1.本发明涉及生物传感器技术领域，尤其涉及一种肠道微环境触发的非侵入式诊断帕金森病的生物探针及其制备方法和应用。
背景技术：2.帕金森病，是一种影响中枢神经系统的慢性神经退化疾病，主要影响运动神经系统。它是常见的神经系统变性疾病，常见于老年人，平均发病年龄为60岁左右，40岁以下起病的青年帕金森病较少见。它的特点是患者运动僵硬或迟缓同时在脑部发现路易小体(lewybody，lb)积累。路易小体富含聚集形式的α-突触核蛋白(α-synuclein，α-syn)。α-syn是一种没有明确结构的14kda蛋白质，主要在神经元中产生，在病理情况下，蛋白质的单体形式逐渐形成寡聚体结构以及不溶性纤维状组装体，以lb的形式累积在细胞内。α-syn的过度表达或突变导致黑质中多巴胺能神经元进行性缺陷和丧失促使形成帕金森病。因此，在临床上以α-syn为帕金森病的主要生物标志物。
3.前人研究主要通过检测外周液(脑脊液(csf)、血浆、唾液)中异常的α-syn积累来反映了帕金森患者大脑中的α-syn异常。与侵入式脑脊液相比，血浆成本更低，而且是相对无创、易于获取的生物标记物。然而，通过elisa和其他类似技术测定血浆中的总α-syn浓度，其结果显示：在帕金森病患者的血浆中测定α-syn浓度的结果产生相互矛盾。与健康人作为对照组相比，帕金森患者的总血浆α-syn出现偏高，偏低或没有明显统计上差异的结果。此外，低聚物或磷酸化形式的α-syn也给出了不确定的结果。这种差异通常归因于分析前和分析中的混杂因素(昼夜变化、性别或年龄依赖性，更为重要的是血液污染)、不同的技术(酶联免疫吸附测定(elisa)、蛋白质印迹、多分析物谱分析(luminex)，质谱)，以及血浆中不同α-syn种类(总的、聚集的、外泌体的)的测量。使用唾液测量α-syn也是生物标志物评估的一种有吸引力的方法；其采集简单且非侵入性，并且没有可能的血液污染。然而，与血浆相比，唾液测量α-syn总蛋白质含量要低得多，而且蛋白质浓度在一天中可能会有所不同。由于富集蛋白质材料种类不同，α-syn将可能没办法充分得到富集。同时唾液中α-syn水平结果受其它蛋白质的影响较大，包括脂质和蛋白水解酶(存在于唾液中)。这两个因素造成通过唾液检测α-syn结果与实际结果相差很大。因此开发一种非侵入式且灵敏有效的诊断帕金森病的方法成为了迫切需要解决的问题。
4.口服递送生物探针被认为是一种很有前途的非侵入式诊断疾病的方法。这主要是由于口服递送方式方便患者在任何地方使用；并且不给患者带来疼痛感，依从性高；同时因为不需要严格的灭菌过程，生产成本较低，价格相对低廉，故能口服给药者不会首选注射给药。在口服过程当中需要克服胃的强酸ph(在1.0～3.0之间)；同时胃肠道含有大量的蛋白水解酶和脱氧核糖核酸酶，这促使开发口服生物探针被受阻碍。为解决上述问题，最常用ph响应性的胶囊应用于生物大分子的递送。该胶囊能够有效保护生物大分子在过胃的过程中免受胃的强酸和胃中大量酶的降解。但是该胶囊在肠道的偏中性环境下开始崩解释放出生
物大分子。这种方法虽然可以有效的克服胃的强酸对生物大分子的影响。但无法克服肠道中大量的降解酶对生物大分子的降解。
5.发光功能性金属有机框架(l-mof)是由稀土金属离子为中心和有机小分子为配体在一定的条件下形成结晶多孔材料。发光功能性金属有机框架的荧光主要是由发出尖锐但微弱的电偶极子选择规则禁止的跃迁，并通过天线效应增加发光强度。多孔发光功能性金属有机框架在很多方面得到应用，特别在医学成像上。近些年有研究金属有机框架的孔径大小可以精确地与dna大小结合。它们的表面电荷和孔径可以量身定制能够有效的嵌入dna。通过l-mof孔径大小刚好能够装载dna。由于装载了dna的三维结构被发光功能性金属有机框架的孔径限制住，所以在强酸下生物大分子得到有效的保护。同时由于设计的孔径没办法让dna或者蛋白质水解酶进入。因此dna水解酶也没办法降解装载到发光功能性金属有机框架空腔中的dna。
6.基于以上背景，基于耐酸性发光金属有机框架为口服生物探针的设计提供了很好的载体。即将dna物理固定在孔腔中形成盔甲，在极端的胃肠道(gi)条件下，盔甲可以有效保护其封装的dna。然而如何专一、有效的在肠道侦测引起帕金森疾病的α-syn依然未得到解决。
