雌激素受体降解剂、其中间体、制备方法、药物组合物和用途与流程

1.本发明涉及一种雌激素受体降解剂、其中间体、制备方法、药物组合物和用途。


背景技术：

2.根据世界卫生组织国际癌症研究机构(iarc)统计，2020年，乳腺癌取代肺癌成为全球发病率第一的癌症，也是女性中发病率最高的癌症。
3.经过多年的研究，己经确定了雌激素-雌激素受体信号通路在乳腺癌发展中的作用；而雌激素受体(er)己经发展成了乳腺癌最重要的生物标记物。以雌激素受体表达为判别指标，乳腺癌可以划分为雌激素受体阳性乳腺癌及雌激素受体阴性乳腺癌；其中，雌激素受体阳性的乳腺癌占乳腺癌患者总数的70％以上。
4.雌激素受体(er)是甾体类激素受体，属于核受体超家族的由配体激活的转录因子，包含两种亚型：分别由不同基因编码的erα(1950年发现)和erβ(1996年发现)。erα和erβ在氨基酸水平上显现高度的相似性，其在dna结合结构域的相似度高达97％，配体结合结构域的相似度达56％，然而，在n末端仅有24％的低同源性。er包含6个结构域(a-f)，组成4个主要的功能区，n端a/b域的功能区具有非配体依赖的转录激活功能区af-1，af-1具有组成性激活活性，通过与基础转录因子、复活因子和其它转录因子的作用激活靶标基因的转录，该区域有多个磷酸化位点，有文献报导af-1的作用依赖于蛋白的磷酸化。c域组成的dna结合结构域(dbd)具有高度的保守性，包含2个锌指结构域，能特异性地结合到靶标dna上，同时该结构域对受体的二聚化具有重要的作用。d域为铰链区，链接dbd和配体结构域(lbd)，保守性较低(两亚型间的同源性仅30％)。c端的e域组成配体结合结构域(lbd)，该结构域决定er与雌激素、serm(选择性雌激素受体调节剂)、serd(选择性雌激素受体降解剂)等配体的特异性结合。lbd具有配体依赖的转录激活功能区af-2，与af-1协同作用发挥er受体激活靶基因转录的功能。同时，lbd具有很强的二聚化界面，并在没有配体的情况下仍能发挥作用，因此，lbd是受体发生二聚化的关键部位。
5.erα主要分布在子宫、卵巢、睾丸、垂体、肾、附睾和肾上腺中，而erβ主要分布在前列腺、卵巢、肺、膀胱、脑和血管中。由于全激动剂或全拮抗剂都有较严重的副作用，serm的研究应运而生。其“选择性”是指serm在某些组织如骨、肝、心血管系统erβ集中区中表现为激动剂，而在另外一些组织如乳腺中表现为拮抗剂。其在子宫(erα较显著区)中可以是激动剂，也可以是拮抗剂。目前已上市的serm包括他莫昔芬(tamoxifen)、雷洛昔芬(raloxifene)、苯卓昔芬(bazedoxifene)、托瑞米芬(toremifene)等，但研究发现目前已上市的serm仍有严重的副作用，如他莫昔芬和托瑞米芬长期服用会引起子宫内膜增生、息肉和子宫内膜癌等，而雷洛昔芬常见的副作用包括潮热、腿痛、乳房触痛和静脉栓塞等。
6.机理上，选择性雌激素受体降解剂拮抗雌激素受体功能，同时加速乳腺癌细胞内(正常的或者变异的)雌激素受体的泛素化降解，彻底阻断雌激素/雌激素受体信号通路，达到抑制正常的或者耐药性乳腺癌细胞生长增殖的目的。研究表明，选择性雌激素受体降解剂可有效抑制耐荷尔蒙以及耐serm的乳腺癌细胞的增殖。作为唯一上市的选择性雌激素受
体降解剂氟维司群(fulvestrant)在治疗耐荷尔蒙疗法以及耐serm疗法的乳腺癌上表现出了良好的效果，验证了选择性雌激素受体降解剂的独特优势。但是，氟维司群本身存在很多问题。首先，因为其pk性质很差，氟维司群表现出了零口服生物利用度；同时，氟维司群又有较高的血液清除率。由于以上两种原因，这个药物只能通过肌肉注射给药。但是，因为其强亲酯性结构，肌肉注射给药的氟维司群在组织分布上也存在严重问题；其临床表现为只有约50％应用氟维司群的乳腺癌患者表现出了临床响应。因此，具有更好的药代动力学和药效动力学特性、更高临床效率以及良好的口服生物利用度的serd的发现对治疗癌症非常有帮助。具有er介导的转录的有效抑制的纯拮抗剂serd在治疗癌症中将特别有益。需要新的serd来治疗癌症诸如乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌、子宫癌、胃癌和肺癌以及由新出现的抗性引起的突变。特别是需要新的serd来治疗er阳性的乳腺癌、胃癌和/或肺癌。


技术实现要素：

7.本发明的目的在于提供一种雌激素受体降解剂、其中间体、制备方法、药物组合物和用途。
8.本发明提供了一种通式i所示的化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其互变异构体、其同位素化合物或其溶剂合物：
[0009][0010]
r1为h或卤素；
[0011]
r2为卤素取代的c
1-4
烷基或卤素取代的c
1-4
烷氧基；
[0012]
x为-o(ch2)
n1-或-nr
x
(ch2)
n2-；r
x
为h或c
1-4
烷基；n1和n2独立地为0、1或2；
[0013]
y1和y2独立地为n或者cry；ry为h或卤素；
[0014]
l为4-6元杂环烷基，其中杂原子选自n、o和s中的一个或两个；
[0015]
r3为取代的c
1-4
烷基，其中取代基选自卤素和氰基中的一个或多个(例如1个、2个、3个、4个、5个或6个，又例如1个、2个或3个)；
[0016]
r4为oh、cooh或conh2；
[0017]
用*标注的碳为非手性碳或手性碳(r或s型手性碳)；
[0018]
条件是：通式i所示的化合物不为
[0019]
在某一实施方案中，r1中，所述卤素优选f、cl、br或i，进一步优选f。
[0020]
在某一实施方案中，r2中，所述卤素取代的c
1-4
烷基中的卤素优选f、cl、br或i。所述卤素取代的c
1-4
烷基中的卤素的个数优选1、2或3个。所述卤素取代的c
1-4
烷基中的c
1-4
烷
基优选甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。所述卤素取代的c
1-4
烷氧基中的卤素优选f、cl、br或i。所述卤素取代的c
1-4
烷氧基中的卤素的个数优选1、2或3个。所述卤素取代的c
1-4
烷氧基中的c
1-4
烷氧基优选甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基。r2中，所述卤素取代的c
1-4
烷基优选-cf3或-cf2h。所述卤素取代的c
1-4
烷氧基优选-ocf3或-ocf2h。
[0021]
在某一实施方案中，r
x
中，所述c
1-4
烷基优选甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。
[0022]
在某一实施方案中，x中的o端或n端与基团的1位相连。
[0023]
在某一实施方案中，l中，所述4-6元杂环烷基优选杂原子为n，杂原子数为1或2个；更优选氮杂环丁烷或吡咯烷。
[0024]
在某一实施方案中，r3中，当所述取代的c
1-4
烷基中取代基选自卤素时，所述卤素优选f、cl、br或i。所述取代的c
1-4
烷基中取代基的个数优选1、2或3个。所述取代的c
1-4
烷基中的c
1-4
烷基优选甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。r3中，所述取代的c
1-4
烷基优选-ch2f、-ch2cn或-ch2ch2ch2f。
[0025]
在某一实施方案中，r1优选卤素，更优选f。
[0026]
在某一实施方案中，当r1为h时，则r2为卤素取代的c
1-4
烷基或卤素取代的c
1-4
烷氧基；所述卤素取代的c
1-4
烷基中的卤素的个数优选1或2。
[0027]
在某一实施方案中，r2为卤素取代的c
1-4
烷基。
[0028]
在某一实施方案中，x为-o(ch2)
n1-。
[0029]
在某一实施方案中，y1和y2独立地为cry；ry为h或卤素；优选地，y1和y2为ch。
[0030]
在某一实施方案中，r4为oh。
[0031]
在某一实施方案中，
[0032]
r1为卤素；
[0033]
r2为卤素取代的c
1-4
烷基；
[0034]
x为-o(ch2)
n1-；n1为0、1或2；
[0035]
y1和y2为ch；
[0036]
l为4-6元杂环烷基，其中杂原子为n，杂原子数为1或2个；
[0037]
r3为取代的c
1-4
烷基，其中取代基选自卤素和氰基中的一个或多个；和
[0038]
r4为oh。
[0039]
在某一实施方案中，
[0040]
r1为卤素；
[0041]
r2为卤素取代的c
1-4
烷基；
[0042]
x为-o(ch2)
n1-；n1为0、1或2；
[0043]
y1和y2为ch；
[0044]
l为4-6元杂环烷基，其中杂原子为n，杂原子数为1或2个；
[0045]
r3为取代的c
1-4
烷基，其中取代基选自卤素和氰基中的一个或多个；和
[0046]
r4为oh；
[0047]
用*标注的碳为r-构型手性碳。
[0048]
在某一实施方案中，为为例如为例如为其中用#标注的碳为手性碳，其表示r-构型手性碳和s-构型手性碳任意比例的混合物。
[0049]
在某一实施方案中，用*标注的碳为非手性碳。
[0050]
在某一实施方案中，用*标注的碳为r-构型手性碳。
[0051]
在某一实施方案中，用*标注的碳为s-构型手性碳。
[0052]
在本发明一优选实施方案中，当x为-o(ch2)
2-，r2为-cf3时，l为4-6元杂环烷基，则r1为卤素。
[0053]
在本发明一优选实施方案中，当n1为2，即当x为-o(ch2)
2-，r2为-cf3和r1为h，r3为取代的甲基时，则取代基为氰基中的一个或多个。
[0054]
在某一实施方案中，所述通式i所示的化合物优选选自以下化合物：
[0055]
[0056]
[0057][0057]
优选为优选为
[0058][0059]
本发明的一些方案中，通式i所示的化合物可为化合物1在以下手性拆分条件下得到：
[0060][0061]
手性柱为chiralcel od-h，250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm；分别收集得到峰1和峰2的所述通式(i)所示的化合物。
[0062]
本发明的一些方案中，通式i所示的化合物可为化合物2在以下手性拆分条件下得到：
[0063][0064]
手性柱为chiralcel od-h,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm；分别收集得到峰1和峰2的所述通式(i)所示的化合物。
[0065]
本发明的一些方案中，通式i所示的化合物可为化合物3在以下手性拆分条件下得到：
[0066][0067]
手性柱为chiralpak ad-h,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm；分别收集得到峰1和峰2的所述通式(i)所示的化合物。
[0068]
本发明的一些方案中，通式i所示的化合物可为化合物5在以下手性拆分条件下得到：
[0069][0070]
手性柱为chiralpak ad-h,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm；分别收集得到峰1和峰2的所述通式(i)所示的化合物。
[0071]
本发明的一些方案中，通式i所示的化合物可为化合物6在以下手性拆分条件下得到：
[0072][0073]
手性柱为chiralpak ad-h,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm；分别收集得到峰1和峰2的所述通式(i)所示的化合物。
[0074]
本发明的一些方案中，通式i所示的化合物可为化合物7在以下手性拆分条件下得到：
[0075][0076]
手性柱为chiralpak ad-h,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm；分别收集得到峰1和峰2的所述通式(i)所示的化合物。
[0077]
本发明的一些方案中，通式i所示的化合物可为化合物8在以下手性拆分条件下得到：
[0078][0079]
手性柱为chiralcel od-h,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的甲醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm；分别收集得到峰1和峰2的所述通式(i)所示的化合物。
[0080]
本发明的一些方案中，通式i所示的化合物可为化合物9在以下手性拆分条件下得到：
[0081][0082]
手性柱为chiralpak ad-h,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm；分别收集得到峰1和峰2的所述通式(i)所示的化合物。
[0083]
本发明的一些方案中，通式i所示的化合物可为化合物10在以下手性拆分条件下得到：
[0084][0085]
手性柱为chiralpak ad-h,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动
相b为含0.1％氨水的异丙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm；收集得到峰1和峰2的所述通式(i)所示的化合物。
[0086]
对于本发明上述通式i中各化合物，峰1的出峰时间早于峰2的出峰时间。
[0087]
本发明的一些方案中，通式i所示的化合物在细胞水平上的erα拮抗活性ic
50
值小于14nm；所述细胞水平上的erα拮抗活性的检测方法可为本领域常规，例如为本技术效果实施例1记载的方法。
[0088]
