含三氮唑稠环类衍生物、药物组合物及其制备方法和应用与流程

含三氮唑稠环类衍生物、药物组合物及其制备方法和应用
1.本技术要求2021年04月30日向中国国家知识产权局提交的，专利申请号为202110483368.8，发明名称为“含三氮唑稠环类衍生物、药物组合物及其制备方法和应用”的在先申请的优先权。所述在先申请的全文通过引用的方式结合于本技术中。
技术领域
2.本发明属于药物合成领域，具体涉及通式(i)所示的含三氮唑稠环类衍生物、及含有该衍生物的药物组合物的制备方法和作为治疗剂在医学上的用途，以及其作为选择性的nk-3受体拮抗剂，用于治疗和/或预防一系列广泛的cns和外周疾病的用途。


背景技术：

3.速激肽受体是包括p物质(sp)、神经激肽a(nka)以及神经激肽b(nkb)在内的被共同命名为“速激肽”的结构相关肽家族的靶标。速激肽是在中枢神经系统(cns)和外周组织中被合成的，在此它们发挥了多种生物活性。目前已有三种速激肽受体是已知的，它们被命名为神经激肽-1(nk-1)受体、神经激肽-2(nk-2)受体以及神经激肽-3(nk-3)受体。速激肽受体属于视紫红质样七次跨膜g蛋白偶联受体。sp具有最高的亲和力并且被认为是nk-1受体的内源性配体，nka是nk-2受体的内源性配体，nkb是nk-3受体的内源性配体。已经在不同的物种中鉴定出nk-1受体、nk-2受体以及nk-3受体。nk-1受体和nk-2受体在多种外周组织中表达并且nk-1受体还在cns中表达，而nk-3受体主要在cns中表达。
4.神经激肽受体介导了多种由速激肽刺激的生物效应，包括传递cns和外周中的兴奋性神经元信号(例如疼痛)、调节平滑肌收缩活动、调节免疫反应和炎症反应、经由扩张外周脉管系统来诱导降压作用以及刺激内分泌腺和外分泌腺分泌。
5.nk-3受体由tacr3基因编码，参与下丘脑-垂体-性腺轴的调节。tacr3基因敲除或突变小鼠均表现为生殖器官发育异常，性激素水平低，繁殖能力严重下降。携带tacr3基因突变会导致患者的促性腺激素释放异常，从而导致患者出现性幼稚症和不育症，并且有相当一部分的家族性性腺功能减退症是由于tacr3基因突变导致。
6.亲吻素kisspeptin/神经激肽b/强啡肽(kndy)神经元参与促性腺激素释放激素(gnrh)信号通路，通过gnrh神经元-垂体-性器官通路，促进雌激素的生成，并且这一信号通路受到负反馈机制的调节，从而保持体内激素水平在一定的合理范围内。同时，kndy神经元也与温度调节信号通路相关，通过释放nkb配体，与中位视前核上的nk-3受体结合，通过抑制发抖和血管收缩，促进流汗和血管舒张来调节体温在一定的范围内。绝经期的女性，由于体内雌激素水平下降，从而导致负反馈机制缺失，使得kndy神经元过度激活，大量释放内源性nkb配体，与中位视前核上的nk-3受体结合，导致出汗、血管舒张，发生潮热的症状。因此，开发针对kndy神经元和中位视前核上的nk-3受体的拮抗剂，有望对潮热的症状有积极的治疗作用。
7.在cns中，nk-3受体在包括内侧额叶前皮质、海马体、丘脑以及杏仁核在内的区域中表达。此外，nk-3受体在多巴胺能神经元上表达。已经证实nk-3受体的激活调节了多巴
胺、乙酰胆碱以及血清素的释放，这提示了nk-3受体调节剂治疗多种病症的治疗效用，所述病症包括精神病性障碍、焦虑症、抑郁症、精神分裂症以及肥胖、疼痛或炎症。
8.尽管大量有意义的研究已在该领域进行，目前仍需要继续研究开发更加有效的小分子nk3r受体拮抗剂，本发明提供了一种新型结构的nk3r受体拮抗剂，并发现具有此类结构的化合物具有良好的活性，能够有效治疗一系列的cns和外周疾病。


技术实现要素：

9.本发明提供了一种如式(i)所示的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、药学上可接受的盐或前药：
[0010][0011]
其中：
[0012]
x为o或s；
[0013]
m为n或cr2；
[0014]
环a选自苯基、8-10元稠杂环基或8-10元稠杂芳基，所述的环a，任选地，进一步被卤素、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基和c
1-6
烷基酰基中的一个或多个取代基所取代；
[0015]
r1选自c
1-6
烷基；
[0016]
r2选自c
1-6
烷基；
[0017]
或者，r1和r2连接形成c
3-6
环烷基。
[0018]
在本发明的一个实施方案中，所述环a选自苯基、苯并5-6元杂环基、苯并5-6元杂芳基、吡啶并5-6元杂芳基、5-6元杂芳基并苯基或5-6元杂环基并苯基，所述的环a，任选地进一步被卤素、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基和c
1-3
烷基酰基中的一个或多个取代基所取代；
[0019]
在本发明的一个实施方案中，所述r1选自甲基；
[0020]
在本发明的一个实施方案中，所述r2选自甲基；
[0021]
在本发明的一个实施方案中，所述r1和r2连接形成环戊烯基。
[0022]
在本发明的一个实施方案中，所述环a选自苯基、吡啶基、吲哚基、苯并呋喃基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并吡唑基、苯并三氮唑基、喹啉基、苯并二氧戊环基、苯并哌啶基、苯并吡咯基、咪唑并苯基、吡啶并吡咯基、噁唑并苯基、哌啶并苯基或吗啉并苯基，所述的环a，任选地，进一步被氟、氯、甲基、甲氧基、甲酰基、乙酰基和三氟甲基中的一个或多个取代基所取代。
[0023]
在本发明的一个实施方案中，所述的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物或药学上可接受盐，其特征在于，通式(i)进一步如通式(ii)所示：
[0024][0025]
其中：
[0026]
x为o或s；
[0027]
r3选自氢、卤素、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基或c
1-3
烷基酰基；
[0028]
或者，r3和r4连接形成5-6元杂环基或5-6元杂芳基，所述的5-6元杂环基和5-6元杂芳基，任选地，进一步被卤素、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷基酰基中的一个或多个取代基所取代；
[0029]
r5选自氢、c
1-3
烷基或c
1-3
卤代烷基；
[0030]
或者，r4和r5连接形成5-6元杂环基或5-6元杂芳基，所述的5-6元杂环基和5-6元杂芳基，任选地，进一步被卤素、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷基酰基中的一个或多个取代基所取代；
[0031]
r6选自氢、卤素、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基或c
1-3
烷基酰基；
[0032]
条件是，r4至少与r3和r5中的一个连接形成5-6元杂环基或5-6元杂芳基。
[0033]
在本发明的一个实施方案中，所述r3选自氢、氟、氯、甲基、甲氧基或三氟甲基；
[0034]
或者，r3和r4连接形成呋喃基、吡咯基、噻唑基、三氮唑基、吡唑基、哌啶基、咪唑基或1,3-二氧戊环基，所述的呋喃基、吡咯基、噻唑基、噁唑基、三氮唑基、吡唑基、哌啶基、咪唑基和1,3-二氧戊环基，任选地，进一步被氟、氯、甲基、甲氧基、甲酰基、乙酰基和三氟甲基中的一个或多个取代基所取代；
[0035]
r5选自氢、甲基或三氟甲基；
[0036]
或者，r4和r5连接形成呋喃基、吡咯基、噻唑基、三氮唑基、吡唑基、哌啶基、咪唑基或1,3-二氧戊环基，所述的呋喃基、吡咯基、噻唑基、噁唑基、三氮唑基、吡唑基、哌啶基、咪唑基和1,3-二氧戊环基，任选地，进一步被氟、氯、甲基、甲氧基、甲酰基、乙酰基和三氟甲基中的一个或多个取代基所取代；
[0037]
r6选自氢、氟、氯、甲基、甲氧基或三氟甲基。
[0038]
在本发明的一个实施方案中，所述环a选自如下基团：
[0039][0040]
在本发明的一个实施方案中，所述选自如下基团：
[0041][0042]
在本发明的一个实施方案中，所述的式(i)化合物优选以通式(iii)所示：
[0043][0044]
其中：
[0045]
x为o或s；
[0046]
环a选自
[0047]
r’为环a上的取代基，其可以相同或不同，任选地选自卤素、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基和c
1-6
烷基酰基；优选的，r’选自氟、氯、甲基、甲氧基或三氟甲基；k为0-5的整数，例如为0、1、2、3、4或5。
[0048]
在本发明的一些实施方式中，所述式(i)化合物可以为如下具体化合物：
[0049]
[0050][0051]
本发明还提供一种药物组合物，其包含上述式(i)所示的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐、代谢产物、前药中的一种、两种或更多种；
[0052]
根据本发明，所述药物组合物还可以任选地包含至少一种药学上可接受的辅料；
[0053]
根据本发明，所述药物组合物还可以任选地包含至少一种另外的活性成分；具体地，所述药物组合物还可以包含除如式(i)所示的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐、代谢产物、前药以外的一种或多种活性成分；
[0054]
在所述的药物组合物中，所述如式(i)所示的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐、代谢产物、前药的剂量，可为治疗有效量；
[0055]
根据本发明，可以通过本领域已知的方法将本发明的药物组合物制成适于给药的剂型。
[0056]
本发明还提供上述式(i)所示的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐、代谢产物、前药中的一种、两种或更
多种，或所述的药物组合物在制备药物中的用途；
[0057]
根据本发明，所述药物为nk3受体拮抗剂。
[0058]
根据本发明，所述药物用于预防和/或治疗由nk3受体介导的疾病；
[0059]
在一些实施方案中，所述药物可用于预防和/或治疗抑郁症、焦虑症、精神病、精神分裂症、精神病性障碍、双相型障碍、认知障碍、帕金森病、阿尔茨海默氏病、注意力不足多动症(adhd)、疼痛、惊厥、肥胖、炎性疾病、呕吐、先兆子痫、气道相关疾病、生殖障碍、避孕和性激素依赖性疾病或妇科疾病相关疾病。
[0060]
所述性激素依赖性疾病包括但不限于良性前列腺增生(bph)、前列腺增生、转移性前列腺癌、睾丸癌、乳腺癌、卵巢癌、雄激素依赖性痤疮、男性型秃发、子宫内膜异位症、青春期异常、子宫纤维化、子宫纤维瘤、激素依赖性癌症、高雄激素血症、多毛症、男性化、多囊卵巢综合征(pcos)、经前烦躁症(pmdd)、hair-an综合征(高雄激素血症、胰岛素抵抗以及黑棘皮病)、卵巢卵泡膜细胞增生症(hair-an伴有卵巢间质中黄体化卵泡膜细胞增生)、高卵巢内雄激素浓度的其它表现(例如卵泡成熟停滞、闭锁、无排卵、痛经、功能失调性子宫出血、不孕症)、产生雄激素的肿瘤(男性化卵巢瘤或肾上腺瘤)、月经过多以及子宫腺肌症。
[0061]
所述气道相关疾病包括慢性阻塞性肺病、哮喘、气道高反应性、支气管收缩以及咳嗽。
[0062]
在一些实施方案中，所述药物用于治疗和/或预防更年期综合征相关疾病，所述的更年期综合征包含潮热、出汗、心悸、眩晕及肥胖等症状。
[0063]
本发明还提供一种治疗和/或预防nk3受体介导的病症或疾病的方法，所述方法包括向治疗对象施用治疗有效量的式(i)所示的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐、代谢产物、前药中的一种、两种或更多种；
[0064]
根据本发明，所述病症或疾病为抑郁症、焦虑症、精神病、精神分裂症、精神病性障碍、双相型障碍、认知障碍、帕金森病、阿尔茨海默氏病、注意力不足多动症(adhd)、疼痛、惊厥、肥胖、炎性疾病、呕吐、先兆子痫、气道相关疾病、生殖障碍、避孕和性激素依赖性疾病或妇科疾病相关疾病。
[0065]
所述性激素依赖性疾病包括但不限于良性前列腺增生(bph)、前列腺增生、转移性前列腺癌、睾丸癌、乳腺癌、卵巢癌、雄激素依赖性痤疮、男性型秃发、子宫内膜异位症、青春期异常、子宫纤维化、子宫纤维瘤、激素依赖性癌症、高雄激素血症、多毛症、男性化、多囊卵巢综合征(pcos)、经前烦躁症(pmdd)、hair-an综合征(高雄激素血症、胰岛素抵抗以及黑棘皮病)、卵巢卵泡膜细胞增生症(hair-an伴有卵巢间质中黄体化卵泡膜细胞增生)、高卵巢内雄激素浓度的其它表现(例如卵泡成熟停滞、闭锁、无排卵、痛经、功能失调性子宫出血、不孕症)、产生雄激素的肿瘤(男性化卵巢瘤或肾上腺瘤)、月经过多以及子宫腺肌症。
[0066]
所述气道相关疾病包括慢性阻塞性肺病、哮喘、气道高反应性、支气管收缩以及咳嗽。
[0067]
在一些实施方案中，所述病症或疾病为更年期综合征相关疾病，所述的更年期综合征包含潮热、出汗、心悸、眩晕及肥胖等症状。
[0068]
所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的式(i)所示的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐、代谢
产物、前药的一种、两种或更多种。优选地，所述患者是温血动物，更优选地是人类。
[0069]
发明的详细说明
[0070]
术语定义
[0071]
除非另外说明，本发明所使用的所有科技术语具有与本发明所属领域技术人员的通常理解相同的含义。本发明涉及的所有专利和公开出版物通过引用方式整体并入本发明。
[0072]
除非另外说明，应当应用本文所使用的下列定义。出于本发明的目的，化学元素与元素周期表cas版，和《化学和物理手册》，第75版，1994一致。此外，有机化学一般原理可参考"organic chemistry",thomas sorrell,university sciencebooks,sausalito:1999,和"march's advanced organic chemistry”by michael b.smith and jerry march,john wiley&sons,new york:2007中的描述，其全部内容通过引用并入本文。
[0073]
术语“包括”为开放式表达，即包括本发明所指明的内容，但并不排除其他方面的内容。
[0074]
除非另有说明，本说明书和权利要求书记载的数值范围相当于至少记载了其中每一个具体的整数数值。例如，数值范围“1-40”相当于记载了数值范围“1-10”中的每一个整数数值即1、2、3、4、5、6、7、8、9、10，以及数值范围“11-40”中的每一个整数数值即11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40。应当理解，本文在描述取代基时使用的一个或多个中，“多个”应当是指≥2的整数，例如2、3、4、5、6、7、8、9或10。
[0075]
术语“卤素”或“卤”是指氟(f)、氯(cl)、溴(br)或碘(i)。
[0076]
术语“氧代”是指取代基中的碳原子、氮原子或硫原子被氧化后形成的氧基取代(＝o)。
[0077]
除非另有说明，本文中术语的定义同样适用于包含该术语的基团，例如烷基的定义也适用于烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基等中的烷基。
[0078]
一般而言，术语“取代的”表示所给结构中的一个或多个氢原子被具体取代基所取代。进一步地，当该基团被1个以上所述取代基取代时，所述取代基之间是相互独立，即，所述的1个以上的取代基可以是互不相同的，也可以是相同的。除非其他方面表明，一个取代基团可以在被取代基团的各个可取代的位置进行取代。当所给出的结构式中不只一个位置能被选自具体基团的一个或多个取代基所取代，那么取代基可以相同或不同地在各个位置取代。其中所述的取代基可以是，但并不限于，＝o、＝s、氢、氘、氰基、硝基、氨基、羟基、巯基、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、羧基、环烷基、环烷基氧基、杂环基、杂环基烷基、芳基、芳基烷基、芳基氧基、杂芳基、杂芳基烷基、杂芳基氧基等。
[0079]
另外，需要说明的是，除非以其他方式明确指出，在本发明中所采用的描述方式
“…
独立地选自”应做广义理解，是指所描述的各个个体之间是相互独立的，可以独立地选自相同或不同的具体基团。更详细地，描述方式
“…
独立地选自”既可以是指在不同基团中，相同符号之间所表达的具体选项之间互相不影响；也可以表示在相同的基团中，相同符号之间所表达的具体选项之间互相不影响。
[0080]
本技术通式定义中的术语“任选的”(或“任选地”、“任选”)意味着被0个、一个或多个取代基所取代的情形，例如“任选被一个、两个或更多个r取代”意味着可以不被r取代(无
2-炔基、3-甲基丁-1-炔基、1-乙基丙-2-炔基、3-甲基戊-4-炔基、2-甲基戊-4-炔基、1-甲基戊-4-炔基、2-甲基戊-3-炔基、1-甲基戊-3-炔基、4-甲基戊-2-炔基、1-甲基戊-2-炔基、4-甲基戊-1-炔基、3-甲基戊-1-炔基、2-乙基丁-3-炔基、1-乙基丁-3-炔基、1-乙基丁-2-炔基、1-丙基丙-2-炔基、1-异丙基丙-2-炔基、2,2-二甲基丁-3-炔基、1,1-二甲基丁-3-炔基、1,1-二甲基丁-2-炔基或3,3-二甲基丁-1-炔基。特别地，所述炔基是乙炔基、丙-1-炔基或丙-2-炔基。
[0086]
术语“环烷基”应理解为表示饱和的单环、双环烃环或桥环烷烃，其具有3～40个碳原子，优选“c
3-10
环烷基”。术语“c
3-10
环烷基”应理解为表示饱和的一价单环、双环烃环或桥环烷烃，其具有3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子。所述c
3-10
环烷基可以是单环烃基，如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基或环癸基，或者是双环烃基如十氢化萘环。
[0087]
术语“杂环基”应理解为表示饱和的单环、双环烃环或桥环烷烃，其包含1-5个独立选自n、o和s的杂原子的总成环原子数为3-20(如原子数为3、4、5、6、7、8、9、10等)的非芳族环状基团，优选“3-10元杂环基”。术语“3-10元杂环基”意指饱和的一价单环、双环烃环或桥环烷烃，其包含1-5个，优选1-3个独立选自n、o和s的杂原子，例如1、2、3个独立选自n、o和s的杂原子。所述杂环基可以通过所述碳原子中的任一个或氮原子(如果存在的话)与分子的其余部分连接。特别地，所述杂环基可以包括但不限于：4元环，如氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基；5元环，如四氢呋喃基、二氧杂环戊烯基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、吡咯啉基；或6元环，如四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基或三噻烷基；或7元环，如二氮杂环庚烷基。任选地，所述杂环基可以是苯并稠合的。所述杂环基可以是双环的，例如但不限于5,5元环，如六氢环戊并[c]吡咯-2(1h)-基环，或者5,6元双环，如六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1h)-基环。含氮原子的环可以是部分不饱和的，即它可以包含一个或多个双键，例如但不限于2,5-二氢-1h-吡咯基、4h-[1,3,4]噻二嗪基、4,5-二氢恶唑基或4h-[1,4]噻嗪基，或者，它可以是苯并稠合的，例如但不限于二氢异喹啉基。根据本发明，所述杂环基是无芳香性的。所述3-20元杂环基与其它基团相连构成本发明的化合物时，可以为3-20元杂环基上的碳原子与其它基团相连，也可以为3-20元杂环基环上杂环原子与其它基团相连。例如当3-20元杂环基选自哌嗪基时，可以为哌嗪基上的氮原子与其它基团相连。或当3-20元杂环基选自哌啶基时，可以为哌啶基环上的氮原子和其对位上的碳原子与其它基团相连。
[0088]
术语“芳基”应理解为表示具有6～20个碳原子的芳香性或部分芳香性的单环、双环或三环烃环，优选“c
6-14
芳基”。术语“c
6-14
芳基”应理解为优选表示具有6、7、8、9、10、11、12、13或14个碳原子的一价芳香性或部分芳香性的单环、双环或三环烃环(“c
6-14
芳基”)，特别是具有6个碳原子的环(“c6芳基”)，例如苯基；或联苯基，或者是具有9个碳原子的环(“c9芳基”)，例如茚满基或茚基，或者是具有10个碳原子的环(“c
10
芳基”)，例如四氢化萘基、二氢萘基或萘基，或者是具有13个碳原子的环(“c
13
芳基”)，例如芴基，或者是具有14个碳原子的环(“c
14
芳基”)，例如蒽基。当所述c
6-20
芳基被取代时，其可以为单取代或者多取代。并且，对其取代位点没有限制，例如可以为邻位、对位或间位取代。
[0089]
术语“杂芳基”应理解为包括这样的单环、双环或三环芳族环系，包括芳香性或部分芳香性的，其具有5～20个环原子且包含1-5个独立选自n、o和s的杂原子，例如“5-14元杂芳基”。术语“5-14元杂芳基”应理解为包括这样的一价单环、双环或三环芳族环系：其具有
5、6、7、8、9、10、11、12、13或14个环原子，特别是5或6或9或10个碳原子，且其包含1-5个，优选1-3各独立选自n、o和s的杂原子并且，另外在每一种情况下可为苯并稠合的。特别地，杂芳基选自噻吩基、呋喃基、吡咯基、恶唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异恶唑基、异噻唑基、恶二唑基、三唑基、噻二唑基、噻-4h-吡唑基等以及它们的苯并衍生物，例如苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并恶唑基、苯并异恶唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、吲唑基、吲哚基、异吲哚基等；或吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等，以及它们的苯并衍生物，例如喹啉基、喹唑啉基、异喹啉基等；或吖辛因基、吲嗪基、嘌呤基等以及它们的苯并衍生物；或噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基等。当所述5-20元杂芳基与其它基团相连构成本发明的化合物时，可以为5-20元杂芳基环上的碳原子与其它基团相连，也可以为5-20元杂芳基环上的杂原子与其它基团相连。当所述5-20元杂芳基被取代时，其可以为单取代或者多取代。并且，对其取代位点没有限制，例如可以为杂芳基环上与碳原子相连的氢被取代，或者杂芳基环上与杂原子相连的氢被取代。
[0090]
除非另有说明，杂环基、杂芳基或亚杂芳基包括其所有可能的异构形式，例如其位置异构体。因此，对于一些说明性的非限制性实例，可以包括在其1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-、9-、10-、11-、12-位等(如果存在)中的一个、两个或更多个位置上取代或与其他基团键合的形式，包括吡啶-2-基、亚吡啶-2-基、吡啶-3-基、亚吡啶-3-基、吡啶-4-基和亚吡啶-4-基；噻吩基或亚噻吩基包括噻吩-2-基、亚噻吩-2-基、噻吩-3-基和亚噻吩-3-基；吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、吡唑-5-基。
[0091]
本发明所使用的立体化学定义和规则一般遵循s.p.parker，ed.，mcgraw-hill dictionary of chemical terms(1984)mcgraw-hill book company，new york；and eliel，e.and wilen，s.，“stereo chemistry of organic compounds”，john wiley&sons，inc.，new york，1994。
[0092]“立体异构体”是指具有相同化学构造，但原子或基团在空间上排列方式不同的化合物。立体异构体包括对映异构体、非对映异构体、构象异构体(旋转异构体)、几何异构体(顺/反)异构体、阻转异构体，等等。
[0093]“对映异构体”是指一个化合物的两个不能重叠但互成镜像关系的异构体。
[0094]“非对映异构体”是指有两个或多个手性中心并且其分子不互为镜像的立体异构体。非对映异构体具有不同的物理性质，如熔点、沸点、光谱性质和反应性。非对映异构体混合物可通过高分辨分析操作如电泳和色谱，例如hplc来分离。
[0095]
本发明公开化合物的任何不对称原子(例如，碳等)都可以以外消旋或对映体富集的形式存在，例如(r)-、(s)-或(r,s)-构型形式存在。在某些实施方案中，各不对称原子在(r)-或(s)-构型方面具有至少0％对映体过量，至少60％对映体过量，至少70％对映体过量，至少80％对映体过量，至少90％对映体过量，至少95％对映体过量，或至少99％对映体过量。
[0096]
所得的任何立体异构体的混合物可以依据组分物理化学性质上的差异被分离成纯的或基本纯的几何异构体，对映异构体，非对映异构体，例如，通过色谱法和/或分步结晶法。
[0097]
术语“互变异构体”是指具有不同能量的可通过低能垒(low energy barrier)互
相转化的结构异构体。若互变异构是可能的(如在溶液中)，则可以达到互变异构体的化学平衡。例如，质子互变异构体(proton tautomer)(也称为质子转移互变异构体(prototro pictautomer))包括通过质子迁移来进行的互相转化，如酮-烯醇异构化和亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体(valen cetautomer)包括通过一些成键电子的重组来进行的互相转化。酮-烯醇互变异构的具体实例是戊烷-2,4-二酮和4-羟基戊-3-烯-2-酮互变异构体的互变。互变异构的另一个实例是酚-酮互变异构。酚-酮互变异构的一个具体实例是吡啶-4-醇和吡啶-4(1h)-酮互变异构体的互变。除非另外指出，本发明化合物的所有互变异构体形式都在本发明的范围之内。
[0098]
术语“药学上可接受的”是指当给人施用时生理上可耐受的并且一般不产生过敏或相似不适当的反应，例如肠胃不适、眩晕等的分子实体和组合物。
[0099]
术语“载体”指与所述化合物一同施用的稀释剂、辅剂、赋形剂或基质。这些药物载体可以是无菌液体，例如水和油类，包括石油、动物、植物或合成来源的，例如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。水和水性溶液盐水溶液和水性葡萄糖与甘油溶液优选用作载体、特别是可注射溶液。适宜的药物载体描述于e.w.martin的“remington
′
s pharmaceutical sciences”中。
[0100]
本发明所使用的术语“前药”，代表一个化合物在体内转化为式(i)所示的化合物。这样的转化受前体药物在血液中水解或在血液或组织中经酶转化为母体结构的影响。本发明前体药物类化合物可以是酯，在现有的发明中酯可以作为前体药物的有苯酯类，脂肪族(c
1-24
)酯类，酰氧基甲基酯类，碳酸酯，氨基甲酸酯类和氨基酸酯类。例如本发明里的一个化合物包含羟基，即可以将其酰化得到前体药物形式的化合物。其他的前体药物形式包括磷酸酯，如这些磷酸酯类化合物是经母体上的羟基磷酸化得到的。关于前体药物完整的讨论可以参考以下文献：t.higuchiand v.stella,pro-drugsas novel delivery systems,vol.14of the a.c.s.symposium series,edward b.roche,ed.,bioreversible carriersin drug design,american pharmaceutical associationand pergamon press,1987,j.rautioetal.,prodrugs:designand clinical applications,nature review drug discovery,2008,7,255-270,and s.j.heckeretal.,prodrugs of phosphatesand phosphonates,journal of medicinal chemistry,2008,51,2328-2345。
[0101]
本发明所使用的术语“代谢产物”是指具体的化合物或其盐在体内通过代谢作用所得到的产物。一个化合物的代谢产物可以通过所属领域公知的技术来进行鉴定，其活性可以通过如本发明所描述的那样采用试验的方法进行表征。这样的产物可以是通过给药化合物经过氧化，还原，水解，酰氨化，脱酰氨作用，酯化，脱脂作用，酶裂解等等方法得到。相应地，本发明包括化合物的代谢产物，包括将本发明的化合物与哺乳动物充分接触一段时间所产生的代谢产物。
[0102]
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结
合和组合。
[0103]
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
具体实施方式
[0104]
以下结合实施例进一步描述本发明，但这些实施例并非限制着本发明的范围，在化学结构名称与化学结构描述不一致时，以化学结构为准。
[0105]
实施例
[0106]
本发明的化合物结构是通过核磁共振(nmr)或/和液质联用色谱(lc-ms)来确定的。nmr化学位移(δ)以百万分之一(ppm)的单位给出。nmr的测定是用bruker avance-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(dmso-d 6
)，氘代甲醇(cd3od)和氘代氯仿(cdcl3)，内标为四甲基硅烷(tms)。
[0107]
液质联用色谱lc-ms的测定用agilent1200infinity series质谱仪。hplc的测定使用安捷伦1200dad高压液相色谱仪(sunfire c18 150
×
4.6mm色谱柱)和waters 2695-2996高压液相色谱仪(gimini c18 150
×
4.6mm色谱柱)。
[0108]
薄层层析硅胶板使用烟台黄海hsgf254或青岛gf254硅胶板，tlc采用的规格是0.15mm～0.20mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。柱层析一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。
[0109]
本发明实施例中的起始原料是已知的并且可以在市场上买到，或者可以采用或按照本领域已知的方法来合成。
[0110]
在无特殊说明的情况下，本发明的所有反应均在连续的磁力搅拌下，在干燥氮气或氩气氛下进行，溶剂为干燥溶剂，反应温度单位为摄氏度。
[0111]
实施例1
[0112]
(r)-(4-(4-氟苯甲酰基)-3-甲基哌嗪-1-基)(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)甲酮
[0113][0114]
第一步
[0115]
(r)-4-(4-氟苯甲酰基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
[0116]
将(r)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg,1.49mmol)和三乙胺(452mg,4.47mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，加入对氟苯甲酰氯(354mg,2.24mmol)。反应液于25℃反应10分钟。反应结束加入20ml水，二氯甲烷(2x20ml)萃取分液，再用20ml饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物通过硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝9/1)分离纯化后得到(r)-4-(4-氟苯甲酰基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg,淡黄色油状物)，产率：58％。
[0117]
ms m/z(esi):345.1[m+h]
+
.