7.对此特异性好、合成简单且稳定的生物材料核酸适配体(aptamer)引起了我们的注意。核酸适配体是一种由指数富集的配体进化技术(selex)从单链随机寡核苷酸文库中筛选，最终得到的能与靶标高特异性和高亲和力结合的单链寡核苷酸。与传统的生物识别元件抗体相比，它显示出了更加优越的性质，比如能强亲合力和高选择性识别靶分子、易合成、易标记、性质稳定(在37oc下不受破坏)等优势。基于适配体的独特优越性，其成为了新一代高特异性和高稳定性生物识别元件。但由于肠道中α-syn的含量低，同时肠道基质干扰比较严重，这就需要侦测手段必须能高特异性识别和有效的扣除基质干扰的方法。
技术实现要素：8.本发明的目的在于提供一种肠道微环境触发的非侵入式诊断帕金森病的生物探针，尤其用于检测作为帕金森病重要诊断标志物的α-syn的发光金属有机框架-金-适配体复合物的生物探针。
9.为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
10.本发明提供了一种肠道微环境触发的非侵入式诊断帕金森病的生物探针的制备方法，包括如下步骤：
11.(1)将硝酸铕和有机配体混合，采用溶剂热方法合成发光金属有机框架；
12.(2)将金纳米粒子与核酸适配体混合反应，得到au-适配体复合物；
13.(3)将发光金属有机框架溶解在au-适配体复合物溶液中进行反应，反应后依次经去离子水、乙醇溶液、十二烷基硫酸钠溶液洗涤，得到吸附有au-适配体复合物的发光金属有机框架，即生物探针。
14.优选的，所述硝酸铕和有机配体的摩尔比为8～12:1。
15.优选的，所述有机配体包括l3,3”'-dihydroxy-2',2”,5',5
”‑
tetramethyl-[1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4,4”'-二羧酸、[1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4,4”'-二羧酸和1,1':4',1”:4”,1”'-四苯基]-3,3”',5,5”'-四羧酸中的一种。
[0016]
优选的，所述溶剂热方法的温度为160～200℃，时间为10～14h。
[0017]
优选的，所述混合反应的温度为25～37℃，转速为200～1000rpm，时间为3～5h。
[0018]
优选的，所述au-适配体复合物溶液由超纯水配置得到，所述au-适配体复合物溶液的浓度为0.5～5mgml；所述发光金属有机框架与au-适配体复合物溶液的质量体积比为8～12mg：8～12ml。
[0019]
优选的，步骤(3)中所述反应的温度为25～37℃，时间为4～6h。
[0020]
本发明还提供了一种所述的制备方法得到的肠道微环境触发的非侵入式诊断帕金森病的生物探针。
[0021]
本发明还提供了一种所述的生物探针在制备肠道微环境触发的非侵入式诊断帕金森病的药物中的应用。
[0022]
本发明还提供了一种所述的检测试剂在制备肠道微环境触发的非侵入式检测肠道α-突触核蛋白的药物中的应用。
[0023]
本发明提供的生物探针基于耐酸性的发光金属有机框架通过精准控制孔径装载修饰在金纳米粒子表面的核酸适配体(au-aptamer)。当生物探针形成之后，发光金属有机框架的发射的荧光被探针上的au-aptamer的可见光所通过荧光共振能量转移所吸收，导致发光金属有机框架在545nm的荧光发生猝灭。发光金属有机框架材料的孔径大小(直径约为)，它允许au纳米颗粒表面上的核酸适配体通过亲水或静电力的相互作用封装到发光金属框架的孔径中，但却不允许dna水解酶(dnase,封装到发光金属框架的孔径中，但却不允许dna水解酶(dnase,)进入框架孔径，从而保护核酸适配体防止其变性失活或水解。
[0024]
本发明提供的生物探针的通过肠道微环境触发的非侵入式诊断帕金森病的机制为：当帕金森患者口服生物探针时，由于患者的肠道微环境中存在α-syn，α-syn可以被生物探针中的核酸适配体特异性识别形成au-aptamer/α-syn复合物，并把au-aptamer/α-syn复合物从发光金属有机框架上释放到肠道中，导致探针中的荧光信号从“关”状态变成了“开”状态。该原位荧光“开”的过程可以通过活体成像仪所监测到。此外，发光金属有机框架完整性的沿肠道保留并在粪便中排出。因此，定量检测粪便的荧光强度即可以有效的诊断帕金森病，从而实现了对帕金森病的非侵入式且专一有效的诊断。该方法为非侵入诊断帕金森病提供解决方案同时为早期诊断帕金森病和潜在治疗开辟了一条新的方法。