本发明还提供了一种所述通式i所示的化合物的制备方法，其包括下列步骤：溶剂中，在碱的作用下，将通式i-a所示的化合物进行如下所示的芳香亲核取代反应即可；
[0089][0090]
其中，*、r1为、r2、r3、r4、x、l、y1和y2的定义均同前所述；hal为卤素，优选f或cl。
[0091]
所述通式i所示的化合物的制备方法优选包括下列步骤：将通式i-a所示的化合物与溶剂混合，得混合溶液，然后在0至5℃的条件下，将所述的混合溶液与碱混合，然后在0-65℃的条件下继续反应，即可。
[0092]
所述通式i所示的化合物的制备方法中，所述溶剂优选醚类溶剂和/或酰胺类溶剂，更优选醚类溶剂，例如四氢呋喃；例如为n,n-二甲基甲酰胺和/或n,n-二甲基乙酰胺。所述碱优选氢化钠、叔丁醇钾或叔丁醇钠。当所述溶剂为醚类溶剂时，所述反应的温度优选50℃至65℃；当所述溶剂为酰胺类溶剂时，所述反应的温度优选为0℃-室温。所述反应的进程一般为采用本领域常规监测方法检测到原料消失或反应不再进行即可。所述反应的时间一般为30分钟-2小时。
[0093]
所述通式i所示的化合物的制备方法中的后处理的方法和条件可为本领域常规的方法和条件。本发明的后处理的方法优选包括下列步骤：所述芳香亲核取代反应结束后，与饱和氯化铵水溶液混合(优选在-10℃至-20℃的条件下混合)，然后与萃取用有机溶剂混合(优选氯代烃类溶剂，例如二氯甲烷；或者酯类溶剂，例如乙酸乙酯)混合，有机相经干燥(优选无水硫酸钠干燥)后，过滤，除去溶剂(优选减压浓缩除去溶剂)，即可。根据需要，在后处理时可选择下列操作中的一种或多种：(i)在萃取时加入水；(ii)有机相在经干燥前，用饱和氯化钠水溶液洗涤；(iii)除去溶剂后再经柱纯化。
[0094]
本发明中，柱纯化一般采用手性sfc制备色谱纯化。其中所述手性sfc制备色谱的条件可包括：手性柱为chiralpak ad-h daicel chemical industries,ltd,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的醇溶液(其中醇为甲醇、乙醇或异丙醇，根据实际需要选择)，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm，收集得到目标化合物。
[0095]
所述通式i所示的化合物的制备方法，其还可进一步包括下列步骤：溶剂中，在手
性配体或无手性配体的存在下，在还原剂的作用下，将通式i-b所示的化合物进行如下所示的还原反应，制得所述通式i-a所示的化合物；
[0096][0097]
其中，*、r1为、r2、r3、r4、x、l、y1和y2的定义均同前所述；hal为卤素，优选为f或cl。
[0098]
当所述还原反应在无手性配体存在下进行时，所述通式i-a所示的化合物的制备方法优选包括下列步骤：气体保护下，将通式i-b所示的化合物与溶剂混合，得混合溶液，然后在0至5℃的条件下，将所述混合溶液与还原剂混合，进行所述还原反应。
[0099]
当所述还原反应在手性配体存在下进行时，所述通式i-a所示的化合物的制备方法优选包括下列步骤：气体保护下，将所述手性配体和溶剂混合(混合温度优选室温)，再与还原剂混合(混合温度优选室温)，所得混合液与通式i-b所示的化合物与溶剂的混合溶液混合；进行所述还原反应。所述的手性配体可为本领域此类反应常规的手性配体，例如(r)-二苯基(吡咯烷-2-基)甲醇、(s)-二苯基(吡咯烷-2-基)甲醇、(s)-2-甲基-cbs-恶唑硼烷、(r)-2-甲基-cbs-恶唑硼烷、(r)-2-正丁基-cbs-恶唑硼烷、(s)-2-正丁基-cbs-恶唑硼烷、(r)-2-苯基-cbs-恶唑硼烷或(s)-2-苯基-cbs-恶唑硼烷。
[0100]
所述通式i-a所示的化合物的制备方法中，所述溶剂优选醚类溶剂，例如四氢呋喃(超干四氢呋喃)。所述还原剂优选三乙基硼氢化锂、硼烷四氢呋喃和硼烷二甲硫醚中的一种或多种。所述反应的温度优选0至50℃。所述反应的进程一般为采用本领域常规监测方法检测到原料消失或反应不再进行即可。
[0101]
在某一实施方案中，当所述还原反应在无手性配体存在下进行时，所述还原剂优选三乙基硼氢化锂。所述反应的温度优选0℃至室温。
[0102]
在某一实施方案中，当所述还原反应在手性配体存在下进行时，所述还原剂优选硼烷四氢呋喃和/或硼烷二甲硫醚。所述的还原剂优选以还原剂和溶剂的混合液的形式加入到反应体系中。所述反应的温度优选室温至50℃(例如45℃)。
[0103]
所述通式i-a所示的化合物的制备方法中，所述气体保护中的气体优选氮气。
[0104]
所述通式i-a所示的化合物的制备方法中的后处理的方法和条件可为本领域常规的方法和条件。本发明的后处理的方法优选包括下列方法一或方法二：
[0105]
方法一包括下列步骤：所述还原反应结束后，与饱和氯化铵水溶液混合(优选在-10℃至-20℃的条件下混合)，然后与萃取用有机溶剂混合(优选氯代烃类溶剂，例如二氯甲烷；或者酯类溶剂，例如乙酸乙酯)混合，有机相经干燥(优选无水硫酸钠干燥)后，过滤，除去溶剂(优选减压浓缩除去溶剂)，即可。根据需要，在后处理时可选择下列操作中的一种或多种：(i)在萃取时加入水；(ii)有机相在经干燥前，用饱和氯化钠水溶液洗涤；(iii)除去溶剂后再经柱纯化；
[0106]
方法二包括下列步骤：所述还原反应结束后，除去溶剂(优选减压浓缩)得到残余物，将所得残余物与卤代烃类溶剂(例如二氯甲烷)和饱和氯化钠水溶液混合，分液(例如分
液后水相可进一步用卤代烃类溶剂萃取，然后合并有机相)，将所得有机相干燥(例如无水硫酸钠干燥)，除去溶剂(例如减压浓缩)即可。
[0107]
本发明还提供了一种通式i-a或i-b所示的化合物：
[0108][0109]
其中，*、r1为、r2、r3、r4、x、l、y1和y2的定义均同前所述；hal为卤素，优选f或cl。
[0110]
本发明还提供了一种药物组合物，其包含所述通式i所示的化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其互变异构体、其同位素化合物或其溶剂合物以及药学上可接受的辅料。
[0111]
本发明还提供了所述通式i所示的化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其互变异构体、其同位素化合物或其溶剂合物在制备治疗癌症的药物中的用途。
[0112]
本发明还提供了一种治疗癌症的方法，所述方法包括通过给予需要治疗的患者所述通式i所示的化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其互变异构体、其同位素化合物或其溶剂合物。
[0113]
本发明中，所述癌症优选乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌、子宫癌、胃癌或肺癌，特别优选乳腺癌、胃癌或肺癌，更优选er阳性的乳腺癌、胃癌和/或肺癌。
[0114]
本发明的化合物可以作为单一药剂使用，或与其他药物组合使用。所述的其他药物优选选自选择性雌激素受体调节剂、芳香酶抑制剂、cdk4抑制剂、cdk6抑制剂、pi3k抑制剂、激素治疗药物、化疗药物和mtor抑制剂中的一种或多种。
[0115]
定义说明
[0116]
术语“立体异构体”是指由分子中原子在空间上排列方式不同所产生的异构体，它包括对映异构体和非对映异构体。
[0117]
术语“对映异构体”是指互为镜像关系的立体异构体。
[0118]
术语“非对映异构体”是指分子具有两个或多个手性中心，并且分子间为非镜像的关系的立体异构体。
[0119]
术语“室温”是指温度为15℃至30℃。
[0120]
术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，由本发明发现的具有特定取代基的化合物与相对无毒的酸或碱制备。当本发明的化合物中含有相对酸性的功能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与这类化合物的中性形式接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐包括钠、钾、钙、铵、有机氨或镁盐或类似的盐。当本发明的化合物中含有相对碱性的官能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与这类化合物的中性形式接触的方式获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括无机酸盐，所述无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、磷酸、硫酸、硫酸氢根、氢碘酸、亚磷酸等；以及有机酸盐，所述有机酸包括如乙酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、乳酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、
柠檬酸、酒石酸和甲磺酸等类似的酸；还包括氨基酸(如精氨酸等)的盐，以及如葡糖醛酸等有机酸的盐。本发明的某些特定的化合物含有碱性和酸性的官能团，从而可以被转换成任一碱或酸加成盐。
[0121]
术语“互变异构体”是指在室温下，不同官能团异构体处于动态平衡，并能很快的相互转化。若互变异构体是可能的，则可以达到互变异构体的化学平衡。例如，质子互变异构体包括通过质子迁移来进行的互相转化，如酮-烯醇异构化和亚胺-烯胺异构化。价键异构体包括一些成键电子的重组来进行的相互转化。
[0122]
术语“溶剂合物”是指化合物分子或离子与溶剂分子相互结合得到的化合物。
[0123]
术语“治疗”是指抑制、减慢、停止或逆转现有症状或障碍的进展或严重程度。
[0124]
术语“患者”是指患有特定疾病、障碍或病症的人。
[0125]
在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
[0126]
本发明所用试剂和原料均市售可得。
[0127]
本发明的积极进步效果在于：
[0128]
本发明的化合物，在荧光素酶报告基因实验中展现了较高的erα拮抗活性；本发明的化合物具有erα降解活性，对体外培养的mcf-7细胞erα蛋白水平具有较强抑制活性；对体外培养的mcf-7细胞增殖具有较强抑制活性；能有效治疗癌症诸如乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌、子宫癌、胃癌和肺癌以及由新出现的抗性引起的突变。特别是需要新的serd来治疗er阳性的乳腺癌、胃癌和/或肺癌。在动物体内的半衰期长，在动物体内作用时间长，更高的血液暴露量，因此，具有更好的药代动力学和药效动力学特性、更高临床效率以及良好的口服生物利用度。
具体实施方式
[0129]
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
[0130]
实施例1
[0131]
[0132][0133]
第一步
[0134]
将化合物1a(5.00g，24.60mmol)溶于二氯甲烷(50ml)中，-78℃下缓慢加入二乙胺基三氟化硫(11.90g，73.90mmol)，滴加完毕后，自然恢复至室温，反应过夜，饱和碳酸氢钠溶液(50ml)淬灭，分液，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经柱层析(石油醚：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物1b(3.70g)，收率：66％。
[0135]
第二步
[0136]
将化合物1b(3.00g，13.30mmol)，三异丙基硼酸酯(3.76g，20.00mmol)溶于四氢呋喃(30ml)，置换氮气后，降温至-78℃，滴加2.5n正丁基锂四氢呋喃溶液(6.40ml，16.00mmol)，滴加完毕后，自然恢复至室温反应过夜，用饱和氯化铵溶液淬灭，减压浓缩得到残余物，残余物经反相柱层析(乙腈：水＝0-100％)纯化得到化合物1c(1.50g)，收率：59％。
[0137]
第三步
[0138]
向化合物1d(14.00g，74.70mmol)的二氯甲烷(200ml)溶液中，加入三乙胺(15.20g，150.00mmol)，4-二甲氨基吡啶(920mg，7.50mmol)，冰浴下滴入甲基磺酰氯(10.30g，89.70mmol)，滴加完毕后，室温反应过夜，用水(200ml)淬灭反应，并用二氯甲烷(200ml x 2)萃取，有机相合并后，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到残余物，残余物经柱层析(乙酸乙酯：石油醚＝0-100％)纯化得到化合物1e(17.86g)，收率：90％。
[0139]
第四步
[0140]
将化合物1e(17.86g，67.00mmol)加入到单口瓶(100ml)中，滴入三乙胺的氢氟酸盐(20.00g，120.60mmol)，搅拌下缓慢滴加1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯(28.50g，187.60mmol)，控制温度在50℃以下。滴加完毕后，升温至90℃反应过夜。自然降温至室温，加入水(50ml)，用石油醚(100ml x 2)萃取，有机相合并后用水(50ml x 1)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到1f(12.66g)，收率：70％。
[0141]
第五步
[0142]
将化合物1f(8.80g，46.50mmol)溶于甲醇(100ml)中，降温至0℃，向反应体系中加
入6n盐酸甲醇溶液(100ml)，室温反应2小时，减压浓缩除去溶剂得到粗品1g(6.00g)。
[0143]
第六步
[0144]