[0118]
第二步
[0119]
(r)-(4-氟苯基)(2-甲基哌嗪-1-基)甲酮的制备
[0120]
将(r)-4-(4-氟苯甲酰基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(280mg,0.87mmol)溶于二氯甲烷(8ml)，加入三氟乙酸(496mg,4.35mmol)。反应液在25℃反应16小时。反应结束后，将反应液冷却至室温并向其中加水(30ml)，然后缓慢加入饱和碳酸氢钠调节ph至9。用二氯甲烷(3x30ml)萃取并将有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩得到r)-(4-氟苯基)(2-甲基哌嗪-1-基)甲酮(200mg,黄色固体)，收率:69％。
[0121]
ms m/z(esi):223.2[m+h]
+
.
[0122]
第三步(r)-(4-(4-氟苯甲酰基)-3-甲基哌嗪-1-基)(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)甲酮的制备
[0123]
将(r)-(4-氟苯基)(2-甲基哌嗪-1-基)甲酮(50mg,0.22mmol)溶于二氯甲烷(5ml)，依次加入n,n二乙丙基乙胺(85mg,0.66mmol)，3-甲基1,2,4-噻二唑-5-羰基氯(72mg,0.44mmol)反应液于25℃反应10分钟。反应结束加入20ml水，2x20ml二氯甲烷，萃取分液，再用20ml饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物通过反相色谱柱(40％乙腈/水)纯化得到(r)-(4-(4-氟苯甲酰基)-3-甲基哌嗪-1-基)(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)甲酮(24.55mg,黄色固体)，收率：32％。
[0124]
ms m/z(esi):349.1[m+h]
+
.
[0125]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.37-7.34(m,2h),7.06(t,j＝8.4hz,2h),5.41-5,28(m,1h),4.59-4.44(m,2h),4.07(br,s,1h),3.42-3.16(m,2h),3.05-2.86(m,1h),2.64(d,j＝4.8hz,3h),1.22(t,j＝7.2hz,3h).
[0126]
19
f nmr(376mhz,cdcl3)δ-109.61.
[0127]
实施例2
[0128]
(r)-苯并呋喃-5-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4],3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0129][0130]
将1-苯并呋喃-5-甲酸(41mg,0.25mmol)溶于dmf(4ml)，向其中依次加入diea(81mg,0.63mmol)，hatu(114mg,0.30mmol)以及化合物(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑2a(60mg,0.25mmol，参考wo2014154895合成方法制备)。反应液于25℃反应2小时。反应结束后，用水(20ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x30ml)萃取。有机相合并，饱和盐水洗涤(2x30ml)，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(38％乙腈/水)纯化后得到(r)-苯并呋喃-5-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4],3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(63.6mg,白色固体)，收率:67％。
[0131]
ms m/z(esi):381.2[m+1]
+
。
[0132]
hplc:100％(214nm),99.73％(254nm).
[0133]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.73-7.72(m,2h),7.59(d,j＝8.4hz,1h),7.39(dd,j＝
8.4,1.4hz,1h),6.83(d,j＝1.4hz,1h),5.85(br,1h),4.93-4.89(m,1h),4.64(br,1h),4.32-4.25(m,1h),3.57-3.51(m,1h),2.73(s,3h),1.76(d,j＝6.8hz,3h).
[0134]
实施例3
[0135]
(r)-苯并呋喃-6-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4],3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0136][0137]
将1-苯并呋喃-6-甲酸(13mg，0.08mmol)溶于dmf(2ml)，向其中依次加入diea(26mg,0.20mmol)，hatu(37mg,0.096mmol)以及化合物2a(18mg,0.08mmol)。反应液于25℃反应2小时。反应结束后，用饱和盐水(20ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x30ml)萃取。将有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(38％乙腈/水)纯化后得到(r)-苯并呋喃-6-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4],3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(13.4mg,白色固体)，产率:44％。
[0138]
ms m/z(esi):381.1[m+1]
+
。
[0139]
hplc:99.45％(214nm),99.64％(254nm).
[0140]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.75(d,j＝2.2hz,1h),7.69(d,j＝8.0hz,1h),7.64(s,1h),7.35-7.32(m,1h),6.85-6.84(m,1h),5.86(br,1h),4.94-4.89(m,1h),4.64(br,1h),4.34-4.26(m,1h),3.58-3.52(m,1h),2.73(s,3h),1.77(d,j＝6.8hz,3h).
[0141]
实施例4
[0142]
(r)-(1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0143][0144]
(r)-(1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0145]
将1h-吲哚-6-甲酸(13mg,0.08mmol)溶于dmf(2ml)，向其中依次加入diea(26mg,0.20mmol)，hatu(37mg,0.096mmol)以及(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑2a(18mg,0.08mmol)。反应液于25℃反应2小时。反应结束后，用饱和盐水(20ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x30ml)萃取。将有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(37％乙腈/水)纯化后得到(r)-(1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(10.3mg,白色固体)，产率:32％。
[0146]
ms m/z(esi):380.1[m+1]
+
。
[0147]
hplc:98.13％(214nm),95.13％(254nm).
[0148]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.55(s,1h),7.69(d,j＝8.0hz,1h),7.56(s,1h),7.38-7.32(m,1h),7.18(d,j＝8.0hz,1h),6.61(s,1h),5.92(br,1h),4.91-4.87(m,1h),4.68(br,1h),433-4.269(m,1h),3.56-3.50(m,1h),2.73(s,3h),1.76(d,j＝6.8hz,3h).
[0149]
实施例5
[0150]
(r)-苯并[d]噻唑-5-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0151][0152]
将(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(30mg,0.13mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(4ml),然后依次加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯(59mg,0.156mmol)和n,n-二异丙基乙胺(42mg,0.325mmol),苯并[d]噻唑-5-甲酸(23mg,0.13mmol),室温下搅拌4小时。反应液用乙酸乙酯(20ml)萃取，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，将得到的残留物用反相柱(45％乙腈/水)纯化后得到(r)-苯并[d]噻唑-5-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(11.0mg,白色固体)，收率：20％。
[0153]
ms.m/z(esi):398.1[m+h]
+
。
[0154]1h nmr(400mhz,cd3od)δ9.38(s,1h),8.28-8.23(m,2h),7.65(dd,j＝8.4,1.6hz,1h),5.98(s,1h),5.01-4.89(m,2h),4.45-4.36(m,1h),373-3.68(m,1h),2.71(s,3h),1.77(d,j＝6.8hz,3h).
[0155]
hplc:98.16％(214nm),97.93％(254nm).
[0156]
实施例6
[0157]
(r)-苯并呋喃-7-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0158][0159]
(r)-苯并呋喃-7-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0160]
将1-苯并呋喃-7-甲酸(41mg,0.25mmol)溶于dmf(4ml)，向其中依次加入diea(81mg,0.63mmol)，hatu(114mg,0.30mmol)以及(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑2a(60mg,0.25mmol)。反应液于25℃反应2小
时。反应结束后，用水(20ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x30ml)萃取。将有机相合并，饱和盐水洗涤(2x30ml)，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(38％乙腈/水)纯化后得到(r)-苯并呋喃-7-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(26.1mg,类白色固体)，产率:27％。
[0161]
ms m/z(esi):381.1[m+1]
+
。
[0162]
hplc:99.47(214nm),100％(254nm).
[0163]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.74(d,j＝8.0hz,1h),7.67(br,1h),7.41(br,1h),7.34(t,j＝7.6hz,1h),6.86(s,1h),5.31(br,1h),4.92(br,1h),4.33(br,1h),3.97(br,1h),3.64(br,1h),2.72(s,3h),1.81(br,3h).
[0164]
实施例7
[0165]
(r)-(1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑基[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0166][0167]
(r)-(1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑基[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0168]
将3-甲基-5-[(8r)-8-甲基-5h，6h，7h，8h-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基]-1,2,4-噻二唑2a(30mg，0.13mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(3ml)中，接着加入1h-1,2,3-苯并三唑-5-甲酸(25mg，0.16mmol)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯(74mg，0.20mmol)和n,n-二异丙基乙胺(51mg，0.39mmol)。该反应在室温下搅拌4小时。反应结束后，加入水(10ml)，利用二氯甲烷(3x10ml)进行萃取。收集有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到粗产品。粗产品通过制备(乙腈/水(0.1％甲酸))分离提纯得到(r)-(1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑基[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(13mg，白色固体)，产率：22％。
[0169]
ms m/z(esi):382.1[m+1]
+
.
[0170]
hplc:98.93％(214nm),99.47％(254nm).
[0171]1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.12(s,1h),8.00(d,j＝8.5hz,1h),7.62(dd,j＝8.5,1.2hz,1h),5.74-6.08(m,1h),4.88(s,br,1h),4.84-4.79(m,1h),4.35-4.43(m,1h),3.71-3.78(m,1h),2.70(s,3h),1.76(d,j＝6.9hz,3h).
[0172]
实施例8
[0173]
(r)-苯并[d]恶唑-5-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑基[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0174][0175]
(r)-苯并[d]恶唑-5-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑基[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0176]
将苯并恶唑-5-甲酸(18mg,0.11mmol)溶于dmf(1.5ml)，向其中依次加入diea(32mg,0.25mmol)，hatu(46mg,0.12mmol)以及(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑2a(24mg,0.10mmol)。反应液于25℃反应2小时。反应结束后，用饱和盐水(20ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x30ml)萃取。将有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(31％乙腈/水)纯化后得到(r)-苯并[d]恶唑-5-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑基[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(12.2mg,白色固体)，产率:32％。
[0177]
ms m/z(esi):382[m+1]
+
。
[0178]
hplc:98.50％(214nm),99.02％(254nm).
[0179]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.23(s,1h),7.90(d,j＝8.0hz,1h),7.75(s,1h),7.48(d,j＝8.0hz,1h),5.83(br,1h),4.96-4.92(m,1h),4.61(br,1h),4.33-4.27(m,1h),3.60-3.55(m,1h),2.73(s,3h),1.78(d,j＝6.8hz,3h).
[0180]
实施例9
[0181]
(r)-(1h苯并[d]咪唑-5-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0182][0183]
将(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(30mg,0.13mmol)溶解在n,n-二甲基甲酰胺(2ml)中，接着加入1h-1,3-苯并二唑-5-甲酸(25.29mg,0.156mmol)，hatu(74mg,0.195mmol)和dipea(51mg,0.39mmol)。反应在室温下反应4小时。反应完成后，向反应中加入水，然后用二氯甲烷(3x10ml)萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，减压除去溶剂后得到粗产品，再经过制备(乙腈/0.1％的甲酸水溶液)纯化后得到(r)-(1h苯并[d]咪唑-5-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(5.7mg，白色固体)，产率：10％。
[0184]
ms m/z(esi):381.1[m+h]
+
。
[0185]
hplc:91.65％(214nm),95.71％(254nm).
[0186]1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.33(s,1h),7.84(s,1h),7.76(d,j＝8.4hz,1h),7.46(dd,j＝8.4,1.3hz,1h),6.02-5.69(m,1h),4.89(s.br,2h),4.43
–
4.35(m,1h),3.74(t,j＝11.6hz,1h),2.71(s,3h),1.77(d,j＝6.8hz,3h).
[0187]
实施例10
[0188]
(r)-苯并[d]噻唑-6-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0189][0190]
将苯并[d]噻唑-6-甲酸(38mg,0.21mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(2ml)并向其中依次加入(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(50mg,0.21mmol)，n,n-二异丙基乙胺(68mg,0.53mmol)和hatu(96mg,0.25mmol)。反应液在25℃反应16小时。用lcms监测反应。完成后，向反应液中加入水(20ml)，然后用乙酸乙酯(2x20ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩。通过反相色谱柱(30％乙腈/水)纯化得到(r)-苯并[d]噻唑-6-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(16mg,白色固体)收率：19％。
[0191]
ms m/z(esi):398.1[m+h]
+
.
[0192]
hplc:98.94％(214nm),99.11％(254nm).
[0193]1h nmr(400mhz,meod)δ9.39(s,1h),8.31(d,j＝1.2hz,1h),8.21(d,j＝8.4hz,1h),7.71(dd,j＝8.4,1.6hz,1h),5.91(s,1h),4.92-4.85(m,2h),4.43-4.36(m,1h),3.78-3.71(m,1h),2.71(s,3h),1.77(d,j＝6.8hz,3h).
[0194]
实施例11
[0195]
(r)-(1h-吲哚-5-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0196][0197]
将(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,
4-噻二唑(30mg,0.13mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(4ml),然后依次加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯(59mg,0.156mmol)n,n-二异丙基乙胺(42mg,0.325mmol)和1h-吲哚-5-甲酸(21mg,0.13mmol)。室温下搅拌4小时。反应液用乙酸乙酯(20ml)萃取，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，将得到的残留物用反相柱(40％乙腈/水)纯化后得到(r)-(1h-吲哚-5-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(13.7mg,白色固体)，收率：27％。
[0198]
ms.m/z:(esi):380.1[m+h]
+
。
[0199]1h nmr(400mhz,cd3od)δ10.89(s,1h),7.78(d,j＝0.8hz,1h),7.50(d,j＝8.4hz,1h),7.36(d,j＝3.2hz,1h),7.27(dd,j＝8.4,1.6hz,1h),6.57(d,j＝2.8hz,1h),5.88(s,1h),4.90-4.89(m,1h),4.87-4.86(m,1h),4.43-4.33(m,1h),3.74-3.67(m,1h),2.71(s,3h),1.75(d,j＝6.8hz,3h).
[0200]
hplc:100％(214nm),99.74％(254nm).
[0201]
实施例12
[0202]
(r)-(1h-吲唑-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0203][0204]
将(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(35mg,0.15mmol)和三乙胺(67mg,0.45mmol)溶于二氯甲烷(10ml),在冰浴0℃下加入3a，7a-二氢-1h-吲唑-6-羰基氯化物(30mg,0.17mmol)并在室温下反应2小时。反应结束后，反应液缓慢加入饱和碳酸氢钠溶液(10ml)，然后用二氯甲烷(3x10ml)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩，将得到的残留物用c18反相柱(乙腈/水＝37/63)分离纯化后得到(r)-(1h-吲唑-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(10.8mg,白色固体)，收率:18％。
[0205]
ms m/z(esi):381.15[m+h]
+
。
[0206]1hnmrδppm:10.54(s,1h),8.15(s,1h),7.86(d,j＝8.2hz,1h),7.64(s,1h),7.22(d,j＝8.2hz,1h),5.83(s,1h),4.93(d,j＝11.2hz,1h),4.65(s,1h),4.29(s,1h),3.55(s,1h),2.73(s,3h),1.76(d,j＝6.8hz,3h).
[0207]
实施例13
[0208]
(r)-(1h-吲唑-5-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0209][0210]
将1h-吲唑-5-甲酸(41mg,0.26mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(2ml)并向其中依次加入(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(40mg,0.17mmol)，n,n-二异丙基乙胺(50mg,0.34mmol)和hatu(109mg,0.26mmol)。反应液在25℃反应4小时。用lcms监测反应。完成后，向反应液中加入水(50ml)，然后用乙酸乙酯(2x50ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩。通过反相色谱柱(35％乙腈/水)纯化得到(r)-(1h-吲唑-5-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(18.01mg,白色固体)，收率：27％。
[0211]
ms m/z(esi):381.2[m+h]
+
.
[0212]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.18(s,1h),7.94(s,1h),7.61(d,j＝8.6hz,1h),7.52-7.50(m,1h),5.86(br,s,1h),4.96-4.92(m,1h),4.69(br,s,1h),4.36-4.29(m,1h),3.61-3.53(m,1h),2.74(s,3h),1.79(d,j＝7.2hz,3h).
[0213]
实施例14
[0214]
(r)-(1h-苯并[d]咪唑-4-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0215][0216]
将(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(40mg,0.17mmol)，1h苯并[d]咪唑-4-甲酸(33mg,0.20mmol)，hatu(97mg,0.225mmol)溶解在n,n-二甲基甲酰胺(2ml)中，接着加入dipea(66mg,0.51mmol)。反应在室温下搅拌2小时。lcms监测反应完成后，加入水(10ml)，接着用二氯甲烷(3x10ml)萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩掉溶剂后经过制备(乙腈/0.1％的甲酸水溶液)纯化后得到(r)-(1h-苯并[d]咪唑-4-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(13mg，白色固体)，产率：20％。
[0217]
ms m/z(esi):381.1[m+h]
+
。
[0218]
hplc:99.57％(214nm),100％(254nm).
[0219]1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.27(s,1h),7.76-7.75(m,1h),7.45-7.38(m,2h),6.25-6.05(m,1h),4.47-4.37(m,1h),3.74-3.68(s,1h),3.56-3.45(m,1h),3.01-2.92(m,1h),2.70(s,3h),1.78(s,3h).
[0220]
实施例15
[0221]
(r)-(1-甲基-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0222][0223]
第一步
[0224]
1-甲基-1h-吲哚-6-甲酸的制备
[0225]
将1h-吲哚-6-甲酸(967mg,6.00mmol)溶于dmf(25ml)并降温至0℃，分批加入nah(60％,720mg,18.00mmol)。于25℃反应30分钟后，向其中加入碘甲烷(2.13g,15mmol)。反应液于25℃再反应2小时。反应结束后，冰浴下用饱和氯化铵溶液(120ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x100ml)萃取。将有机相合并，饱和盐水(2x100ml)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。
[0226]
将上述得到的粗品溶于甲醇(15ml)与水(7ml)的混合溶剂中，然后加入氢氧化钠(960mg,24mmol)。反应液加热至60℃反应5小时。反应结束后，反应液冷却至室温并向其中加入水(50ml)，用2m盐酸将ph调节至5。用乙酸乙酯(2x80ml)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的残留物用反相柱(35％乙腈/水)纯化后得到1-甲基-1h-吲哚-6-甲酸(781mg,黄色固体)，收率：71％。
[0227]
ms m/z(esi):176.2[m+1]
+
。
[0228]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.60(s,1h),8.08(s,1h),7.68-7.58(m,2h),7.55(d,j＝3.0hz,1h),6.52-6.51(m,1h),3.87(s,3h).
[0229]
第二步
[0230]
(r)-(1-甲基-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0231]
将1-甲基-1h-吲哚-6-甲酸(23mg,0.13mmol)溶于dmf(3ml)，向其中依次加入diea(42mg,0.33mmol)，hatu(59mg,0.16mmol)以及(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(30mg,0.13mmol)。反应液于25℃反应2小时，反应结束后，用饱和盐水(20ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x30ml)萃取。将有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(39％乙腈/水)纯化后得到(r)-(1-甲基-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(17mg,白色固体)，收率：33％。
[0232]
ms m/z(esi):394.2[m+1]
+
。
[0233]
hplc:98.94％(214nm),99.09％(254nm).
[0234]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.67(d,j＝8.0hz,1h),7.52(s,1h),7.19(d,j＝3.0hz,1h),7.16(d,j＝8.0hz,1h),6.55(d,j＝3.2hz,1h),5.91(br,1h),4.92-4.88(m,1h),4.69(br,1h),4.34-4.28(m,1h),3.83(s,3h),3.59-3.49(m,1h),2.73(s,3h),1.78(d,j＝6.8hz,3h).
[0235]
实施例16
[0236]
1(r)-(1-甲基-1h-吲哚-5-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0237][0238]
第一步
[0239]
1-甲基吲哚-5-甲酸甲酯的制备
[0240]
将1h-吲哚-5-甲酸(500mg,3.1mmol)溶于超干四氢呋喃(20ml)，加入氢化钠(149mg,6.20mmol)，反应液在0℃下搅拌5分钟，然后加入碘甲烷(881mg,6.20mmol)，反应液在25℃下搅拌16小时，向反应液加入5％柠檬酸溶液(10ml)，用乙酸乙酯(20ml)萃取，有机相用饱和食盐水(20ml)洗，无水硫酸钠干燥后浓缩，残留物用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化后得到标题产物1-甲基吲哚-5-甲酸甲酯(400mg,白色固体)，收率:61％。
[0241]
ms.m/z(esi):190.2[m+1]
+
。
[0242]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.38(s,1h),7.91(dd,j＝8.4,1.2hz,1h),7.31(d,j＝8.8hz,1h),7.09(d,j＝3.2hz,1h),6.57(d,j＝2.8hz,1h),3.91(s,3h),3.80(s,3h).