附图说明
[0025]
图1为实施例制备的铕基的耐酸性发光金属有机框架和生物探针的tem图；
[0026]
图2为实施例1制备的铕基的耐酸性发光金属有机框架和生物探针的共聚焦显微镜图；
[0027]
图3为体外不同浓度α-syn下的荧光光谱；
[0028]
图4为体外不同浓度的α-syn在545nm处的荧光强度标准曲线；
[0029]
图5为帕金森病小鼠模型胃肠道的荧光信号，上图为小鼠成像，下图为小鼠肠道成像。
具体实施方式
[0030]
本发明提供了一种肠道微环境触发的非侵入式诊断帕金森病的生物探针的制备方法，包括如下步骤：
[0031]
(1)将硝酸铕和有机配体混合，采用溶剂热方法合成发光金属有机框架；
[0032]
(2)将金纳米粒子与核酸适配体混合反应，得到au-适配体复合物；
[0033]
(3)将发光金属有机框架溶解在au-适配体复合物溶液中进行反应，反应后依次经去离子水、乙醇溶液、十二烷基硫酸钠溶液洗涤，得到吸附有au-适配体复合物的发光金属有机框架，即生物探针。
[0034]
本发明在制备肠道微环境触发的非侵入式诊断帕金森病的生物探针时，将硝酸铕和有机配体混合，采用溶剂热方法合成发光金属有机框架。
[0035]
在本发明中，所述硝酸铕和有机配体的摩尔比优选为8～12:1，进一步优选为10：1。
[0036]
在发明中所述有机配体优选为l3,3”'-dihydroxy-2',2”,5',5
”‑
tetramethyl-[1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4,4”'-二羧酸、[1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4,4”'-二羧酸和1,1':4',1”:4”,1”'-四苯基]-3,3”',5,5”'-四羧酸中的一种，进一步优选为l3,3”'-dihydroxy-2',2”,5',5
”‑
tetramethyl-[1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4,4”'-二羧酸。
[0037]
在本发明中，所述硝酸铕和有机配体在dmf(n,n-二甲基甲酰胺)溶剂中混合。
[0038]
在本发明中，所述硝酸铕、有机配体和dmf的摩尔体积比优选为8～12mmol:1mmol:8～12ml，进一步优选为10mmol:1mmol:10ml。
[0039]
在本发明中，所述硝酸铕和有机配体混合时，优选采用超声混合。
[0040]
在本发明中，所述超声的功率优选为100～1500w，进一步优选为500w。
[0041]
在本发明中，所述超声的时间优选为0.5～1.5min，进一步优选为1min。
[0042]
在本发明中，优选在50ml内衬特氟隆的不锈钢高压釜中完成硝酸铕和有机配体的合成。
[0043]
在本发明中，所述溶剂热方法的温度优选为160～200℃，进一步优选为180℃。
[0044]
在本发明中，所述溶剂热方法的时间优选为10～14h，进一步优选为12h。
[0045]
在本发明中，所述发光金属有机框架的耐酸范围优选为ph＝1.0～3.0，进一步优选为ph＝2.0；孔径直径优选为进一步优选为
[0046]
本发明将金纳米粒子与核酸适配体混合反应，得到au-适配体复合物。
[0047]
在本发明中，所述金纳米粒子优选按照如下方法制备得到：将1wt％柠檬酸三钠的水溶液(2.5ml)加入到含有0.01wt％haucl4的沸腾水溶液(100ml)中，并在加入后立即在烧瓶中剧烈旋转(1000rpm)。直到溶液的颜色逐渐从灰色变为蓝色，再由紫色变为酒红色。之后，在剧烈搅拌(1000rpm)下使溶液沸腾10分钟以验证反应完成。最终，将溶液冷却至环境温度(25℃)，然后在4℃下储存备用。
[0048]
在本发明中，所述核酸适配体优选为α-syn的核酸适配体，其核苷酸序列为5
’‑