将粗品1g(6.00g，46.50mmol)溶于二氯甲烷(120ml)中，降温至0℃，分批将三乙酰基硼氢化钠(20.00g，94.50mmol)加入到反应体系中，并向反应体系中加入羟基乙醛二聚体(5.70g，47.60mmol)，室温搅拌过夜。加入水(200ml)淬灭反应，分液，水相经二氯甲烷(200ml x 1)洗涤，水相用50％的氢氧化钠水溶液调节ph》13，水相经二氯甲烷(200ml x 3)萃取，有机相合并后，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到化合物1h(5.60g)，收率：67％。
[0145]
第七步
[0146]
将化合物1i(15.00g，86.00mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(150ml)，在氮气保护下，加入n-氯代丁二酰亚胺(11.50g，86.00mmol)，升温至100℃反应过夜。加水(400ml)淬灭反应，分液，有机相用氯仿：异丙醇(3:1)混合溶剂(400ml x 2)萃取，有机相合并后，经饱和氯化钠溶液(400ml x 1)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品1j(18.00g)。
[0147]
第八步
[0148]
向粗品1j(18.00g，86.00mmol)的n,n-二甲基甲酰胺(500ml)溶液中，加入三溴化磷(35.00g，0.13mol)，室温反应1小时。加入饱和碳酸氢钠水溶液调ph约为13，有大量固体析出，过滤，固体经水(200ml x 2)洗涤，减压浓缩得到化合物1k(19.00g)，收率：81％。
[0149]
第九步
[0150]
将化合物1k(5.00g，18.00mmol)溶解于四氢呋喃(50ml)中，降温至-40℃，加入向反应体系中滴加1.3n异丙基氯化镁四氢呋喃溶液(27ml，36.00mmol)，维持-40℃反应1小时，向反应体系中加入4-氟苯甲酰氯(5.70g，36.00mmol)，自然恢复至室温下继续反应1小时，加饱和氯化铵(100ml)淬灭反应，并用乙酸乙酯(100ml x 2)萃取，有机相合并后，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到残余物，残余物经柱层析(乙酸乙酯：石油醚＝0-100％)纯化得到化合物1l(2.00g)，收率：35％。
[0151]
ms-esi计算值[m+h]
+
316，实测值316。
[0152]
第十步
[0153]
向化合物1l(2.00g，6.30mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中，加入三溴化硼(4.76g，19.00mmol)，升温到40℃反应过夜。向反应体系中加入饱和碳酸氢钠溶液(30ml)淬灭反应，加水(20ml)稀释，分液，水相经二氯甲烷(30ml x 2)萃取，有机相合并后经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经柱层析(乙酸乙酯：石油醚＝0-100％)纯化得到化合物1m(1.20g)，收率：63％。
[0154]
ms-esi计算值[m+h]
+
302，实测值302。
[0155]
第十一步
[0156]
将化合物1m(0.97g，3.21mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(20ml)中，向反应体系中加入60％的氢化钠(1.10g，26.80mmol)，搅拌5分钟后加入化合物1h(2.00g，6.70mmol)，升温至40℃反应1小时。加入饱和氯化铵溶液(20ml)淬灭反应，并用氯仿：异丙醇(3:1)混合溶剂(20ml x 3)萃取，有机相合并后，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品1n(800mg)。
[0157]
ms-esi计算值[m+h]
+
415，实测值415。
[0158]
第十二步
[0159]
将粗品1n(800mg，3.27mmol)溶于1,4-二氧六环(8ml)和水(2ml)的混合溶剂中，向
反应体系中加入化合物1c(550mg，2.89mmol)，碳酸钾(1.10g，7.72mmol)，xphos pd g2催化剂(175mg，0.19mmol)，氮气保护下升温至80℃反应12小时，反应液减压浓缩得到残余物，残余物经柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物1o(400mg)，两步收率：24％。
[0160]
ms-esi计算值[m+h]
+
525，实测值525。
[0161]
第十三步
[0162]
将化合物1o(300mg，0.57mmol)溶于四氢呋喃(6ml)中，降温至0℃，加入1n三乙基硼氢化锂的四氢呋喃溶液(5.80ml，5.80mmol)，室温反应1小时。饱和氯化铵溶液(20ml)淬灭反应，并用乙酸乙酯(20ml x 3)萃取，有机相合并后，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到残余物，残余物经柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物1p(150mg)，收率：50％。
[0163]
ms-esi计算值[m+h]
+
527，实测值527。
[0164]
第十四步
[0165]
将化合物1p(100mg，0.20mmol)溶于四氢呋喃(5ml)中，加入60％氢化钠(24mg，0.60mmol)，升温至60℃搅拌2小时，加饱和氯化铵溶液(20ml)淬灭反应，并用乙酸乙酯(20ml x3)萃取，有机相合并后，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物1(90mg)，再经过手性sfc(手性柱为chiralcel od-h,250*30mm i.d.,5μm(大赛璐化学工业-daicel chemical industries,ltd)；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm)制备色谱纯化得到化合物1-峰1(30mg)和1-峰2(31mg)，收率：60％。
[0166]
化合物1-峰1:
[0167]1h nmr(400mhz,cd3od)δ9.32(s,1h),8.08(d,j＝8.3hz,1h),7.74(d,j＝9.2hz,1h),7.37(s,1h),7.24(d,j＝7.8hz,1h),7.22(d,j＝9.1hz,1h),7.13-7.10(m,3h),7.03-7.00(m,1h),6.67-6.50(m,3h),4.52(d,j＝3.5hz,1h),4.40(d,j＝4.5hz,1h),3.97(s,2h),3.74(t,j＝8.4hz,2h),3.48(t,j＝8.4hz,2h),3.04(s,2h),2.96-2.86(m,1h).
[0168]
ms-esi计算值[m+h]
+
507，实测值507。
[0169]
化合物1-峰2:
[0170]1h nmr(400mhz,cd3od)δ9.31(s,1h),8.08(d,j＝8.0hz,1h),7.74(d,j＝8.8hz,1h),7.36(s,1h),7.21-7.16(m,2h),7.09(d,j＝9.1hz,3h),7.01(s,1h),6.80
–
6.50(m,3h),4.50(d,j＝4.4hz,1h),4.38(d,j＝4.2hz,1h),3.93(s,2h),3.61(t,j＝8.4hz,2h),3.33(t,j＝8.4hz,2h),2.93(s,2h),2.90-2.82(m,1h).
[0171]
ms-esi计算值[m+h]
+
507，实测值507。
[0172]
实施例2
[0173][0174][0175]
第一步
[0176]
将氰甲基磷酸二乙酯(8.07g，45.56mmol)溶于无水四氢呋喃(80ml)，抽换氮气三次，冰盐浴将体系降温到-10℃左右，控制内温低于5℃向反应体系中分批次加入叔丁醇钾(5.30g，47.23mmol)，继续反应30分钟，维持内温低于0℃，向其中缓慢滴加化合物2a(6.00g，35.05mmol)的四氢呋喃(80ml)溶液。维持内温低于10℃继续反应1.5小时，向反应中加入水(100ml)淬灭反应，并用乙酸乙酯(50ml)稀释，分液，水相经乙酸乙酯(50ml x 3)萃取，合并有机相，饱和食盐水(100ml x 3)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到残余物，残余物经柱层析(乙酸乙酯：石油醚＝0-100％)纯化得到化合物2b(5.14g)，收率：76％。
[0177]1h nmr(400mhz,cd3cl)δ5.45-5.41(m,1h),4.77-4.72(m,2h),4.68-4.64(m,2h),1.49(s,9h).
[0178]
第二步
[0179]
向化合物2b(5.14g，26.46mmol)的甲醇(200ml)溶液中加入10％湿钯碳(0.51g)，置换氢气(15psi)，室温反应1小时，经硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到粗品2c(5.16g)，收率：100％。
[0180]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ3.97(t,j＝8.0hz,2h),3.61-3.58(m,2h),2.86-2.84(m,3h),1.40(s,9h).
[0181]
第三步
[0182]
冰浴下，向化合物2c(5.16g，26.46mmol)的二氯甲烷(15ml)溶液中加入三氟乙酸(13ml)，室温反应4小时，减压浓缩除去溶剂和大部分三氟乙酸，加水(100ml)稀释，经冻干
得到化合物2d(7.40g)，收率：100％。
[0183]
第四步
[0184]
冰浴下，向化合物2d(7.40g，26.46mmol)的二氯甲烷溶液(40ml)中分批加入乙醇醛二聚体(20.00g，112.76mmol)，分批次加入三乙酰氧基硼氢化钠(15.00g，70.76mmol)，自然恢复至室温反应4小时。向反应体系中加入水(100ml)，用2n稀盐酸调节ph至2～3，分液，除去有机相，水相用饱和碳酸氢钠溶液调节ph至8～9，水相用二氯甲烷(50ml x 8)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品2e(3.06g)，收率：62％。
[0185]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ4.41(brs,1h),3.37-3.29(m,4h),2.87(dt,j＝6.0,1.2hz,2h),2.75(d,j＝6.8hz,2h),2.70-2.61(m,1h),2.44(t,j＝6.0hz,2h).
[0186]
ms-esi计算值[m+h]
+
141，实测值141。
[0187]
第五步
[0188]
向100ml三口瓶中依次加入粗品2e(750mg，5.34mmol)和n,n-二甲基甲酰胺(30ml)，置换氮气三次，冰盐浴降温到0℃，加入60％的氢化钠(1.70g，42.60mmol)，在0℃反应0.5小时，将化合物1m(1.07g，3.55mmol)的n,n-二甲基甲酰胺(10ml)溶液滴加到反应体系中，搅拌5分钟后升温到40℃继续反应2小时。反应体系冷却至室温，向其中加入饱和氯化铵溶液(15ml)淬灭反应，加入水(100ml)和二氯甲烷(60ml)，分液，水相用二氯甲烷(50ml x 3)萃取，合并有机相，经饱和氯化钠溶液(100ml x 3)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经硅胶柱层析(甲醇：乙酸乙酯＝0-100％)纯化得到化合物2f(600mg)，收率：40％。
[0189]
ms-esi计算值[m+h]
+
422，实测值422。
[0190]
第六步
[0191]
将化合物2f(500mg，1.19mmol)，2-氟-4-三氟甲基苯硼酸(739mg，3.56mmoml)，sphos-pd-g2(85mg，0.12mmol)和碳酸钾(982mg，7.11mmol)加入到1,4-二氧六环(40ml)和水(10ml)的混合溶剂中，氮气鼓泡45分钟后，反应体系升温至80℃反应1小时，反应体系冷却至室温，过滤，减压浓缩得到的残余物，加入水(30ml)稀释后用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取，有机相合并后用饱和食盐水(30ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经柱层析(乙酸乙酯：石油醚＝0-100％和甲醇：乙酸乙酯＝0-100％)纯化得到化合物2g(543mg)，收率：83％。
[0192]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.66(s,1h),8.89(s,1h),7.75(dd,j＝9.8,1.7hz,1h),7.60(td,j＝5.0,2.5hz,3h),7.54(t,j＝7.6hz,1h),7.45(dd,j＝5.8,3.3hz,2h),7.23(dd,j＝9.1,2.5hz,1h),6.96(d,j＝8.0hz,2h),3.99(t,j＝8.0hz,2h),3.35(t,j＝8.0hz,2h),2.95(t,j＝6.7hz,2h),2.76(d,j＝6.7hz,4h),2.76-2.67(m,1h).
