发明领域本发明属于纳米，更具体地属于药物、食品、化妆品和兽药领域，并且涉及具有高固体含量的蜂胶提取物的纳米结构水性制剂(nano-ap)。所述制剂可以以液体形式使用，或添加到半固体或液体基质中，以获得是用於人类或兽药用，具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗病毒活性的产品。发明基础自古以来，蜂胶就作为治疗剂用，以其抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗过敏、抗真菌和抗菌作用而闻名(patel,2015；endo et al.,2018；daugsch et al.,2008)。此外，已被证明可以有效对抗脑癌、头颈癌、皮肤癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、肾癌、膀胱癌、前列腺癌、结肠癌和血癌(patel,2015)。蜂胶是由蜜蜂(主要来自意大利蜜蜂)从植物的各个部分收集的物质与其分泌物(例如蜂蜡和唾液)，所混合形成的树脂。蜜蜂将蜂胶用来修补蜂巢的破洞，并保护其免受昆虫和微生物的侵害(devequi-nunes et al.,2018；de et al.,2015；reis etal.,2019)。蜂胶的成分因地理区域及其植物而异，一般由富含次生代谢物的50％树脂，加上30％蜡、10％精油、5％花粉和5％其他物质以及300多种化学物质组成，其中多种化合物已经鉴定出，特别是酚类化合物和类黄酮(endo et al.,2018；de et al.,2015；reis et al.,2019；devequi-nunes et al.,2018)。蜂胶根据蜜蜂采集材料的地理区域的植物群和生产时期的不同而异，呈现出多种多样且复杂的化学成分。其地理和植物来源对于质量控制、标准化和治疗效率非常重要(lustosa et al.,2008)，与其化学和生物成分密切相关(de et al.,2015)。蜂胶因其抗氧化、抗炎、抗真菌、抗病毒和抗菌特性而闻名于世(sforcin et al.,2011；dantas et al.,2017)。绿蜂胶(pv，葡文缩写)是全球使用最广泛的蜂胶。baccharis dracunculifoliadc(菊科)，被称为“田野迷迭香”或“金雀花”，是绿色蜂胶的主要植物来源，因其颜色而得名(búfalo et al.,2010)。如下所述，绿蜂胶提取物的主要成分是酚类化合物，尤其是源自肉桂酸的酚类化合物，如阿替匹林c(artepelin c)、酒神菊素(baccharine)和杜鲁潘宁(drupanin)，此外还有其他酚酸，如咖啡酸和香豆酸(barretta et a.,2017；sousa et a.,2007；endo et al.,2018)。巴西红蜂胶(pvb，葡文缩写)也因其成分不同于其他蜂胶，而在世界市场上脱颖而出(freires et al.,2016)。其主要植物来源是dalbergia ecasthophyllum，是一种在红树林区域和巴西东北地区海岸发现的物种(freires et al.,2016；reis et al.,2019)。该蜂胶提取物中存在的二苯甲酮聚异戊二烯化衍生物，表明其成分也来自另一种植物：symphonia globulifera(aldana-mej ia et al,2021)。与其生物活性最相关的化合物是异黄酮类的次生代谢物，例如芒柄花素(formononetin)、紅花苜蓿多酚(biochanin a)和维斯体素(vestitol)，还发现了二苯甲酮(benzophenone)和其他类别的化合物(berretta et al.,2017；reis et al.,2019)。尽管蜂胶提取物具有众多优点，但由于生物利用度低、主要成分水溶性低、蜂胶气味强烈以及最终配方中存在酒精，蜂胶提取物的使用受到限制(daudt et al.,2013；watkins et al.,2015)。因此，纳米技术的使用成为克服这些限制的帮手，能够封装蜂胶提取物，并获得具有高固体含量和优于纯提取物的性能的水分散体。将分子封装在纳米结构中，可以改善活性成分的性能和稳定性，增加其生物利用度，溶解亲脂性化合物，提供封装活性成分的持续释放，将其导向生物靶标，降低毒性等优点(mora-huertas et al.,2010；daudt et al.,2013)。脂质纳米结构(例如纳米乳液和微乳液)因其生物相容性和可生物降解性而脱颖而出，因为与脂质体相比，它们具有更高的稳定性和更大的封装亲脂性化合物的能力，而且易于大规模制备(miranda et al.,2021；singh et al.,2017)。脂质纳米结构用途广泛，可以掺入凝胶、霜剂、软膏、泡沫等中。此外，它们可以添加到水中以获得调味水，这可以增加封装的天然化合物的稳定性并延长其释放。技术现状一些现有技术文献，描述了用于牙科和美容领域的含有绿蜂胶或红蜂胶的纳米结构制剂，例如：文獻br102012010441-5a2中提到由非离子表面活性剂和粘度剂组成的蜂胶乙醇提取物的胶态分散体，該粘度剂能够降低提取物的疏水性及其在水性介质中形成沉淀的倾向，在不改变结构的情况下提高结构的混溶性。然而，该文献与本发明不同，因为其由聚合物胶束体系组成，该体系是不同于本发明的纳米结构体系的纳米结构体系，本发明的纳米结构体系是微乳液。胶束体系由表面活性剂、蜂胶提取物和水组成，而微乳液由表面活性剂、助表面活性剂、油、蜂胶提取物和水组成。