sh-tttttggtggctggagggggcgcgaacg。购买于sangon biotech(shanghai,china,https://www.sangon.com/)。购买的核酸适配体已经完成了巯基化的处理过程。
[0049]
在本发明中，所述金纳米粒子与核酸适配体的摩尔浓度比优选为0.5～1.5:1.5～2.5，进一步优选为1:2。
[0050]
在本发明中，所述金纳米粒子与核酸适配体混合反应的温度优选为25～37℃，进一步优选为37℃。
[0051]
在本发明中，所述金纳米粒子与核酸适配体混合反应的转速优选为200～1000rpm，进一步优选为300rpm。
[0052]
在本发明中，所述金纳米粒子与核酸适配体混合反应的时间优选为3～5h，进一步优选为4h。
[0053]
在本发明中，混合反应完成后，还优选对au-适配体复合物进行洗涤。
[0054]
在本发明中，所述洗涤优选用十二烷基硫酸钠溶液洗涤，以去除未反应的核酸适配体。
[0055]
在本发明中，所述洗涤的次数优选为2～4次，进一步优选为3次。
[0056]
在本发明中，每次所述洗涤后优选采用离心分离，并在-40℃进行冷冻干燥，得到au-适配体复合物。
[0057]
在本发明中，所述离心分离的转速优选为8000～12000rpm，进一步优选为10000rpm。
[0058]
在本发明中，所述离心分离的时间优选为8～12min，进一步优选为10min。
[0059]
本发明将前述制备的发光金属有机框架溶解在au-核酸适配体复合物溶液中进行反应，反应后依次经去离子水、乙醇溶液、十二烷基硫酸钠溶液洗涤，得到吸附有au-核酸适配体复合物的发光金属有机框架，即生物探针。
[0060]
在本发明中，所述au-核酸适配体复合物溶液优选用超纯水配置得到。
[0061]
在本发明中，所述au-核酸适配体复合物溶液的浓度优选为0.5～5mg/ml，进一步优选为1mg/ml。
[0062]
在本发明中，所述发光金属有机框架与au-适配体复合物溶液的质量体积比优选为8～12mg：8～12ml，进一步优选为10mg：10ml。
[0063]
在本发明中，所述反应的温度优选为25～37℃，进一步优选为37℃。
[0064]
在本发明中，所述反应的时间优选为4～6h，进一步优选为5h。
[0065]
在本发明中，所述乙醇溶液的体积浓度优选为70％。
[0066]
在本发明中，所述十二烷基硫酸钠溶液的浓度优选为5％(w/w)。
[0067]
在本发明中，每个试剂洗涤的次数独立的优选为3～5次，进一步独立的优选为4次。
[0068]
在本发明中，所述洗涤完成后，分离吸附了au-适配体复合物的发光金属有机框架。
[0069]
在本发明中，所述分离的方法优选采用离心分离，离心分离后并在-40℃进行冷冻干燥。
[0070]
在本发明中，所述离心分离的转速优选为8000～12000rpm，进一步优选为10000rpm。
[0071]
在本发明中，所述离心分离的时间优选为8～12min，进一步优选为10min。
[0072]
本发明还提供了一种所述的制备方法得到的肠道微环境触发的非侵入式诊断帕金森病的生物探针。
[0073]
本发明还提供了一种所述的生物探针在制备肠道微环境触发的非侵入式诊断帕
金森病的药物中的应用。
[0074]
本发明还提供了一种所述的检测试剂在制备肠道微环境触发的非侵入式检测肠道α-突触核蛋白的药物中的应用。
[0075]
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
[0076]
实施例1
[0077]
(1)制备多孔耐酸的发光金属有机框架：将eu(no3)3(136mg,0.3mmol)和l3,3”'-dihydroxy-2',2”,5',5
”‑
tetramethyl-[1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4,4”'-二羧酸(43.5mg,0.03mmol)分散在10ml dmf，在500w下超声1min。然后将所得溶液转移到50ml内衬特氟隆的不锈钢高压釜中，并在180℃下热处理12小时，得到具有多孔耐酸特性的发光金属有机框架。将得到的发光金属有机框架置于手套箱中干燥，干燥的条件为80℃下，4小时。经测定该发光金属有机框架的耐酸值为ph＝1.0～3.0，孔径为