[0193]
ms-esi计算值[m+h]
+
550，实测值550。
[0194]
第七步
[0195]
氮气保护下，将化合物2g(415mg，0.76mmol)溶于超干四氢呋喃(16ml)中，向反应体系中加入1n三乙基硼氢化锂的四氢呋喃溶液(3.80ml，3.80mmol)，反应液迅速变成棕黑色，继续反应30分钟，反应体系降温到-15℃左右，加入饱和氯化铵溶液(10ml)淬灭反应，并加入水(50ml)和二氯甲烷(50ml)稀释，分液，水相用二氯甲烷(50ml x 3)萃取，有机相合并后经饱和氯化钠溶液(100ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余
物经硅胶柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物2h(88mg)，收率：21％。
[0196]
ms-esi计算值[m+h]
+
552，实测值552。
[0197]
第八步
[0198]
将化合物2h(88mg，0.16mmol)溶于超干四氢呋喃(5ml)中，加入60％的氢化钠(32mg，0.80mmol)，升温到55℃继续反应45分钟，将反应体系降温到-15℃左右，加入饱和氯化铵溶液(5ml)淬灭反应，并加入水(50ml)和二氯甲烷(50ml)稀释，分液，水相经二氯甲烷(20ml x 3)萃取，有机相合并后经饱和氯化钠溶液(30ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到化合物2，化合物2再经过手性sfc制备色谱(手性柱为chiralcel od-h daicel chemical industries,ltd,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm)纯化得到化合物2-峰1(38mg)和2-峰2(36mg)，总收率：60％。
[0199]
化合物2：
[0200]1h nmr(400mhz,cd3cl)δ9.13(s,1h),7.93(d,j＝8.1hz,1h),7.51(s,1h),7.37-7.28(m,3h),7.10(d,j＝8.5hz,3h),6.95(s,1h),6.80(d,j＝8.4hz,2h),6.55(brs,1h),3.96-3.90(m,2h),3.58(t,j＝7.7hz,2h),3.14(t,j＝6.9hz,2h),2.89(t,j＝5.5hz,2h),2.86
–
2.78(m,1h),2.64(d,j＝6.8hz,2h).
[0201]
ms-esi计算值[m+h]
+
532，实测值532。
[0202]
化合物2-峰1：
[0203]1h nmr(400mhz,cd3cl)δ9.13(s,1h),7.93(d,j＝8.1hz,1h),7.51(s,1h),7.37-7.28(m,3h),7.10(d,j＝8.5hz,3h),6.95(s,1h),6.80(d,j＝8.4hz,2h),6.55(brs,1h),3.96-3.90(m,2h),3.58(t,j＝7.7hz,2h),3.14(t,j＝6.9hz,2h),2.89(t,j＝5.5hz,2h),2.86
–
2.78(m,1h),2.64(d,j＝6.8hz,2h).
[0204]
ms-esi计算值[m+h]
+
532，实测值532。
[0205]
化合物2-峰2：
[0206]1h nmr(400mhz,cd3od)δ9.41(s,1h),8.22(d,j＝8.1hz,1h),7.81(d,j＝9.2hz,1h),7.43(d,j＝2.5hz,1h),7.38(d,j＝8.2hz,1h),7.26-7.14(m,5h),6.90(d,j＝8.0hz,2h),4.32(t,j＝8.6hz,2h),4.18(t,j＝4.8hz,2h),4.04(t,j＝8.4hz,2h),3.59(t,j＝4.9hz,2h),3.26(p,j＝7.8hz,1h),2.88(d,j＝6.7hz,2h).
[0207]
ms-esi计算值[m+1]
+
532，实测值532。
[0208]
实施例3
[0209]
[0210][0211]
第一步
[0212]
将化合物3a(8.00g，46.73mmol)溶于甲醇(20ml)中，冰水浴控制反应内温在0-10℃，分批次加入硼氢化钠(0.88g，23.37mmol)，自然升温到室温，反应2小时。冰水浴将反应体系降温到0℃左右，缓慢滴加0.5n稀盐酸(100ml)，滴毕。加入二氯甲烷(100ml)，分液，水相经二氯甲烷(50ml x 4)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品3b(8.20g)，收率：100％。
[0213]
第二步
[0214]
将粗品3b(3.91g，22.57mmol)溶于四氢呋喃(100ml)中，冰水浴控制反应内温在0-10℃，分批次加入叔丁醇钾(3.80g，33.86mmol)，自然升温到室温，反应30分钟，滴加溴化苄(4.25g，24.83mmol)，滴毕，继续在室温反应3小时。反应液减压浓缩得到残余物，向残余物中加入乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)，分液，水相用乙酸乙酯(100ml x 3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品3c(6.10g)。
[0215]
第三步
[0216]
将粗品3c(6.10g，22.57mmol)溶于甲醇(10ml)中，冰水浴控制反应内温在0-10℃，缓慢滴加4n盐酸甲醇溶液(60ml)，滴毕，反应在室温反应6小时，减压浓缩得到残余物，向残余物中加入水(10ml)，滴加15％的氢氧化钠水溶液调节ph到12～13，加入水(50ml)和二氯甲烷(50ml)，分液，水相用二氯甲烷(40ml x 4)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品3d(3.17g)，两步收率：84％。
[0217]
第四步
[0218]
将粗品3d(1.00g，6.13mmol)溶于乙腈(20ml)中，加入碳酸钾(1.69g，12.26mmol)，反应在室温搅拌30分钟，升温到60℃，缓慢滴加3-氟-1-碘代丙烷(1.27g，6.74mmol)，滴毕。继续反应30分钟。减压浓缩得到残余物，向残余物中加入水(100ml)和乙酸乙酯(100ml)，分液，水相用乙酸乙酯(100ml x 3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品3e(1.37g)，收率：100％。
[0219]
ms-esi计算值[m+h]
+
224，实测值224。
[0220]
第五步
[0221]
将粗品3e(0.56g，2.51mmol)加入反应瓶中，加入10％湿钯碳(0.56g)，加入甲酸铵
(0.50g，7.50mmol)，置换氢气三次，并氮气保护，用注射器加入甲醇(12ml)，升温至66℃反应3小时。硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到粗品3f(316mg)，收率：100％。
[0222]
ms-esi计算值[m+h]
+
134，实测值134。
[0223]
第六步
[0224]
将粗品3f(316mg，2.38mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)中，冰水浴将体系降温到0℃左右，分批次加入60％的氢化钠(0.88g，21.97mmol)，自然升温到室温，并搅拌30分钟，滴加化合物1m(0.55g，1.83mmol)的n,n-二甲基甲酰胺(10ml)溶液，滴毕。升温到60℃，反应1小时，向反应液中依次加入饱和氯化铵(10ml)和水(100ml)淬灭反应，加入乙酸乙酯(50ml)，分液，水相经乙酸乙酯(50ml x 3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到残余物，残余物经硅胶柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物3g(515mg)，收率：68％。
[0225]
ms-esi计算值[m+h]
+
415，实测值415。
[0226]
第七步
[0227]
依次将化合物3g(290mg，0.70mmol)，2-氟-4-(三氟甲基)苯硼酸(290mg，0.70mmol)，sphos-pd-g2(48mg，0.07mmol)，碳酸钾(386mg，2.80mmol)，1,4-二氧六环(10ml)和水(1ml)加入到反应瓶中，氮气鼓泡约30分钟，氮气保护下升温到80℃反应2小时。反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经硅胶柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物3h(250mg)，收率：66％。
[0228]
ms-esi计算值[m+h]
+
543，实测值543。
[0229]
第八步
[0230]
氮气保护下，将化合物3h(230mg，0.42mmol)溶于超干四氢呋喃(20ml)中，向反应体系中缓慢滴加1n三乙基硼氢化锂的四氢呋喃溶液(4.2ml，4.20mmol)，滴毕。自然升温到室温反应2小时。冰水浴将反应体系降温到0℃左右，滴加饱和氯化铵溶液(5ml)淬灭反应，并加入水(50ml)和乙酸乙酯(50ml)，分液，水相用乙酸乙酯(50ml x 3)萃取，有机相合并后经饱和氯化钠溶液(50ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品3i(231mg)，收率：100％。
[0231]
ms-esi计算值[m+h]
+
545，实测值545。
[0232]
第九步
[0233]
将粗品3i(235mg，0.42mmol)溶于超干四氢呋喃(15ml)中，加入60％的氢化钠(85mg，2.12mmol)，升温到55℃继续反应2小时，将反应体系降温到0℃左右，加入饱和氯化铵溶液(10ml)淬灭反应，并加入水(50ml)和二氯甲烷(50ml)稀释，分液，水相经二氯甲烷(50ml x 3)萃取，有机相合并后经饱和氯化钠溶液(30ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到化合物3(186.0mg)，化合物3再经过手性sfc制备色谱(手性柱为chiralpak ad-h daicel chemical industries,ltd,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm)纯化得到化合物3-峰1(41mg)和3-峰2(41mg)，总收率：37％。
[0234]
化合物3：
[0235]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ9.26(s,1h),7.97(d,j＝8.0hz,1h),7.53(d,j＝4.0hz,
1h),7.44(d,j＝12.0hz,1h),7.35-7.25(m,3h),7.10(d,j＝8.4hz,2h),6.97(d,j＝9.5hz,2h),6.65(d,j＝8.6hz,2h),4.78(t,j＝4.0hz,1h),4.56(d,j＝8.0hz,1h),4.44(t,j＝5.8hz,1h),4.00(t,j＝8.0hz,2h),3.23(d,j＝8.0hz,2h),2.80(t,j＝8.0hz,2h),1.91-1.78(m,2h).
[0236]
ms-esi计算值[m+1]
+
525，实测值525。
[0237]
化合物3-峰1：
[0238]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ9.15(s,1h),7.95(d,j＝8.0hz,1h),7.52(d,j＝4.0hz,1h),7.37-7.28(m,3h),7.17(d,j＝12.0hz,1h),7.11(d,j＝4.0hz,2h),6.97(s,1h),6.71(d,j＝8.0hz,2h),6.60(d,j＝8.0hz,1h),4.79-4.73(m,1h),4.56(t,j＝5.9hz,1h),4.44(t,j＝5.9hz,1h),3.88-3.82(m,2h),3.13(t,j＝8.0hz,2h),2.68(t,j＝8.0hz,2h),1.84-1.73(m,2h).
[0239]
ms-esi计算值[m+h]
+
525，实测值525。
[0240]
化合物3-峰2：
[0241]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ9.17(s,1h),7.95(m,1h),7.52(d,j＝4.0hz,1h),7.36-7.28(m,3h),7.19(d,j＝9.1hz,1h),7.11(d,j＝8.7hz,2h),6.97(s,1h),6.70(d,j＝8.6hz,2h),6.63(d,j＝8.0hz,1h),4.76(p,j＝5.8hz,1h),4.56(t,j＝5.9hz,1h),4.44(t,j＝5.9hz,1h),3.88-3.82(m,2h),3.13(t,j＝8.0hz,2h),2.69(t,j＝8.0hz,2h),1.86-1.75(m,2h).
