本发明属于生物医药，涉及一种眼用环孢素纳米胶束药物及其制备方法和应用。
背景技术：
1、环孢素，又称环孢素a，是由11个氨基酸组成的环形多肽，是一种强效、选择性的免疫抑制剂。环孢素在眼科方面近年来被用于治疗干眼症(角结膜干燥症)、角结膜炎及角膜移植后的免疫排斥反应，其作用机理包括抑制t细胞激活，从而降低炎性细胞因子的产生，抗细胞凋亡、增加杯状细胞密度和黏蛋白分泌水平及增加眼泪流量等。环孢素作为临床长期用药安全有效，无全身性不良反应，能明显改善干眼症、角结膜炎及相关眼部疾病的不适症状。
2、环孢素是一种脂溶性极强的药物，性状是白色粉末，在乙腈、乙醇等有机溶剂中极易溶解，在水中其水溶性仅为12ng/ml(25℃)。但以滴眼液形式给药时每只眼睛的结膜囊容积通常不超过30μl，因此，通过提高环孢素的浓度来提高作用于眼部的有效药物量，提高眼部组织中的药物浓度以达到更好的效果是亟需研究的方向。
3、目前，市场上环孢素的制剂有很多，但几乎为油剂或乳剂。油剂及乳剂对于眼局部使用，通常有较强的灼热感及刺激性。因此，亟需开发新的安全有效的且稳定性好的高浓度环孢素滴眼液产品。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种眼用环孢素纳米胶束药物及其制备方法和应用，具体涉及一种眼用环孢素纳米胶束药物及其制备方法和一种环孢素滴眼液及其制备方法。本发明利用纳米胶束技术，将难溶性药物环孢素制成高浓度的稳定的眼用溶液制剂，该制剂中不含任何油相成分，刺激性小，且制备过程简单便捷，易于放大和应用。
2、为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
3、第一方面，本发明提供一种眼用环孢素纳米胶束药物，所述眼用环孢素纳米胶束药物由形成胶束粒子的第一增溶剂和第二增溶剂，以及负载于胶束粒子中的环孢素组成；
4、所述第一增溶剂选自聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚山梨酯80、月桂醇聚氧乙烯醚(brij35)、泊洛沙姆188、硬脂酸聚烃氧40酯或泰洛沙泊中的任意一种或至少两种的组合；
5、所述第二增溶剂选自聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯或如下结构化合物中的任意一种或至少两种的组合：
6、
7、
8、在上述结构化合物中，r各自独立地选自c9-c26烷基；r1选自c1-c5亚烷基；r2各自独立地选自h、甲基或乙基；m+选自na+、k+或nh4+；聚乙二醇链段的分子量各自独立地为500-20000。
9、所述c9-c26烷基是指c9烷基、c10烷基、c11烷基、c12烷基、c13烷基、c14烷基、c15烷基、c16烷基、c17烷基、c18烷基、c19烷基、c20烷基、c21烷基、c22烷基、c23烷基、c24烷基、c25烷基、c26烷基。所述c1-c5亚烷基是指c1亚烷基、c2亚烷基、c3亚烷基、c4亚烷基、c5亚烷基。
10、所述聚乙二醇链段的分子量可以各自独立地选择为500、1000、2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、10000、13000、15000、20000等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
11、本发明所涉及的眼用环孢素纳米胶束药物选择如上所述特定类型的第一增溶剂和第二增溶剂，并借助纳米胶束技术解决了环孢素在水中的溶解性问题，使得环孢素能够以较高浓度稳定地存在于水溶液中，有利于环孢素在眼部组织的更高浓度的累积，从而有利于环孢素更快发挥作用。且局部刺激性低，可提高患者使用的舒适度。
12、环孢素并非以任意的增溶剂就能够将其成功负载形成稳定的胶束体系，本发明所使用的第一增溶剂属于眼科药物常用的增溶剂，价格较低，安全性好，但单独的第一增溶剂溶液不能直接溶解环孢素；本发明创造性地将第二增溶剂与第一增溶剂进行复配，这种组合方式能够使得环孢素直接溶解，采用直接水化法便能制备高环孢素含量的稳定的纳米胶束，简单便捷，安全环保。两种增溶剂合用并非是两种增溶剂溶解度的简单叠加，他们之间相互影响，协同增加环孢素的溶解度，且其总成本较低，具有较高的实用价值。
13、优选地，所述第二增溶剂选自聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯、mpeg-dspe(甲氧基-聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺)、mpeg-dppe(甲氧基-聚乙二醇-二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺)、alc-0159(甲氧基聚乙二醇双十四烷基乙酰胺)、mpeg-dmg(1,2-二肉豆蔻酰-rac-甘油-3-甲氧基聚乙二醇)、mpeg-dsg(甲氧基聚乙二醇双琥珀酰亚胺戊二酸酯)中的任意一种或至少两种的组合；在上述结构化合物中，聚乙二醇链段的分子量各自独立地为500-20000，例如500、1000、2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、10000、13000、15000、20000等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
14、优选地，所述第一增溶剂与第二增溶剂的总质量与环孢素质量的比例不低于4:1，例如4.5:1、5:1、5.5:1、6:1、6.5:1、7:1、7.5:1、8:1、9:1、10:1、11:1、12:1、13:1、14:1、15:1、16:1等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
15、优选地，所述第一增溶剂与第二增溶剂的质量比不高于10:1，例如9.5:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、0.5:1、0.1:1等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
16、优选地，所述眼用环孢素纳米胶束药物的粒径为5-100nm，例如5nm、10nm、15nm、20nm、30nm、40nm、50nm、60nm、70nm、80nm、90nm、100nm等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