[0243]
第二步
[0244]
1-甲基吲哚-5-甲酸的制备
[0245]
将1-甲基吲哚-5-甲酸甲酯2(300mg,1.59mmol)溶于甲醇/水(20ml)，加入氢氧化钠(382mg,9.54mmol)，反应液在70℃下搅拌8小时，反应液用1mol/l盐酸溶液(20ml)调ph值至6，用二氯甲烷萃取(50ml)，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得到标题产物1-甲基吲哚-5-甲酸(200mg,白色固体)，收率:92％。
[0246]
ms.m/z(esi):176.2(m+1)。
[0247]1h nmr(400mhz,dmso-d6
)δ12.50(s,1h),8.23(s,1h),7.77(d,j＝8.4hz,1h),7.48(d,j＝8.4hz,1h),7.42(d,j＝2.8hz,1h),6.56(d,j＝2.8hz,1h),3.82(s,3h).
[0248]
第三步
[0249]
(r)-(1-甲基-1h-吲哚-5-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0250]
将1-甲基吲哚-5-甲酸(37mg,0.21mmol)溶于n，n-二甲基甲酰胺(4ml)，依次加入n，n-二异丙基乙胺(68mg,0.52mmol)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯(96mg,0.25mmol)和(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(50mg,0.21mmol)，反应液在25℃下搅拌16小时。向反应液加入水(10ml)，用乙酸乙酯(20ml)萃取，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，残留物用反向柱层析(乙腈/水＝37％)得到(r)-(1-甲基-1h-吲哚-5-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(16.2mg,白色固体)收率:18％。
[0251]
ms.m/z(esi):394.2(m+1)。
[0252]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.76(d,j＝0.8hz,1h),7.39(d,j＝8.4hz,1h),7.33(dd,j＝8.4,1.2hz,1h),7.16(d,j＝3.2hz,1h),6.55(d,j＝3.2hz,1h),5.90(br,1h),4.89(dd,j
＝13.2,3.2hz,1h),4.70(br,1h),4.34-4.27(m,1h),3.85(s,3h),3.56-3.48(m,1h),2.74(s,3h),1.76(d,j＝7.2hz,3h).
[0253]
hplc:97.39％(214nm),95.61％(254nm).
[0254]
实施例17
[0255]
(r)-苯并[d]恶唑-7-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0256][0257]
第一步
[0258]
3-氨基-2-羟基苯甲酸甲酯的制备
[0259]
将2-羟基-3-硝基苯甲酸甲酯(500mg，2.54mmol)溶于乙腈(10ml)中，加入锌粉(332mg，5.08mmol)和氯化铵(13.59g，254mmol)。该反应在室温下搅拌16小时。反应结束后，加入水(100ml)，通过乙酸乙酯(3x50ml)进行萃取，收集有机相并用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到粗产品。粗产品通过柱层析(二氯甲烷：甲醇＝20：1)得到3-氨基-2-羟基苯甲酸甲酯(110mg，淡黄色固体)，产率：23％。
[0260]
ms m/z(esi):168.2[m+1]
+
.
[0261]
第二步
[0262]
1,3-苯并恶唑-7-甲酸甲酯的制备
[0263]
将3-氨基-2-羟基苯甲酸甲酯(150mg，0.9mmol)溶于(二乙氧基甲氧基)乙烷(4.78g，45mmol)。该反应在120℃搅拌16小时。反应结束后，旋干溶剂得到粗产品，加入水(20ml)，通过乙酸乙酯(3x20ml)进行萃取，收集有机相并用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。旋干溶剂得到1,3-苯并恶唑-7-甲酸甲酯(130mg，棕色固体)，产率：73％。
[0264]
ms m/z(esi):178.0[m+1]
+
.
[0265]
第三步
[0266]
1,3-苯并恶唑-7-甲酸的制备
[0267]
将1,3-苯并恶唑-7-甲酸甲酯(120mg，0.68mmol)溶于甲醇(6ml)和水(2ml)，加入一水合氢氧化锂(143mg，3.4mmol)。该反应在室温下搅拌1小时。反应结束后，旋干溶剂，加入水(5ml)并将用1m hcl将ph值调到3-5，然后利用乙酸乙酯(3x10ml)萃取，收集有机相并用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。旋干溶剂得到1,3-苯并恶唑-7-甲酸(110mg，黄色固体)，产率：89％)。
[0268]
ms m/z(esi):164.0[m+1]
+
.
[0269]
第四步
[0270]
(r)-苯并[d]恶唑-7-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0271]
将3-甲基-5-[(8r)-8-甲基-5h，6h，7h，8h-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基]-1,2,4-噻二唑(50mg，0.21mmol)溶解在n,n-二甲基甲酰胺(2ml)，加入n,n-二异丙基乙胺(81mg，0.63mmol)和2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯(160mg，0.42mmol)，最后加入1,3-苯并恶唑-7-甲酸(41mg，0.25mmol)。该反应在室温下搅拌1小时。反应结束
后，粗产品通过反相柱(乙腈/水/0.05％nh3)分离提纯得到(r)-苯并[d]恶唑-7-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(19.6mg，白色固体)，产率：24％。
[0272]
ms m/z(esi):382.2[m+1]
+
.
[0273]
hplc:99.41％(214nm),98.10％(254nm).
[0274]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.16(s,1h),7.97-7.94(m,1h),7.56-7.48(m,2h),6.39-6.12(m,1h),4.97(d,j＝10.8hz,1h),4.37-4.29(m,1h),3.72-3.55(m,2h),2.73(s,3h),1.78(s,3h).
[0275]
实施例18
[0276]
(r)-苯并呋喃-2-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0277][0278]
第一步
[0279]
(r)-苯并呋喃-2-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0280]
将1-苯并呋喃-2-甲酸(18mg,0.11mmol)溶于dmf(2ml)，向其中依次加入diea(32mg,0.25mmol)，hatu(46mg,0.12mmol)以及化合物(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(24mg,0.10mmol)。反应液于25℃反应2小时。反应结束后，用饱和盐水(20ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x30ml)萃取。将有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(40％乙腈/水)纯化后得到(r)-苯并呋喃-2-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(15.6mg,白色固体)，产率:41％。
[0281]
ms m/z(esi):381.1[m+1]
+
。
[0282]
hplc:100％(214nm),99.82％(254nm).
[0283]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.70(d,j＝7.6hz,1h),7.57(d,j＝8.4hz,1h),7.53(s,1h),7.47(t,j＝7.6hz,1h),7.34(t,j＝7.6hz,1h),6.25-6.19(m,1h),5.07-5.00(m,2h),4.39(br,1h),3.58(br,1h),2.75(s,3h),1.90(br,3h).
[0284]
实施例19
[0285]
(r)-苯并[d]恶唑-2-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0286][0287]
第一步
[0288]
1,3-苯并恶唑-2-甲酸乙酯的制备
[0289]
将2-氨基苯酚(1g，9.16mmol)溶于四氢呋喃(30ml)中，加入三乙胺(1.8g，18.32mmol)，在-10℃的条件下加入2-氯-2-氧乙酸乙酯(1.5g，10.99mmol)。该反应在室温下搅拌2小时。当反应结束后，将反应冷却到0℃，加入四氢呋喃(20ml)和三苯基膦(6g，22.90mmol)，然后缓慢滴加偶氮二甲酸二异丙酯。混合物在室温下搅拌16小时。反应结束后，旋干溶剂，粗产品经过柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝3：2)得到1,3-苯并恶唑-2-甲酸乙酯(280mg，黄色固体)，产率：13％。
[0290]
ms m/z(esi):192.2(m+1).
[0291]
第二步
[0292]
1,3-苯并恶唑-2-甲酸的制备
[0293]
将1,3-苯并恶唑-2-甲酸乙酯(100mg，0.52mmol)溶于甲醇(9ml)和水(3ml)中，加入一水合氢氧化锂(109mg，0.52mmol)。该反应在室温下搅拌1小时。旋干溶剂，加入乙腈(5ml)和水(15ml)，冻干后得到1,3-苯并恶唑-2-甲酸(85mg，淡黄色固体)，产率：45％。
[0294]
ms m/z(esi+):164.2[m+1]
+
.
[0295]
第三步
[0296]
(r)-苯并[d]恶唑-2-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0297]
将1,3-苯并恶唑-2-甲酸(41mg，0.25mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(2ml)中，加入n,n-二异丙基乙胺(54mg，0.42mmol)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯(120mg，0.032mmol)和(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2，4-噻二唑(50mg，0.21mmol)。该反应在室温下搅拌30分钟。反应结束后，粗产品通过反相柱(乙腈/水/0.1％甲酸)得到(r)-苯并[d]恶唑-2-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(26mg，白色固体)，产率：32％)。
[0298]
ms m/z(esi+):382.2[m+1]
+
.
[0299]
hplc:100％(214nm),100％(254nm).
[0300]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.80(t,j＝8.4hz,1h),7.62(t,j＝8.4hz,1h),7.47(t,j＝7.2hz,1h),7.41(t,j＝7.2hz,1h),7.00-6.95(m,1h),6.20-5.80(m,1h),5.17-4.97(m,2h),4.51-4.21(m,1h),3.74-3.40(m,2h),2.69(s,3h),1.90-1.77(m,3h).
[0301]
实施例20
[0302]
(r)-(3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0303][0304]
将3-甲基-5-[(8r)-8-甲基-5h,6h,7h,8h-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基]-1,2,4-噻二唑(50mg，0.21mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(3ml)中，接着加入n,n-二异丙基乙胺
(81mg，0.63mmol)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯(160mg，0.21mmol)和1,2,3,4-四氢喹啉-3-甲酸(41mg，0.23mmol)。该反应在室温下搅拌0.5小时。反应结束后，粗产品通过反相柱(乙腈/水)及制备(乙腈/水(0.1％甲酸))分离提纯得到(r)-(3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(26mg，白色固体)，产率：31％。
[0305]
ms m/z(esi):396.2[m+h]
+
.
[0306]
hplc:99.58％(214nm),98.71％(254nm).
[0307]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.26-7.25(m,1h),7.08-6.90(m,2h),6.71-6.62(m,1h),6.56(d,j＝8.0hz,1h),6.16-5.59(m,1h),5.11-4.92(m,1h),4.37-4.11(m,1h),3.81-3.56(m,1h),3.54-3.41(m,2h),3.32-3.17(m,1h),3.17-3.03(m,2h),2.90-2.79(m,1h),2.73(s,3h),1.72(d,j＝39.2hz,3h).
[0308]
实施例21
[0309]
(3,4-二氢-2h-苯并[b][1,4]噁嗪-3-基)((r)-8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0310][0311]
第一步
[0312]
3,4-二氢-2h-苯并[b][1,4]噁嗪-3-甲酸乙酯的制备
[0313]
将4-(叔丁基)3-乙基2,3-二氢-4h-苯并[b][1,4]噁嗪-3,4-二甲酸(200mg,0.65mmol)溶于二氯甲烷(4ml)，加入三氟乙酸(2ml)。反应液于25℃反应1小时。lcms监测反应结束，将反应液旋干并加入水和乙腈冻干得到3,4-二氢-2h-苯并[b][1,4]噁嗪-3-甲酸乙酯(100mg,红色固体)，收率：68％。
[0314]
ms m/z(esi):208.1[m+h]
+
.
[0315]
第二步
[0316]
3,4-二氢-2h-苯并[b][1,4]噁嗪-3-甲酸的制备
[0317]
将3,4-二氢-2h-苯并[b][1,4]噁嗪-3-甲酸乙酯(100mg,0.48mmol)溶于四氢呋喃/水(4/1,5ml)，加入氢氧化锂一水合物(30mg,0.72mmol)。反应液于25℃反应1小时。lcms监测反应结束，然后向残留物中滴加2m的盐酸将过量的氢氧化锂中和并调节到ph为5。旋干并加入水和乙腈冻干得到3,4-二氢-2h-苯并[b][1,4]噁嗪-3-甲酸(63mg,红色固体)，收率：64％。
[0318]
ms m/z(esi):180.1[m+h]
+
.
[0319]
第三步
[0320]
(3,4-二氢-2h-苯并[b][1,4]噁嗪-3-基)((r)-8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0321]
将3,4-二氢-2h-苯并[b][1,4]噁嗪-3-甲酸(63mg,0.27mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(3ml)，依次加入n,n二异丙基乙胺(100mg,0.81mmol)，hatu(152mg,0.41mmol)和3,4-二氢-2h-1,4-苯并噁嗪-3-甲酸(58mg,0.32mmol)反应液于25℃反应1小时。反应结束加入20ml水，2x20ml二氯甲烷，萃取分液，再用20ml饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥并浓
缩。将得到的残留物通过反相色谱柱(45％乙腈/水)纯化得到(3,4-二氢-2h-苯并[b][1,4]噁嗪-3-基)((r)-8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备(27mg,白色固体)，收率：25％。
[0322]
ms m/z(esi):398.2[m+h]
+
.
[0323]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ6.71-6.65(m,3h),6.52-6.48(m,1h),5.93(d,j＝51.2hz,1h),5.81-5.74(m,1h),4.74-4.71(m,1h),4.60-4.45(m,2h),4.38-4.31(m,1h),4.24(t,j＝10.4hz,1h),2.71(d,j＝16.8hz,3h),1.67-1.51(m,3h).
[0324]
实施例22
[0325]
(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪7(8h)-基)(喹啉-2-基)甲酮
[0326][0327]
将喹啉-2-甲酸(21mg,0.12mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(5ml)，依次加入三乙胺(33mg,0.33mmol)，hatu(46mg,0.12mmol)。搅拌10分钟后，加入3-甲基-5-[(8r)-8-甲基-5h，6h，7h，8h-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基]-1,2,4-噻二唑(25mg,0.11mmol)，反应液于室温条件再反应30分钟。反应结束后，将反应液直接用prep-hpl纯化得到(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪7(8h)-基)(喹啉-2-基)甲酮(11mg,白色固体)，收率：25％。
[0328]
ms m/z(esi):392.2[m+1]
+
。
[0329]1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.25-8.29(m,1h),8.05-8.07(m,1h),7.81
–
7.87(m,2h),7.73-7.77(m,1h),7.59-7.62(m,1h),6.18-6.23(m,1h),4.86
–
5.16(m,2h),4.27
–
4.66(m,1h),3.39
–
3.64(m,1h),2.69(s,3h),1.77-1.92(m,3h).
[0330]
实施例23
[0331]
((r)-8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪7(8h)-基)(1,2,3,4-四氢喹啉-2-基)甲酮
[0332][0333]
第一步
[0334]
1,2,3,4-四氢喹啉-2-甲酸的制备
[0335]
将喹啉-2-甲酸(1.0g,5.8mmol)溶于甲醇(6ml)，加入氧化铂(50mg,0.022mmol)反应液在氢气氛围中于25℃反应16小时。lcms监测反应结束，将反应液过滤并旋干得到1,2,3,4-四氢喹啉-2-甲酸(800mg,红色固体)，收率：72％。
[0336]
ms m/z(esi):178.1[m+h]
+
.
[0337]
第二步
[0338]
((r)-8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪7(8h)-基)(1,2,3,4-四氢喹啉-2-基)甲酮的制备
[0339]
将(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(50mg,0.21mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(3ml)，依次加入n,n-二异丙基乙胺(82mg,0.42mmol)，hatu(161mg,0.32mmol)和1,2,3,4-四氢喹啉-2-甲酸(41mg,0.23mmol)。反应液于25℃反应4小时。lcms监测反应结束，将反应液旋干通过制备色谱得到((r)-8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪7(8h)-基)(1,2,3,4-四氢喹啉-2-基)甲酮(6.70mg,白色固体)，收率：8％。
[0340]
ms m/z(esi):396.2[m+h]
+
.
[0341]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.06-6.99(m,2h),6.72-6.66(m,2h),6.16-5.55(m,1h)5.04-4.92(m,1h),4.34-4.24(m,3h),3.67-3.30(m,1h),2.96-2.82(m,2h),2.75(s,3h),2.16(d,j＝10hz,1h),1.89-1.69(m,3h).
[0342]
实施例24
[0343]
(3,4-二氢-2h-苯并[b][1,4]噁嗪-2-基)((r)-8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0344][0345]
第一步
[0346]
3,4-二氢-2h-苯并[b][1,4]噁嗪-2-甲酸乙酯的制备
[0347]
将2-氨基苯酚(2.0g,18.3mmol)和碳酸钾(12.627g,91.5mmol)加入到dmf(30ml)，反应液搅拌30分钟后加入2,3-二溴丙酸乙酯(6.18g,23.7mmol)，反应液在45℃搅拌5小时。反应液加入水(20ml)淬灭，乙醚萃取(3x20ml)，浓缩得到的残留物用硅胶柱层析色谱柱纯化后得到3,4-二氢-2h-苯并[b][1,4]噁嗪-2-甲酸乙酯(1.5g)为白色固体。
[0348]1h nmr(400mhz,dmso)δ6.77
–
6.58(m,3h),6.47(ddd,j＝8.0,6.8,2.0hz,1h),6.24(s,1h),4.35(dd,j＝10.8,3.2hz,1h),4.21(t,j＝2.8hz,1h),4.17
–
4.08(m,3h),1.19(t,j＝7.2hz,3h).
[0349]
第二步
[0350]
4-(叔丁基)2-乙基2，3-二氢-4h-苯并[b][1,4]噁嗪-1,4-二甲酸酯的制备
[0351]
将3,4-二氢-2h-苯并[b][1,4]噁嗪-2-甲酸乙酯(300mg,1.45mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，加入二碳酸二叔丁酯(650mg,2.9mmol)，吡啶(460mg,5.8mmol)和催化量4-二甲氨基吡啶(5mg)，反应液在25℃搅拌16小时。反应液加入水(30ml)淬灭，乙酸乙酯萃取(3x30ml)，有机相浓缩得到的残留物用硅胶柱层析色谱柱(5-5％etoac/pe)分离纯化后得
到4-(叔丁基)2-乙基2，3-二氢-4h-苯并[b][1,4]噁嗪-1,4-二甲酸酯(100mg，白色固体)，收率：21％。
[0352]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.59(s,1h),7.01
–
6.89(m,2h),6.83(ddd,j＝8.8,6.0,2.4hz,1h),4.77(dd,j＝4.8,3.2hz,1h),4.26
–
4.06(m,3h),3.79(dd,j＝13.6,3.2hz,1h),1.45(s,9h),1.22(t,j＝7.2hz,3h).
[0353]
第三步
[0354]
4-(叔丁氧羰基)-3,4-二氢-2h-苯甲酸[b][1,4]噁嗪-2-甲酸的制备
[0355]
将4-(叔丁基)2-乙基2，3-二氢-4h-苯并[b][1,4]噁嗪-1,4-二甲酸酯(100mg,0.325mmol)溶于thf/h2o(5ml，v/v:5/1)，加入氢氧化锂(39mg,1.6mmol)，将反应液室温搅拌16小时。反应液用1m hcl溶液酸化至ph＝7,浓缩得到化合物4(80mg，白色固体)，得到的粗品无需进一步纯化可以直接用于下一步。
[0356]
ms m/z(esi):[m+1]
+
:302.2.
[0357]
第四步
[0358]
2-((r)-8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7-羰基)-2,3-二氢-4h-苯并[b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯的制备
[0359]
将4-(叔丁氧羰基)-3,4-二氢-2h-苯甲酸[b][1,4]噁嗪-2-甲酸(50mg,0.21mmol)溶于dmf(3ml)，加入n,n-二异丙基乙胺(54mg,0.42mmol)，hatu(80mg,0.21mmol)和(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(70mg,0.25mmol)，反应液在25℃搅拌2小时。反应液加入水(20ml)淬灭，乙酸乙酯萃取(3x20ml)，饱和食盐水洗(3x20ml)，浓缩得到的残留物用pre-hplc(乙腈/水)纯化后得到基2-((r)-8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7-羰基)-2,3-二氢-4h-苯并[b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯(50mg,白色固体)，收率：85％。
[0360]
ms m/z(esi):[m+1]
+
:498.1
[0361]
第五步
[0362]
(3,4-二氢-2h-苯并[b][1,4]噁嗪-2-基)((r)-8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0363]
将2-((r)-8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7-羰基)-2,3-二氢-4h-苯并[b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯(50mg,0.1mmol)溶于二氯甲烷(5ml)加入三氟乙酸(120mg,1.0mmol)，反应液在25℃搅拌2小时。反应液浓缩得到的残留物用pre-hplc(乙腈/水)纯化后得到(3,4-二氢-2h-苯并[b][1,4]噁嗪-2-基)((r)-8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(15mg,白色固体)，收率：34％。
[0364]
ms m/z(esi):[m+1]
+
:398.1
[0365]1h nmr(400mhz,dmso)δ6.83
–
6.67(m,2h),6.2
–
6.60(m,1h),6.52
–
6.51(m,1h),5.91
–
5.86(m,1h),5.81
–
5.66(m,1h),5.18
–
4.97(m,1h),4.84
–
4.44(m,2h),4.32(t,j＝11.6hz,1h),3.87
–
3.54(m,1h),3.49
–
3.32(m,2h),2.82
–
2.65(m,3h),1.54-1.24(m,3h).
[0366]
实施例25
[0367]
(r)-苯并[d][1,3]二恶唑-4-基(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0368][0369]
将1,3-亚甲二氧杂环戊烯-4-甲酸(25mg,0.16mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(2ml)并向其中依次加入，hatu(72mg,0.20mmol)n,n-二异丙基乙胺(50mg,0.39mmol)和(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(30mg,0.13mmol)。反应液在25℃反应1小时。用lcms监测反应。完成后，向反应液中加入水(50ml)，然后用乙酸乙酯(2x50ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩。通过反相色谱柱(30％乙腈/水)纯化得到(r)-(4-氟-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(19.01mg,白色固体)，收率：39％。
[0370]
ms m/z(esi):385.1[m+h]
+
.
[0371]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.07-7.04(m,1h),6.97-6.94(m,2h),6.11(d,j＝17.2hz,2h),5.90-5.79(m,1h),4.73(d,j＝11.6hz,1h),4.20(t,j＝11.6hz,1h),4.00-3.91(m,1h),3.75-3.64(m,1h),2.69(s,3h),1.61(d,j＝6.4hz,3h).
[0372]
实施例26
[0373]
(r)-(3-氟-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0374][0375]
第一步
[0376]
3-氟-1h-吲哚-6-甲酸甲酯的制备
[0377]
将3-氟-1h-吲哚-6-甲酸(1.50g,8.60mmol)溶于乙腈/吡啶(15ml/5ml)，然后依次加入氟化试剂selectfluor(2.74g,7.70mmol)。反应液在25℃反应16小时。反应完成后，向反应液中加入乙酸乙酯(300ml)并用饱和食盐水(3x100ml)洗涤有机相。无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物通过硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)分离纯化得到3-氟-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(260mg,黄色固体)，收率：14％。
[0378]
ms m/z(esi):194.3[m+h]
+
.
[0379]
第二步
[0380]
3-氟-1h-吲哚-6-甲酸的制备
[0381]
将3-氟-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(100mg,0.52mmol)溶于甲醇(5ml)与水(1ml)的混合
溶剂中，并向其中加入氢氧化钠(104mg,2.60mmol)。反应液在40℃反应5小时。反应完成后，向反应液中滴加2m的盐酸调节ph至3。向反应液中加入乙酸乙酯(80ml)萃取。有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩，得到3-氟-1h-吲哚-6-甲酸(69mg,黄色固体)，产率：70％。
[0382]
ms m/z(esi):180.1[m+h]
+
.
[0383]
第三步
[0384]
(r)-(3-氟-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0385]
将1h-吲唑-5-甲酸(45mg,0.26mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(3ml)并向其中依次加入(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑051d(40mg,0.17mmol)，n,n-二异丙基乙胺(132mg,1.02mmol)和hatu(103mg,0.27mmol)。反应液在25℃反应4小时。用lcms监测反应。完成后，向反应液中加入水(50ml)，然后用乙酸乙酯(2x50ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩。通过反相色谱柱(38％乙腈/水)纯化得到(r)-(3-氟-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(3.01mg,白色固体)，收率：4％。
[0386]
ms m/z(esi):398.1[m+h]
+
.
[0387]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.16(s,1h),7.53-7.49(m,1h),7.26-7.21(m,2h),5.96(br,1h),4.67(br,1h),4.27-4.21(m,1h),3.76(d,j＝45.6hz,2h),2.68(s,3h),1.67(s,3h).