[0242]
ms-esi计算值[m+h]
+
525，实测值525。
[0243]
实施例4
[0244]
[0245][0246]
第一步
[0247]
将化合物4a(8.00g，43.20mmol)溶于甲醇(20ml)中，冰水浴控制反应内温在0-10℃，分批次加入硼氢化钠(0.20g，21.60mmol)，自然升温到室温，反应2小时。冰水浴将反应体系降温到0℃左右，缓慢滴加0.5n稀盐酸(100ml)，滴毕。加入二氯甲烷(100ml)，分液，水相经二氯甲烷(50ml x 4)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品4b(7.30g)，收率：90％。
[0248]
第二步
[0249]
将粗品4b(7.30g，38.87mmol)溶于四氢呋喃(100ml)中，冰水浴控制反应内温在0-10℃，分批次加入叔丁醇钾(6.54g，58.31mmol)，自然升温到室温，反应30分钟，滴加溴化苄(7.30g，42.76mmol)，滴毕，继续在室温反应3小时。反应液直接减压浓缩得到残余物，向残余物中加入乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)，分液，水相用乙酸乙酯(100ml x 3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品4c(10.78g)，收率：100％。
[0250]
第三步
[0251]
将粗品4c(10.78g，38.87mmol)溶于甲醇(20ml)中，冰水浴控制反应内温在0-10℃，缓慢滴加4n盐酸甲醇溶液(80ml)，滴毕，反应在室温反应6小时，反应液直接减压浓缩得到残余物，向残余物中加入水(10ml)，滴加15％的氢氧化钠水溶液调节ph到12～13，加入水(50ml)，加入二氯甲烷(50ml)，分液，水相用二氯甲烷(40ml x 4)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品4d(6.00g)，收率：87％。
[0252]
第四步
[0253]
将粗品4d(4.00g，22.57mmol)溶于乙腈(50ml)中，加入碳酸钾(6.24g，
45.14mmol)，反应在室温搅拌30分钟，升温到55℃，缓慢滴加3-氟-1-碘代丙烷(5.10g，27.08mmol)，滴毕，继续反应。停止反应，减压浓缩得到残余物，向残余物中加入水(100ml)和乙酸乙酯(100ml)，分液，水相用乙酸乙酯(100ml x 3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品4e(5.38g)，收率：100％。
[0254]
ms-esi计算值[m+h]
+
238，实测值238。
[0255]
第五步
[0256]
将4e(5.38g，22.61mmol)加入反应瓶中，加入10％湿钯碳(0.53g)，加入甲酸铵(4.52g，67.83mmol)，氮气置换三次，并氮气保护，用注射器加入甲醇(12ml)，升温到66℃反应3小时。反应液经硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到粗品4f(316mg)，收率：100％。
[0257]
ms-esi计算值[m+h]
+
148，实测值148。
[0258]
第六步
[0259]
将粗品4f(1.26g，6.64mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(25ml)中，冰水浴将体系降温到0℃左右，分批次加入60％氢化钠(1.60g，39.87mmol)，自然升温到室温，并搅拌30分钟，滴加化合物1m(1.00g，3.32mmol)的n,n-二甲基甲酰胺(20ml)溶液，滴毕。升温到60℃，反应1小时。向反应液中依次加入饱和氯化铵(10ml)，水(100ml)和乙酸乙酯(50ml)，分液，水相经乙酸乙酯(50ml x 3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经硅胶柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物4g(0.82g)，收率：58％。
[0260]
ms-esi计算值[m+h]
+
429，实测值429。
[0261]
第七步
[0262]
将化合物4g(172.0mg，0.40mmol)，2-氟-4-(三氟甲基)苯硼酸(167mg，0.80mmol)，sphos-pd-g2(29mg，0.04mmol)，碳酸钾(222.2mg，1.61mmol)1,4-二氧六环(5ml)和水(1ml)依次加入到反应瓶中，氮气鼓泡15-30分钟，升温到80℃反应2小时。反应液自然冷却至室温，经硅藻土过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经硅胶柱层析(二氯甲烷：甲醇＝0-100％)纯化得到化合物4h(177mg)，收率：79％。
[0263]
ms-esi计算值[m+h]
+
557，实测值557。
[0264]
第八步
[0265]
氮气保护下，将化合物4h(167mg，0.32mmol)溶于超干四氢呋喃(20ml)中，向反应体系中缓慢滴加1n三乙基硼氢化锂的四氢呋喃溶液(1.5ml，1.50mmol)，滴毕。自然升温到室温反应2小时。冰水浴将反应体系降温到0℃左右，滴加饱和氯化铵溶液(5ml)淬灭反应，并加入水(50ml)和乙酸乙酯(50ml)，分液，水相用乙酸乙酯(50ml x 3)萃取，有机相合并后经饱和氯化钠溶液(50ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品4i(180mg)，收率：100％。
[0266]
ms-esi计算值[m+h]
+
559，实测值559。
[0267]
第九步
[0268]
将粗品4i(180mg，0.32mmol)溶于超干四氢呋喃(15ml)中，加入60％的氢化钠(64mg，1.61mmol)，升温到55℃继续反应2小时，将反应体系降温到0℃左右，加入饱和氯化铵溶液(10ml)淬灭反应，并加入水(50ml)和二氯甲烷(50ml)稀释，分液，水相经二氯甲烷(50ml x 3)萃取，有机相合并后经饱和氯化钠溶液(30ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到残余物，残余物经硅胶柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物4
(31mg)，收率：18％。
[0269]
化合物4：
[0270]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ9.22(s,1h),7.97(d,j＝8.1hz,1h),7.54(s,1h),7.4-7.27(m,4h),7.11(d,j＝8.1hz,2h),7.00(s,1h),6.87(d,j＝9.1hz,1h),6.73(d,j＝8.7hz,2h),4.78-4.74(m,1h),4.60-4.56(m,1h),4.48-4.44(m,1h),2.97(s,1h),2.89-2.77(m,2h),2.70-2.64(m,3h),2.33-2.22(m,1h),1.99-1.91(m,3h).
[0271]
ms-esi计算值[m+h]
+
539，实测值539。
[0272]
实施例5
[0273][0274][0275]
第一步
[0276]
将化合物5a(15.00g，80.13mmol)溶于四氢呋喃(150ml)中，冰水浴控制反应内温在0-10℃，分批次加入叔丁醇钾(13.50g，120.20mmol)，自然升温到室温，反应30分钟，滴加
溴化苄(14.40g，84.14mmol)，滴毕，继续在室温反应3小时。反应液减压浓缩得到残余物，向残余物中加入乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)，分液，水相用乙酸乙酯(100ml x 3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品5b(25.20g)，收率：100％。
[0277]
第二步
[0278]
将粗品5b(22.22g，80.13mmol)溶于二氯甲烷(20ml)中，冰水浴控制反应内温在0-10℃，缓慢滴加三氟乙酸(75ml)，滴毕，反应在室温反应6小时。反应液直接减压浓缩得到残余物，向残余物中加入水(10ml)，滴加15％的氢氧化钠水溶液调节ph到10～12，依次加入水(50ml)和二氯甲烷(50ml)，分液，水相用二氯甲烷(40ml x 4)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品5c(12.10g)，收率：85％。
[0279]
ms-esi计算值[m+h]
+
178，实测值178。
[0280]
第三步
[0281]
将粗品5c(12.10g，68.27mmol)溶于乙腈(180ml)中，加入碳酸钾(11.32g，81.92mmol)，反应在室温搅拌分钟，升温到55℃，缓慢滴加3-氟-1-碘代丙烷(14.12g，75.10mmol)，滴毕，继续反应。停止反应，减压浓缩得到残余物，向残余物中加入水(100ml)和乙酸乙酯(100ml)，分液，水相用乙酸乙酯(100ml x 3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品5d(12.20g)，收率：75％。
[0282]
ms-esi计算值[m+h]
+
238，实测值238。
[0283]
第四步
[0284]
将粗品5d(2.30g，9.70mmol)加入反应瓶中，加入10％湿钯碳(0.50g)，加入甲酸(23ml)，氮气置换三次，并氮气保护，升温到40℃反应1.5小时。停止反应，硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到粗品5e(1.43g)，收率：100％。
[0285]
ms-esi计算值[m+h]
+
148，实测值148。
[0286]
第五步
[0287]
将粗品5e(1.43g，10.00mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(20ml)中，冰水浴将体系降温到0℃左右，分批次加入60％氢化钠(4.00g，100.00mmol)，自然升温到室温，并搅拌30分钟，滴加化合物1m(2.51g，8.33mmol)的n,n-二甲基甲酰胺(20ml)溶液，滴毕。升温到60℃反应2小时。停止反应，向反应液中依次加入饱和氯化铵溶液(10ml)，水(100ml)，乙酸乙酯(50ml)，分液，水相经乙酸乙酯(50ml x 3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经硅胶柱层析(二氯甲烷：甲醇＝0-100％)纯化得到化合物5f(2.22g)，收率：62％。
[0288]
ms-esi计算值[m+h]
+
429，实测值429。
[0289]
第六步
[0290]
将化合物5f(300mg，0.70mmol)，2-氟-4-(三氟甲基)苯硼酸(292mg，1.40mmol)，sphos-pd-g2(51mg，0.07mmol)，碳酸钾(3878mg，2.80mmol)加入到反应瓶中，加入1,4-二氧六环(10ml)，水(2ml)，氮气鼓泡15-30分钟，升温到80℃反应2小时。停止反应，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经硅胶柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物5g(350mg)，收率：90％。
[0291]
第七步
[0292]
氮气保护下，将化合物5g(350mg，0.63mmol)溶于超干四氢呋喃(20ml)中，向反应
体系中缓慢滴加1n三乙基硼氢化锂的四氢呋喃溶液(6.30ml，6.30mol)，滴毕。自然升温到室温反应2小时。冰水浴将反应体系降温到0℃左右，滴加饱和氯化铵溶液(5ml)淬灭反应，并加入水(50ml)和乙酸乙酯(50ml)，分液，水相用乙酸乙酯(50ml x 3)萃取，有机相合并后经饱和氯化钠溶液(50ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品5h(380mg)，收率：100％。
[0293]
第八步
[0294]
将粗品5h(350mg，0.63mmol)溶于超干四氢呋喃(15ml)中，加入60％的氢化钠(126mg，3.16mmol)，升温到55℃继续反应2小时，将反应体系降温到0℃左右，加入饱和氯化铵溶液(10ml)淬灭反应，并加入水(50ml)和二氯甲烷(50ml)稀释，分液，水相经二氯甲烷(50ml x 3)萃取，有机相合并后经饱和氯化钠溶液(30ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经硅胶柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物5(188mg)，收率：56％。
[0295]
化合物5(120mg)再经过手性sfc制备色谱(手性柱为chiralpak ad-h daicel chemical industries,ltd,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm)纯化得到化合物5-峰1(49mg)和5-峰2(46mg)，总收率：79％。
[0296]
化合物5：
[0297]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ9.23(s,1h),7.97(d,j＝8.1hz,1h),7.53(d,j＝4.0hz,1h),7.40-7.27(m,4h),7.10(d,j＝8.3hz,2h),6.99(s,1h),6.84-6.88(m,1h),6.73(d,j＝8.5hz,2h),4.74-4.76(m,1h),4.59-4.55(m,1h),4.48-4.44(m,1h),2.96-2.86(m,1h),2.87-2.73(m,2h),2.65
–
2.56(m,3h),2.26
–
2.30(m,1h),1.91
–
1.95(m,3h).
[0298]
ms-esi计算值[m+h]
+
539，实测值539。
[0299]
化合物5-峰1：
[0300]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ9.16(s,1h),7.96(d,j＝8.1hz,1h),7.55(d,j＝10.9hz,1h),7.39-7.29(s,3h),7.18(d,j＝8.9hz,1h),7.12(d,j＝8.5hz,2h),6.97(s,1h),6.78(d,j＝8.5hz,2h),6.60(s,1h),4.82-4.78(m,1h),4.59(t,j＝5.9hz,1h),4.47(t,j＝5.9hz,1h),2.95-2.91(m,1h),2.83(d,j＝8.9hz,2h),2.66(q,j＝6.7hz,2h),2.56(d,j＝4.0hz,1h),2.31
–
2.26(m,1h),1.92
–
1.96(m,3h).
[0301]
ms-esi计算值[m+h]
+
539，实测值539。
[0302]
化合物5-峰2：
[0303]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ9.18(s,1h),7.97(d,j＝8.1hz,1h),7.55(s,1h),7.38-7.28(m,3h),7.21-7.24(m,1h),7.11(d＝8.6hz,2h),6.97(s,1h),6.77(d,j＝8.7hz,2h),6.65(s,1h),4.80(d,j＝7.1hz,1h),4.56(t,j＝5.9hz,1h),4.44(t,j＝5.9hz,1h),2.83-2.85(m,3h),2.62-2.64(m,3h),2.29-2.33(m,1h),2.09-1.83(m,3h).
[0304]
ms-esi计算值[m+h]
+
539，实测值539。
[0305]
实施例6
[0306][0307][0308]
第一步
[0309]
将化合物6a(20.00g，140.75mmol)溶于无水二氯甲烷(100ml)，抽换氮气三次，降温至-60℃左右，缓慢滴加二乙胺基三氟化硫(53.00ml，427.45mmol)，约10分钟滴加完毕。自然升至室温反应过夜。维持内温低于5℃，缓慢加入水(200ml)淬灭反应，加入乙酸乙酯(200ml x 2)萃取，有机相合并后依次用饱和碳酸氢钠水溶液(200ml x 1)、饱和食盐水(200ml x 1)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经柱层析(二氯甲烷：甲醇＝0-100％)纯化得到化合物6b(15.00g)，收率：65％。
[0310]
第二步
[0311]
将化合物6b(15.00g，91.41mmol)溶于无水四氢呋喃(75ml)，抽换氮气三次，体系降温到-70℃左右，缓慢滴加二异丙基氨基锂(90.00ml，180.00mmol)，滴加完毕后，缓慢加入硼酸三异丙酯(25.80g，137.16mmol)，滴加完毕反应2小时。用2n稀盐酸(200ml)淬灭反应并调节ph约为6。减压浓缩得到残余物，残余物经反相柱层析(水：乙腈＝0-100％)纯化得到化合物6c(3.00g)，收率：16％。
[0312]
第三步
[0313]
将化合物6d(1.00g，5.77mmol)溶于无水二氯甲烷(10ml)，加入咪唑(0.59g，8.67mmol)，氯甲酸苄酯(1.18g，6.90mmol)，室温反应16小时,反应液直接减压浓缩得到残余物。将残余物分散在水(200ml)和乙酸乙酯(20ml)中，分液，水相经乙酸乙酯(20ml x 1)萃取，合并有机相，依次经饱和碳酸氢钠(20ml x 1)、饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到化合物6e(1.50g)，收率：85％。
[0314]
第四步
[0315]
将化合物6e(1.50g，4.89mmol)溶于无水二氯甲烷(10ml)，加入三氟乙酸(1.00ml,13.50mmol)，室温反应2小时，反应液减压浓缩得到化合物6f(1.50g)，收率：96％。
[0316]
第五步
[0317]
向化合物6f(1.20g，3.74mmol)的无水乙腈(10ml)溶液中依次加入碳酸钾(1.68g，12.12mmol)和1-氟-3-碘丙烷(900mg，4.79mmol)，室温反应2小时，向反应液中加入水(10ml)淬灭反应。乙酸乙酯(10ml x 1)萃取，水相直接冻干得到粗品。将粗品分散在乙酸乙酯(10ml)中，过滤，减压浓缩得到化合物6g(0.50g)，收率：80％。
[0318]1h nmr(400mhz,cd3cl)δ4.58(t,j＝5.9hz,1h),4.50-4.45(m,3h),3.70(t,j＝8.0hz,3h),2.93(t,j＝8.0hz,3h),2.62(t,j＝7.2hz,3h),1.84-1.74(m,2h).