此外，上述文献使用蜂胶乙醇提取物，与本发明不同，本发明使用不含酒精的蜂胶提取物。文献cn103768103 b涉及一种油水型纳米乳液，包含1％蜂胶提取物、溶剂油、表面活性剂和超纯水，其中溶剂油选自矿物油、植物油、动物油或合成油。表面活性剂选自磷脂、非离子表面活性剂或其混合物。另外，平均粒径为15～70nm，优选为15～50nm，更优选为15～20nm。然而，该文献所使用的纳米结构的类型和方法，与本发明不同。例如，上述文献中，采用高压均化器的高能方法和高温(75℃)以取得纳米乳液，而本发明中采用的是低搅拌速度和低温度(25-45℃)取得的微乳液，以保存蜂胶提取物中存在的化合物，并且含有5-12％的蜂胶提取物，8-12％尤佳。纳米结构的成分也不同，影响纳米结构的物理化学和生物特性的差异。文献br102015016405-0b1描述了含有红蜂胶提取物的聚合物纳米颗粒，以及一種由涂层和分散剂/稳定剂聚合物组成的纳米聚合物基质。该纳米封装系统由二元系统组成，具有生物相容性、可生物降解特性，还可促进活性成分的受控释放，也保护皮肤化妆品组合物免受蜂胶提取物中存在的酚类物质的氧化攻击。文献br102015033031-6a2除了描述获得方法之外，还描述了纳米封装物质的组合物，内含封装抗菌活性的生物聚合基质中的红蜂胶提取物，可用于控制多重耐药性感染。该组合物以红蜂胶纳米胶囊呈现，由红蜂胶的水乙醇提取物、水相和有机相组成。可以看出，两篇文献由于所使用的纳米结构的类型及其组成，而与本发明不同。br102015016405-0和br102015033031-6两份文献中，通过可生物降解的聚合物，例如聚己内酯(pcl)和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plga)来使用聚合物纳米颗粒。此外，已存在用于漱口含有纯绿蜂胶的纳米结构制剂，例如文献wo2013/163714，也存在含有绿蜂胶提取物的纳米胶囊或聚合物纳米球制剂，例如文献ep2633862a1，或红蜂胶提取物，例如文献br102016018124-0和wo2018/023182，用于医药、化妆品、农艺领域的应用，含有绿色蜂胶提取物的聚合胶束用作液体分散体，例如文献cn1303899c，蜂胶提取物与环糊精的包合物，例如文献wo2017/089842和wo2012/073051。此外，文献cn101869234描述了使用有机溶剂(乙醇和乙酸乙酯)和稳定剂制备的绿蜂胶提取物获得纳米乳液。文献br102018072871提及一种微乳液制剂，其包覆含有绿蜂胶提取物或其分离物的聚合物，其组成于本发明不同，其中水相由水、聚乙二醇和胆汁盐组成，油相由橄榄油或向日葵和饱和脂肪酸组成，卵磷脂与胆盐一起用作表面活性剂。具有提取物的微乳液是在高搅拌下获得的，这与本发明不同，在本发明中，低搅拌一段中使用自发形成过程。此外，在形成微乳液之后，发明人用壳聚糖或白蛋白涂覆该纳米结构，获得与本发明不同的纳米结构体系。改变纳米结构的组成可以显着改变物理化学特性，从而改变纳米结构的生物效应及其与生物体的相互作用(ridolfo et al.,2021；albanese et al.,2012。可以看出，所引用的文献与本文提出的发明的不同之处，在于纳米结构的类型：化学成分和物理化学特性，并且本发明将是第一个提出纳米结构脂质系统，来封装高总固体含量的蜂胶提取物，特别是在低搅拌且不使用有机溶剂下，一步获得的巴西绿蜂胶或红蜂胶提取物。因此，本发明带来的创新是一种易于规模化的纳米结构微乳液脂质系统，避免使用含有高含量蜂胶提取物(nano-ap)的有机溶剂，特别是巴西绿或红蜂胶提取物，但不限于这些提取物，可作为水性制剂以应用于制药、食品、化妆品和兽药领域，具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗病毒活性，包括对引起covid-19的sars-cov-2病毒产生作用。
背景技术：
技术实现思路
1、本发明的目的是提出一种含有高含量蜂胶提取物(nano-ap)，特别是绿蜂胶(nano-apv)或巴西红蜂胶(nano-apvb)提取物的纳米结构水性制剂，旨在药物、食品、化妆品和兽药的制剂。蜂胶提取物中存在的生物活性物质，负责其抗氧化、抗菌、抗炎、抗肿瘤和抗病毒活性，这些活性通过将提取物封装在微乳液中而得到增强。
1.蜂胶提取物的纳米结构脂质制剂的，其特征在于，它包含：
2.根据权利要求1所述的制剂，其特征在于，所述脂质组，选自大豆油、辛酸/癸酸甘油三酯、90、亚麻籽油、菜籽油、葡萄籽油、辣木油、麦芽油和椰子油，优选亚麻籽油、菜籽油和大豆油。
3.根据权利要求1所述的制剂，其特征在于，表面活性剂选自聚氧乙烯聚氧丙烯聚氧乙烯嵌段共聚物，尤其是f68或407、hs15或聚山梨醇酯(尤其是80、60、20)或脱水山梨糖醇单油酸酯(尤其是60、80、20)，最好是hs15、聚山梨醇酯80和脱水山梨糖醇单油酸酯80。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的制剂的用途，其特征在于，所述制剂为液体形式或者添加到半固体或液体基质中以获得具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗病毒活性。
5.根据权利要求4所述的制剂的用途，其特征在于，其用于制药、食品、化妆品和兽药领域中的应用。
6.根据权利要求4所述的制剂的用途，其特征在于，其还用于添加到水中以获得调味水。