[0388]
实施例27
[0389]
(r)-(3-氯-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0390][0391]
第一步
[0392]
3-氯-1h-吲哚-6-甲酸的制备
[0393]
将1h-吲哚-6-甲酸(403mg,2.50mmol)溶于二氯甲烷(20ml)与dmf(2ml)的混合溶剂，加入ncs(341mg,2.55mmol)。反应液于25℃反应2小时。反应结束后，向反应液中加水(50ml)，二氯甲烷/甲醇混合溶剂(10/1,4x100ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(35％乙腈/水)纯化后得到3-氯-1h-吲哚-6-甲酸(473mg,黄色固体)，收率:96％。
[0394]
ms m/z(esi):196.1[m+1]
+
.
[0395]1h nmr(400mhz,dmso)δ11.76(s,1h),8.07(br,1h),7.75(d,j＝2.8hz,1h),7.71(dd,j＝8.4,1.6hz,1h),7.55(d,j＝8.4hz,1h).
[0396]
第二步
[0397]
(r)-(3-氯-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0398]
将3-氯-1h-吲哚-6-甲酸(64mg,0.33mmol)溶于二氯甲烷(5ml)，加入氯化亚砜(116mg,0.98mmol)，然后加3滴dmf。反应液于25℃反应20分钟。酸转化成酰氯后，浓缩除去过量的氯化亚砜。将得到的酰氯溶于二氯甲烷(1ml)，加入到含有3-甲基-5-[(8r)-8-甲基-5h，6h，7h，8h-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基]-1,2,4-噻二唑(31mg,0.13mmol)，三乙胺(66mg,0.65mmol)的二氯甲烷(4ml)溶液中。反应液于25℃反应20分钟。反应结束后，加入饱和碳酸氢钠(20ml)淬灭反应，二氯甲烷(2x30ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(39％乙腈/水)分离，再用制备色谱纯化后得到(r)-(3-氯-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(29.3mg,白色固体)，收率:54％。
[0399]
ms m/z(esi):414.1[m+1]
+
.
[0400]
hplc:99.41％(214nm),99.10％(254nm).
[0401]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.94(s,1h),7.69(d,j＝8.0hz,1h),7.51(s,1h),7.30(d,j＝2.4hz,1h),7.24(d,j＝8.0hz,1h),5.89(br,1h),4.91-4.89(m,1h),4.61(br,1h),4.31-4.26(m,1h),3.57-3.51(m,1h),2.73(s,3h),1.75(d,j＝6.8hz,3h).
[0402]
实施例28
[0403]
(r)-(3-甲基-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0404][0405]
第一步
[0406]
3-甲酰基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯的制备
[0407]
将三氯氧磷(2.63g，17.12mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(5ml)中，将1h-吲哚-6-甲酸甲酯(1g，5.71mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(5ml)并缓慢滴加到上述体系中。该反应在35℃下搅拌16小时。加入甲醇(10ml)和冰水(10ml)淬灭反应。用20％氢氧化钠溶液中和反应，过滤，收集滤饼并用水洗，真空干燥，最终得到3-甲酰基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(800mg，黄色固体)，产率：62％。
[0408]
ms m/z(esi):204.2[m+1]
+
.
[0409]
第二步
[0410]
3-甲基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯的制备
[0411]
将3-甲酰基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(150mg，0.74mmol)溶于四氢呋喃(10ml)中，将硼烷的四氢呋喃溶液(1mol/l)(2.22ml，2.22mmol)加入到反应液中，该反应在50℃反应1小时。反应结束后，加入氯化铵溶液(20ml)，用乙酸乙酯(3x20ml)萃取，收集有机相并利用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到粗产品。粗产品通过柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)纯化分离得到3-甲基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(80mg，白色固体)，产率：54％。
[0412]
ms m/z(esi):190.2[m+1]
+
.
[0413]
第三步
[0414]
3-甲基-1h-吲哚-6-甲酸的制备
[0415]
将3-甲基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(70mg，0.37mmol)溶于甲醇(15ml)和水(5ml)中，加入氢氧化钠(44mg，1.11mmol)。该反应在室温下搅拌48小时。减压下旋去甲醇，利用1mol/l的盐酸将溶液ph调至3-5，然后通过乙酸乙酯(3x20ml)进行萃取，收集有机相并利用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到3-甲基-1h-吲哚-6-甲酸(65mg，白色固体)，产率：90％。
[0416]
ms m/z(esi):176.2[m+1]
+
.
[0417]
第四步
[0418]
3-甲基-1h-吲哚-6-羰基氯的制备
[0419]
将3-甲基-1h-吲哚-6-甲酸(40mg，0.23mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中，加入n,n-二甲基甲酰胺(0.1ml)和草酸二氯(35mg，0.28mmol)。该反应在室温下搅拌30分钟。反应结束后，旋干溶剂得到3-甲基-1h-吲哚-6-羰基氯(40mg，淡黄色固体)，产率：85％。
[0420]
ms m/z(esi):190.2(m-cl+14).
[0421]
第五步
[0422]
(r)-(3-甲基-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0423]
将3-甲基-5-[(8r)-8-甲基-5h,6h,7h,8h-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基]-1,2,4-噻二唑(35mg，0.15mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，加入n,n-二异丙基乙胺(58mg，0.45mmol)，然后加入3-甲基-1h-吲哚-6-羰基氯(40mg，0.21mmol)。该反应在室温下搅拌1小时。反应结束后，粗产品经过反相柱(乙腈/水/0.1％甲酸)提纯分离得到(r)-(3-甲基-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1，2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(15mg，白色固体)，产率：25％。
[0424]
ms m/z(esi):394.2[m+1]
+
.
[0425]
hplc:99.20％(214nm),98.94％(254nm).
[0426]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.52(s,1h),7.61(d,j＝8.1hz,1h),7.50(s,1h),7.17(d,j＝8.0hz,1h),7.10(s,1h),5.84-5.98(m,1h),4.86-4.89(m,1h),4.57-4.70(m,1h),4.24-4.31(m,1h),3.49-3.55(m,1h),2.73(s,3h),2.34(s,3h),1.74(d,j＝6.8hz,3h).)
[0427]
实施例29
[0428]
(r)-(3-甲氧基-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0429]
[0430]
第一步
[0431]
1-乙酰基-3-甲酰基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯的制备
[0432]
将3-甲酰-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(400mg,1.97mmol)溶于乙酸酐(2.01g,19.7mmol)。将反应液加热至150℃反应3小时。反应结束后，降温至室温并浓缩除去大部分乙酸酐。冰浴条件下缓慢加入饱和碳酸氢钠(20ml)中和残留的乙酸酐，乙酸乙酯(3x20ml)萃取。有机相合并，饱和盐水(50ml)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到1-乙酰基-3-甲酰基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(300mg,黄色固体)，收率:62％。
[0433]
ms m/z(esi):246.1[m+1]
+
.
[0434]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ10.16(s,1h),9.08(d,j＝0.8hz,1h),8.33(d,j＝8.8hz,1h),8.22(s,1h),8.12(dd,j＝8.4,1.2hz,1h),3.97(s,3h),2.79(s,3h).
[0435]
第二步
[0436]
1-乙酰基-3-氧代吲哚啉-6-甲酸甲酯的制备
[0437]
依次将1-乙酰基-3-甲酰基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(600mg,2.45mmol)和对甲苯磺酸一水合物(466mg,2.45mmol)加至间氯过氧苯甲酸(634mg,3.68mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中。反应液于25℃反应8小时。反应结束后，浓缩反应液。将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)分离纯化后得到1-乙酰基-3-氧代吲哚啉-6-甲酸甲酯(200mg,紫色固体)，收率:35％。
[0438]
ms m/z(esi):234.1[m+1]
+
.
[0439]
第三步
[0440]
1-乙酰基-3-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯的制备
[0441]
将1-乙酰基-3-氧代吲哚啉-6-甲酸甲酯(200mg,0.86mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，加入(重氮甲基)三甲基硅烷(2m,4ml)和甲醇(4ml)。反应液于25℃反应16小时。反应结束后，将溶剂旋蒸除去。残留物中加水(100ml)，二氯甲烷(2x20ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝6/4)分离纯化后得到1-乙酰基-3-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(110mg,黄色固体)，收率:51％。
[0442]
ms m/z(esi):248.1[m+1]
+
.
[0443]
第四步
[0444]
3-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸的制备
[0445]
将1-乙酰基-3-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(100mg,0.40mmol)溶于甲醇(9ml)与水(3ml)的混合溶剂，加入氢氧化钠(48mg,1.20mmol)。反应液于25℃反应16小时。反应结束后，旋蒸除去甲醇。用1m盐酸将残余液调节至ph4～6，乙酸乙酯(3x20ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到3-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸(70mg,黄色固体)，收率:71％。
[0446]
ms m/z(esi):248.1[m+1]
+
.
[0447]1h nmr(400mhz,dmso)δ12.53(s,1h),10.82(s,1h),7.94(s,1h),7.58-7.47(m,2h),7.17(d,j＝2.4hz,1h),3.82(s,3h).
[0448]
第五步
[0449]
1-(叔丁氧羰基)-3-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸的制备
[0450]
将3-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸(25mg,0.1mmol)溶于四氢呋喃(4ml)，依次加入三乙胺(23mg,0.23mmol)，4-二甲氨基吡啶(11mg,0.09mmol)，叔丁氧羰基酸酐(39mg,
0.18mmol)。反应液于25℃反应16小时。反应结束后，饱和氯化铵(40ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x35ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(38％乙腈/水)分离纯化后得到得到1-(叔丁氧羰基)-3-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸(26mg,淡黄色固体)，收率:90％。
[0451]
ms m/z(esi):290.0[m+1]
+
.
[0452]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.87(s,1h),7.98(dd,j＝8.4,1.2hz,1h),7.65(d,j＝8.4hz,1h),7.16(s,1h),3.92(s,3h),1.71(s,9h).
[0453]
第六步
[0454]
(r)-3-甲氧基-6-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7-羰基)-1h-吲哚-1-甲酸叔丁酯的制备
[0455]
将1-(叔丁氧羰基)-3-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸(26mg,0.09mmol)溶于dmf(1.5ml)，向其中依次加入diea(29mg,0.23mmol)，hatu(41mg,0.11mmol)以及3-甲基-5-[(8r)-8-甲基-5h，6h，7h，8h-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基]-1,2,4-噻二唑(21mg,0.09mmol)。反应液于25℃反应3小时。反应结束后，用饱和盐水(40ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x30ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(52％乙腈/水)纯化后得到(r)-3-甲氧基-6-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7-羰基)-1h-吲哚-1-甲酸叔丁酯(30mg,淡黄色固体)，收率:65％。
[0456]
ms m/z(esi):510.2[m+1]
+
.
[0457]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.34(br,1h),7.66(d,j＝8.0hz,1h),7.31(d,j＝8.0hz,1h),7.04(s,1h),5.86(br,1h),4.91(d,j＝10.4hz,1h),4.71-4.54(m,1h),4.34-4.26(m,1h),3.93(s,3h),3.57-3.50(m,1h),2.73(s,3h),1.78(d,j＝6.8hz,3h),1.65(s,9h).
[0458]
第七步
[0459]
(r)-(3-甲氧基-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0460]
将纯化后得到叔丁基(r)-3-甲氧基-6-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7-羰基)-1h-吲哚-1-甲酸酯(25mg,0.05mmol)溶于甲醇(4.5ml)与水(1.5ml)的混合溶剂，加入碳酸钾(166mg,1.20mmol)。反应液加热至80℃反应1小时。反应结束后，向反应液中加饱和盐水(30ml)，二氯甲烷(2x40ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(52％乙腈/水)分离，再用制备色谱纯化得到(r)-(3-甲氧基-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(4.0mg,白色固体)，收率:20％。
[0461]
ms m/z(esi):410.1[m+1]
+
.
[0462]
hplc:97.40％(214nm),97.34％(254nm).
[0463]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.88(s,1h),7.69(d,j＝8.0hz,1h),7.43(s,1h),7.12(d,j＝8.0hz,1h),6.81(d,j＝2.4hz,1h),5.91(br,1h),4.88(dd,j＝13.6,
[0464]
3.6hz,1h),4.64(br,1h),4.28(td,j＝12.8,4.0hz,1h),3.91(s,3h),3.52(t,j＝11.6hz,1h),2.73(s,3h),1.75(d,j＝6.8hz,3h).
[0465]
实施例30
[0466]
(r)-1-(6-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7-羰基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)乙-1-酮
[0467]
第一步
[0468]
(r)-6-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7-羰基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酸叔丁酯的制备
[0469]
将2-(叔丁氧羰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸(58mg,0.21mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(4ml),然后依次加入(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(50mg,0.21mmol),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯(119mg,0.32mmol)和n，n-二异丙基乙胺(27mg,0.21mmol)，在室温下搅拌2小时，反应液用乙酸乙酯萃取，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。抽滤，滤液减压浓缩，将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)分离纯化后得到(r)-6-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7-羰基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酸叔丁酯(40mg,黄色固体)，收率:34％。
[0470]
ms.m/z(esi):496.2[m+h]
+
.
[0471]
第二步
[0472]
(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)甲酮的制备
[0473]
将分离纯化后得到(r)-6-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7-羰基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酸叔丁酯(40mg,0.08mmol)溶于二氯甲烷(4ml)，然后依次加入三氟乙酸(0.5ml)。在室温下搅拌2小时。将反应液浓缩得到(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)甲酮(30mg,黄色油状)，收率:85％。
[0474]
ms.m/z.(esi):396.1[m+h]
+
。
[0475]
第三步
[0476]
(r)-1-(6-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7-羰基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)乙-1-酮的制备
[0477]
将(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)甲酮3(30mg,0.07mmol)溶于二氯甲烷(4ml),然后依次加入三乙胺(15mg,0.15mmol)和乙酰氯(12mg,0.15mmol),在室温下搅拌2小时。反应液用二氯甲烷萃取，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，再用反相柱(55％乙腈/水)纯化后得到(r)-1-(6-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7-羰基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)乙-1-酮(gs1-055)(16mg,白色固体)，收率：48％。
[0478]
ms.m/z(esi):438.2[m+h]
+
[0479]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.28(d,j＝7.6hz,1h),7.26-7.18(m,2h),6.01-5.57(m,1h),4.91(dd,j＝13.4,2.0hz,1h),4.77(s,2h),4.67(s,1h),4.25(td,j＝12.0,2.4hz,1h),3.88-3.81(m,1h),3.71(t,j＝6.0hz,1h),3.51(t,j＝13.0hz,1h),2.94(t,j＝5.6hz,1h),2.88(t,j＝5.6hz,1h),2.72(s,3h),2.20(d,j＝4.4hz,3h),1.73(d,j＝6.8hz,3h).
[0480]
hplc:254nm(100％),214nm(100％).
[0481]
实施例31
[0482]
(r)-(4-氟苯并呋喃-7-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0483][0484]
第一步
[0485]
1-溴-2-(3,3-二乙氧基丙氧基)-4-氟苯的制备
[0486]
将2-溴-5-氟苯酚(2g,10.05mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(20ml)，依次加2-溴-1,1-二乙氧基乙烷(3.10g,15.70mmol)和碳酸钾(2.18g,15.70mmol)。反应液于80℃反应16小时。lcms监测反应结束，加入水(200ml)，乙酸乙酯(3x80ml)萃取分液，再用饱和氯化钠溶液(100ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝10：1)纯化得到1-溴-2-(3,3-二乙氧基丙氧基)-4-氟苯(1g,黄色固体)，收率：29％。
[0487]
ms m/z(esi):321.1[m+h]
+
.
[0488]
第二步
[0489]
1-溴-2-(3,3-二乙氧基丙氧基)-4-氟苯的制备
[0490]
将1-溴-2-(3,3-二乙氧基丙氧基)-4-氟苯(900mg,2.80mmol)溶于甲苯(15ml)，加多聚磷酸(900mg,5.60mmol)。反应液于120℃反应5小时。lcms监测反应结束，将反应液降至室温缓慢滴加氨水至反应液ph＝10，然后加入水(100ml)，乙酸乙酯(3x80ml)萃取分液，再用饱和氯化钠溶液(100ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝10：1)纯化得到1-溴-2-(3,3-二乙氧基丙氧基)-4-氟苯(290mg,白色固体)，收率：44％。
[0491]
ms m/z(esi):215.1[m+h]
+
.
[0492]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.20(d,j＝2.2hz,1h),7.61-7.58(m,1h),7.24(d,j＝2.2hz,1h),7.15-7.11(m,1h).
[0493]
第三步
[0494]
4-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯4-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯的制备
[0495]
将1-溴-2-(3,3-二乙氧基丙氧基)-4-氟苯(290mg,1.35mmol)溶于甲醇(10ml)，依次加入pd(dppf)cl2(72mg,0.14mmol)，醋酸钾(371mg,4.05mmol)。反应液在一氧化碳的氛围中于80℃反应16小时。lcms监测反应结束，加入水(100ml)，乙酸乙酯(3x80ml)萃取分液，
再用饱和氯化钠溶液(100ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝9：1)纯化得到4-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(160mg,白色固体)，收率：56％。
[0496]
ms m/z(esi):195.1[m+h]
+
.
[0497]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.23(d,j＝2.2hz,1h),7.97-7.93(m,1h),7.28-7.21(m,2h),3.92(s,3h).
[0498]
第四步
[0499]
4-氟苯并呋喃-7-甲酸的制备
[0500]
将4-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(160mg,0.82mmol)溶于甲醇/水(5/1ml)，加入氢氧化锂一水合物(165mg,4.10mmol)反应液于25℃反应4小时。lcms监测反应结束，将反应液旋干得到粗品4-氟苯并呋喃-7-甲酸，无需纯化直接投下一步反应。
[0501]
ms m/z(esi):181.1[m+h]
+
.
[0502]
第五步
[0503]
4-氟苯并呋喃-7-羰基氯的制备
[0504]
将4-氟苯并呋喃-7-甲酸(40mg,0.22mmol)溶于二氯甲烷(2ml)，依次加入氯化亚砜(262mg,2.2mmol)，n,n-二甲基甲酰胺(0.05ml)反应液于25℃反应10分钟。lcms监测反应结束，将反应液旋干得到粗品4-氟苯并呋喃-7-甲酸4-氟苯并呋喃-7-羰基氯，无需纯化直接投下一步反应。
[0505]
ms m/z(esi):195.1[m-cl+ch3o+h].
[0506]
第六步
[0507]
(r)-(4-氟苯并呋喃-7-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0508]
将(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(30mg,0.13mmol)溶于二氯甲烷(3ml)并向其中依次加入n,n-二异丙基乙胺(50mg,0.39mmol)和4-氟苯并呋喃-7-羰基氯(38mg,0.20mmol)。反应液在25℃反应30分钟。用lcms监测反应。完成后，向反应液中加入水(50ml)，然后用乙酸乙酯(2x50ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩。通过反相色谱柱(60％乙腈/水)纯化得到(r)-(4-氟苯并呋喃-7-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(16.00mg,白色固体)，收率：32％。
[0509]
ms m/z(esi):399.1[m+h]
+
.
[0510]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.16(s,1h),7.53-7.49(m,1h),7.26-7.21(m,2h),5.96(br,s,1h),4.67(br,s,1h),4.27-4.21(m,1h),3.76(d,j＝45.6hz,2h),2.68(s,3h),1.67(s,3h).
[0511]
实施例32
[0512]
(r)-(4-氯苯并呋喃-7-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0513][0514]
第一步
[0515]
1-溴-4-氯-2-(2,2-二甲氧基)苯的制备
[0516]
将2-溴-5-氯苯酚(700mg,3.37mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)，室温下依次加入2-溴-1,1-二乙氧基乙烷(996mg,5.06mmol)和碳酸钾(699mg,5.06mmol)。反应液加热至135℃反应7小时。lcms监测反应结束后，加水(50ml)稀释，乙酸乙酯(3x20ml)萃取。有机相合并，干燥并浓缩。粗品用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝5/95)纯化得1-溴-4-氯-2-(2,2-二甲氧基)苯(900mg,白色固体)，收率：78％。
[0517]
ms m/z(esi):345.1[m+1]
+
。
[0518]
第二步
[0519]
7-溴-4-氯苯并呋喃的制备
[0520]
将1-溴-4-氯-2-(2,2-二甲氧基)苯(400mg,1.29mmol)溶于甲苯(20ml)，然后向其中加入多聚磷酸(4ml)。反应液加热至120℃反应5小时，lcms监测反应结束后，反应液冷却至0℃，将氨水(20ml)缓慢滴加至反应液中，然后加水(30ml)稀释，用乙酸乙酯(3x30ml)萃取。合并有机相，干燥并浓缩。粗品用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝100/0)纯化得到7-溴-4-氯苯并呋喃(161mg,白色固体)，产率：51％。
[0521]1h nmr(400mhz,cdcl3)δppm:7.73(d,j＝2.2hz,1h),7.40(d,j＝8.4hz,1h),7.14(d,j＝8.4hz,1h),6.97
–
6.92(m,1h).
[0522]
第三步
[0523]
4-氯-1-苯并呋喃-7-甲酸甲酯的制备
[0524]
将7-溴-4-氯苯并呋喃(161mg,0.70mmol)溶于甲醇(10ml)，依次加入乙酸钾(206mg,0.48mmol)，pd(dppf)cl2(51mg,0.07mmol)。一氧化碳氛围下加热至80℃反应2小时，lcms监测反应完成后，将溶剂蒸干，蒸干的残渣用乙酸乙酯(10ml)溶解，加水(20ml)稀释，然后用乙酸乙酯萃取(3x10ml)。合并有机相，干燥并浓缩。残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝9/91)纯化得到4-氯-1-苯并呋喃-7-甲酸甲酯(133mg,白色固体)，产率：86％。
[0525]
ms m/z(esi):211.1[m+1]
+
。
[0526]
第四步
[0527]
4-氯-1-苯并呋喃-7-甲酸的制备
[0528]
将4-氯-1-苯并呋喃-7-甲酸甲酯(310mg,1.47mmol)溶于甲醇(20ml)和水(1ml)的混合溶剂中，加入氢氧化锂一水合物(106mg,4.41mmol)。反应液在室温下反应2小时。lcms监测反应完成后，旋蒸除去溶剂，向残留物中加水(20ml)，用稀盐酸(5ml,1m)调节ph到1，然后用乙酸乙酯(3x10ml)萃取。合并有机相并干燥后。旋蒸除去溶剂得到产品4-氯-1-苯并呋喃-7-甲酸(87mg,浅黄色固体)产率：27％。得到的产品可以直接进行下一步，不需要进一步纯化。
[0529]
ms m/z(esi):197.2[m+1]
+
。
[0530]
第五步
[0531]
4-氯苯并呋喃-7-羰基氯的制备
[0532]
将4-氯-1-苯并呋喃-7-甲酸(50mg,0.25mmol)溶于二氯甲烷(5ml)，加入氯化亚砜(36mg,0.30mmol)。反应液在室温下反应30分钟。lcms监测反应完成后，旋蒸除去溶剂以及残留的氯化亚砜，得到产品4-氯苯并呋喃-7-羰基氯(42mg,浅黄色固体)，产率：70％，产品不需要进一步纯化，可直接用于下一步。
[0533]
ms m/z(esi):211.1[m+1]
+
。
[0534]
第六步
[0535]
(r)-(4-氯苯并呋喃-7-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0536]
将(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(30mg,0.13mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，然后加入三乙胺(39mg,0.39mmol)和4-氯-1-苯并呋喃-7-羰基氯(42mg,0.20mmol)。反应在室温下搅拌2小时。lcms监测反应完成后，加水(20ml)，然后用二氯甲烷(3x10ml)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用反向柱(乙腈/水＝43/57)纯化得到(r)-(4-氯苯并呋喃-7-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(32mg,白色固体)，产率：61％。
[0537]
ms m/z(esi):451.1[m+1]
+
[0538]1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.71(d,j＝6.6hz,1h),7.37(s,2h),6.97(d,j＝1.8hz,1h),6.27(s,1h),5.26(s,1h),4.94(s,1h),4.31(s,1h),3.63(s,1h),2.73(s,3h),1.77(s,3h).
[0539]
实施例33
[0540]
(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(4-(三氟甲基)苯并呋喃-7-基)甲酮
[0541][0542]
第一步
[0543]
7-溴-4-(三氟甲基)-1-苯并呋喃的制备
[0544]
将1-溴-2-(2,2-二乙氧基乙氧基)-4-(三氟甲基)苯(400mg,1.12mmol)溶于甲苯(5ml)中，加入多聚磷酸(2ml)。反应液在120℃反应5小时。反应结束后，反应液冷却至0℃，缓慢加入氨水(10ml)。再加水(20ml)用乙酸乙酯(3x10ml)萃取。将所有有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(100％石油醚)分离纯化后得到7-溴-4-(三氟
甲基)-1-苯并呋喃(175mg,无色油状物)，收率：56％。
[0545]1h nmr(400mhz,cdcl3)δppm:7.81(d,j＝2.2hz,1h),7.56(d,j＝8.2hz,1h),7.41(d,j＝8.2hz,1h),6.96
–
7.07(m,1h).