[0319]
第六步
[0320]
将化合物6g(133mg，1.00mmol)溶于无水二甲基甲酰胺(6ml)，冷却至0℃下加入60％的氢化钠(500mg，12.50mmol)，搅拌0.5小时，向反应体系中缓慢滴加化合物1m(200mg，0.66mmol)的无水二甲基甲酰胺(4ml)溶液，升温至60℃反应2小时。向反应液中加入饱和氯化铵溶液(20ml)淬灭反应，并用乙酸乙酯(20ml x 3)萃取，有机相合并用饱和食盐水(20ml x 1)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物6h(170mg)，收率：64％。
[0321]
ms-esi计算值[m+h]
+
415，实测值415。
[0322]
第七步
[0323]
将化合物6h(210mg，0.51mmol)，6c(315mg，1.52mmol)，碳酸钾(284mg，2.01mmol)，xphos pd g2催化剂(32mg，0.04mmol)，1,4-二氧六环(10ml)和水(2ml)依次加入到反应瓶中，氮气鼓泡30分钟，在氮气保护下升温至100℃反应2小时。反应液减压过滤，滤液浓缩得到残余物，加入水(20ml)和乙酸乙酯(20ml)后分液，有机相用饱和食盐水(20ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经柱纯化(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物6i(240mg)，收率：90％。
[0324]
ms-esi计算值[m+h]
+
543，实测值543。
[0325]
第八步
[0326]
将化合物6i(230mg，0.42mmol)溶于四氢呋喃(10ml)中，降温至0℃，加入1n三乙基硼氢化锂的四氢呋喃溶液(4.00ml，4.00mmol)，室温反应2小时。饱和氯化铵溶液(20ml)淬灭反应，并用乙酸乙酯(20ml x 2)萃取，有机相合并后，依次经饱和氯化铵溶液(20ml x 1)、饱和食盐水(20ml x 1)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到残余物，残余物经柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物6j(230mg)，收率：100％。
[0327]
第九步
[0328]
将化合物6j(230mg，0.42mmol)溶于四氢呋喃(10ml)中，加入60％氢化钠(175mg，
4.4mmol)，升温至60℃搅拌1小时，加饱和氯化铵溶液(10ml)淬灭反应，并用乙酸乙酯(20ml x 3)萃取，有机相合并后，依次经饱和氯化铵溶液(20ml x 1)、饱和食盐水(20ml x 1)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到残余物，残余物经柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物6，再经过手性sfc制备色谱(手性柱为chiralpak ad-h daicel chemical industries,ltd,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm)纯化得到化合物6-峰1(40mg)和6-峰2(45mg)，收率：38％。
[0329]
化合物6-峰1：
[0330]1h nmr(400mhz,cd3cl)δ9.13(s,1h),7.67(d,j＝8.2hz,1h),7.46(s,1h),7.29-7.23(m,3h),7.08-6.87(m,4h),6.87(s,1h),6.81-6.71(m,1h),6.64(d,j＝8.6hz,2h),4.73-4.67(m,1h),4.52(t,j＝5.9hz,1h),4.40(t,j＝5.9hz,1h),3.81(q,j＝6.7hz,2h),3.09(t,j＝8.0hz,2h),2.65(t,j＝8.0hz,2h),1.81-1.69(m,2h).
[0331]
ms-esi计算值[m+h]
+
525，实测值525。
[0332]
化合物6-峰2：
[0333]1h nmr(400mhz,cd3cl)δ9.13(s,1h),7.67(d,j＝8.1hz,1h),7.47(s,1h),7.29-7.23(m,3h),7.09-6.85(m,4h),6.75-6.73(m,1h),6.64(d,j＝8.6hz,2h),4.70(t,j＝5.8hz,1h),4.52(t,j＝5.9hz,1h),4.40(t,j＝5.9hz,1h),3.81(q,j＝6.6hz,2h),3.09(s,2h),2.65(t,j＝7.8hz,2h),1.82-1.69(m,2h).
[0334]
ms-esi计算值[m+h]
+
525，实测值525。
[0335]
实施例7
[0336][0337]
[0338]
第一步
[0339]
在250ml三口瓶中加入化合物7a(10.00g，54.92mmol)，硼酸三异丙酯(13.40g，71.40mmol)，无水四氢呋喃(80ml)，置换氮气三次，干冰乙醇浴降温到-60℃，滴加2n二异丙基氨基锂四氢呋喃溶液(36.00ml，72.00mmol)，滴毕，在-60℃反应2小时。滴加2n稀盐酸(100ml)淬灭反应并调节ph至6～7，加入乙酸乙酯(100ml x 3)萃取，合并有机相，减压浓缩得到残余物，残余物经反相柱层析(乙腈：水＝0-100％)纯化得到化合物7b(4.60g)，收率：37％。
[0340]
ms-esi计算值[2m-h2o-h]-433，实测值433。
[0341]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.74(s,2h),7.71-7.45(m,2h).
[0342]
第二步
[0343]
向250ml三口瓶中依次加入化合物1n(300mg，0.72mmol)，7b(490mg，2.17mmoml)，sphos-pd-g2(104mg，0.14mmol)和碳酸钾(500mg，3.62mmol)，1,4-二氧六环(20ml)和水(5ml)的混合溶剂，氮气鼓泡45分钟后，置换氮气三次，反应体系升温至80℃反应1小时，反应体系冷却至室温，过滤，减压浓缩得到的残余物，加入水(50ml)稀释后用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取，有机相合并后用饱和食盐水(30ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经硅胶柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物7c(320mg)，收率：80％。
[0344]
ms-esi计算值[m+1]
+
561，实测值561。
[0345]
第三步
[0346]
氮气保护下，将化合物7c(500mg，0.89mmol)溶于超干四氢呋喃(20ml)中，降温至0-5℃，向反应体系中加入1n三乙基硼氢化锂的四氢呋喃溶液(4.46ml，4.46mmol)，加毕，升至室温继续反应1小时，反应体系降温到-15℃左右，加入饱和氯化铵溶液(20ml)淬灭反应，并加入水(50ml)和二氯甲烷(50ml)稀释，分液，水相用二氯甲烷(30ml x 3)萃取，有机相合并后经饱和氯化钠溶液(30ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经硅胶柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物7d(350mg)，收率：72％。
[0347]
ms-esi计算值[m+1]
+
563，实测值563。
[0348]
第四步
[0349]
将化合物7d(350mg，0.62mmol)溶于超干四氢呋喃(20ml)中，降温至0-5℃，加入60％的氢化钠(249mg，6.20mmol)，加毕，升温到60℃继续反应1小时，将反应体系降温到-15℃左右，加入饱和氯化铵溶液(20ml)淬灭反应，并加入水(50ml)和二氯甲烷(50ml)稀释，分液，水相经二氯甲烷(30ml x 3)萃取，有机相合并后经饱和氯化钠溶液(30ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到化合物7(280mg)，化合物7再经过手性sfc制备色谱(手性柱为chiralpak ad-h daicel chemical industries,ltd,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm)纯化得到化合物7-峰1(40mg)和7-峰2(40mg)，总收率：83％。
[0350]
化合物7：
[0351]1h nmr(400mhz,cd3cl)δ9.21(s,1h),7.66(d,j＝8.3hz,1h),7.48-7.43(m,2h),7.28-7.23(m,2h),7.07-6.97(m,4h),6.66(d,j＝8.7hz,2h),4.52(s,1h),4.40(s,1h),
3.97(s,2h),3.79(s,2h),3.43(s,2h),3.10-2.95(m,3h).
[0352]
ms-esi计算值[m+1]
+
543，实测值543。
[0353]
化合物7-峰1：
[0354]1h nmr(400mhz,cd3cl)δ9.14(brs,1h),7.67(brs,1h),7.47(brs,2h),7.25(brs,2h),7.06-6.95(m,4h),6.78-6.73(m,2h),4.57(s,1h),4.43(s,1h),3.96(s,2h),3.60(s,2h),3.25(s,2h),2.93(s,3h).
[0355]
ms-esi计算值[m+1]
+
543，实测值543。
[0356]
化合物7-峰2：
[0357]1h nmr(400mhz,cd3cl)δ9.16(brs,1h),7.70(brs,1h),7.49(brs,2h),7.26(brs,2h),7.05-7.01(m,4h),6.82-6.74(m,2h),4.57(s,1h),4.44(s,1h)3.93(s,2h),3.58(s,2h),3.24(s,2h),2.94(s,3h).
[0358]
ms-esi计算值[m+1]
+
543，实测值543。
[0359]
实施例8
[0360][0361][0362]
第一步
[0363]
向250ml三口瓶中依次加入化合物1n(220mg，0.53mmol)，6c(330mg，1.59mmoml)，sphos-pd-g2(76mg，0.11mmol)和碳酸钾(366mg，2.65mmol)，1,4-二氧六环(20ml)和水(5ml)的混合溶剂，氮气鼓泡45分钟后，置换氮气三次，反应体系升温至100℃反应1小时，反应体系冷却至室温，过滤，减压浓缩得到的残余物，加入水(50ml)稀释后用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取，有机相合并后用饱和食盐水(30ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经硅胶柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物8a(220mg)，收率：76％。
[0364]
ms-esi计算值[m+1]
+
543，实测值543。
[0365]
第二步
[0366]
氮气保护下，将化合物8a(220mg，0.41mmol)溶于超干四氢呋喃(20ml)中，降温至0-5℃，向反应体系中加入1n三乙基硼氢化锂的四氢呋喃溶液(2.00ml，2.00mmol)，加毕，升
至室温继续反应1小时，反应体系降温到-15℃左右，加入饱和氯化铵溶液(20ml)淬灭反应，并加入水(50ml)和二氯甲烷(50ml)稀释，分液，水相用二氯甲烷(30ml x 3)萃取，有机相合并后经饱和氯化钠溶液(30ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经硅胶柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物8b(190mg)，收率：86％。
[0367]
ms-esi计算值[m+1]
+
545，实测值545。
[0368]
第三步
[0369]
将化合物8b(190mg，0.35mmol)溶于超干四氢呋喃(20ml)中，降温至0-5℃，加入60％的氢化钠(140mg，3.5mmol)，加毕，升温到60℃继续反应1小时，将反应体系降温到-15℃左右，加入饱和氯化铵溶液(20ml)淬灭反应，并加入水(50ml)和二氯甲烷(50ml)稀释，分液，水相经二氯甲烷(30ml x 3)萃取，有机相合并后经饱和氯化钠溶液(30ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到化合物8(170mg)，化合物8再经过手性sfc制备色谱(手性柱为chiralcel od-h daicel chemical industries,ltd,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的甲醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm)纯化得到化合物8-峰1(52mg)和8-峰2(41mg)，总收率：93％。
[0370]
化合物8：
[0371]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.22(s,1h),8.03(s,1h),7.72(d,j＝8.1hz,1h),7.55(d,j＝9.1hz,1h),7.37(d,j＝2.3hz,1h),7.20-7.07(m,2h),7.01-6.93(m,3h),6.80-6.64(m,3h),4.46(d,j＝8.0hz,1h),4.32(d,j＝8.0hz,1h),3.78(t,j＝8.0hz,2h),3.36(d,j＝8.0hz,2h),3.02(t,j＝8.0hz,2h),2.76-2.65(m,3h).