[0078]
(2)制备au-核酸适配体：将1wt％柠檬酸三钠的水溶液(2.5ml)加入到含有0.01wt％haucl4的沸腾水溶液(100ml)中，并在加入后立即在烧瓶中剧烈旋转(1000rpm)。直到溶液的颜色逐渐从灰色变为蓝色，再由紫色变为酒红色。之后，在剧烈搅拌(1000rpm)下使溶液沸腾10分钟以验证反应完成，得到金纳米粒子。最终将溶液冷却至环境温度(25℃)，然后在4℃下储存备用。
[0079]
核酸适配体为α-syn的核酸适配体，核苷酸序列为5
’‑
sh-tttttggtggctggagggggcgcgaacg，购自sangon biotech(shanghai,china,https://www.sangon.com/)。
[0080]
将1μm的金纳米粒子溶液(用超纯水配置)与2μm的核酸适配体(用超纯水配置)混合，在37℃下缓慢旋转(300rpm)反应4小时，然后离心分离(10000rpm，10min)，并用超纯水洗涤3次，每次洗涤完后均进行离心分离(10000rpm，10min)，通过洗涤和离心去除未反应的核酸适配体。最后，将最后一次离心分离得到的固体冷冻干燥，得到au-核酸适配体，并置于4℃下保存备用。
[0081]
(3)在发光金属有机框架上修饰au-核酸适配体：以超纯水为溶剂配置浓度为1mg/ml的au-核酸适配体溶液。迅速从手套箱中取出干燥的发光金属有机框架10mg，在室温(25℃)下溶解在10mlau-核酸适配体溶液中反应5小时。然后取出离心(10000rpm，10min)，依次经去离子水洗涤4次、70％的乙醇溶液洗涤4次和5％(w/w)的十二烷基硫酸钠溶液洗涤4次(sds可以将吸附在发光金属有机框架表面的适配体去除，从而仅保留其孔洞内部的适配体)，经离心分离(10000rpm，10min)，得到au-核酸适配体吸附在发光金属有机框架内部的生物探针。
[0082]
上述步骤(1)制备的发光金属有机框架通过tem呈现出一维线状结构，如图1(左图)所示。经au-核酸适配体修饰后，如图1(右图)所示，从图1(右图)中可以看到一粒粒金纳米粒子在发光金属有机框架中清晰可见，表明au-核酸适配体可以精准的装入发光金属有机框架的空腔中形成生物探针。图2为发光的金属有机框架(左图)和生物探针(右图)的共聚焦显微镜图。表明发光的金属有机框架会呈现绿色的荧光。但当金纳米粒子表面修饰的核酸适配体有效装载到发光金属有机框架的空腔中时，通过金纳米粒子的荧光共振能量转移使得发光金属有机框架呈现绿色荧光发生猝灭，得到不发光的生物探针。进一步证实生
物探针的形成。
[0083]
利用上述制备的生物探针进行体外检测并绘制不同浓度α-syn下的荧光光谱和标准曲线。通过把不同浓度的α-syn溶解在pbs中与1mg/ml的生物探针反应30min。反应之后的溶液通过fl-4600分子荧光仪检测其荧光强度。结果如图3、4所示。从图中可以看出，本发明提供的生物探针能够实现体外的α-syn检测，且检测灵敏度较高，标准曲线线性较好。
[0084]
本发明还构建了帕金森病小鼠模型进行了体内实验。
[0085]
帕金森病小鼠模型的构建：
[0086]
mptp(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶)有高度脂溶性，易透过血脑屏障，进入脑后可在神经胶质细胞单胺氧化酶的作用下转化为它的有效成分mpp
+
。mpp
+
被多巴胺转运体摄取到多巴胺能神经元线粒体内后，可抑制线粒体复合物i的活性，会导致多巴胺能神经元变性、死亡。
[0087]
连续7天，每天腹腔注射mptp(0.6mg,2mg/ml)到8周龄大的雄性小鼠c57bl/6中构建帕金森病小鼠。
[0088]
然后在帕金森老鼠中，口服生物探针(口服剂量50mg/kg)之后，通过小动物成像仪侦测到来至胃肠道的荧光信号，如图5所示。表明肠道微环境触发的生物探针可以对胃肠道的α-syn进行响应。同时肠道微环境触发的生物探针可以在随着粪便保留下来。对小鼠粪便定量检测α-syn的含量并与商业elisa试剂盒对比，结果如表1所示。
[0089]
表1实施例1的生物探针与商业elisa试剂盒对比粪便中α-syn浓度结果(n＝6)