[0546]
第二步
[0547]
4-(三氟甲基)-1-苯并呋喃-7-甲酸甲酯的制备
[0548]
将7-溴-4-(三氟甲基)-1-苯并呋喃(175mg,0.66mmol)溶于甲醇(20ml)加入醋酸钾(194mg,1.98mmol)和pdcl2(dppf)。反应液在80℃充满co气体中反应2小时反应结束后，反应液冷却至室温，浓缩，得到的残留物加水(20ml)，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取。将所有有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝9/1)分离纯化后得到4-(三氟甲基)-1-苯并呋喃-7-甲酸甲酯(65mg,白色固体)，收率：38％。
[0549]
ms m/z(esi):245.1[m+h]
+
。
[0550]
第三步
[0551]
4-(三氟甲基)-1-苯并呋喃-7-甲酸的制备
[0552]
将4-(三氟甲基)-1-苯并呋喃-7-甲酸甲酯(55mg,0.23mmol)溶于甲醇(10ml)分批加入氢氧化锂(16mg,0.68mmol)。反应液在25℃反应2小时。反应结束后，用1m稀盐酸调节溶液ph值到1，并用乙酸乙酯(3x5ml)萃取。将所有有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到4-(三氟甲基)-1-苯并呋喃-7-甲酸(35mg,淡黄色固体)的粗品，收率：61％。该粗品直接用于下一步反应。
[0553]
ms m/z(esi):231.0[m+h]
+
。
[0554]
第四步
[0555]
4-(三氟甲基)-1-苯并呋喃-7-羰基氯的制备
[0556]
将4-(三氟甲基)-1-苯并呋喃-7-甲酸(17mg,0.074mmol)溶于二氯甲烷(5ml)并加入氯化亚砜(11mg,0.089mmol)。反应液在25℃反应30分钟。反应液浓缩得到4-(三氟甲基)-1-苯并呋喃-7-羰基氯(17mg,淡黄色油状物)的粗品。收率：83％。该粗品直接用于下一步反应。
[0557]
第五步
[0558]
(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(4-(三氟甲基)苯并呋喃-7-基)甲酮的制备
[0559]
将(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(10mg,0.04mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中，加入三乙胺(12mg,0.12mmol)和4-(三氟甲基)-1-苯并呋喃-7-羰基氯058e(10mg,0.04mmol)。反应液在25℃反应30分钟。反应液浓缩，得到的残留物用反相柱(55％乙腈/水)纯化后得到(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(4-(三氟甲基)苯并呋喃-7-基)甲酮(8mg,白色固体)，收率：47％。
[0560]
ms m/z(esi):449.1[m+h]
+
。
[0561]1hnmrδ(400mhz,cdcl3):77.77-7.86(m,1h),7.69(d,j＝7.8hz,1h),7.55(s,1h),7.10(s,1h),6.34(s,1h),5.25(s,1h),4.95-5.07(m,1h),4.29-4.41(m,1h),3.73-3.90(m,1h),2.74(s,3h),1.61-1.69(m,3h).
[0562]
19
fnmr(376mhz,cdcl3)δ:-61.69.
[0563]
实施例34
[0564]
(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(3-(三氟甲基)-1h-吲哚-6-基)甲酮
[0565][0566]
第一步
[0567]
1h-吲哚-6-甲酸甲酯的制备
[0568]
将1h-吲哚-6-甲酸(3.22g,20.00mmol)溶于甲醇(50ml)，加入浓硫酸(1ml)。反应液加热至80℃反应5小时。反应结束后，反应液降温至室温，加水(150ml)淬灭反应，用饱和碳酸氢钠调节ph至7。二氯甲烷(2x150ml)萃取，有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝4/1)分离纯化后得到1h-吲哚-6-甲酸甲酯(2.85g,淡黄色固体)，收率:81％。
[0569]
ms m/z(esi):176.2[m+1]
+
。
[0570]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.51(s,1h),8.08-8.07(m,1h),7.65-7.62(m,2h),7.61(t,j＝2.8hz,1h),6.54-6.53(m,1h),3.85(s,3h).
[0571]
第二步
[0572]
3-碘-1h-吲哚-6-甲酸甲酯的制备
[0573]
将1h-吲哚-6-甲酸甲酯(1.40g,8.00mmol)溶于dmf(15ml)，依次加入氢氧化钾(988mg,17.60mmol)，单质碘(2.03g,8.00mmol)。反应液于25℃反应1小时。反应结束后，将反应液倒入硫代硫酸钠(8mmol)的冰水(300ml)溶液中。过滤，冷水(40ml)洗涤滤饼。将得到的固体溶于乙酸乙酯(150ml)，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到3-碘-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(2.38g,黄色固体)，收率:98％。
[0574]
ms m/z(esi):302.0[m+1]
+
。
[0575]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.69(s,1h),8.14(s,1h),7.89(dd,j＝8.4,1.2hz,1h),7.49(d,j＝8.4hz,1h),7.45(d,j＝2.4hz,1h),3.95(s,3h).
[0576]
第三步
[0577]
3-(三氟甲基)-1h-吲哚-6-甲酸甲酯的制备
[0578]
将3-碘-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(241mg,0.80mmol)溶于dmf(12ml)，依次加入二苯基(三氟甲基)锍三氟甲磺酸盐(388mg,0.96mmol)，铜粉(152mg,2.40mmol)。氮气保护下，将反应液加热至60℃反应16小时。反应结束后，将反应液降温至室温，加入乙酸乙酯(80ml)。过滤除去固体，滤液用饱和盐水(2x50ml)洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)分离纯化后得到3-(三氟甲基)-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(125mg,淡黄色固体)，收率:64％。
[0579]
ms m/z(esi):244.1[m+1]
+
。
[0580]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.67(s,1h),8.21(s,1h),7.94(dd,j＝8.4,1.2hz,1h),
7.79(d,j＝8.8hz,1h),7.70(d,j＝1.6hz,1h),3.96(s,3h).
[0581]
19
f nmr(400mhz,cdcl3)δ-57.46.
[0582]
第四步
[0583]
3-(三氟甲基)-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}吲哚-6-甲酸甲酯的制备
[0584]
将3-(三氟甲基)-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(117mg,0.48mmol)溶于dmf(5ml)。冰浴下降温至0℃，加入氢化钠(60％,38mg,0.96mmol)。反应液于0℃反应30分钟后，加入2-(三甲基硅烷基)乙氧甲基氯(120mg,0.72mmol)。反应液于25℃再反应1小时。反应结束后，将反应液泼入冷饱和氯化铵溶液(30ml)，乙酸乙酯(2x40ml)萃取。有机相合并，饱和盐水(50ml)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到3-(三氟甲基)-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}吲哚-6-甲酸甲酯(179mg,淡黄色油状物)，收率:70％。
[0585]
ms m/z(esi):374.2[m+1]
+
。
[0586]
第五步
[0587]
3-(三氟甲基)-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}吲哚-6-甲酸的制备
[0588]
将3-(三氟甲基)-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}吲哚-6-甲酸甲酯(179mg,0.48mmol)溶于甲醇(4ml)，加入氢氧化钠(240mg,6mmol)水(1.5ml)溶液。反应液加热至60℃反应2小时。反应结束后，将反应液降温至室温。加水(25ml)，用2m hcl调节ph至5。乙酸乙酯(2x40ml)萃取，有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(58％乙腈/水)分离纯化后得到3-(三氟甲基)-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}吲哚-6-甲酸(159mg,淡黄色固体)，收率:91％。
[0589]
ms m/z(esi):358.1[m+1]
+
。
[0590]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.37(s,1h),8.03(dd,j＝8.4,1.2hz,1h),7.82(d,j＝8.4hz,1h),7.69(d,j＝1.2hz,1h),5.57(s,2h),3.53(t,j＝8.0hz,2h),0.92(t,j＝8.0hz,2h),-0.04(s,9h).
[0591]
第六步
[0592]
(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1h-吲哚-6-基)甲酮的制备
[0593]
将3-(三氟甲基)-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}吲哚-6-甲酸(36mg,0.10mmol)溶于dmf(2ml)，依次加入diea(32mg,0.25mmol)，hatu(46mg,0.12mmol)，3-甲基-5-[(8r)-8-甲基-5h，6h，7h，8h-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基]-1,2,4-噻二唑(24mg,0.10mmol)。反应液于25℃反应3小时。反应结束后，用水(20ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x30ml)萃取。将有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(61％乙腈/水)纯化后得到(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1h-吲哚-6-基)甲酮(30mg,白色固体)，产率:49％。
[0594]
ms m/z(esi):578.2[m+1]
+
。
[0595]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.70(d,j＝7.6hz,1h),7.57(d,j＝8.4hz,1h),7.53(s,1h),7.47(t,j＝7.6hz,1h),7.34(t,j＝7.6hz,1h),6.25-6.19(m,1h),5.07-5.00(m,2h),4.39(br,1h),3.58(br,1h),2.75(s,3h),1.90(br,3h).
[0596]
第七步
[0597]
(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(3-(三氟甲基)-1h-吲哚-6-基)甲酮的制备
[0598]
将(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1h-吲哚-6-基)甲酮(24mg,0.04mmol)加入四丁基氟化铵(1m,2ml)四氢呋喃溶液中。反应液于25℃反应24小时。反应结束后，向反应液中加入饱和氯化铵(50ml)，乙酸乙酯(2x35ml)萃取。有机相合并，饱和氯化铵(4x60ml)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(42％乙腈/水)分离，然后制备色谱纯化后得到(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(3-(三氟甲基)-1h-吲哚-6-基)甲酮(5.7mg,白色固体)，产率:32％。
[0599]
ms m/z(esi):448.1[m+1]
+
。
[0600]
hplc:99.54％(214nm),98.87％(254nm).
[0601]1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.86(d,j＝1.2hz,1h),7.79(d,j＝8.4hz,1h),7.70(s,1h),7.35(dd,j＝8.4,1.2hz,1h),5.90(br,1h),4.62(s,1h),4.43-4.36(m,2h),3.76-3.70(m,1h),2.72(s,3h),1.77(d,j＝6.8hz,3h).
[0602]
19
f nmr(400mhz,cd3od)δ-58.39.
[0603]
实施例35
[0604]
(r)-(4-氟-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0605][0606]
将4-氟吲哚-6-甲酸(35mg,0.20mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(2ml)并向其中依次加入(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(30mg,0.10mmol)，n,n-二异丙基乙胺(50mg,0.39mmol)和hatu(74mg,0.20mmol)。反应液在25℃反应2小时。用lcms监测反应。完成后，向反应液中加入水(50ml)，然后用乙酸乙酯(2x50ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩。通过反相色谱柱(48％乙腈/水)纯化得到(r)-(4-氟-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(22.74mg,白色固体)，收率：45％。
[0607]
ms m/z(esi):398.1[m+h]
+
.
[0608]1h nmr(400mhz,dmso)δ11.69(s,1h),7.55(d,j＝2.8hz,1h),7.43(s,1h),6.98-6.6.95(m,1h),6.58(d,j＝2.8hz,1h),5.72(s,1h),4.69(d,j＝10.0hz,1h),4.36-4.29(m,1h),4.24(s,1h),3.64(t,j＝11.2hz,1h),2.70(s,3h),1.64(d,j＝6.8hz,3h).
[0609]
19
f nmr(376mhz,dmso)δ-121.52.
[0610]
实施例36
[0611]
(r)-(1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲硫酮
[0612][0613]
(r)-(1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲硫酮的制备
[0614]
将(r)-(1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(42mg,0.11mmol)溶于甲苯(10ml)，加入劳森试剂(53mg,0.13mmol)。将反应液加热至110℃反应3小时。反应结束后，降温至室温并浓缩。向残留物中加入饱和碳酸氢钠(30ml)，乙酸乙酯(2x40ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(42％乙腈/水)纯化后得到(r)-(1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲硫酮(10.8mg,黄色固体)，收率:25％。
[0615]
ms m/z(esi):396.1[m+1]
+
。
[0616]
hplc:100％(214nm),100％(254nm).
[0617]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.47(s,1h),7.64(d,j＝8.0hz,1h),7.46(s,1h),7.34-7.29(m,1h),7.02(d,j＝8.0hz,1h),6.61-6.55(m,1h),5.94(br,1h),4.92(br,1h),4.49(br,2h),3.72(br,1h),2.72(s,3h),1.84(br,3h).
[0618]
实施例37
[0619]
(r)-(1h-苯并[d]咪唑-2-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0620][0621]
第一步
[0622]
(2r)-2-甲基-3-氧哌嗪-1-基甲酸叔丁酯的制备
[0623]
将(3r)-3-甲基哌嗪-2-酮(5.50g,48.18mmol)溶于二氯甲烷(30ml)，依次加入二碳酸二叔丁酯(15.77g,72.28mmol)，三乙胺(19.50g,192.76mmol)。反应液于室温反应2小时。反应结束后，将反应液浓缩。残留物用反相柱(乙腈/水＝25/75)得到(2r)-2-甲基-3-氧哌嗪-1-基甲酸叔丁酯(8.20g,白色固体)，收率：75％。
[0624]
ms m/z(esi):237.2[m+1]
+
。
[0625]
第二步
[0626]
(2r)-3-乙氧基-2-甲基-5,6-二氢-2h-吡嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
[0627]
将(2r)-2-甲基-3-氧哌嗪-1-基甲酸叔丁酯(1.6g,7.47mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，依次加入碳酸钠(1.98g,18.68mmol)，三乙基氧翁四氟硼酸(2.13g,11.21mmol)。反
应液于室温反应1小时。反应结束后，向反应液中加入饱和盐水(30ml)，二氯甲烷(2x20ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到(2r)-3-乙氧基-2-甲基-5,6-二氢-2h-吡嗪-1-甲酸叔丁酯(1.20g,淡黄色油状物)，收率：67％。
[0628]
ms m/z(esi):243.1[m+1]
+
。
[0629]
第三步
[0630]
(8r)-8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5h，6h，8h-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7-甲酸叔丁酯的制备
[0631]
将粗品(2r)-3-乙氧基-2-甲基-5,6-二氢-2h-吡嗪-1-甲酸叔丁酯(1.84g,7.59mmol)溶于甲醇(20ml)，加入3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-碳酰肼(1.20g,7.59mmol)。将反应液加热至85℃反应16小时。反应结束后，反应液降至室温并浓缩。残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝50/50)分离纯化得到(8r)-8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5h，6h，8h-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7-甲酸叔丁酯(800mg,白色固体)，收率：30％。
[0632]
ms m/z(esi):337.2[m+1]
+
。
[0633]
第四步
[0634]
3-甲基-5-[(8r)-8-甲基-5h，6h，7h，8h-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基]-1,2,4-噻二唑的制备
[0635]
将(8r)-8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5h，6h，8h-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7-甲酸叔丁盐(700mg,2.07mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，加入三氟乙酸(6ml)。反应液于室温反应5小时。反应结束后，将反应液浓缩。残留物溶于二氯甲烷(80ml)，饱和碳酸氢钠(30ml)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩得到3-甲基-5-[(8r)-8-甲基-5h,6h,7h,8h-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基]-1,2,4-噻二唑(467mg,白色固体)，收率：86％。
[0636]
ms m/z(esi):237.2(m+1)。
[0637]
第五步
[0638]
(r)-(1h-苯并[d]咪唑-2-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0639]
将(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(30mg,0.13mmol)溶于dmf(5ml)，依次加入1h-1,3-苯并二唑-2-甲酸(32mg,0.20mmol)，hatu(54mg,0.14mmol)，三乙胺(53mg,0.52mmol)。反应液于室温反应30分钟。反应结束后，加入饱和盐水(20ml)淬灭反应，二氯甲烷(3x10ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(乙腈/水＝43/57)分离纯化得到r)-(1h-苯并[d]咪唑-2-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(30.4mg,白色固体)，收率：62％。
[0640]
ms m/z(esi):381.2[m+1]
+
。
[0641]1hnmr(400mhz,cdcl3)δ13.34(s,1h),7.83(s,1h),7.58(s,1h),7.39-7.35(m,2h),6.25-5.96(m,1h),4.96-4.83(m,2h),4.46-4.19(m,1h),3.62-3.56(m,1h),2.73(s,3h),1.84-1.69(m,3h).
[0642]
实施例38
[0643]
(r)-(7-氯-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0644][0645]
第一步
[0646]
7-氯-1h-吲哚-6-甲酸的制备
[0647]
将化合物2-氯-3-硝基苯甲酸(1.0g,0.005mol)溶于无水四氢呋喃(40ml)中，用干冰乙醇浴将反应物冷却至-45℃并加入乙烯基溴化镁(0.66g,0.005mol)，将反应液升温至室温并搅拌过夜。在0℃下加入nh4cl饱和溶液，反应液搅拌1小时后用乙酸乙酯萃取(3x20ml)，水层用2m hcl溶液酸化至ph＝2,将析出的固体过滤得到7-氯-1h-吲哚-6-甲酸(600mg,淡棕色固体)，无需进一步纯化可以直接用于下一步，收率：56％。
[0648]
ms m/z(esi):196.1[m+h]
+
.
[0649]
第二步
[0650]
7-氯-1h-吲哚-6-甲酸甲酯的制备
[0651]
将化合物7-氯-1h-吲哚-6-甲酸(600mg,3.07mmol)和硫酸(301mg,3.07mmol)溶于甲醇(20ml)中，将反应液升温至60℃并搅拌16小时。反应液用饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)淬灭，再用乙酸乙酯萃取(3x20ml)，饱和食盐水洗(3x10ml)，有机相浓缩得到的残留物用柱层析色谱柱(ea/pe＝1/10,v/v)纯化后得到7-氯-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(300mg,淡黄色固体)，收率：44％。
[0652]
ms m/z(esi):210.1[m+h]
+
.
[0653]
第三步
[0654]
7-氯-1h-吲哚-6-甲酸的制备
[0655]
将7-氯-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(50mg,0.24mmol)溶于meoh/h2o(4ml，v/v:5/1)，加入氢氧化钠(28.8mg,0.72mmol)，将反应液升温至60℃并搅拌2小时。反应液用2m hcl溶液酸化至ph＝2,再用乙酸乙酯萃取(3x20ml)，饱和食盐水洗(10ml)，浓缩得到7-氯-1h-吲哚-6-甲酸(40mg,白色固体)，无需进一步纯化可以直接用于下一步。
[0656]
ms m/z(esi):196.1[m+h]
+
.
[0657]
第四步
[0658]
(r)-(7-氯-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0659]
将7-氯-1h-吲哚-6-甲酸(25.4mg,0.13mmol)溶于dmf(3ml)，加入n,n-二异丙基乙胺(28.8mg,0.72mmol)，hatu(98.9mg,0.26mmol)和(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(30mg,0.13mmol)，反应液在25℃搅拌2小时。反应液加入水(20ml)淬灭，乙酸乙酯萃取(3x20ml)，饱和食盐水洗(20ml)，浓缩得到的残留物用pre-hplc(乙腈/水)纯化后得到(r)-(7-氯-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(10.4mg,白色
固体)，收率：19％。
[0660]
ms m/z(esi):414.1[m+h]
+
.
[0661]
hplc:97.88％(214nm),97.26％(254nm).
[0662]1h nmr(400mhz,dmso)δ11.73(s,1h),7.63(d,j＝8.1hz,1h),7.53(d,j＝2.2hz,1h),7.12(d,j＝8.0hz,1h),6.62(s,1h),6.03
–
5.94(m,1h),4.70
–
4.54(m,1h),4.22
–
4.09(m,1h),3.69(d,j＝13.6hz,2h),2.77
–
2.63(m,3h),1.725-1.45(m,3h).
[0663]
实施例39
[0664]
(r)-(7-甲基-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0665][0666]
第一步
[0667]
3-氨基-4-[2,2-二甲氧基-1-(甲硫基)乙基]-2-甲基苯甲酸甲酯的制备
[0668]
将3-氨基-2-甲基苯甲酸甲酯(661mg,4.00mmol)，and 1,1-二甲氧基-2-(甲硫基)乙烷(545mg,4.00mmol)溶于二氯甲烷(10ml)。降温至-30℃，5分钟内将ncs(534mg,4.00mmol)分批加入，然后2分钟内将三乙胺(405mg,4.00mmol)滴加至反应液中。该温度下反应5分钟后，将反应液加热至37℃反应4小时。反应结束后，浓缩得到粗品3-氨基-4-[2,2-二甲氧基-1-(甲硫基)乙基]-2-甲基苯甲酸甲酯(1.20g,棕色固体)，收率：50％。
[0669]
ms m/z(esi):300.1(m+1)。
[0670]
第二步
[0671]
7-甲基-3-(甲硫基)-1h-吲哚-6-甲酸甲酯的制备
[0672]
将第一步得到的浓缩得到粗品3-氨基-4-[2,2-二甲氧基-1-(甲基磺胺基)乙基]-2-甲基苯甲酸甲酯(1.20g,4.00mmol)溶于四氢呋喃(30ml)，加入盐酸(2m,30ml)。反应液于25℃反应4小时。反应结束后，向反应液中加水(50ml)，乙酸乙酯(2x60ml)萃取。有机相合并，饱和碳酸氢钠饱(50ml)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(52％乙腈/水)纯化后得到7-甲基-3-(甲硫基)-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(213mg,黄色固体)，收率:22％。
[0673]
ms m/z(esi):236.1[m+1]
+
。
[0674]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.42(s,1h),7.81(d,j＝8.4hz,1h),7.62(d,j＝8.4hz,1h),7.45(d,j＝2.8hz,1h),3.92(s,3h),2.77(s,3h),2.37(s,3h).
[0675]
第三步
[0676]
7-甲基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯的制备
[0677]
将7-甲基-3-(甲硫基)-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(210mg,0.89mmol)溶于乙醇(10ml)，加入雷尼镍(1.00g)。反应液于25℃反应4小时。反应结束后，过滤除去雷尼镍，滤液浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(45％二氯甲烷/石油醚)纯化后得到7-甲基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯
(123mg,白色固体)，收率:72％。
[0678]
ms m/z(esi):190.1[m+1]
+
。
[0679]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.36(s,1h),7.74(d,j＝8.4hz,1h),7.50(d,j＝8.4hz,1h),7.40-7.33(m,1h),6.59(dd,j＝3.2,2.0hz,1h),3.91(s,3h),2.79(s,3h).
[0680]
第四步
[0681]
7-甲基-1h-吲哚-6-甲酸的制备
[0682]
将7-甲基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(110mg,0.58mmol)溶于甲醇(6ml)，加入氢氧化钠(320mg,8mmol)的水(2ml)溶液。反应液加热至60℃反应2小时。反应结束后，将反应液降至室温，加水(25ml)，用2m盐酸调节ph至5。乙酸乙酯(2x40ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到7-甲基-1h-吲哚-6-甲酸(101mg,黄色固体)，收率:98％。
[0683]
ms m/z(esi):176.1[m+1]
+
。
[0684]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.35(s,1h),11.39(s,1h),7.54(d,j＝8.4hz,1h),7.51(t,j＝2.8hz,1h),7.40(d,j＝8.4hz,1h),6.49(dd,j＝2.8,2.0hz,1h),2.74(s,3h).
[0685]
第五步
[0686]
(r)-(7-甲基-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0687]
将7-甲基-1h-吲哚-6-甲酸(23mg,0.13mmol)溶于dmf(2ml)，依次加入diea(42mg,0.33mmol)，hatu(59mg,0.16mmol)，3-甲基-5-[(8r)-8-甲基-5h，6h，7h，8h-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基]-1,2,4-噻二唑(31mg,0.13mmol)。反应液于25℃反应16小时。反应结束后，用盐水(40ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x50ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(38％乙腈/水)纯化后得到(r)-(7-甲基-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(22.8mg,白色固体)，收率:45％。
[0688]
ms m/z(esi):394.1[m+1]
+
。
[0689]
hplc:100％(214nm),100％(254nm).
[0690]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.32(s,1h),7.53-7.41(m,2h),7.03-6.82(m,1h),6.54-6.46(m,1h),6.09-5.90(m,1h),5.13-4.76(m,1h),4.70-4.52(m,1h),4.19(br,1h),3.69-3.60(m,1h),2.75-2.63(m,3h),2.42(s,3h),1.75-1.45(m,3h).