[0372]
ms-esi计算值[m+1]
+
525，实测值525。
[0373]
化合物8-峰1：
[0374]1h nmr(400mhz,cd3cl)δ9.03(s,1h),7.61(d,j＝8.2hz,1h),7.43(s,1h),7.26-7.21(m,1h),7.13-6.70(m,5h),6.68-6.57(m,3h),4.50(d,j＝8.0hz,1h),4.38(d,j＝8.0hz,1h),3.89(t,j＝8.0hz,2h),3.52(t,j＝8.0hz,2h),3.22-3.16(m,2h),2.96-2.84(m,3h).
[0375]
ms-esi计算值[m+1]
+
525，实测值525。
[0376]
化合物8-峰2：
[0377]1h nmr(400mhz,cd3cl)δ9.01(s,1h),7.60(d,j＝8.2hz,1h),7.43(s,1h),7.19(t,j＝7.1hz,1h),7.03-6.70(m,5h),6.69-6.68(m,2h),6.55(s,1h),4.51(d,j＝4.0hz,1h),4.39(d,j＝4.0hz,1h),3.89(d,j＝4.7hz,2h),3.51(t,j＝4.0hz,2h),3.20-3.16(m,2h),2.88-2.76(m,3h).
[0378]
ms-esi计算值[m+1]
+
525，实测值525。
[0379]
化合物8-峰1：
[0380][0381]
化合物8-峰2：
chemical industries,ltd,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm)纯化得到化合物9-峰1(21mg)和9-峰2(22mg)，收率：30％。
[0394]
化合物9-峰1：
[0395]1h nmr(400mhz,cd3cl)δ9.19(s,1h),7.69(d,j＝8.0hz,1h),7.51(s,1h),7.31-7.25(m,3h),7.13(d,j＝8.0hz,2h),7.06(s,1h),6.83(d,j＝9.0hz,1h),6.69(d,j＝8.6hz,2h),4.77(q,j＝5.8hz,1h),4.57(t,j＝5.8hz,1h),4.45(t,j＝5.8hz,1h),3.87(d,j＝6.4hz,2h),3.16(dd,j＝8.2,4.4hz,2h),2.84-2.63(m,2h),1.86-1.72(m,2h).
[0396]
ms-esi计算值[m+h]
+
543，实测值543。
[0397]
化合物9-峰2：
[0398]1h nmr(400mhz,cd3cl)δ9.19(s,1h),7.64(d,j＝8.0hz,1h),7.46(s,1h),7.27-7.19(m,3h),7.09-7.00(m,3h),6.83(d,j＝9.0hz,1h),6.69(d,j＝8.6hz,2h),4.77(t,j＝5.8hz,1h),4.57(t,j＝5.8hz,1h),4.45(t,j＝5.8hz,1h),3.82(d,j＝6.4hz,2h),3.12(d,j＝8.2hz,2h),2.67(t,j＝8.0hz,2h),1.86-1.72(m,2h).
[0399]
ms-esi计算值[m+h]
+
543，实测值543。
[0400]
实施例10
[0401][0402]
第一步
[0403]
向250ml三口瓶中依次加入化合物5f(200mg，0.47mmol)，7b(320mg，1.41mmol)，sphos-pd-g2(65mg，0.09mmol)和碳酸钾(320mg，2.32mmol)，1,4-二氧六环(20ml)和水(5ml)的混合溶剂，氮气鼓泡45分钟后，置换氮气三次，反应体系升温至80℃反应1小时，反应体系冷却至室温，过滤，减压浓缩得到残余物，加入水(50ml)稀释后用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取，有机相合并后用饱和食盐水(30ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，经硅胶柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到化合物10a(220mg)，收率：82％。
[0404]
第二步
[0405]
氮气保护下，将化合物10a(220mg，0.38mmol)溶于超干四氢呋喃(20ml)中，降温至0-5℃，向反应体系中加入1n三乙基硼氢化锂的四氢呋喃溶液(1.90ml，1.90mmol)，加毕，升至室温继续反应1小时，反应体系降温到-15℃左右，加入饱和氯化铵溶液(20ml)淬灭反应，并加入水(50ml)和二氯甲烷(50ml)稀释，分液，水相用二氯甲烷(30ml x 3)萃取，有机相合并后经饱和氯化钠溶液(30ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到残余物，残余物经硅胶柱层析(甲醇：二氯甲烷＝0-100％)纯化得到10b(160mg)，收率：72％。
[0406]
第三步
[0407]
将化合物10b(160mg，0.28mmol)溶于超干四氢呋喃(20ml)中，降温至0-5℃，加入60％的氢化钠(110mg，2.80mmol)，加毕，升温到60℃继续反应1小时，将反应体系降温到-15℃左右，加入饱和氯化铵溶液(20ml)淬灭反应，并加入水(50ml)和二氯甲烷(50ml)稀释，分液，水相经二氯甲烷(30ml x 3)萃取，有机相合并后经饱和氯化钠溶液(30ml x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到化合物10(120mg)，化合物10再经过手性sfc制备色谱(手性柱为chiralpak ad-h daicel chemical industries,ltd,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的异丙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm)纯化得到化合物10-峰1(31mg)和10-峰2(47mg)，总收率：78％。
[0408]
化合物10：
[0409]1h nmr(400mhz,cd3cl)δ9.17(s,1h),7.65(d,j＝8.3hz,1h),7.52(s,1h),7.43(d,j＝9.0hz,1h),7.26-7.23(m,2h),7.06(d,j＝8.4hz,2h),7.01-6.92(m,2h),6.67(d,j＝8.6hz,2h),4.79(s,1h),4.52(t,j＝5.1hz,1h),4.41(t,j＝5.6hz,1h),3.30-3.24(m,1h),2.89-2.78(m,5h),2.30-2.22(m,1h),1.99-1.80(m,3h).
[0410]
ms-esi计算值[m+1]
+
557，实测值557。
[0411]
化合物10-峰1：
[0412]1h nmr(400mhz,cd3cl)δ9.09(s,1h),7.74-7.61(m,1h),7.51(s,1h),7.27-7.24(m,2h),7.11(d,j＝8.6hz,3h),7.01(s,1h),6.77(d,j＝8.6hz,2h),6.55(s,1h),4.82(s,1h),4.56(t,j＝8.0hz,1h),4.44(t,j＝8.0hz,1h),2.91-2.86(m,3h),2.65-2.56(m,3h),2.34(d,j＝7.4hz,1h),2.10-1.76(m,3h).
[0413]
ms-esi计算值[m+1]
+
557，实测值557。
[0414]
化合物10-峰2：
[0415]1h nmr(400mhz,cd3cl)δ9.13(s,1h),7.69(d,j＝8.2hz,1h),7.53(s,1h),7.27-7.23(m,3h),7.11(d,j＝8.5hz,2h),7.03(s,1h),6.84-6.68(m,3h),4.82(s,1h),4.58(t,j＝8.0hz,1h),4.46(t,j＝8.0hz,1h),2.97-2.87(m,3h),2.67-2.59(m,3h),2.38-2.30(m,1h),2.04-1.90(m,3h).
[0416]
ms-esi计算值[m+1]
+
557，实测值557。
[0417]
实施例11
modulator for the treatment of hot flushes,j.med.chem 2006,49,843-846等文献可说明，手性配体为(r)-二苯基(吡咯烷-2-基)甲醇为时，所得的化合物必然为r构型。
[0425]
故实施例8中所得化合物8-峰2的绝对构型同本实施例所得化合物。
[0426]
ms-esi计算值[m+1]
+
525，实测值525。
[0427]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ9.08(s,1h),7.66(d,j＝8.2hz,1h),7.48(d,j＝2.4hz,1h),7.30-7.31(m,1h),7.2-7.28(m,1h),7.14(d,j＝7.8hz,1h),7.07(d,j＝8.9hz,2h),6.97(s,1h),6.92(s,1h),6.74(d,j＝8.7hz,2h),6.64(s,1h),4.57(d,j＝5.3hz,1h),4.45(d,j＝5.4hz,1h),3.9-3.96(m,2h),3.56(t,j＝7.9hz,2h),3.20-3.25(m,2h),3.00-2.82(m,3h).
[0428]
效果实施例1细胞水平erα拮抗活性检测
[0429]
使用双荧光素酶报告基因检测系统(promega)，检测化合物对erα的拮抗作用：按需用量混合含双荧光素报告基因的质粒(2个质粒分别表达erα-gal4融合蛋白及gal-4控制的荧光素酶)与fugene hd转染试剂(promega,e2311)，制备转染混合物。取状态良好的hek293细胞，消化后采用新鲜培养基重悬，计数后将hek293细胞悬液调整至合适浓度，并加入转染混合物，充分混匀。将于转染混合物混匀后的细胞接种入96孔板中，每孔100μl，并置于37℃，5％co2的细胞培养箱中孵育24小时。取出孔板，向孔板中加入经梯度稀释的待测化合物，每孔5μl，对照组加入5μl含10％dmso的完全培养基；除低信号对照组外，各孔加入含erα激动剂ppt(tocris,1426)的完全培养基5μl，低信号对照组加入完全培养基5μl，终体积为110μl。将96孔板置于37℃，5％co2的细胞培养箱中孵育20小时。
[0430]
使用多功能酶标仪(perkinelmer,enspire)分别检测萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶的化学发光信号值，萤火虫荧光素酶信号除以海肾荧光素酶信号后得到的标准化数值“f/r”，并根据以下公式计算抑制率：
[0431]
％抑制率＝(最大值-测定值)/(最大值-最小值)
×
100％
[0432]
其中“测定值”为每个浓度点的“f/r”值，最小值为不加ppt和待测化合物的“f/r”平均值，最大值为仅加入ppt的“f/r”平均值。将数据导入graph prism 5.0软件进行曲线拟合，并计算ic
50
值。
[0433]
表1.细胞水平erα报告基因检测ic
50
值
[0434][0435][0436]
阳性对照化合物结构(专利wo2020014435中实施例1b)：
[0437][0438]
结果表明：本发明的化合物在上述荧光素酶报告基因实验中展现了较高的erα拮抗活性，其对erα拮抗活性优于阳性对照。
[0439]
效果实施例2诱导mcf-7细胞erα蛋白降解活性检测
[0440]
取对数生长期的乳腺癌细胞mcf-7细胞，采用含10％fbs、1％ps、1％glutamax的emem培养基培养重悬并调整至合适浓度加入96孔细胞培养板中，100μl/孔，接种密度15000个/孔。将细胞培养板放置于37℃、5％co2培养箱中培养过夜。采用hp d300(tecan,model no.hpd300)将梯度稀释的受试化合物工作液加入细胞培养板中，双复孔，每孔0.5μl。化合物终浓度100nm起始，3.16倍梯度稀释，共9个浓度；并设置0.5％dmso阴性对照孔(加一抗及不加一抗对照)、100nm fulvestrant阳性对照孔。将细胞培养板放置于37℃、5％co2培养箱中培养24小时。取出细胞培养板、弃掉培养基并用pbs洗涤2次，采用含4％甲醛的pbs固定1小时、弃固定液后加含0.2％trition x-100的pbs通透1小时、pbs清洗后加入封闭液封闭1小时后，每孔加入50μl用封闭液1:1000稀释的erα抗体(thermo,rm-9101-s)，4℃冰箱中孵育过夜。采用含0.1％trition x-100的pbs洗板后，加入用抗体稀释液1:1000稀释的荧光素标记二抗(每孔50μl)，以及抗体封闭液1:20000稀释的dna染料draq5(每孔50μl)，室温避光孵育1小时。分别采用含0.1％trition x-100的pbs、pbs洗板并晾干后，采用odyssey双色红外荧光成像系统(li-cor odyssey)以800nm、700nm双通道进行扫描成像并分别获取双通道的荧光值。
[0441]
按下列公式计算抑制率％：
[0442]
(1-((rlu
compound-blank)/draq5
compound
)/((rlu
dmso-blank)/draq5
dmso
)*100
[0443]
利用graphpad prism 5.0软件绘制药效抑制率曲线并计算ic
50
值(表2)。
[0444]
表2.对mcf-7细胞erα蛋白水平抑制ic
50
值
[0445][0446][0447]
结果表明：本发明的化合物对体外培养的mcf-7细胞erα蛋白水平具有较强抑制活
性，部分化合物其对体外培养的mcf-7细胞erα蛋白水平的抑制活性优于阳性对照(专利wo2020014435中实施例1b)。
[0448]
效果实施例3本发明实施例化合物对mcf-7细胞增殖抑制gi
50
检测
[0449]