17、第二方面，本发明提供根据第一方面所述的眼用环孢素纳米胶束药物的制备方法，所述制备方法包括：
18、将环孢素与第一增溶剂、第二增溶剂以及水混合，使环孢素溶解，得到所述眼用环孢素纳米胶束药物。
19、本发明所涉及的眼用环孢素纳米胶束药物采用直接水化法即可制得，环孢素在4h内即可完全溶解，区别于制备多数聚合物胶束的薄膜水化法等方法，该方法简单便捷不使用任何有机溶剂，有利于工业化放大生产，安全环保。且制得的眼用环孢素纳米胶束药物体系非常稳定，货架期长，有利于储存和运输。
20、优选地，所述溶解在0-70℃下进行，例如2℃、4℃、10℃、25℃、30℃、35℃、40℃、50℃、60℃、70℃等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
21、上述制备方法对温度无特殊要求，在0-70℃下均能实现产品的制备。
22、优选地，所述溶解借助如下任意一种或至少两种的方式进行：
23、(1)搅拌；(2)振荡；(3)超声处理。
24、优选地，所述环孢素在混合体系中的终浓度为0.2-10mg/ml，例如0.5mg/ml、1mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml、6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml等。
25、优选地，所述第一增溶剂在混合体系中的终浓度为0.01-20mg/ml，例如0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.5mg/ml、1mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、5mg/ml、8mg/ml、10mg/ml、12mg/ml、14mg/ml、16mg/ml、18mg/ml等。
26、优选地，所述第二增溶剂在混合体系中的终浓度为2-30mg/ml，例如5mg/ml、8mg/ml、10mg/ml、12mg/ml、15mg/ml、18mg/ml、20mg/ml、22mg/ml、25mg/ml、28mg/ml、30mg/ml等。
27、上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
28、优选地，所述第一增溶剂与第二增溶剂的总质量与环孢素质量的比例不低于4:1，例如4.5:1、5:1、5.5:1、6:1、6.5:1、7:1、7.5:1、8:1、9:1、10:1、11:1、12:1、13:1、14:1、15:1、16:1等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
29、优选地，所述第一增溶剂与第二增溶剂的质量比不高于10:1，例如9.5:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、0.5:1、0.1:1等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
30、第三方面，本发明提供根据第一方面所述的眼用环孢素纳米胶束药物在制备眼用环孢素制剂中的应用。
31、第四方面，本发明提供一种环孢素滴眼液，所述环孢素滴眼液的制备原料包括第一方面所述的眼用环孢素纳米胶束药物。
32、优选地，所述环孢素滴眼液的制备原料还包括渗透压调节剂、ph调节剂、增稠剂、防腐剂中的任意一种或至少两种的组合。
33、第五方面，本发明提供根据第四方面所述的环孢素滴眼液的制备方法，所述制备方法包括：
34、将渗透压调节剂、ph调节剂、增稠剂、防腐剂中的任意一种或至少两种的组合与眼用环孢素纳米胶束药物混合溶解于水中，即得。
35、优选地，所述混合溶解后还将溶液通过0.22微米的过滤器滤过除去不溶的微粒。
36、相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
37、本发明所涉及的眼用环孢素纳米胶束药物创造性地复配总成本较低的特定类型的第一增溶剂和第二增溶剂，并借助纳米胶束技术解决了环孢素在水中的溶解性问题，使得环孢素能够以较高浓度稳定地存在于水溶液中，有利于环孢素在眼部组织的更高浓度的累积，从而有利于环孢素更快发挥作用。且局部刺激性低，可提高患者使用的依从性和耐受性。产品的稳定性好，有利于储存和运输。且该眼用环孢素纳米胶束药物采用直接水化法制得，环孢素在4h内即可完全溶解，区别于制备多数聚合物胶束的薄膜水化法等，该方法不使用任何有机溶剂，有利于工业化放大生产，安全环保。该方法的生产总成本较低，具有较大的实用价值。
1.一种眼用环孢素纳米胶束药物，其特征在于，所述眼用环孢素纳米胶束药物由形成胶束粒子的第一增溶剂和第二增溶剂，以及负载于胶束粒子中的环孢素组成；
2.根据权利要求1所述的眼用环孢素纳米胶束药物，其特征在于，所述第二增溶剂选自聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯、mpeg-dspe、mpeg-dppe、alc-0159、mpeg-dmg、mpeg-dsg中的任意一种或至少两种的组合；在上述结构化合物中，聚乙二醇链段的分子量各自独立地为500-20000。
3.根据权利要求1或2所述的眼用环孢素纳米胶束药物，其特征在于，所述第一增溶剂与第二增溶剂的总质量与环孢素质量的比例不低于4:1；
4.根据权利要求1-3中任一项所述的眼用环孢素纳米胶束药物，其特征在于，所述眼用环孢素纳米胶束药物的粒径为5-100nm。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的眼用环孢素纳米胶束药物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述溶解在0-70℃下进行；
7.根据权利要求1-4中任一项所述的眼用环孢素纳米胶束药物在制备眼用环孢素制剂中的应用。
8.一种环孢素滴眼液，其特征在于，所述环孢素滴眼液的制备原料包括权利要求1-4中任一项所述的眼用环孢素纳米胶束药物。
9.根据权利要求8所述的环孢素滴眼液，其特征在于，所述环孢素滴眼液的制备原料还包括渗透压调节剂、ph调节剂、增稠剂、防腐剂中的任意一种或至少两种的组合。
10.根据权利要求8或9所述的环孢素滴眼液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