[0691]
实施例40
[0692]
(r)-(7-氟-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0693][0694]
将7-氟-1h-吲哚-6-甲酸(40mg,0.23mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(3ml)并向其中依次加入(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,
4-噻二唑094b(18mg,0.080mmol)，n,n-二异丙基乙胺(58mg,0.45mmol)和hatu(86mg,0.23mmol)。反应液在25℃反应6小时。用lcms监测反应。完成后，向反应液中加入水(50ml)，然后用乙酸乙酯(2x50ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩。通过反相色谱柱(42％乙腈/水)纯化得到(r)-(7-氟-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(28.04mg,白色固体)，收率：32％。
[0695]
ms m/z(esi):398.1[m+h]
+
.
[0696]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ9.16(s,1h),7.47(d,j＝8.0hz,1h),7.35(s,1h),7.05(s,1h),6.61(d,j＝2.0hz,1h),5.40-5.19(m,1h),4.90(br,s,1h),4.27-4.09(m,2h),3.66-3.47(m,1h),2.71(s,3h),1.78(br,s,3h).
[0697]
19
f nmr(376mhz,cdcl3)δ-136.16.
[0698]
实施例41
[0699]
(r)-(7-甲氧基-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮
[0700][0701]
第一步
[0702]
2-甲氧基-4-甲基苯甲酸甲酯的制备
[0703]
将2-羟基-4-甲基苯甲酸(10g,0.06mol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(100ml)，然后依次加入碳酸钾(13.6g,0.10mol)和碘甲烷(18.6g,0.13mol)，在室温下搅拌8小时。用300ml乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)分离纯化后得到2-甲氧基-4-甲基苯甲酸甲酯(6.5g，淡黄色的油状)，收率：50％。
[0704]
ms m/z.(esi):181.2[m+h]
+
。
[0705]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.71(d,j＝8.4hz,1h),6.79-6.75(m,2h),3.88(s,3h),3.86(d,j＝0.4hz,3h),2.37(s,3h).
[0706]
第二步
[0707]
5-溴-2-甲氧基-4-甲基苯甲酸甲酯的制备
[0708]
将2-甲氧基-4-甲基苯甲酸甲酯(6.0g,0.03mol)溶于三氯甲烷(200ml)，然后在0℃条件下，滴加液溴(5.85g,0.04mol)。加料结束后，在室温下搅拌4小时。用200ml硫代硫酸钠溶液萃灭，200ml二氯甲烷萃取，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)分离纯化后得到5-溴-2-甲氧基-4-甲基苯甲酸甲酯(4.8g,白色固体)，收率：53％。
[0709]
ms m/z.(esi):259.0[m+h]
+
。
[0710]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.96(s,1h),6.84(s,1h),3.88(s,3h),3.86(s,3h),2.41
(s,3h).
[0711]
第三步
[0712]
5-溴-2-甲氧基-4-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯的制备
[0713]
将5-溴-2-甲氧基-4-甲基苯甲酸甲酯(4.6g,0.02mmol)溶于60ml浓硫酸中，在0℃条件下，缓慢滴加浓硝酸(0.8ml)，0℃下搅拌2小时。反应液用300ml水和200ml饱和碳酸氢钠溶液萃灭，在用200ml乙酸乙酯萃取，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)分离纯化后得到5-溴-2-甲氧基-4-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯(3g,白色固体)，收率：53％。
[0714]
ms m/z.(esi):304.0[m+h]
+
。
[0715]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.18(s,1h),3.94(s,3h),3.92(s,3h),2.36(s,3h).
[0716]
第四步
[0717]
(e)-5-溴-4-(2-(二甲氨基)乙烯基)-2-甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯的制备
[0718]
将5-溴-2-甲氧基-4-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯(2.9g,0.01mol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(20ml)，然后滴加n,n-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(1.13g,0.01mol).在110℃条件下搅拌16小时。用乙酸乙酯(50ml)萃取，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩得到(e)-5-溴-4-(2-(二甲氨基)乙烯基)-2-甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯(3g,黄色液体)，收率：79％。
[0719]
ms m/z.(esi):359.0[m+h]
+
。
[0720]
第五步
[0721]
4-溴-7-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯的制备
[0722]
将(e)-5-溴-4-(2-(二甲氨基)乙烯基)-2-甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯(3g,0.008mol)溶于四氢呋喃(30ml)和甲醇(30ml)，然后加入雷尼镍(0.49g)和水合肼(0.54g,0.017mol)。在50℃条件下搅拌4小时。抽滤，浓缩。再用二氯甲烷(50ml)萃取，饱和氯化钠溶液，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝4/1)分离纯化后得到4-溴-7-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(1g,灰色固体)，收率：39％。
[0723]
ms m/z.(esi):284.1[m+h]
+
。
[0724]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.89(s,1h),7.82(s,1h),7.38(t,j＝2.8hz,1h),6.61(dd,j＝2.8,2.4hz,1h),4.03(s,3h),3.95(s,3h).
[0725]
第六步
[0726]
7-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯的制备
[0727]
将-溴-7-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(900mg,3.17mmol)溶于甲醇(30ml)，然后加入钯碳(169mg,1.58mmol)和三乙胺(320mg,3.17mmol)。在氢气条件下，室温搅拌16小时。抽滤，浓缩。再用二氯甲烷(30ml)萃取，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)分离纯化后得到7-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(460mg,白色固体)，收率：64％。
[0728]
ms m/z.(esi):206.1[m+h]
+
。
[0729]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.69(s,1h),7.64(d,j＝8.4hz,1h),7.38(d,j＝8.4hz,1h),7.33(t,j＝2.8hz,1h),6.58(dd,j＝3.2,2.4hz,1h),4.04(s,3h),3.95(s,3h).
[0730]
第七步
[0731]
7-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸制备
[0732]
将7-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸甲酯(130mg,0.63mmol)溶于8ml甲醇/水(3:1),然后加入氢氧化锂(202mg,8mmol)，60℃搅拌2小时。反应液加入20ml水，水相用2摩尔盐酸调节ph为5，乙酸乙酯(40ml)萃取，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩得到7-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸(110mg,白色固体)，收率：86％。
[0733]
ms m/z.(esi):192.1[m+h]
+
。
[0734]1h nmr(400mhz,dmso-d6
)δ12.38(s,1h),11.59(s,1h),7.47(t,j＝2.8hz,1h),7.40(d,j＝8.4hz,1h),7.31(d,j＝8.4hz,1h),6.50(dd,j＝2.8,2.0hz,1h),3.92(s,3h).
[0735]
第八步
[0736]
(r)-(7-甲氧基-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮的制备
[0737]
将7-甲氧基-1h-吲哚-6-甲酸(40mg,0.21mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(3ml)，然后加入(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基)-1,2,4-噻二唑(49mg,0.21mmol)，n、n-二异丙基乙胺(68mg,0.53mmol)和o-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸盐(49mg,0.21mmol)。室温下搅拌16小时，用乙酸乙酯(30ml)萃取，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩。将得到的残留物用反相柱(40％乙腈/水)纯化后得到(r)-(7-甲氧基-1h-吲哚-6-基)(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)甲酮(50mg,白色固体)，收率：58％。
[0738]
ms m/z.(esi):410.1[m+h]
+
。
[0739]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.63(s,1h),7.44(d,j＝8.0hz,1h),7.30(s,1h),7.01(dd,j＝13.8,7.6hz,1h),6.60(s,1h),6.42-6.16(m,1h),5.27(d,j＝42.8hz,1h),5.02-4.68(m,1h),4.45-4.20(m,1h),3.95(d,j＝35.7hz,3h),3.71-3.35(m,1h),2.79-2.63(m,3h),1.79(d,j＝15.8hz,3h).
[0740]
hplc:254nm(100％),214nm(100％).
[0741]
实施例42
[0742]
(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-基)甲酮
[0743][0744]
第一步
[0745]
6-氰基-7-氮杂吲哚的制备
[0746]
将6-溴-7-氮杂吲哚(985mg,5.00mmol)溶于dmf(15ml)，依次加入氰化锌(411mg,3.50mmol)，锌粉(33mg,0.50mmol)，pd(dppf)cl2(183mg,0.25mmol)。氮气保护下，将反应液加热至140℃反应4小时。反应结束后，反应液降温至室温，加水(120ml)，乙酸乙酯(2x80ml)萃取。有机相合并，饱和盐水(2x80ml)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(30％乙酸乙酯/石油醚)纯化后得到6-氰基-7-氮杂吲哚(536mg,白色固体)，收率:
74％。
[0747]
ms m/z(esi):144.1[m+1]
+
。
[0748]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ11.31(s,1h),8.08(dd,j＝8.0,0.8hz,1h),7.72(dd,j＝3.6,2.8hz,1h),7.52(d,j＝8.0hz,1h),6.65(dd,j＝3.6,2.0hz,1h).
[0749]
第二步
[0750]
7-氮杂吲哚-6-甲酸的制备
[0751]
将6-氰基-7-氮杂吲哚(358mg,2.50mmol)加入氢氧化钠水溶液(2m,6ml)中。反应液加热至100℃反应3小时。反应结束后，反应液降至室温，加水(25ml)。用2m盐酸调节ph至6～7，析出固体，过滤收集固体。滤液用二氯甲/甲醇(10/1,4x60ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将两部分产品合并得到7-氮杂吲哚-6-甲酸(400mg,淡黄色固体)，收率:98％。
[0752]
ms m/z(esi):163.1[m+1]
+
。
[0753]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.81(s,1h),12.08(s,1h),8.09(d,j＝8.0hz,1h),7.82(d,j＝8.4hz,1h),7.77-7.69(m,1h),6.57(dd,j＝3.2,1.6hz,1h).
[0754]
第三步
[0755]
(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-基)甲酮的制备
[0756]
将7-氮杂吲哚-6-甲酸(21mg,0.13mmol)溶于dmf(2.5ml)，依次加入diea(42mg,0.33mmol)，hatu(59mg,0.16mmol)以及3-甲基-5-[(8r)-8-甲基-5h，6h，7h，8h-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-3-基]-1,2,4-噻二唑(31mg,0.13mmol)。反应液于25℃反应3小时。反应结束后，用盐水(40ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x50ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(34％乙腈/水)纯化后得到(r)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-基)甲酮(15.6mg,白色固体)，收率:30％。
[0757]
ms m/z(esi):381.1[m+1]
+
。
[0758]
hplc:95.28％(214nm),98.34％(254nm).
[0759]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ9.00(s,1h),8.06(d,j＝8.4hz,1h),7.63(d,j＝8.0hz,1h),7.51-7.42(m,1h),6.65-6.54(m,1h),6.28(br,1h),5.20-4.75(m,2h),4.59-4.30(m,1h),3.65-3.40(m,1h),2.75(s,3h),1.83(d,j＝6.8hz,3h).
[0760]
实施例43
[0761]
(r)-(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-8-甲基-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(4-氟苯基)甲酮
[0762][0763]
第一步
[0764]
(2r)-2-甲基-3-氧哌嗪-1-甲酸苄酯的制备
[0765]
将(r)-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-1(2h)-甲酸苄酯(2.00g,8.12mmol)溶于1,2-二氯乙烷(40ml)，依次加入三乙基硅烷(9.42g,81.20mmol)以及三氟乙酸(7.41g,
64.96mmol)。反应液回流反应40小时。反应结束后，降温至室温并旋蒸除去溶剂。向残留物中加入乙酸乙酯(20ml)，然后加入饱和碳酸氢钠溶液(20ml)中和残留的三氟乙酸，乙酸乙酯(3x20ml)萃取。合并有机相，饱和盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱(乙酸乙酯/石油醚＝1/1)分离纯化得到(2r)-2-甲基-3-氧哌嗪-1-甲酸苄酯(1.6g,白色固体)，收率：76％。
[0766]
ms m/z(esi):249.2[m+1]
+
。
[0767]
第二步
[0768]
(2r)-3-乙氧基-2-甲基-5,6-二氢-2h-吡嗪-1-甲酸苄酯的制备
[0769]
将(2r)-2-甲基-3-氧哌嗪-1-甲酸苄酯(1.61g,6.5mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，依次加入碳酸钠(1.72g,16.22mmol)，三乙基氧翁四氟硼酸(1.85g,9.73mmol)。反应液于室温反应1小时。反应结束后，向反应液中加入饱和盐水(30ml)，二氯甲烷(2
×
20ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到粗品(2r)-3-乙氧基-2-甲基-5,6-二氢-2h-吡嗪-1-甲酸苄酯(1.2g,淡黄色油状物)，收率：60％。
[0770]
ms m/z(esi):277.3[m+1]
+
。
[0771]
第三步
[0772]
(r)-3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-8-甲基-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-甲酸苄酯的制备
[0773]
将粗品(2r)-3-乙氧基-2-甲基-5,6-二氢-2h-吡嗪-1-甲酸苄酯(200mg,0.72mmol)溶于乙醇(10ml)，加入4,5-二甲基噻唑-2-碳酰肼(125mg,0.72mmol)。将反应液加热至85℃反应16小时。反应结束后，反应液降至室温并浓缩。残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝35/65)分离纯化得到(r)-3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-8-甲基-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-甲酸苄酯(200mg,白色固体)，收率：69％。
[0774]
ms m/z(esi):384.3[m+1]
+
。
[0775]
第四步
[0776]
(r)-4,5-二甲基-2-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)噻唑的制备
[0777]
将(r)-3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-8-甲基-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-甲酸苄酯(190mg,0.50mmol)溶于二氯甲烷(15ml)，加入三甲基碘硅烷(1.00g,5mmol)。反应液于室温反应16小时。反应结束后，缓慢加入甲醇(20ml)淬灭反应。旋蒸除去有机溶剂得到(r)-4,5-二甲基-2-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)噻唑(65mg,橙色固体)，收率：47％。
[0778]
ms m/z(esi):250.2(m+1)。
[0779]
第五步
[0780]
(r)-(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-8-甲基-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(4-氟苯基)甲酮的制备
[0781]
将(r)-4,5-二甲基-2-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)噻唑(45mg,0.18mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，依次加入三乙胺(81mg,0.54mmol)，4-氟苯甲酰氯(29mg,0.18mmol)。反应液于室温反应20分钟。反应结束后，加入饱和盐水(20ml)淬灭反应，二氯甲烷(3x10ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用
反相柱(乙腈/水＝43/57)分离纯化得到(r)-(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-8-甲基-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(4-氟苯基)甲酮(56.0mg,白色固体)，收率：84％。
[0782]
ms m/z(esi):372.2[m+1]
+
。
[0783]1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.44-7.48(m,2h),7.13
–
7.18(m,2h),5.72(s,1h),4.89-4.93(m,1h),4.55(s,1h),4.19-4.24(m,1h),3.50(s,1h),2.42(s,3h),2.36(s,3h),1.72(d,j＝6.9hz,3h),
[0784]1fnmr(376mhz,cdcl3)δ-108.57(s,1h).
[0785]
实施例44
[0786]
(r)-(3-(5,6-二氢-4h-环戊[d]噻唑-2-基)-8-甲基-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7(8)-基)(4-氟苯基)甲酮
[0787][0788]
第一步
[0789]
5,6-二氢-4h-环戊[d]噻唑-2-甲酸乙酯的制备
[0790]
将硫代草氨酸乙酯(1.0g,7.51mmol)和2-氯环戊酮(934mg,0.79mmol)溶于甲苯(20ml)中，110℃反应4h。将反应液用乙酸乙酯(20ml)稀释，用饱和碳酸氢钠(30ml)和饱和食盐水(30ml)溶液水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。将所得残留物用柱层析(pe:ea＝1:4)纯化得5,6-二氢-4h-环戊[d]噻唑-2-甲酸乙酯(598mg，淡黄色固体)，产率：38％。
[0791]
ms m/z(esi):198.2[m+h]
+
。
[0792]
第二步
[0793]
5,6-二氢-4h-环戊[d]噻唑-2-碳酰肼的制备
[0794]
将化合物029b(548mg,2.78mmol)溶于乙醇(20ml)中，然后加入水合肼(208mg,4.17mmol)，室温反应1h。将反应液减压浓缩，乙酸乙酯(20ml)稀释，水洗(2
×
30ml)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。将所得残留物用柱层析(二氯甲烷:甲醇＝1:9)纯化得5,6-二氢-4h-环戊[d]噻唑-2-碳酰肼(416mg，白色固体)，产率：77％。
[0795]
ms m/z(esi):184.1[m+h]
+
。
[0796]
第三步
[0797]
(r)-3-(5,6-二氢-4h-环戊[d]噻唑-2-基)-8-甲基-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7(8h)-甲酸苄酯的制备
[0798]
将(r)-5-乙氧基-6-甲基-3,6-二氢吡嗪-1(2h)-甲酸苄酯(100mg,0.38mmol)溶于甲醇(5ml)中，然后加入化合物(77mg,0.42mmol)，85℃反应16h。将反应液减压浓缩，所得残余物用柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝1:2)纯化得(r)-3-(5,6-二氢-4h-环戊[d]噻唑-2-基)-8-甲基-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7(8h)-甲酸苄酯(112mg，白色固体)，产率：73％。
[0799]
ms m/z(esi):396.2[m+h]
+
。
[0800]
第四步
[0801]
(r)-2-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-5,6-二氢-4h-环戊[d]噻唑的制备
[0802]
将(r)-3-(5,6-二氢-4h-环戊[d]噻唑-2-基)-8-甲基-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7(8h)-甲酸苄酯(90mg,0.23mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中，然后加入三甲基碘硅烷(460mg,2.3mmol)，室温反应16h。将反应液用甲醇(5ml)淬灭，减压浓缩得(r)-2-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-5,6-二氢-4h-环戊[d]噻唑(60mg，橙色固体)，产率：89％。
[0803]
ms m/z(esi):250.2[m+h]
+
。
[0804]
第五步
[0805]
(r)-(3-(5,6-二氢-4h-环戊[d]噻唑-2-基)-8-甲基-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(4-氟苯基)甲酮的制备
[0806]
将(r)-2-(8-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-3-基)-5,6-二氢-4h-环戊[d]噻唑(60mg,0.23mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中，然后加入三乙胺(103mg,0.69mmol)和4-氟苯甲酰氯(36mg,0.23mmol)，室温反应2h。将反应液用水(10ml)淬灭，二氯甲烷(3x10ml)萃取，饱和食盐水溶液水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。将所得残余物用制备色谱纯化得(r)-(3-(5,6-二氢-4h-环戊[d]噻唑-2-基)-8-甲基-5,6-二氢-[1,2,4]三唑[4,3-a]吡嗪-7(8h)-基)(4-氟苯基)甲酮(34mg，白色固体)，产率：39％。
[0807]
ms m/z(esi):384.2[m+h]
+
。
[0808]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.49-7.45(m,2h),7.18-7.14(m,2h),5.79
–
5.75(m,1h),4.99-4.81(m,1h),4.66-4.44(m,1h),4.25-4.20(m,1h),3.55-3.45(m,1h),3.02-2.98(m,2h),2.92-2.87(m,2h),2.63
–
2.52(m,2h),1.76-1.72(m,3h).
[0809]
19
f nmr(376mhz,cdcl3)δ-108.48(s,1h).
[0810]
实施例45和实施例46
[0811]
(4-氟苯基)(4-甲基-1-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,4,6,7-四氢-5h-咪唑并[4,5-c]吡啶-5-基)甲酮
[0812]
(4-氟苯基)(4-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3,4,6,7-四氢-5h-咪唑并[4,5-c]吡啶-5-基)甲酮
[0813][0814]
第一步
[0815]
4-甲基-4,5,6,7-四氢-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶的制备
[0816]
将2-(1h-咪唑-4-基)乙胺(1.20g，10.89mmol)，乙醛(1.20g，27.22mmol)和氢氧化钠(1.10g，27.22mmol)溶解在甲醇(45ml)和水(10ml)的混合溶液中。然后将反应在100℃下搅拌4小时。反应完成后，用盐酸水溶液将溶液酸化至ph小于1，减压除去溶液。然后将残余物在真空下干燥。将所得油状物与甲醇(2
×
50ml)溶解在一起并过滤。减压蒸发除去滤液，残余物在真空下干燥。然后将该残余物悬浮在异丙醇中，并将该悬浮液回流一小时。将其冷却至室温后，将混合物过滤并将沉淀物在真空下干燥后得到4-甲基-4,5,6,7-四氢-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶(1.30g，棕色固体)，产率:70％。
[0817]
ms m/z(esi):138.1[m+1]
+
。
[0818]
第二步
[0819]
(4-氟苯基)(4-甲基-1,4,6,7-四氢基-5h-咪唑[4,5-c]吡啶-5-基)甲酮的制备
[0820]
将4-甲基-4,5,6,7-四氢-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶(800mg，5.8317mmol)溶在二氯甲烷(30ml)中，然后加入dipea(2256mg，17.50mmol)和4-氟苯甲酰氯(1387mg，8.75mmol)。将反应物在25度下搅拌一小时。lcms监测反应完成后。向反应液中加入20ml水，并用二氯甲烷(3x10m)萃取，有机层用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗产物。粗产物经过硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化得到(4-氟苯基)(4-甲基-1,4,6,7-四氢基-5h-咪唑[4,5-c]吡啶-5-基)甲酮(180mg，浅黄色固体)产率：8.4％。
[0821]
ms m/z(esi):260[m+1]
+
。
[0822]
第三步
[0823]
(4-氟苯基)(4-甲基-1-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,4,6,7-四氢-5h-咪唑并[4,5-c]吡啶-5-基)甲酮和(4-氟苯基)(4-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3,4,6,7-四氢-5h-咪唑并[4,5-c]吡啶-5-基)甲酮的制备
[0824]
将(4-氟苯基)(4-甲基-1,4,6,7-四氢基-5h-咪唑[4,5-c]吡啶-5-基)甲酮(130mg，0.5mmol)，5-氯-3-甲基-1,2,4-噻二唑(81mg，0.6mmol)和钠氢(60％油)(30mg，0.75mmol)溶在dmf(3ml)中。反应在25度氮气保护下搅拌4小时，lcms监测反应完成后。向反应中加水20ml，用二氯甲烷(3x20ml)萃取。有机物用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗品，并通过反向柱(乙腈:水＝1/1)和制备(乙腈/0.1三氟乙酸的水溶液)纯化得到(4-氟苯基)(4-甲基-1-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,4,6,7-四氢-5h-咪唑并[4,5-c]吡啶-5-基)甲酮45(14.7mg，白色固体)，产率:8.22％。(4-氟苯基)(4-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3,4,6,7-四氢-5h-咪唑并[4,5-c]吡啶-5-基)甲酮46(54.3mg，白色固体)，产率:30.32％。
[0825]
实施例45：
[0826]
ms m/z(esi):358.2[m+1]
+
。
[0827]
hplc:100％(214nm),100％(254nm).
[0828]1h nmr(400mhz,meod)δ8.48(s,1h),7.51-7.55(m,2h),7.22-7.26(m,2h),6.20-6.29(m,1h),3.87-3.92(m,1h),3.57-3.67(m,1h),2.84-2.94(m,1h),2.67(s,3h),2.39-2.49(m,1h),1.58(d,j＝6.0hz,3h).
[0829]
实施例46：
[0830]
ms m/z(esi):358.2[m+1]
+
。
[0831]
hplc:99.76％(214nm),99.71％(254nm).
[0832]1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.56(s,1h),7.56-7.48(m,2h),7.22-7.26(m,2h),5.50-5.65(m,1h),3.89-4.04(s,1h),3.40-4.54(s,1h),2.97-3.13(m,2h),2.61(s,3h),1.56(d,j＝6.4hz,3h).
[0833]
实施例47
[0834]
(4-氟苯基)(1-甲基-6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3,4-二氢吡咯[1,2-a]吡嗪-2(1h)-基)甲酮
[0835][0836]
第一步
[0837]
1-(5-溴-1h-吡咯-2-基)乙烷-1-酮的制备
[0838]
将1-(1h-吡咯-2-基)乙烷-1-酮(5.00g,45.82mmol)溶于甲醇(70ml)与水(70ml)的混合溶剂中，于冰浴条件下加入溴化钠(5.66g,54.98mmol)，然后缓慢加入oxone(14.65g,23.83mmol)。反应液于25℃反应30分钟。反应结束后，向反应液中加入水(200ml)，用二氯甲烷(2x300ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱[40％乙腈/水(0.05％三氟乙酸)]纯化后得到1-(5-溴-1h-吡咯-2-基)乙烷-1-酮(7.36g,白色固体)，收率:85％。
[0839]
ms m/z(esi):188.1[m+1]
+
。
[0840]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ9.63(br s,1h),7.02-7.01(m,1h),6.90-6.89(m,1h),2.41(s,3h).