乳腺癌细胞mcf-7采用加入10％charcoal dextran stripped fbs、10ug/ml insulin、1％ps、1％glutamax的emem培养基培养。取对数生长期的细胞，采用完全培养基重悬并调整至合适浓度加入96孔细胞培养板中，200μl/孔，接种密度2500个/孔。将细胞培养板放置于37℃、5％co2培养箱中培养过夜(其中一块板9孔加入细胞悬液，加药前用ctg检测，作为g0值)。采用hp d300将梯度稀释的受试化合物工作液加入细胞培养板中，双复孔，化合物终浓度100nm起始，3倍梯度稀释，共9个浓度；并向各孔中加入1μl estradiol(e2)工作液，终浓度为0.1nm。将细胞培养板放置于37℃、5％co2培养箱中培养168小时。分别在化合物与细胞孵育0h、168h，将细胞板取出平衡至室温，采用celltiter glo assay kit(promega,g7558)、多功能酶标仪(perkinelmer,envision)检测lμminescence读值，并利用xlfit绘制药效抑制率曲线并计算gi
50
值。
[0450]
表3.mcf-7细胞增殖抑制gi
50
值
[0451]
实施例gi
50
(nm)实施例8-峰20.10阳性对照0.24
[0452]
结果表明：本发明的化合物对体外培养的mcf-7细胞增殖具有较强抑制活性，其对体外培养的mcf-7细胞增殖的抑制活性优于阳性对照(专利wo2020014435中实施例1b)。
[0453]
效果实施例4 sd大鼠体内药代动力学研究
[0454]
将本发明合成的化合物用dma：30％solutol hs 15：saline＝10:10:80(体积比)配制成澄清溶液(0.5mg/ml的给药浓度)，以5mg/kg(口服灌胃)的剂量经灌胃给予3只雄性sd大鼠(动物给药前禁食过夜)。口服灌胃给药后分别于0，0.25，0.5，1，2，4，6，8和24小时经颈静脉采集血样。血浆样品经过蛋白沉淀处理后，用lc-ms/ms法测定药物浓度，所得结果用phoenix winnonlin 8.1计算药代动力学参数。结果如表4。
[0455]
表4
[0456][0457]
结论：相比较阳性对照(专利wo2020014435中实施例1b)，本发明的部分化合物在动物体内同时半衰期长，在动物体内作用时间长，血液暴露量更高，因此，具有更好的药代动力学和药效动力学特性、更高临床效率以及良好的口服生物利用度。

技术特征：
1.一种通式i所示的化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其互变异构体、其同位素化合物或其溶剂合物：r1为h或卤素；r2为卤素取代的c
1-4
烷基或卤素取代的c
1-4
烷氧基；x为-o(ch2)
n1-或-nr
x
(ch2)
n2-；r
x
为h或c
1-4
烷基；n1和n2独立地为0、1或2；y1和y2独立地为n或者cr
y
；r
y
为h或卤素；l为4-6元杂环烷基，其中杂原子选自n、o和s中的一个或两个；r3为取代的c
1-4
烷基，其中取代基选自卤素和氰基中的一个或多个；r4为oh、cooh或conh2；用*标注的碳为非手性碳或手性碳；条件是：通式i所示的化合物不为2.如权利要求1所述的通式i所示的化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其互变异构体、其同位素化合物或其溶剂合物，其特征在于，r1中，所述卤素为f、cl、br或i，进一步优选f；和/或，r2中，所述卤素取代的c
1-4
烷基中的卤素为f、cl、br或i；和/或，r2中，所述卤素取代的c
1-4
烷基中的卤素的个数为1、2或3个；和/或，r2中，所述卤素取代的c
1-4
烷基中的c
1-4
烷基为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基；和/或，r2中，所述卤素取代的c
1-4
烷氧基中的卤素为f、cl、br或i；和/或，r2中，所述卤素取代的c
1-4
烷氧基中的卤素的个数为1、2或3个；和/或，r2中，所述卤素取代的c
1-4
烷氧基中的c
1-4
烷氧基为甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基；和/或，r
x
中，所述c
1-4
烷基优选甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基；和/或，x中的o端或n端与基团的1位相连；和/或，l中，所述4-6元杂环烷基为杂原子为n，杂原子数为1或2个；优选氮杂环丁烷或吡咯烷；
和/或，r3中，所述取代的c
1-4
烷基中取代基选自卤素时，所述卤素为f、cl、br或i；和/或，r3中，所述取代的c
1-4
烷基中取代基的个数为1、2或3个；和/或，r3中，所述取代的c
1-4
烷基中的c
1-4
烷基为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。3.如权利要求1或2所述的通式i所示的化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其互变异构体、其同位素化合物或其溶剂合物，其特征在于，r1为卤素，优选f；和/或，r2为卤素取代的c
1-4
烷基；和/或，x为-o(ch2)
n1-；n1为0、1或2；和/或，y1和y2独立地为cr
y
；r
y
为h或卤素；优选地，y1和y2为ch；和/或，r4为oh。4.如权利要求1-3任一项所述的通式i所示的化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其互变异构体、其同位素化合物或其溶剂合物，其特征在于，r1为卤素；r2为卤素取代的c
1-4
烷基；x为-o(ch2)
n1-；n1为0、1或2；y1和y2为ch；l为4-6元杂环烷基，其中杂原子为n，杂原子数为1或2个；r3为取代的c
1-4
烷基，其中取代基选自卤素和氰基中的一个或多个；和r4为oh；例如，r1为卤素；r2为卤素取代的c
1-4
烷基；x为-o(ch2)
n1-；n1为0、1或2；y1和y2为ch；l为4-6元杂环烷基，其中杂原子为n，杂原子数为1或2个；r3为取代的c
1-4
烷基，其中取代基选自卤素和氰基中的一个或多个；和r4为oh；用*标注的碳为r-构型手性碳。5.如权利要求1-4任一项所述的通式i所示的化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其互变异构体、其同位素化合物或其溶剂合物，其特征在于，为为为例如为
其中用#标注的碳为手性碳，其表示r-构型手性碳和s-构型手性碳任意比例的混合物；和/或，用*标注的碳为非手性碳、r-构型手性碳或s-构型手性碳；和/或，当x为-o(ch2)
2-，r2为-cf3时，l为4-6元杂环烷基，则r1为卤素；和/或，当x为-o(ch2)
2-，r2为-cf3和r1为h，r3为取代的甲基时，则取代基为氰基中的一个或多个。6.如权利要求1-5任一项所述的通式i所示的化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其互变异构体、其同位素化合物或其溶剂合物，其特征在于，所述通式i所示的化合物选自以下化合物：
7.如权利要求1所述的通式i所示的化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其互变异构体、其同位素化合物或其溶剂合物，其特征在于，所述的通式i所示的化合物为以下任一结构：在下述条件下的峰1和峰2对应的化合物；手性柱为chiralcel od-h，250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm；
在下述条件下的峰1和峰2对应的化合物；手性柱为chiralcel od-h,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm；在下述条件下的峰1和峰2对应的化合物；手性柱为chiralpak ad-h,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm；在下述条件下的峰1和峰2对应的化合物；手性柱为chiralpak ad-h,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm；在下述条件下的峰1和峰2对应的化合物；手性柱为chiralpak ad-h,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm；在下述条件下的峰1和峰2对应的化合物；手性柱为chiralpak ad-h,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的乙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38
℃；检测波长为uv 254nm；在下述条件下的峰1和峰2对应的化合物；手性柱为chiralpak ad-h,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的异丙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm；在下述条件下的峰1和峰2对应的化合物；手性柱为chiralpak ad-h,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的异丙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm；或，在下述条件下的峰1和峰2对应的化合物；手性柱为chiralpak ad-h,250*30mm i.d.,5μm；流动相a为超临界二氧化碳；流动相b为含0.1％氨水的异丙醇溶液，梯度为流动相a/流动相b＝60/40，比例为体积比；流速为50ml/min；柱温为38℃；检测波长为uv 254nm。8.一种如权利要求1-7任一项所述通式i所示的化合物的制备方法，其包括下列步骤：溶剂中，在碱的作用下，将通式i-a所示的化合物进行如下所示的芳香亲核取代反应即可；其中，*、r1为、r2、r3、r4、x、l、y1和y2的定义均如权利要求1-7任一项所述；hal为卤素，优选f或cl。9.如权利要求8所述的通式i所示的化合物的制备方法，其特征在于，所述通式i所示的化合物的制备方法包括下列步骤：将通式i-a所示的化合物与溶剂混合，得混合溶液，然后在0至5℃的条件下，将所述的混合溶液与碱混合，然后在0-65℃的条件下继续反应，即可；所述溶剂优选醚类溶剂和/或酰胺类溶剂，更优选醚类溶剂，例如四氢呋喃；例如为n,
n-二甲基甲酰胺和/或n,n-二甲基乙酰胺；所述碱优选氢化钠、叔丁醇钾或叔丁醇钠；当所述溶剂为醚类溶剂时，所述反应的温度优选50℃至65℃；当所述溶剂为酰胺类溶剂时，所述反应的温度优选为0℃-室温。10.如权利要求8或9所述的通式i所示的化合物的制备方法，其还进一步包括下列步骤：溶剂中，在手性配体或无手性配体的存在下，在还原剂的作用下，将通式i-b所示的化合物进行如下所示的还原反应，制得所述通式i-a所示的化合物；其中，*、r1为、r2、r3、r4、x、l、y1和y2的定义均如权利要求8所述；hal为卤素，优选为f或cl。11.如权利要求10所述的通式i所示的化合物的制备方法，其特征在于，当所述还原反应在无手性配体存在下进行时，所述通式i-a所示的化合物的制备方法包括下列步骤：气体保护下，将通式i-b所示的化合物与溶剂混合，得混合溶液，然后在0至5℃的条件下，将所述混合溶液与还原剂混合，进行所述还原反应；当所述还原反应在手性配体存在下进行时，所述通式i-a所示的化合物的制备方法优选包括下列步骤：气体保护下，将所述手性配体和溶剂混合，再与还原剂混合，所得混合液与通式i-b所示的化合物与溶剂的混合溶液混合；进行所述还原反应；所述的手性配体可为(r)-二苯基(吡咯烷-2-基)甲醇、(s)-二苯基(吡咯烷-2-基)甲醇、(s)-2-甲基-cbs-恶唑硼烷、(r)-2-甲基-cbs-恶唑硼烷、(r)-2-正丁基-cbs-恶唑硼烷、(s)-2-正丁基-cbs-恶唑硼烷、(r)-2-苯基-cbs-恶唑硼烷或(s)-2-苯基-cbs-恶唑硼烷；所述通式i-a所示的化合物的制备方法中，所述溶剂优选醚类溶剂，例如四氢呋喃；所述还原剂优选三乙基硼氢化锂、硼烷四氢呋喃和硼烷二甲硫醚中的一种或多种；所述反应的温度优选0至50℃；所述气体保护中的气体优选氮气。12.如权利要求10或11所述的通式i所示的化合物的制备方法，其特征在于，当所述还原反应在无手性配体存在下进行时，所述还原剂为三乙基硼氢化锂；和/或，所述反应的温度为0℃至室温；当所述还原反应在手性配体存在下进行时，所述还原剂为硼烷四氢呋喃；和/或硼烷二甲硫醚，所述反应的温度为室温至50℃。13.一种通式i-a或i-b所示的化合物：
其中，*、r1为、r2、r3、r4、x、l、y1和y2的定义均如权利要求1-7任一项所述；hal为卤素，优选f或cl。14.一种药物组合物，其包含如权利要求1-7任一项所述的通式i所示的化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其互变异构体、其同位素化合物或其溶剂合物以及药学上可接受的辅料。15.如权利要求14所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物还包含其他药物；所述的其他药物选自选择性雌激素受体调节剂、芳香酶抑制剂、cdk4抑制剂、cdk6抑制剂、pi3k抑制剂、激素治疗药物、化疗药物和mtor抑制剂中的一种或多种。16.一种如权利要求1-7任一项所述的通式i所示的化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其互变异构体、其同位素化合物或其溶剂合物在制备治疗癌症的药物中的用途。17.如权利要求16所述的用途，其特征在于，所述癌症为乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌、子宫癌、胃癌或肺癌，优选乳腺癌、胃癌或肺癌，更优选er阳性的乳腺癌、胃癌和/或肺癌。

技术总结
本发明公开了一种雌激素受体降解剂、其中间体、制备方法、药物组合物和用途。本发明的化合物如下通式I所示。本发明的化合物具有较高的ERα拮抗活性和ERα降解活性，能有效治疗癌症诸如乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌、子宫癌、胃癌和肺癌以及由新出现的抗性引起的突变。突变。突变。


技术研发人员：李傲 陈以乐 曹国庆
受保护的技术使用者：明慧医药（上海）有限公司
技术研发日：2022.04.28
技术公布日：2022/11/1