其较高的药用价值作为中药使用，据《本草纲目》和《本草拾遗》等传统药物典籍的记载，其具清热祛风，清肝明目，利尿镇痛作用。2010年版《中国药典》规定以谷精草植物的干燥带花茎的头状花序作为中药谷精草。谷精草含有多糖、苷、黄酮和微量元素等多种成分。研究显示谷精草提取物具有抗菌、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、神经保护等药理活性。
3、中药多糖是一类在中草药中广泛存在的多糖化合物，在中医药学中具有悠久的历史和广泛的应用。近年来，中医药开始在肺癌治疗中发挥重要作用，取得了显著成效。中药多糖因低毒副作用而被广泛应用于抗癌治疗，对抑制肿瘤细胞的增殖、转移以及增强免疫力等方面具有不同程度的治疗效果。中药多糖还能促进肠道益生菌的生长，修复肠道黏膜，对肺癌治疗起着积极作用。
4、一直以来，谷精草多糖(eriocauli flos polysaccharide,efp)在肺癌方面的研究未见报道，因此本发明有望进一步阐明谷精草多糖抗肿瘤活性及内在机制，有利于开发谷精草多糖在抗肺癌治疗上的新用途。
技术实现思路
1、为了解决上述技术问题，本发明提供了一种谷精草多糖的制备方法及其抗肿瘤的新用途。
2、本发明的技术方案如下：
3、本发明提供了谷精草多糖在制备抗肿瘤药物中的用途。
4、进一步地，本发明提供了谷精草多糖在制备抗肺癌药物中的用途。
5、本发明通过实验发现，所述的用途是通过谷精草多糖对肺癌细胞(a549、llc)的抑制作用。
6、本发明测定了所述谷精草多糖分离组分的分子量及单糖组分，所述谷精草多糖是以葡萄糖为主的杂多糖。
7、所述谷精草多糖是谷精草风干捣碎后得到粉末，通过热水提取、透析、脱色、除蛋白、脱脂、离子柱分离后得到的多糖分离组分。
8、具体地，所述的谷精草多糖是采用以下方法制备得到的：
9、(1)取风干捣碎后的谷精草粉末，用热水浸提，将所得水提液进行抽滤、离心、旋转蒸发仪浓缩、透析浓缩得到粗多糖；
10、(2)将步骤(1)所得粗多糖通过脱色，除蛋白，脱脂，得到纯化后粗多糖；
11、(3)将步骤(2)所得粗多糖用deae-sepharose ff离子柱纯化，然后浓缩、透析、冻干得到纯化多糖。
12、进一步地，所述的谷精草多糖是采用以下方法制备得到的：
13、(1)将新鲜的谷精草经风干后捣碎，融入蒸馏水中，热水提取2h，取出水提液进行抽滤，离心。采用旋转蒸发仪浓缩，将浓缩提液倒入500da的透析袋，透析几天后冻干机冻干得到粗多糖；
14、(2)粗多糖纯化经过脱色、除蛋白、脱脂三个步骤。脱色：用蒸馏水溶解样品，使用naoh-h2o2法处理后，使用500da透析袋透析过夜，去除小分子杂质，浓缩冻干。除蛋白：蒸馏水溶解样品，用氯仿-正丁醇混合液去除蛋白，重复sevag法五次。最后离心，收集上清液，浓缩冻干。脱脂：在除蛋白后的冻干样品中加入石油醚溶液，至液面没过所有样品，超声1h后弃去上层溶液，风干剩余样品；
15、(3)多糖的分级纯化：用大型离子柱通过三种浓度的流动相(0m、1m、2m)对efp进行等度洗脱分离得到几个组分，将收集到的组分分别浓缩后，用500da透析至nacl除尽，再浓缩后冻干得到谷精草多糖组分。
16、进一步地，步骤(1)中，用热水浸提时，谷精草粉末与蒸馏水的体积比为1：8。
17、进一步地，步骤(2)中，脱色使用naoh-h2o2法处理，其naoh为4m，调节ph至9-10，再加入30％ h2o2，搅拌1.5h后重复三次。
18、进一步地，步骤(2)中，除蛋白使用sevag法，氯仿-正丁醇体积比为4：1，样品溶液与氯仿-正丁醇混合液体积比为1：1。
19、进一步地，步骤(2)中，脱脂使用石油醚溶液，加至其液面没过所有样品，超声1h后弃去上层溶液，风干沉淀完成脱脂。
20、进一步地，分级纯化步骤中，先使用通过小型deae-sepharose ff离子柱，确定efp进行梯度洗脱的最佳条件为：上样量(0.2g)，流动相(2.0mnacl溶液)，收集体积(5.0ml/管)，在此基础上经过调整得到大型离子柱的洗脱最佳条件。
21、进一步地，使用hplc检测谷精草多糖分离组分的分子量及单糖组成。
22、本发明所述药物还包括药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂等，所述药物的制剂包括液体制剂、颗粒剂、片剂、冲剂、胶囊、缓释剂或注射剂等。
23、本发明的有益效果如下：本发明提供了一种谷精草多糖的制备及其抗肿瘤的新用途，相较于现有与肺癌治疗相关的中药多糖，该方法通过提取谷精草多糖组分将其作为抗肿瘤的药物，对肺癌细胞(a549、llc)的增殖、迁移和侵袭具有抑制作用，动物实验结果表明谷精草多糖具有良好的体内抗肺癌作用，有望开发为新的抗肿瘤尤其是肺癌的药物。本发明有利于开发谷精草多糖的抗肺癌新用途，开发与传统治疗方法相联合的抗肿瘤治疗方式。
1.谷精草多糖在制备抗肿瘤药物中的用途。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于谷精草多糖在制备抗肺癌药物中的用途。
3.如权利要求1或2所述的用途，其特征在于所述的用途是通过谷精草多糖对肺癌细胞(a549、llc)的抑制作用。
4.如权利要求1或2所述的用途，其特征在于所述谷精草多糖是以葡萄糖为主的杂多糖。
5.如权利要求1或2所述的用途，其特征在于所述的谷精草多糖是采用以下方法制备得到的：
6.如权利要求5所述的用途，其特征在于步骤(1)中，用热水浸提时，谷精草粉末与蒸馏水的体积比为1：8。
7.如权利要求5所述的用途，其特征在于步骤(2)中，脱色使用naoh-h2o2法处理，其naoh为4m，调节ph至9-10，再加入30％h2o2，搅拌1.5h后重复三次。
8.如权利要求5所述的用途，其特征在于步骤(2)中，除蛋白使用sevag法，氯仿-正丁醇体积比为4：1，样品溶液与氯仿-正丁醇混合液体积比为1：1。
9.如权利要求5所述的用途，其特征在于步骤(2)中，脱脂使用石油醚溶液，加至其液面没过所有样品，超声1h后弃去上层溶液，风干沉淀完成脱脂。
10.如权利要求1或2所述的用途，其特征在于所述药物还包括药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂，所述药物的制剂包括液体制剂、颗粒剂、片剂、冲剂、胶囊、缓释剂或注射剂。