[0841]
第二步
[0842]
(2-(2-乙酰基-5-溴-1h-吡咯-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0843]
将1-(5-溴-1h-吡咯-2-基)乙烷-1-酮(3.76g,20.00mmol)与n-boc-乙醇胺(3.29g,20.40mmol)溶于四氢呋喃(50ml)，加入三苯基膦(7.87g,30.00mmol)，然后缓慢加入diad(5.66g,28.00mmol)。反应液于25℃反应30分钟。反应结束后，加水(150ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x150ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(15％乙酸乙酯/石油醚)纯化后得到(2-(2-乙酰基-5-溴-1h-吡咯-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(6.56g,白色固体)，收率:89％。
[0844]
ms m/z(esi):353.0[m+1]
+
。
[0845]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ6.94(d,j＝1.6hz,1h),6.81(d,j＝2.0hz,1h),4.69(br,1h),4.38(t,j＝5.8hz,2h),3.40(t,j＝5.4hz,2h),2.40(s,3h),1.42(s,9h).
[0846]
第三步
[0847]
(2-(2-乙酰基-5-(三丁基锡基)-1h-吡咯-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0848]
将(2-(2-乙酰基-5-溴-1h-吡咯-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(497mg,1.50mmol)溶于二氧六环(12ml)，加入六正丁基二锡(1.04g,1.80mmol)与四(三苯基膦)钯(87mg,0.08mmol)。氮气保护下，反应液加热至90℃反应16小时。反应结束后，降温至室温并浓缩。将得到的残留物用反相柱(100％乙腈/水)纯化后得到(2-(2-乙酰基-5-(三丁基锡基)-1h-吡咯-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(345mg,无色油状物)，收率:42％。
[0849]
ms m/z(esi):453.3[m+1]
+
。
[0850]1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.12-7.08(m,1h),6.87-6.85(m,1h),4.38(t,j＝5.8hz,2h),3.35-3.33(m,2h),2.42(s,3h),1.65-1.46(m,6h),1.39(s,9h),1.36-1.31(m,6h),1.13-0.95(m,6h),0.91(t,j＝7.2hz,9h).
[0851]
第四步
[0852]
(2-(2-乙酰基-5-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吡咯-1-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0853]
将(2-(2-乙酰基-5-(三丁基锡基)-1h-吡咯-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(395mg,0.73mmol)溶于二氧六环(10ml)，加入5-氯-3-甲基-1,2,4-噻二唑(98mg,0.73mmol)与四(三苯基膦)钯(84mg,0.07mmol)。氮气保护下，反应液加热至95℃反应10小时。反应结束后，降温至室温，氟化钾水溶液(1m,20ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x40ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(45％乙酸乙酯/石油醚)纯化后得到(2-(2-乙酰基-5-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吡咯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(130mg,淡黄色固体)，收率:50％。
[0854]
ms m/z(esi):351.2[m+1]
+
。
[0855]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.44(d,j＝1.6hz,1h),7.39(d,j＝1.6hz,1h),4.70(br,1h),4.48(t,j＝5.6hz,2h),3.47(q,j＝6.0hz,2h),2.67(s,3h),2.49(s,3h),1.40(s,9h).
[0856]
第五步
[0857]
1-(1-(2-氨基乙基)-5-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吡咯-2-基)乙-1-酮的制备
[0858]
将叔丁基(2-(2-乙酰基-5-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吡咯-1-基)氨基甲酸乙酯(120mg,0.34mmol)溶于二氯甲烷(5ml)，加入三氟乙酸(1.5ml)。反应液于25℃反应1小时。反应结束后，向反应液中加入饱和碳酸氢钠(30ml)中和三氟乙酸，二氯甲烷(3x50ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到1-(1-(2-氨基乙基)-5-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吡咯-2-基)乙-1-酮(85mg,黄色固体)，收率:95％。
[0859]
ms m/z(esi):251.1[m+1]
+
。
[0860]
第六步
[0861]
3-甲基-5-(1-甲基-1,2,3,4-四氢吡咯[1,2-a]吡嗪-6-基)-1,2,4-噻二唑的制备
[0862]
将1-(1-(2-氨基乙基)-5-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吡咯-2-基)乙-1-酮(85mg,0.34mmol)溶于甲醇(5ml)，加入三乙胺(103mg,1.02mmol)。反应液加热至65℃反应30分钟后，加入硼氢化钠(129mg,3.40mmol)。继续保持65℃反应1小时。反应结束后，反应液降温至室温，冷水(5ml)淬灭。加入饱和碳酸氢钠(20ml)，二氯甲烷(3x40ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(35％乙腈/水)纯化后得到3-甲基-5-(1-甲基-1,2,3,4-四氢吡咯[1,2-a]吡嗪-6-基)-1,2,4-噻二唑(52mg,淡黄色固体)，收率:64％。
[0863]
ms m/z(esi):235.1[m+1]
+
。
[0864]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.21(d,j＝1.6hz,1h),6.32(s,1h),4.13-3.94(m,3h),3.42-3.39(m,1h),3.26-3.19(m,1h),2.65(s,3h),1.49(d,j＝6.4hz,3h).
[0865]
第七步
[0866]
(4-氟苯基)(1-甲基-6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3,4-二氢吡咯[1,2-a]吡嗪-2(1h)-基)甲酮的制备
[0867]
将3-甲基-5-(1-甲基-1,2,3,4-四氢吡咯[1,2-a]吡嗪-6-基)-1,2,4-噻二唑(47mg,0.20mmol)溶于二氯甲烷(4ml)，然后依次加入三乙胺(51mg,0.50mmol)，对氟苯甲酰
氯(41mg,0.26mmol)。反应液于25℃反应20分钟。反应结束后，用饱和碳酸氢钠(20ml)淬灭，二氯甲烷(2x30ml)萃取。将有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(39％乙腈/水)纯化后得到(4-氟苯基)(1-甲基-6-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3,4-二氢吡咯[1,2-a]吡嗪-2(1h)-基)甲酮(49.5mg,淡黄色固体)，产率:69％。
[0868]
ms m/z(esi):357.1[m+1]
+
。
[0869]
hplc:100％(214nm),100％(254nm).
[0870]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.51-7.40(m,2h),7.23(d,j＝1.6hz,1h),7.17-7.13(m,2h),6.32(br,1h),5.45(br,1h),4.40(br,1h),4.15-3.96(m,2h),3.56(br,1h),2.65(s,3h),1.56(d,j＝6.8hz,3h).
[0871]
19
f nmr(376mhz,cdcl3)δ-109.26.
[0872]
实施例48和实施例49
[0873]
(4-氟苯基)(4-甲基-1-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,4,6,7-四氢-5h-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-基)甲酮
[0874]
(4-氟苯基)(4-甲基-2-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-2,4,6,7-四氢-5h-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-基)甲酮
[0875][0876]
第一步
[0877]
4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶的制备
[0878]
将化合物4-氯-1h-吡唑[4,3-c]吡啶(1g，6.51mmol)溶于四氢呋喃(20ml)并冷却到0℃，将氢化钠(520mg，13.02mmol)在5分钟内逐份加入体系中。该反应在0℃搅拌10分钟。5分钟内逐滴加入三甲基氯硅烷(1.6g，9.77mmol)，反应在0℃继续搅拌15分钟。反应结束后，加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，收集有机相，通过乙酸乙酯(3x30ml)进行萃取，收集有机相并用无水硫酸钠干燥，减压浓缩溶剂得到粗产品。粗产品通过柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝3：7)分离提纯得到4-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶(1.60g，淡黄色液体)，产率：78％。
[0879]
ms m/z(esi):284.2[m+1]
+
.
[0880]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.30-8.27(m,1h),8.23-8.22(m,1h),7.50-7.48(m,1h),5.79(s,2h),3.64-3.58(m,2h),0.98-0.90(m,2h),-0.00(s,9h).
[0881]
第二步
[0882]
4-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶的制备在密闭小瓶中，将化合物4-氯-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1h吡唑[4,3-c]吡啶(1g，3.52mmol)和2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三羟甲基核糖酯(884mg，7.04mmol)溶于1，
4-二氧六环和水的混合溶液(10ml，二氧六环：水＝5：1)中，加入1,1'-双(二苯基膦)二茂铁钯(ii)二氯二氯甲烷络合物(143mg，0.18mmol)和碳酸钾(973mg，7.04mmol)。该反应在120℃及微波条件下反应2小时。反应结束后，冷却并旋干溶剂得到粗产品，粗产品通过柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝3：7)分离提纯得到4-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶(580mg，黄色油状液体)，产率：62％。
[0883]
ms m/z(esi):264.2[m+1]
+
.
[0884]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.42(s,1h),7.50(s,1h),7.32(s,1h),5.81(s,2h),3.71-3.57(m,2h),3.02(s,3h),0.95-0.91(m,2h),-0.00(s,9h).
[0885]
第三步
[0886]
5-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-1
–
((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-鎓的制备
[0887]
将化合物4-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶(550mg，2.09mmol)溶于乙腈(15ml)，加入1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(491mg，3.04mmol)。该反应在80℃下搅拌24小时。反应结束后，旋干溶剂得到5-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-1
–
((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-鎓(800mg，棕色固体)，产率：78％。
[0888]
ms m/z(esi):384.2[m+1]
+
.
[0889]
第四步
[0890]
5-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶的制备
[0891]
将化合物5-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-1
–
((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-鎓(500mg，1.3mmol)溶于甲醇(30ml)，加入硼氢化钠(492mg，13mmol)。该反应在室温下搅拌8小时。反应结束后，加入氯化铵溶液(1ml)，通过乙酸乙酯(3x10ml)进行萃取，收集有机相并用饱和食盐水洗涤，收集有机相并用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到粗产品。粗产品通过反相柱(乙腈：水＝9：1)分离提纯得到5-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶(250mg，黄色油状液体)，产率：37％。
[0892]
ms m/z(esi):388.2[m+1]
+
.
[0893]
第五步
[0894]
5-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶的制备
[0895]
将化合物5-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶(250mg，0.65mmol)溶于乙腈(4ml)，加入三氟乙酸(3.7g，32.5mmol)。该反应在室温下搅拌2小时。反应结束后，旋干溶剂得到5-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶(180mg，棕色固体)，产率：75％。
[0896]
ms m/z(esi):258.2[m+1]
+
.
[0897]
第六步
[0898]
5-(5-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-3-甲基-1,2,4-噻二唑和5-(5-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-4,5,6,7-四氢-2h-吡唑并[4,3-c]吡啶-2-基)-3-甲基-1,2,4-噻二唑的制备
[0899]
将化合物5-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶(150mg，0.58mmol)溶于四氢呋喃(20ml)并冷却到0℃，5分钟内逐份加入氢化钠(93mg，2.32mmol)。该反应在0℃下搅拌10分钟。逐滴加入5-氯-3-甲基-1,2,4-噻二唑(94mg，0.70mmol)并在室温下搅拌16小时。反应结束后，利用饱和氯化铵溶液进行淬灭，收集有机相并用乙酸乙酯(2x30ml)萃取，收集有机相并用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到粗产品。粗产品通过柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝3：7)分离提纯得到5-(5-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-3-甲基-1,2,4-噻二唑48g-1和5-(5-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-4,5,6,7-四氢-2h-吡唑并[4,3-c]吡啶-2-基)-3-甲基-1,2,4-噻二唑48g-2的混合物(110mg，淡黄色油状液体)，产率：48％。
[0900]
ms m/z(esi):356.1[m+1]
+
.
[0901]
第七步
[0902]
3-甲基-5-(4-甲基-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-1,2,4-噻二唑和3-甲基-5-(4-甲基-4,5,6,7-四氢-2h-吡唑并[4,3-c]吡啶-2-基)-1,2,4-噻二唑的制备
[0903]
将化合物48g-1和化合物48g-2的混合物(110mg，0.31mmol)溶于三氟乙酸(3ml)，该反应130℃和微波条件下反应6小时。反应结束后，冷却至室温，旋干溶剂得到3-甲基-5-(4-甲基-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)-1,2,4-噻二唑48h-1和3-甲基-5-(4-甲基-4,5,6,7-四氢-2h-吡唑并[4,3-c]吡啶-2-基)-1,2,4-噻二唑48h-2的混合物(75mg，棕色固体)，产率：91％。
[0904]
ms m/z(esi):236.2[m+1]
+
.
[0905]
第八步
[0906]
(4-氟苯基)(4-甲基-1-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,4,6,7-四氢-5h-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-基)甲酮和(4-氟苯基)(4-甲基-2-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-2,4,6,7-四氢-5h-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-基)甲酮的制备
[0907]
将化合物48h-1和化合物48h-2的混合物(70mg，0.30mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，加入n,n-二异丙基乙胺(116mg，0.90mmol)和对氟苯甲酰氯(57mg，0.36mmol)。反应在室温下搅拌1小时。反应结束后，旋干溶剂得到粗产品，粗产品通过反相柱(乙腈/水/0.1％甲酸)提纯分离得到(4-氟苯基)(4-甲基-2-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-2,4,6,7-四氢-5h-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-基)甲酮48(38.6mg，白色固体，产率：36％)和(4-氟苯基)(4-甲基-1-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,4,6,7-四氢-5h-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-基)甲酮49(17mg，白色固体，产率：16％)。
[0908]
实施例48：
[0909]
ms m/z(esi):358.2[m+1]
+
.
[0910]
hplc:100％(214nm),99.82％(254nm).
[0911]1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.31(s,1h),7.54-7.50(m,2h),7.26-7.22(m,2h),5.89-5.69(m,1h),3.03-3.82(m,1h),3.54-3.90(m,1h),2.96-2.81(m,2h),2.55(s,3h),1.55(d,j＝6.8hz,3h).
[0912]
19
f nmr(376mhz,cd3od)δ-112.10.
[0913]
实施例49：
[0914]
ms m/z(esi):358.2[m+1]
+
.
[0915]
hplc:99.77％(214nm),99.81％(254nm).
[0916]1h nmr(400mhz,meod)δ7.79(s,1h),7.54-7.51(m,2h),7.26-7.22(m,2h),5.73-5.58(m,1h),3.97-3.83(m,1h),3.48-3.39(m,2h),3.18-3.06(m,1h),2.55(s,3h),1.53(d,j＝6.8hz,3h).
[0917]
19
f nmr(376mhz,meod)δ-112.04.
[0918]
实施例50
[0919]
(r)-(4-氟苯基)(8-甲基-4-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,8-二氢吡啶[3,4-d]嘧啶-7(6h)-基)甲酮
[0920][0921]
第一步
[0922]
苄基-d-丙氨酸乙酯的制备
[0923]
将d-丙氨酸乙酯(5.51g)溶于乙腈(80ml)中，依次加入苯甲醛(3.18g)，三乙胺(9.09g)和醋酸硼氢化钠(15.9g)。反应液在25℃下反应16小时。反应结束后，将反应液浓缩，加入饱和碳酸氢钠水溶液(300ml)中和，并用二氯甲烷(3x100ml)萃取。有机相合并后饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)分离纯化后得到苄基-d-丙氨酸乙酯(4.48g，无色油状物)，收率：72％。
[0924]
ms m/z(esi):208.3[m+h]
+
。
[0925]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.36-7.34(m,5h),4.68(s,1h),4.20(q,j＝7.1hz,2h),3.86(d,j＝12.8hz,1h),3.76(d,j＝12.8hz,1h),3.47-3.44(m,1h),1.37(d,j＝7.1hz,3h),1.29(t,j＝7.1hz,3h).
[0926]
第二步
[0927]
(r)-4-(苄基(1-乙氧基-1-氧代丙烷-2-基)氨基)丁酸甲酯的制备
[0928]
将苄基-d-丙氨酸乙酯(3.11g,15.0mmol)溶于1，2-二氯乙烷(50ml)中，并加入4-氧代丁酸甲酯(2.61g,22.5mmol)和分子筛(1.5g)。反应液在25℃反应5小时，再加入醋酸硼氢化钠(6.36g,30.0mmol)。反应液在25℃反应16小时。反应结束后将反应液浓缩，将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)分离纯化后得到(r)-4-(苄基(1-乙氧基-1-氧代丙烷-2-基)氨基)丁酸甲酯(2.2g,无色油状物)，收率：48％。
[0929]
ms m/z(esi):308.3[m+h]
+
。
[0930]
第三步
[0931]
(2r)-1-苄基-2-甲基-3-恶哌啶-4-甲酸甲酯的制备
[0932]
将(r)-4-(苄基(1-乙氧基-1-氧代丙烷-2-基)氨基)丁酸甲酯(2.0g,6.51mmol)溶于甲苯(30ml)中，并加入叔丁醇钾(1.61g,14.32mmol)。反应液在20℃反应4小时。反应结束后用2m稀盐酸调节ph值到7～8，并用乙酸乙酯(2x50ml)萃取。有机相合并后饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品(2r)-1-苄基-2-甲基-3-恶哌啶-4-甲酸甲酯(1.6g,橙红色油状物)，收率：94％。该粗品直接用于下一步反应。
[0933]
ms m/z(esi):262.3[m+h]
+
。
[0934]
第四步
[0935]
(r)-7-苄基-8-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶[3,4-d]嘧啶-4(1h)-酮的制备
[0936]
将(2r)-1-苄基-2-甲基-3-恶哌啶-4-甲酸甲酯(1.6g,6.12mmol)溶于20％乙醇钠的乙醇溶液(20ml)，并加入甲脒盐酸盐(1.09g,13.46mmol)。反应液在90℃反应3小时。反应结束后用2m稀盐酸调节ph值到7～8，并用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。有机相合并后饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品(r)-7-苄基-8-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶[3,4-d]嘧啶-4(1h)-酮(900mg,无色油状物)，收率：58％。该粗品直接用于下一步反应。
[0937]
ms m/z(esi):256.3[m+h]
+
。
[0938]
第五步
[0939]
(r)-8-甲基-4-氧代-4,5,6,8-四氢吡啶[3,4-d]嘧啶-7(1h)-甲酸叔丁酯的制备
[0940]
将(r)-7-苄基-8-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶[3,4-d]嘧啶-4(1h)-酮(900mg,3.53mmol)溶于甲醇(30ml)中，加入二碳酸二叔丁酯(1.16g,5.3mmol)和10％湿钯碳(100mg)。反应液在20℃氢气中反应16小时。反应结束后，反应液过滤，浓缩，将得到的残留物用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝95/5)分离纯化后得到(r)-8-甲基-4-氧代-4,5,6,8-四氢吡啶[3,4-d]嘧啶-7(1h)-甲酸叔丁酯(535mg,类白色固体)，收率：57％。
[0941]
ms m/z(esi):266.2[m+h]
+
。
[0942]
第六步
[0943]
(r)-4-氯-8-甲基-5,8-二氢吡啶[3,4-d]嘧啶-7(6h)-甲酸叔丁酯的制备
[0944]
将(r)-8-甲基-4-氧代-4,5,6,8-四氢吡啶[3,4-d]嘧啶-7(1h)-甲酸叔丁酯(240mg,0.9mmol)溶于甲苯(20ml)，并加入三苯基膦(708mg,2.7mmol)和三氯异氰尿酸(448mg,1.35mmol)。反应液加热到110℃反应3小时。反应结束后将反应液浓缩，将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)分离纯化后得到(r)-4-氯-8-甲基-5,8-二氢吡啶[3,4-d]嘧啶-7(6h)-甲酸叔丁酯(130mg,淡黄色油状物)，收率：51％。
[0945]
ms m/z(esi):284.2[m+h]
+
。
[0946]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.79(s,1h),5.15(s,1h),4.41(s,1h),3.14
–
2.99(m,1h),2.85(dd,j＝9.4,4.4hz,2h),1.54(d,j＝7.0hz,3h),1.49(s,9h).
[0947]
第七步
[0948]
(r)-8-甲基-4-(三丁基锡基)-5,8-二氢吡啶[3,4-d]嘧啶-7(6h)-甲酸叔丁酯的制备
[0949]
将(r)-4-氯-8-甲基-5,8-二氢吡啶[3,4-d]嘧啶-7(6h)-甲酸叔丁酯(125mg,0.44mmol)溶于二氧六环(4ml)并加入六丁基二锡(307mg,0.528mmol)和pd(pph3)4(51mg,0.044mmol)。反应液在90℃反应16小时。通过lcms检测到基(r)-8-甲基-4-(三丁基锡基)-5,8-二氢吡啶[3,4-d]嘧啶-7(6h)-甲酸叔丁酯。该反应液降温到室温，直接用于下一步反
应。
[0950]
ms m/z(esi):540.3[m+h]
+
。
[0951]
第八步
[0952]
(r)-8-甲基-4-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,8-二氢吡啶[3,4-d]嘧啶-7(6h)-甲酸叔丁酯的制备
[0953]
往上一步的反应液中加入5-氯-3-甲基-1,2,4-噻唑(10mg,0.072mmol)和pd(pph3)4(7mg,0.006mmol)。反应液在110℃反应6小时。反应结束后将反应液浓缩，将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)分离纯化后得到(r)-8-甲基-4-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,8-二氢吡啶[3,4-d]嘧啶-7(6h)-甲酸叔丁酯(18mg,白色固体)，两步收率：87％。
[0954]
ms m/z(esi):292.2(m-56)。
[0955]
第九步
[0956]
(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶[3,4-d]嘧啶-4-基)-1,2,4-噻唑的制备
[0957]
将(r)-8-甲基-4-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,8-二氢吡啶[3,4-d]嘧啶-7(6h)-甲酸叔丁酯(17mg,0.05mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中，加入三氟乙酸(0.5ml)。反应液在25℃反应2小时。反应结束后将反应液浓缩，得到(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶[3,4-d]嘧啶-4-基)-1,2,4-噻唑(12mg,黄色油状物)的粗品，收率：97％。该粗品直接用于下一步反应。
[0958]
ms m/z(esi):248.2[m+h]
+
。
[0959]
第十步
[0960]
(r)-(4-氟苯基)(8-甲基-4-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,8-二氢吡啶[3,4-d]嘧啶-7(6h)-基)甲酮的制备
[0961]
将(r)-3-甲基-5-(8-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶[3,4-d]嘧啶-4-基)-1,2,4-噻唑(9mg,0.04mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中，依次加入三乙胺(12mg,0.12mmol)和4-氟苯甲酰氯(9.5mg,0.06mmol)。反应液在25℃反应2小时。反应结束后将反应液浓缩，得到的残留物用反相柱(45％乙腈/水)纯化得到(r)-(4-氟苯基)(8-甲基-4-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,8-二氢吡啶[3,4-d]嘧啶-7(6h)-基)甲酮(3.2mg,白色固体)，收率：22％。
[0962]
ms m/z(esi):370.0[m+h]
+
。
[0963]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ9.09(s,1h),7.47(d,j＝5.6hz,2h),7.16(t,j＝8.4hz,2h),5.98-5.64(m,1h),5.10-4.74(m,1h),4.02(d,j＝22.3hz,1h),3.27(s,2h),2.77(s,3h),1.72(d,j＝6.5hz,3h).
[0964]
hplc:97.69％(214nm),88.46％(254nm).
[0965]
19
f nmr(376mhz,cdcl3)δ-109.58.
[0966]
实施例51
[0967]
(4-氟苯基)(1-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吲唑-6-基)甲酮
[0968][0969]
第一步
[0970]
3-溴-1h-吲唑-6-甲酸甲酯的制备
[0971]
将1h-吲唑-6-甲酸甲酯(2g,11.40mmol)加入到n,n-二甲基甲酰胺(5ml)中，加入n-溴代丁二酰亚胺(2.20g,12.50mmol)，室温下反应16小时，加入20ml水，2x20ml二氯甲烷，萃取分液，再用20ml饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩得到标题产物3-溴-1h-吲唑-6-甲酸甲酯(2.80g,黄色固体)，收率：91％。
[0972]
ms m/z(esi):255.0.[m+h]
+
.
[0973]
第二步
[0974]
3-溴-1h-吲唑-6-甲酸甲酯的制备
[0975]
将3-溴-1h-吲唑-6-甲酸甲酯(1.80g,7.10mmol)加入到n,n-二甲基甲酰胺(5ml)中，然后将反应液降温到0℃，缓慢加入氢化钠(2.20g,12.50mmol，60％于矿物油中)，并搅拌10分钟，加入碘甲烷(0.5ml,8.5mmol)升至室温下反应1小时，lcms监测反应结束后，加入50ml饱和氯化铵溶液，乙酸乙酯(2x100ml)，萃取分液，再用20ml饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，残留液通过硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝5：1)纯化得到标题产物3-溴-1h-吲唑-6-甲酸甲酯(1.16g,黄色固体)，收率：56％。
[0976]
ms m/z(esi):269.0.[m+h]
+
.