[0090][0091]
由表1可知，开发出的肠道微环境的非侵入式口服生物探针的对帕金森老鼠粪便的检测结果跟商业化的酶联免疫试剂盒得到的结果一致，证明其结果的可靠性。
[0092]
由以上实施例可知，本发明提供了一种基于肠道微环境的非侵入式口服生物探针，用于早期阶段诊断帕金森病。给口服生物探针提供了一种全新的方案，克服了口服生物探针无法在肠胃道稳定存在的问题。并且该方法适用于患者在家中自己检测，大大方便了患者。非侵入式早期疾病开辟了一条新的方法。
[0093]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应
视为本发明的保护范围。
技术特征：1.一种肠道微环境触发的非侵入式诊断帕金森病的生物探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将硝酸铕和有机配体混合，采用溶剂热方法合成发光金属有机框架；(2)将金纳米粒子与核酸适配体混合反应，得到au-适配体复合物；(3)将发光金属有机框架溶解在au-适配体复合物溶液中进行反应，反应后依次经去离子水、乙醇溶液、十二烷基硫酸钠溶液洗涤，得到吸附有au-适配体复合物的发光金属有机框架，即生物探针。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述硝酸铕和有机配体的摩尔比为8～12:1。3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述有机配体为l3,3”'-dihydroxy-2',2”,5',5
”‑
tetramethyl-[1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4,4”'-二羧酸、[1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4,4”'-二羧酸和1,1':4',1”:4”,1”'-四苯基]-3,3”',5,5”'-四羧酸中的一种。4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述溶剂热方法的温度为160～200℃，时间为10～14h。5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述混合反应的温度为25～37℃，转速为200～1000rpm，时间为3～5h。6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述au-适配体复合物溶液由超纯水配置得到，所述au-适配体复合物溶液的浓度为0.5～5mgml；所述发光金属有机框架与au-适配体复合物溶液的质量体积比为8～12mg：8～12ml。7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述反应的温度为25～37℃，时间为4～6h。8.一种权利要求1～7任一项所述的制备方法得到的肠道微环境触发的非侵入式诊断帕金森病的生物探针。9.一种权利要求8所述的生物探针在制备肠道微环境触发的非侵入式诊断帕金森病的药物中的应用。10.一种权利要求8所述的检测试剂在制备肠道微环境触发的非侵入式检测肠道α-突触核蛋白的药物中的应用。
技术总结本发明提供了一种肠道微环境触发的非侵入式诊断帕金森病的生物探针及其制备方法和应用，本发明属于生物传感器技术领域。本发明提供的生物探针的制备方法，包括如下步骤：(1)将硝酸铕和有机配体混合，采用溶剂热方法合成发光金属有机框架；(2)将金纳米粒子与核酸适配体混合反应，得到Au-适配体复合物；(3)将发光金属有机框架溶解在Au-适配体复合物溶液中进行反应，反应后依次经去离子水、乙醇溶液、十二烷基硫酸钠溶液洗涤，得到生物探针。本发明提供了一种基于肠道微环境的非侵入式口服生物探针，用于早期阶段诊断帕金森病。给口服生物探针提供了一种全新的方案，克服了口服生物探针无法在肠胃道稳定存在的问题。探针无法在肠胃道稳定存在的问题。探针无法在肠胃道稳定存在的问题。
技术研发人员：缪养宝
受保护的技术使用者：四川省医学科学院
技术研发日：2022.06.30
技术公布日：2022/11/1