[0977]
第三步
[0978]
1-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1h-吲唑-6-甲酸甲酯的制备
[0979]
将3-溴-1h-吲唑-6-甲酸甲酯(1.16g,4.30mmol)加入到二氧六环(20ml)中，依次加入联硼酸频那醇酯(1.64g,6.40mmol)，醋酸钾(844mg,8.6mmol)，pd(dppf)cl2(315mg,0.4mmol)。在氮气保护下于120℃反应5小时，lcms监测反应结束后，加入50ml饱和氯化铵溶液，乙酸乙酯(2x100ml)萃取分液，再用20ml饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，残留液通过硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝8：1)纯化得到标题产物1-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1h-吲唑-6-甲酸甲酯(800mg,白色固体)，收率：54％。
[0980]
ms m/z(esi):235.1.[(m-(ch3)
4-(ch)2+h)].
[0981]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.35(s,1h),7.97(t,j＝10.4hz,1h),7.80-7.78(m,1h),4.20(s,3h),3.92(s,3h),1.34(s,12h).
[0982]
第四步
[0983]
1-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吲唑-6-甲酸甲酯的制备
[0984]
将1-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1h-吲唑-6-甲酸甲酯
(380mg,1.20mmol)加入到二氧六环/水(10ml/2ml)溶剂中，依次加入5-氯-3-甲基-1,2,4-噻二唑(193mg,1.44mmol)，pd(dppf)cl2(88mg,0.12mmol)，碳酸钾(249mg,1.80mmol)。微波条件下90℃反应1小时。lcms监测反应结束后，加入20ml水，2x20ml二氯甲烷，萃取分液，再用20ml饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，残留液通过硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝8：1)纯化得到标题产物1-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吲唑-6-甲酸甲酯(110mg,白色固体),收率：30％。
[0985]
ms m/z(esi):289.1.[m+h]
+
.
[0986]
第五步
[0987]
1-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吲唑-6-甲酸的制备
[0988]
将1-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吲唑-6-甲酸甲酯(110mg,0.38mmol)加入到四氢呋喃/水(5ml/1ml)中，加入氢氧化锂一水合物(159mg,3.80mmol).。反应液于25℃反应1小时。lcms监测反应结束后，加入2m盐酸调节ph为3，将反应液旋干得到粗品1-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吲唑-6-甲酸，无需纯化直接投下一步反应。
[0989]
ms m/z(esi):275.1.[m+h]
+
.
[0990]
第六步
[0991]
n-甲氧基-n,1-二甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吲唑-6-甲酰胺的制备
[0992]
将1-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吲唑-6-甲酸(100mg,0.36mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(3ml)，依次加入n,n二异丙基乙胺(233mg,1.80mmol)，hatu(205mg,0.54mmol)和n,o-二甲基羟胺盐酸盐(70mg,0.72mmol)反应液于25℃反应1小时。反应结束加入20ml水，2x20ml二氯甲烷，萃取分液，再用20ml饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物通过硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝8：1)纯化得到n-甲氧基-n,1-二甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吲唑-6-甲酰胺(100mg,白色固体)收率：78％。
[0993]
ms m/z(esi):318.1[m+h]
+
.
[0994]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.35-8.33(m,1h),7.59-7.56(m,1h),4.24(s,3h),3.58(s,3h),3.32(s,3h),2.72(s,3h).
[0995]
第七步
[0996]
(4-氟苯基)(1-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吲唑-6-基)甲酮的制备
[0997]
将n-甲氧基-n,1-二甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吲唑-6-甲酰胺(60mg,0.19mmol)溶于四氢呋喃(2ml)，将反应液降温至-78℃缓慢滴加(4-氟苯基)溴化镁(1m in thf,10ml,10.00mmol)。反应液于25℃反应4小时。反应结束加入饱和氯化铵溶液(20ml)淬灭，乙酸乙酯(2x20ml)，萃取分液，再用20ml饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物通过硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝4：1)纯化得到粗产物，通过制备色谱制备得到(4-氟苯基)(1-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1h-吲唑-6-基)甲酮(7.00mg,白色固体)收率：10％。
[0998]
ms m/z(esi):353.1[m+h]
+
.
[0999]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.51(d,j＝8.4hz,1h),7.93-7.88(m,3h),7.71(d,j＝
2.74hz,1h),7.21(t,j＝8.4hz,2h),4.23(s,3h),2.80(s,3h).
[1000]
实施例52
[1001]
2-[(4-氟苯基)羰基]-1-甲基-5-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3,4-二氢-1h-2,6-萘啶
[1002][1003]
第一步
[1004]
n-[2-(4-溴-2-氯吡啶-3-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯的制备
[1005]
将lda(2m,5.75ml,11.50mmol)的四氢呋喃(45ml)溶液于乙醇/干冰浴中冷却至-70℃，然后将4-溴-2-氯吡啶(1.92g,10.00mmol)的四氢呋喃(5ml)溶液滴加至该溶液中。反应液于-70℃反应1小时后，再向反应液滴加3-boc-1,2,3-恶硫唑烷2,2-二氧化物(2.23g,10.00mmol)的四氢呋喃(20ml)溶液。反应液于-70℃继续反应3小时。反应结束后，饱和氯化铵(200ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x180ml)萃取。有机相合并，饱和盐水洗涤(300ml)，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用反相柱(46％乙腈/水)纯化后得到n-[2-(4-溴-2-氯吡啶-3-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(1.80g,淡黄色固体)，收率:53％。
[1006]
ms m/z(esi):335.0[m+h]
+
。
[1007]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.06(d,j＝5.2hz,1h),7.46(d,j＝5.2hz,1h),4.68(s,1h),3.46-3.44(m,2h),3.19(t,j＝6.8hz,2h),1.42(s,9h).
[1008]
第二步
[1009]
n-{2-[2-氯-4-(1-乙氧基乙烯基)吡啶-3-基]乙基}氨基甲酸叔丁酯的制备
[1010]
将n-[2-(4-溴-2-氯吡啶-3-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(772mg,2.30mmol)溶于1，4-二氧六环(15ml)，依次加入1-乙氧基乙烯基三丁基锡(872mg,2.42mmol)，四三苯基膦钯(133mg,0.11mmol)。氮气保护下，将反应液加热至80℃反应16小时。反应结束后，将反应液降至室温，氟化钾水溶液(1m,40ml)淬灭反应，乙酸乙酯(2x50ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化后得到n-{2-[2-氯-4-(1-乙氧基乙烯基)吡啶-3-基]乙基}氨基甲酸叔丁酯(630mg,淡黄色固体)，收率:83％。
[1011]
ms m/z(esi):327.1[m+h]
+
。
[1012]1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.20(d,j＝4.8hz,1h),7.28(d,j＝4.8hz,1h),4.50(d,j＝2.8hz,1h),4.32(d,j＝2.4hz,1h),3.96(q,j＝6.8hz,2h),3.32-3.30(m,2h),3.03-2.99(m,2h),1.41-1.36(m,12h).
[1013]
第三步
[1014]
1-[3-(2-氨基乙基)-2-氯吡啶-4-基]乙酮的制备
[1015]
将n-{2-[2-氯-4-(1-乙氧基乙烯基)吡啶-3-基]乙基}氨基甲酸酯(1.08g,3.30mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，加入三氟乙酸(3.5ml)。反应液于25℃反应1小时。反应结
束后，向反应液中加入饱和碳酸氢钠(80ml)中和三氟乙酸，二氯甲烷(2x60ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到1-[3-(2-氨基乙基)-2-氯吡啶-4-基]乙酮(656mg,淡黄色固体)，收率:99％。
[1016]
ms m/z(esi):181.1(m-18+1)。
[1017]
第四步
[1018]
1-氯-5-甲基-5,6,7,8-四氢-2,6-萘啶的制备
[1019]
将1-[3-(2-氨基乙基)-2-氯吡啶-4-基]乙酮(656mg,3.30mmol)溶于甲醇(10ml)，依次加入三乙胺(668mg,6.60mmol)，硼氢化钠(749mg,19.80mmol)。反应液加热至65℃反应1小时。反应结束后，反应液降至室温，加水(5ml)淬灭。加入饱和碳酸氢钠(60ml)，二氯甲烷(2x80ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到1-氯-5-甲基-5,6,7,8-四氢-2,6-萘啶(603mg,黄色固体)，收率:99％。
[1020]
ms m/z(esi):183.1[m+h]
+
。
[1021]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.16(d,j＝4.8hz,1h),7.01(d,j＝4.8hz,1h),4.07(q,j＝6.4hz,1h),3.37-3.31(m,1h),3.11-2.99(m,1h),2.80-2.77(m,2h),2.12(s,1h),1.47(d,j＝6.8hz,3h).
[1022]
第五步
[1023]
5-氯-1-甲基-3,4-二氢-1h-2,6-萘啶-2-甲酸叔丁酯的制备
[1024]
将1-氯-5-甲基-5,6,7,8-四氢-2,6-萘啶(603mg,3.30mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，依次加入三乙胺(835mg,8.25mmol)，二碳酸二叔丁酯(864mg,3.96mmol)。反应液于25℃反应2小时。反应结束后，用饱和氯化铵(50ml)淬灭，二氯甲烷(2x50ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝9/1)纯化后得到5-氯-1-甲基-3,4-二氢-1h-2,6-萘啶-2-甲酸叔丁酯(851mg,无色油状物，过夜固化)，收率:90％。
[1025]
ms m/z(esi):283.1[m+h]
+
。
[1026]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.18(d,j＝4.8hz,1h),7.00(d,j＝5.2hz,1h),5.29-4.96(m,1h),4.36-4.24(m,1h),3.09(br,1h),2.92-2.71(m,2h),1.49(s,9h),1.45(d,j＝6.8hz,3h).
[1027]
第六步
[1028]
1-甲基-5-(三甲基锡基)-3,4-二氢-1h-2,6-萘啶-2-甲酸叔丁酯的制备
[1029]
将5-氯-1-甲基-3,4-二氢-1h-2,6-萘啶-2-甲酸叔丁酯(424mg,1.50mmol)溶于二氧六环，依次加入六甲基二锡(491mg,1.50mmol)，pd(pph3)2cl2(105mg,0.15mmol)及三苯胂(46mg,0.15mmol)。氮气保护下，将反应液加热至105℃反应20小时。反应结束后，将反应液降温至室温并将其直接用于下一步反应。
[1030]
ms m/z(esi):413.1[m+h]
+
。
[1031]
第七步
[1032]
1-甲基-5-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3,4-二氢-1h-2,6-萘啶-2-甲酸叔丁酯的制备
[1033]
向上一步得到的1-甲基-5-(三甲基锡基)-3,4-二氢-1h-2,6-萘啶-2-甲酸叔丁酯(581mg,1.41mmol)的粗品溶液中依次加入5-氯-3-甲基-1,2,4-噻二唑(285mg,2.11mmol)，
pd(pph3)2cl2(99mg,0.14mmol)。氮气保护下，将反应液加热至115℃反应10小时。反应结束后，将反应液将至室温，氟化钾溶液(1m,30ml)淬灭，乙酸乙酯(2x40ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝4/1)分离，然后用反相柱(66％乙腈/水)纯化后得到1-甲基-5-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3,4-二氢-1h-2,6-萘啶-2-甲酸叔丁酯(150mg,黄色固体)，收率:11％。
[1034]
ms m/z(esi):347.1[m+h]
+
。
[1035]
第八步
[1036]
1-甲基-5-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,2,3,4-四氢-2,6-萘啶的制备
[1037]
将1-甲基-5-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3,4-二氢-1h-2,6-萘啶-2-甲酸叔丁酯(69mg,0.20mmol)溶于二氯甲烷(3ml)，加入三氟乙酸(1ml)。反应液于25℃反应1小时。反应结束后，加入饱和碳酸氢钠(50ml)，二氯甲烷(3x50ml)萃取。有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到1-甲基-5-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,2,3,4-四氢-2,6-萘啶(50mg,淡棕色固体)，收率:56％。
[1038]
ms m/z(esi):247.1[m+h]
+
。
[1039]
第九步
[1040]
2-[(4-氟苯基)羰基]-1-甲基-5-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3,4-二氢-1h-2,6-萘啶的制备
[1041]
将1-甲基-5-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,2,3,4-四氢-2,6-萘啶(49mg,0.20mmol)溶于二氯甲烷(5ml)，依次加入三乙胺(51mg,0.50mmol)，4-氟苯甲酰氯(41mg,0.26mmol)。反应液于25℃反应20分钟。反应结束后，用饱和碳酸氢钠(20ml)淬灭，二氯甲烷(2x30ml)萃取。无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)分离，然后用反相柱(52％乙腈/水)纯化后得到2-[(4-氟苯基)羰基]-1-甲基-5-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-3,4-二氢-1h-2,6-萘啶(7.3mg,白色固体)，收率:10％。
[1042]
ms m/z(esi):369.1[m+h]
+
。
[1043]
hplc:100％(214nm),98.93％(254nm).
[1044]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.49(s,1h),7.53-7.44(m,2h),7.26-7.21(m,1h),7.16(t,j＝8.4hz,2h),5.83(br,1h),3.98(br,1h),3.84-3.75(m,1h),3.44(br,1h),3.22(br,1h),2.73(s,3h),1.64(d,j＝6.8hz,3h).
[1045]
19
f nmr(376mhz,cdcl3)δ-109.74.
[1046]
生物学评价
[1047]
测试例1、本发明化合物对人源nk-3受体活性的测定
[1048]
该方法用来测定本发明中的化合物对人源nk-3r/hek293稳转细胞株中所表达的人源nk-3受体蛋白活性的拮抗作用。
[1049]
1、试验材料及仪器
[1050]
1.1培养基
[1051]
f12(gibco,cat#11765-047)；fbs(corning,cat#35-076-cv)；geneticin(invitrogen,cat#10131)；penicillin/streptomycin(invitrogen,cat#15140)。
[1052]
1.2试剂
[1053]
fluo-4 direct(invitrogen,cat#f10471)；hbss(gibco,cat#14025076)；hepes
(gibco,cat#15630080)；bonine serum albumin(sgima,cat#b2064-100g)。
[1054]
1.3仪器耗材
[1055]
384well poly-d-lysine protein coating plate(greiner,cat#781946)；flipr(molecular devices)；vi-cell xr cell viability analyzer(beckman coulter)；incubator(thermo)。
[1056]
2、实验步骤
[1057]
2.1人源nk-3r/hek293稳转细胞株接种于384-well细胞培养板，接种密度为12000cells/well/25μl，于37℃，5％co2培养过夜；
[1058]
2.2冻融20x component a至室温，用assay buffer将其稀释至2x工作浓度，于室温待用；
[1059]
2.3将细胞培养板于室温平衡10分钟，去除培养基，加入20μl assay buffer和20μl 2x component a，200g，室温离心3-5sec，37℃，孵育2小时；
[1060]
2.4利用dmso将化合物于384pp_dmso板中进行3倍稀释，然后利用echo 550将化合物转移各240nl/well至工作板中，200g，室温，1min；加入40μl assay buffer至工作板中，200g，室温，1min后，于振荡器2500rpm，20min，混匀后200g，室温，1min待用；
[1061]
2.5用assay buffer配制2.5nm neurokinin b tfa(6x)，取50ul至3657板中，待用；
[1062]
2.6取出细胞培养板于室温静置10min，加入10μl步骤2.4中稀释好的化合物至相应孔中于25℃静置30min；
[1063]
2.7利用flipr tetra将10μl步骤2.5中稀释好的化合物加入相应实验孔中，收集数据。
[1064]
本发明中化合物对人源nk-3受体拮抗活性通过以上的实验进行测定，获得本发明的化合物的抑制曲线并且确定抑制50％的参考激动剂相应的化合物的浓度(ic
50
)，具体的ic
50
值见表1。
[1065]
表1本发明中化合物对人源nk-3受体拮抗活性的ic
50
值。
[1066]
化合物编号ic
50
(nm)fezolinetant734.36186.226423.731293.53568.6436106.842269.5
[1067]
实验结论：
[1068]
以上数据显示，本发明实施例化合物是强效的nk-3受体拮抗剂，活性显著优于阳性对照化合物fezolinetant。
[1069]
测试例2、本发明化合物的血浆蛋白结合测试
[1070]
化学品/药物的药物代谢动力学和药效动力学特性在很大程度上随化学品与血浆或血清蛋白的可逆性结合而变。一般来说，只有药物的未结合部分或“游离的部分”可供用
于扩散或转运穿过细胞膜，以及与药理学/毒理学靶标相互作用。因此，化合物的血浆蛋白结合(ppb)的程度影响了它的作用以及它的分布和消除。
[1071]
平衡透析法使得能够对化合物的血浆蛋白结合进行测定，所述平衡透析法是用于可靠估测血浆中非结合的药物分数的一种被承认的和标准的方法。
[1072]
血浆样品的透析过程：血浆样品加入到每个透析孔的给药端(n＝3)，在透析孔对应的接收端中加入等量空白透析缓冲液，将透析板置于5％co2的培养箱中，在37℃下、约100rpm振荡孵育4h。透析结束后，移取透析后的缓冲液样品(透析液)和透析后的血浆样品到样品接收板中。在样品中加入相应体积的对应空白血浆或缓冲液，并加入终止液，充分摇匀。摇匀后的样品以4000rpm的条件离心20分钟。经过蛋白沉淀后，取上清进行lc-ms/ms分析。
[1073]
化合物的游离率(％unbound)、结合率(％bound)和回收率(％recovery)的计算公式如下：
[1074]
％unbound＝100
×
f/t
[1075]
％bound＝100-％unbound
[1076]
％recovery＝100*(f+t)/t0
[1077]
其中，[f]是透析接收端待测化合物的浓度或对照化合物与内标的峰面积比值；[t]是透析供应端待测化合物的浓度或对照化合物与内标的峰面积比值；[t0]是零时刻血浆中待测化合物的浓度或对照化合物与内标的峰面积比值。
[1078]
实验结果：
[1079]
表2本发明中化合物在人ppb测试中的结合率
[1080]
化合物编号％boundfezolinetant46.93175.753588.72
[1081]
实验结论：
[1082]
以上数据显示，本发明实施例化合物有相对较高的血浆蛋白结合率，相对较高的血浆蛋白结合有利于减少游离药物的代谢和清除，并能提高药物的作用时间。

技术特征：
1.一种通式(i)所示的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物或其药学上可接受盐：其中：x为o或s；m为n或cr2；环a选自苯基、8-10元稠杂环基或8-10元稠杂芳基，所述的环a，任选地，进一步被卤素、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基和c
1-6
烷基酰基中的一个或多个取代基所取代；r1选自c
1-6
烷基；r2选自c
1-6
烷基；或者，r1和r2连接形成c
3-6
环烷基。2.根据权利要求1所述的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物或药学上可接受盐，其中，m为n或cr2；环a选自苯基、苯并5-6元杂环基、苯并5-6元杂芳基、吡啶并5-6元杂芳基、5-6元杂芳基并苯基或5-6元杂环基并苯基，所述的环a，任选地进一步被卤素、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基和c
1-3
烷基酰基中的一个或多个取代基所取代；r1选自甲基；r2选自甲基；或者，r1和r2连接形成环戊烯基。3.根据权利要求1或2所述的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物或药学上可接受盐，其中，环a选自苯基、吡啶基、吲哚基、苯并呋喃基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并吡唑基、苯并三氮唑基、喹啉基、苯并二氧戊环基、苯并哌啶基、苯并吡咯基、咪唑并苯基、吡啶并吡咯基、噁唑并苯基、哌啶并苯基或吗啉并苯基，所述的环a，任选地，进一步被氟、氯、甲基、甲氧基、甲酰基和三氟甲基中的一个或多个取代基所取代。4.根据权利要求1～3任一项所述的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物或药学上可接受盐，其特征在于，通式(i)进一步如通式(ii)所示：其中：
x为o或s；r3选自氢、卤素、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基或c
1-3
烷基酰基；或者，r3和r4连接形成5-6元杂环基或5-6元杂芳基，所述的5-6元杂环基和5-6元杂芳基，任选地，进一步被卤素、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷基酰基中的一个或多个取代基所取代；r5选自氢、c
1-3
烷基或c
1-3
卤代烷基；或者，r4和r5连接形成5-6元杂环基或5-6元杂芳基，所述的5-6元杂环基和5-6元杂芳基，任选地，进一步被卤素、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷基酰基中的一个或多个取代基所取代；r6选自氢、卤素、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基或c
1-3
烷基酰基；条件是，r4至少与r3和r5中的一个连接形成5-6元杂环基或5-6元杂芳基。5.根据权利要求4所述的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物或药学上可接受盐，其中，r3选自氢、氟、氯、甲基、甲氧基或三氟甲基或者，r3和r4连接形成呋喃基、吡咯基、噻唑基、三氮唑基、吡唑基、哌啶基、咪唑基或1,3-二氧戊环基，所述的呋喃基、吡咯基、噻唑基、噁唑基、三氮唑基、吡唑基、哌啶基、咪唑基和1,3-二氧戊环基，任选地，进一步被氟、氯、甲基、甲氧基、甲酰基和三氟甲基中的一个或多个取代基所取代；r5选自氢、甲基或三氟甲基；或者，r4和r5连接形成呋喃基、吡咯基、噻唑基、三氮唑基、吡唑基、哌啶基、咪唑基或1,3-二氧戊环基，所述的呋喃基、吡咯基、噻唑基、噁唑基、三氮唑基、吡唑基、哌啶基、咪唑基和1,3-二氧戊环基，任选地，进一步被氟、氯、甲基、甲氧基、甲酰基和三氟甲基中的一个或多个取代基所取代；r6选自氢、氟、氯、甲基、甲氧基或三氟甲基。6.根据权利要求1～5中任一项所述的化合物、其立体异构体或药学上可接受盐，其中，环a和各自独立的选自如下基团：
7.根据权利要求1～6中任一项所述的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述化合物为通式(iii)所示的化合物：其中：x为o或s；
环a选自r’为环a上的取代基，其可以相同或不同，任选地选自卤素、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基和c
1-6
烷基酰基；k为选自0、1、2、3、4或5的整数。8.根据权利要求1～7中任一项所述的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物或其药学上可接受的盐，其特征在于，选自如下化合物：
9.一种药物组合物，其包含权利要求1～8任一项所述的式(i)所示的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐、代谢产物、前药中的一种、两种或更多种，和至少一种药学上可接受的辅料。10.权利要求1～8任一项所述的式(i)所示的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐、代谢产物、前药中的一种、两种或更多种，或权利要求9所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防和/或治疗由nk-3受体介导的疾病。11.权利要求1～8任一项所述的式(i)所示的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位
素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐、代谢产物、前药中的一种、两种或更多种，或权利要求9所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防和/或治疗抑郁症、焦虑症、精神病、精神分裂症、精神病性障碍、双相型障碍、认知障碍、帕金森病、阿尔茨海默氏病、注意力不足多动症(adhd)、疼痛、惊厥、肥胖、炎性疾病、呕吐、先兆子痫、气道相关疾病、生殖障碍、避孕和性激素依赖性疾病、妇科疾病相关疾病、更年期综合征相关疾病；优选的，所述性激素依赖性疾病包括但不限于良性前列腺增生(bph)、前列腺增生、转移性前列腺癌、睾丸癌、乳腺癌、卵巢癌、雄激素依赖性痤疮、男性型秃发、子宫内膜异位症、青春期异常、子宫纤维化、子宫纤维瘤、激素依赖性癌症、高雄激素血症、多毛症、男性化、多囊卵巢综合征(pcos)、经前烦躁症(pmdd)、hair-an综合征(高雄激素血症、胰岛素抵抗以及黑棘皮病)、卵巢卵泡膜细胞增生症(hair-an伴有卵巢间质中黄体化卵泡膜细胞增生)、高卵巢内雄激素浓度的其它表现(例如卵泡成熟停滞、闭锁、无排卵、痛经、功能失调性子宫出血、不孕症)、产生雄激素的肿瘤(男性化卵巢瘤或肾上腺瘤)、月经过多以及子宫腺肌症；优选的，所述气道相关疾病包括慢性阻塞性肺病、哮喘、气道高反应性、支气管收缩以及咳嗽；优选的，所述的更年期综合征包含潮热、出汗、心悸、眩晕及肥胖等症状。

技术总结
本发明涉及含三氮唑稠环类衍生物、其药物组合物及其制备方法和应用。特别地，本发明涉及通式(I)所示的化合物、其制备方法及含有该化合物的药物组合物，及其作为NK-3受体拮抗剂，在治疗和/或预防一系列广泛的CNS和外周疾病等疾病或病症的用途，其中通式(I)中的各取代基与说明书中的定义相同。代基与说明书中的定义相同。代基与说明书中的定义相同。


技术研发人员：宋云龙 沈光远 刘鹏 李曼华 金磊 王国成 苗新园
受保护的技术使用者：长春金赛药业有限责任公司
技术研发日：2022.04.29
技术公布日：2022/11/1